ПРИМЕНЕНИЕ (Z)-6-МЕТОКСИ-2-(2-ОКСОБУТИЛИДЕН)ИНДОЛИН-3-ОНА В КАЧЕСТВЕ ПРОТИВОГРИБКОВОГО СРЕДСТВА В ОТНОШЕНИИ ДРОЖЖЕВЫХ ГРИБОВ Российский патент 2024 года по МПК A61K31/403 A61P31/10 C07D209/36 

Изобретение относится к области органической химии - новым биологически активным соединениям - замещенным индолин-3-онам, а именно к (Z)-6-метокси-2-(2-оксобутилиден)индолин-3-ону 1 формулы:

соединение 1 обладает антимикотической активностью, что позволяет предположить его использование в медицине в качестве потенциального лекарственного средства с антимикотическими свойствами.

Аналогом по структуре заявляемому соединению является (Е)-[2,3'-биндолинилиден]-2',3-дион (индирубин) 2, обладающий антимикотической активностью [J. Ethnopharmacol. 2010, 132, 349-354 Phytochemistry, 1999, 52, 2, 271-274; doi: 10.1016/j.jep.2010.07.050] формулы:

Эталоном сравнения был выбран кетоконазол 3 формулы:

который широко применяется в лечебной практике, и является аналогом по действию [Машковский М.Д. Лекарственные средства. - 16-е изд., перераб., испр. и доп. - М.: Новая волна, 2012. - с. 918; Med. Chem. Res. 2013, 22, 211 -218; doi: 10.1007/s00044-012-0021-2].

Задачей изобретения является поиск в ряду замещенных индолин-3-онов веществ с выраженным антимикотическим действием и низкой токсичностью.

Поставленная задача достигается получением (Z)-6-метокси-2-(2-оксобутилиден)индолин-3-она, который обладает антимикотической активностью.

Заявляемое соединение 1 синтезируют обработкой 6-метокси-2-(2-оксобутил)-1-тозилиндолин-3-она раствором NaHCO₃ при 50°С с дальнейшим выделением целевого продукта стандартными методами синтетической органической химии по схеме:

Пример 1. Получение соединения 1. К раствору 0.387 г (1 ммоль) 6-метокси-2-(2-оксобутил)-1-тозилиндолин-3-она в 4 мл этанола добавляют 0.168 г (2 ммоль) NaHCO₃, растворенного в 2 мл Н₂О, и перемешивают при 50°С в течение 5 часов. Затем реакционную смесь охлаждают и экстрагируют дихлорметаном (3×10 мл). Объединенные органические слои промывают водой и насыщенным раствором NaCl, сушат над безводным Na₂SO₄ и концентрируют досуха. Остаток очищают колоночной хроматографией на силикагеле, используя в качестве элюента смесь петролейного эфира/этилацетата. Выход 75%. Т. пл. 153 - 154°С. Спектр ЯМР ¹Н, (400 MHz, CDCl₃), δ, м.д.: 9.63 (с, 1H), 7.58 (д, 1Н, J=8.5 Гц), 6.48 (дд, 1Н, J=8.5, 2.0 Гц), 6.36 (д, 1H, J=2.0 Гц), 6.14 (с, 1Н), 3.87 (с, 3Н), 2.60 (кв, 2Н, J=7.4 Гц), 1.16 (т, 3Н, J=7.4 Гц). Спектр ЯМР ¹³С, (100 MHz, CDCl₃), δ, м.д.: 204.4, 186.5, 167.9, 156.0, 144.3, 127.4, 113.6, 109.0, 97.8, 96.9, 56.0, 37.3, 8.6. Полученное соединение 1 представляет собой темно-красное кристаллическое вещество, растворимое в хлороформе, ацетоне, этилацетате, этаноле.

Пример 2. Для характеристики антимикотической активности соединений использовали стандартные параметры: минимальная подавляющая концентрация (МПК), которую определяли модифицированным методом двукратных серийных разведений [Методические рекомендации: Грибы рода Candida. Методы выделения, идентификации на видовом уровне и определение чувствительности к противогрибковым препаратам, Москва, 2009; МУК 4.2.1890-04 Определение чувствительности микроорганизмов к антибактериальным препаратам] и минимальная фунгицидная концентрация (МФК).

Тесты проводили с использованием культуры модельных микроорганизмов Candida albicans АТСС 10231 на питательной среде Мюллера-Хинтона с добавлением 2% глюкозы в 96-луночных полистироловых планшетах. Концентрация микроорганизмов в лунках перед началом культивирования составляла 2,5*105 КОЕ/мл. Культивирование проводили при 37°С без перемешивания. Определение МПК и высевы для определения МФК производили через 24 ч. Исследуемые соединения растворяли в диметилсульфоксиде (ДМСО) до полного растворения в концентрации 20 мг/мл и ниже, в зависимости от растворимости. Вносили в питательную среду так, чтобы количество ДМСО не превышало 5%.

Пример 3. Острую токсичность (ЛД₅₀, мг/мл) соединения 1 определяли по методу Г. Н. Першина [Першин Г. Н. Методы экспериментальной химиотерапии // М., С.100, 1971, 109-117]. Соединение 1 вводили внутрибрюшинно белым мышам массой 16-18 г в виде взвеси в 2% крахмальной слизи и наблюдали за поведением и гибелью животных в течение 10 суток. Для исследуемого соединения 1 ЛД₅₀ составляет > 500 мг/кг.

Согласно классификации токсичности препаратов, соединение 1 относится к IV классу мало токсичных препаратов [Измеров Н.Ф., Саноцкий И.В., Сидоров К.К. Параметры токсикометрии промышленных ядов при однократном воздействии: Справочник. М., 1977, стр. 196]. Результаты испытаний представлены в таблице:

Как видно из таблицы, заявляемое соединение 1 является сопоставимым по антимикотической активности с препаратом сравнения (кетоконазол) по отношению к С.albicans. Таким образом, (Z)-6-метокси-2-(2-оксобутилиден)индолин-3-он 1 проявляет сопоставимую активность с эталоном сравнения, что делает возможным его использование для создания новых лекарственных средств, целенаправленного действия.

Изобретение относится к области органической химии, а именно к применению (Z)-6-метокси-2-(2-оксобутилиден)индолин-3-она формулы 1 в качестве противогрибкового средства в отношении Candida albicans. Технический результат изобретения заключается в получении соединения, обладающего выраженной антимикотической активностью. 1 табл., 3 пр.

Применение (Z)-6-метокси-2-(2-оксобутилиден)индолин-3-она:

в качестве противогрибкового средства в отношении Candida albicans.