ПРИМЕНЕНИЕ (Z)-2-(2-ОКСОПРОПИЛИДЕН)ИНДОЛИН-3-ОНА В КАЧЕСТВЕ ПРОТИВОГРИБКОВОГО СРЕДСТВА В ОТНОШЕНИИ ДРОЖЖЕВЫХ ГРИБОВ Российский патент 2023 года по МПК A61K31/404 A61P31/10 

Изобретение относится к области органической химии - новым биологически активным соединениям - замещенным индолин-3-онам, а именно к (Z)-2-(2-оксопропилиден)индолин-3-ону 1 формулы:

соединение 1 обладает антимикотической активностью, что позволяет предположить его использование в медицине в качестве потенциального лекарственного средства с антимикотическими свойствами.

Аналогом по структуре заявляемому соединению является (Е)-[2,3'-биндолинилиден]-2',3-дион (индирубин) 2, обладающий антимикотической активностью [J. Ethnopharmacol. 2010, 132, 349-354 Phytochemistry, 1999, 52, 2, 271-274; doi: 10.1016/j.jep.2010.07.050] формулы:

Эталоном сравнения был выбран кетоконазол 3 формулы:

который широко применяется в лечебной практике, и является аналогом по действию [Машковский М.Д. Лекарственные средства. - 16-е изд., перераб., испр. и доп. - М.: Новая волна, 2012. - с. 918; Med. Chem. Res. 2013, 22, 211 - 218; doi: 10.1007/s00044-012-0021-2].

Задачей изобретения является поиск в ряду замещенных индолин-3-онов веществ с выраженным антимикотическим действием и низкой токсичностью.

Поставленная задача достигается получением (Z)-2-(2-оксопропилиден)индолин-3-она, который обладает антимикотической активностью.

Заявляемое соединение 1 синтезируют обработкой 2-(2-оксопропил)-1-тозилиндолин-3-она раствором NaHCO₃ при 50°С с дальнейшим выделением целевого продукта стандартными методами синтетической органической химии по схеме:

Пример 1. Получение соединения 1. К раствору 0.343 г (1 ммоль) 2-(2-оксопропил)-1-тозилиндолин-3-она в 4 мл этанола добавляют 0.168 г (2 ммоль) NaHCO₃, растворенного в 2 мл H₂O, и перемешивают при 50°С в течение 5 часов. Затем реакционную смесь охлаждают и экстрагируют дихлорметаном (3×10 мл). Объединенные органические слои промывают водой и насыщенным раствором NaCl, сушат над безводным Na₂SO₄ и концентрируют досуха. Остаток очищают колоночной хроматографией на силикагеле, используя в качестве элюента смесь петролейного эфира/этилацетата. Выход 85%. Т. пл. 162-164°С. Спектр ЯМР ¹Н, (400 МГц, CDCl₃), δ, м.д.: 9.73 (с, 1Н), 7.66 (д, J=7.5 Гц, 1Н), 7.49 (т, J=7.7 Гц, 1Н), 7.00 (т, J=7.5 Гц, 1Н), 6.93 (д, J=8.0 Гц, 1Н), 6.18 (с, 1Н), 2.35 (с, 3Н). Спектр ЯМР ¹³С, (100 МГц, CDCl₃), δ, м.д.: 200.7, 188.5, 153.2, 142.7, 137.2, 125.4, 122.0, 119.9, 111.8, 98.5, 30.9. Полученное соединение 1 представляет собой темно-красное кристаллическое вещество, растворимое в хлороформе, ацетоне, этилацетате, этаноле.

Пример 2. Для характеристики антимикотической активности соединений использовали стандартные параметры: минимальная подавляющая концентрация (МПК), которую определяли модифицированным методом двукратных серийных разведений [Методические рекомендации: Грибы рода Candida. Методы выделения, идентификации на видовом уровне и определение чувствительности к противогрибковым препаратам, Москва, 2009; МУК 4.2.1890-04 Определение чувствительности микроорганизмов к антибактериальным препаратам] и минимальная фунгицидная концентрация (МФК).

Тесты проводили с использованием культуры модельных микроорганизмов Candida albicans АТСС 10231 на питательной среде Мюллера-Хинтона с добавлением 2% глюкозы в 96-луночных полистироловых планшетах. Концентрация микроорганизмов в лунках перед началом культивирования составляла 2,5*105 КОЕ/мл. Культивирование проводили при 37°С без перемешивания. Определение МПК и высевы для определения МФК производили через 24 ч. Исследуемые соединения растворяли в диметилсульфоксиде (ДМСО) до полного растворения в концентрации 20 мг/мл и ниже, в зависимости от растворимости. Вносили в питательную среду так, чтобы количество DMSO не превышало 5%.

Пример 3. Острую токсичность (ЛД₅₀, мг/мл) соединения 1 определяли по методу Г.Н. Першина [Першин Г.Н. Методы экспериментальной химиотерапии // М., С. 100, 1.971, 109-11.7]. Соединение 1 вводили внутрибрюшинно белым мышам массой 16-18 г в виде взвеси в 2% крахмальной слизи и наблюдали за поведением и гибелью животных в течение 10 суток. Для исследуемого соединения 1 ЛД₅₀ составляет > 500 мг/кг.

Согласно классификации токсичности препаратов, соединение 1 относится к IV классу мало токсичных препаратов [Измеров Н.Ф., Саноцкий И.В., Сидоров К.К. Параметры токсикометрии промышленных ядов при однократном воздействии: Справочник. М., 1977, стр. 196]. Результаты испытаний представлены в таблице:

Как. видно из таблицы, заявляемое соединение 1 превышает в полтора раза по антимикотической активности препарат сравнения (кетоконазол) по отношению к С, albicans. Таким образом, (Z)-2-(2-оксопропилиден)индолин-3-он 1 проявляет более высокую активность по сравнению с эталоном сравнения, что делает возможным его использование для создания новых лекарственных средств, целенаправленного действия.

Изобретение относится к области органической химии - новым биологически активным соединениям - замещенным индолин-3-онам, а именно к (Z)-2-(2-оксопропилиден)индолин-3-ону формулы 1, который обладает антимикотической активностью, что позволяет предположить его использование в медицине в качестве потенциального лекарственного средства с антимикотическими свойствами. Представлено применение (Z)-2-(2-оксопропилиден)индолин-3-она формулы 1 в качестве противогрибкового средства в отношении дрожжевых грибов. Изобретение обеспечивает (Z)-2-(2-оксопропилиден)индолин-3-он формулы 1, обладающий выраженным антимикотическим действием и низкой токсичностью. 1 табл., 3 пр.

Применение (Z)-2-(2-оксопропилиден)индолин-3-она:

в качестве противогрибкового средства в отношении дрожжевых грибов.