Применение 1-ацетил-5,6-диметил-2-(2-оксопропил)индолин-3-она в качестве противогрибкового средства в отношении дрожжевых грибов Российский патент 2023 года по МПК C07D209/36 A61K31/404 A61P31/10 

Изобретение относится к области органической химии - новым биологически активным соединениям - замещенным индолин-3-онам, а именно к 1-ацетил-5,6-диметил-2-(2-оксопропил)индолин-3-ону 1 формулы:

соединение 1 обладает антимикотической активностью, что позволяет предположить его использование в медицине в качестве потенциального лекарственного средства с антимикотическими свойствами.

Аналогом по структуре заявляемому соединению является 2-октадецил-3-гидроксииндол (фистулозин) 2, обладающий антимикотической активностью [Phytochemistry, 1999, 52, 2, 271-274; doi: 10.1016/S0031-9422(99)00170-3] формулы:

Эталоном сравнения был выбран кетоконазол 3 формулы:

который широко применяется в лечебной практике, и является аналогом по действию [Машковский М.Д. Лекарственные средства. - 16-е изд., перераб., испр. и доп. - М.: Новая волна, 2012. - с. 918; Med. Chem. Res. 2013, 22, 211-218; doi: 10.1007/s00044-012-0021-2].

Задачей изобретения является поиск в ряду замещенных индолин-3-онов веществ с выраженным антимикотическим действием и низкой токсичностью.

Поставленная задача достигается получением 1-ацетил-5,6-диметил-2-(2-оксопропил)индолин-3-она, который обладает антимикотической активностью.

Заявляемое соединение 1 синтезируют последовательной обработкой N-[4,5-диметил-2-(5-метилфуран-2-ил)фенил]ацетамида м-хлорпероксибензойной кислотой в дихлорметане при 0°C с последующим выдерживанием при комнатной температуре и триэтиламином с дальнейшим выделением целевого продукта стандартными методами синтетической органической химии по схеме:

Пример 1. Получение соединения 1. К раствору 0.243 г (1 ммоль) N-[4,5-диметил-2-(5-метилфуран-2-ил)фенил]ацетамида в 5 мл дихлорметана при 0°C при перемешивании добавляют 0.319 г (1.3 ммоль) 70%-й м-хлорпероксибензойной кислоты и выдерживают при 0°C в течение 15 минут, затем смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 6 часов и добавляют 0.188 мл (1.36 ммоль) триэтиламина, далее перемешивают в течение 16 часов при комнатной температуре. Реакционную смесь промывают водой до нейтральной реакции среды, затем насыщенным раствором NaCl, органический слой сушат над безводным Na₂SO₄, растворитель отгоняют при пониженном давлении. Остаток очищают с помощью колоночной хроматографии на силикагеле, в качестве элюента используют смесь этилацетат - петролейный эфир и перекристаллизовывают из этанола. Выход 66%. Т. пл. 163-165°C. Спектр ЯМР ¹Н, (400 МГц, ДМСО-_d6), δ, м.д.: 8.05 (с, 1H), 7.44 (с, 1H), 4.71 (дд, J=5.6, 3.6 Гц, 1H), 3.31 (дд, J=17.9, 6.0 Гц, 1H), 3.26-3.16 (м, 2Н), 2.36 (с, 3Н), 2.32 (с, 3Н), 2.28 (с, 3Н), 2.09 (с, 3Н). Спектр ЯМР ¹³С, (100 МГц, ДМСО-_d6), δ, м.д.: 204.7, 197.6, 169.0, 152.1, 147.0, 132.8, 123.5, 122.9, 118.5, 63.0, 44.8, 30.4, 24.7, 21.3, 19.2. Полученное соединение 1 представляет собой бесцветное кристаллическое вещество, растворимое в хлороформе, ацетоне, этилацетате, горячем этаноле.

Пример 2. Для характеристики антимикотической активности соединений использовали стандартные параметры: минимальная подавляющая концентрация (МПК), которую определяли модифицированным методом двукратных серийных разведений [Методические рекомендации: Грибы рода Candida. Методы выделения, идентификации на видовом уровне и определение чувствительности к противогрибковым препаратам, Москва, 2009; МУК 4.2.1890-04 Определение чувствительности микроорганизмов к антибактериальным препаратам] и минимальная фунгицидная концентрация (МФК).

Тесты проводили с использованием культуры модельных микроорганизмов Candida albicans АТСС 10231 на питательной среде Мюллера-Хилтона с добавлением 2% глюкозы в 96-луночных полистироловых планшетах. Концентрация микроорганизмов в лунках перед началом культивирования составляла 2,5*105 КОЕ/мл. Культивирование проводили при 37°C без перемешивания. Определение МПК и высевы для определения МФК производили через 24 ч. Исследуемые соединения растворяли в диметилсульфоксиде (ДМСО) до полного растворения в концентрации 20 мг/мл и ниже, в зависимости от растворимости. Вносили в питательную среду так, чтобы количество ДМСО не превышало 5%.

Пример 3. Острую токсичность (ЛД₅₀, мг/мл) соединения 1 определяли по методу Г.Н. Першина [Першин Г.Н. Методы экспериментальной химиотерапии // М., С. 100, 1971, 109-117]. Соединение 1 вводили внутрибрюшинно белым мышам массой 16-18 г в виде взвеси в 2% крахмальной слизи и наблюдали за поведением и гибелью животных в течение 10 суток. Для исследуемого соединения 1 ЛД₅₀ составляет >500 мг/кг.

Согласно классификации токсичности препаратов, соединение 1 относится к IV классу мало токсичных препаратов [Измеров Н.Ф., Санонкий И.В., Сидоров К.К. Параметры токсикометрии промышленных ядов при однократном воздействии: Справочник. М., 1977, стр. 196]. Результаты испытаний представлены в таблице:

Как видно из таблицы, заявляемое соединение 1 по антимикотической активности сопоставимо препарату сравнения (кетоконазол) по отношению к С. albicans. Таким образом, 1-ацетил-5,6-диметил-2-(2-оксопропил)индолин-3-он 1 проявляет активность, сравнимую с эталоном сравнения, что делает возможным его использование для создания новых лекарственных средств, целенаправленного действия.

Изобретение относится к области органической химии, конкретно к применению 1-ацетил-5,6-диметил-2-(2-оксопропил)индолин-3-она формулы 1, который обладает антимикотической активностью, в качестве противогрибкового средства в отношении дрожжевых грибов. 1 табл., 3 пр.

Применение 1-ацетил-5,6-диметил-2-(2-оксопропил)индолин-3-она

в качестве противогрибкового средства в отношении дрожжевых грибов.