ПРИМЕНЕНИЕ 1-АЦЕТИЛ-2-(2-ОКСОПРОПИЛ)-5-ХЛОРИНДОЛИН-3-ОНА В КАЧЕСТВЕ ПРОТИВОГРИБКОВОГО СРЕДСТВА В ОТНОШЕНИИ ДРОЖЖЕВЫХ ГРИБОВ Российский патент 2023 года по МПК A61K31/404 A61P31/10 

Изобретение относится к области органической химии - новым биологически активным соединениям - замещенным индолин-3-онам, а именно к 1-ацетил-2-(2-оксопропил)-5-хлориндолин-3-ону 1 формулы:

соединение 1 обладает антимикотической активностью, что позволяет предположить его использование в медицине в качестве потенциального лекарственного средства с антимикотическими свойствами.

Аналогом по структуре заявляемому соединению является 2-октадецил-3-гидроксииндол (фистулозин) 2, обладающий антимикотической активностью [Phytochemistry, 1999, 52, 2, 271-274; doi: 10.1016/S0031-9422(99)00170-3] формулы:

Эталоном сравнения был выбран кетоконазол 3 формулы:

который широко применяется в лечебной практике, и является аналогом по действию [Машковский М.Д. Лекарственные средства. - 16-е изд., перераб., испр. и доп.- М.: Новая волна, 2012. - с. 918; Med. Chem. Res. 2013, 22, 211-218; doi: 10.1007/s00044-012-0021-2].

Задачей изобретения является поиск в ряду замещенных индолин-3-онов веществ с выраженным антимикотическим действием и низкой токсичностью.

Поставленная задача достигается получением 1-ацетил-2-(2-оксопропил)-5-хлориндолин-3-она, который обладает антимикотической активностью.

Заявляемое соединение 1 синтезируют последовательной обработкой N-[2-(5-метилфуран-2-ил)-4-хлорфенил]ацетамида м-хлорпероксибензойной кислотой в дихлорметане при 0°С с последующим выдерживанием при комнатной температуре и триэтиламином с дальнейшим выделением целевого продукта стандартными методами синтетической органической химии по схеме:

Пример 1. Получение соединения 1. К раствору 0.249 г (1 ммоль) N-[2-(5-метилфуран-2-ил)-4-хлорфенил]ацетамида в 5 мл дихлорметана при 0°С при перемешивании добавляют 0.319 г (1.3 ммоль) 70%-й м-хлорпероксибензойной кислоты и выдерживают при 0°С в течение 15 минут, затем смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 5 часов и добавляют 0.188 мл (1.35 ммоль) триэтиламина, далее перемешивают в течение 16 часов при комнатной температуре. Реакционную смесь промывают водой до нейтральной реакции среды, затем насыщенным раствором NaCl, органический слой сушат над безводным Na₂SO₄, растворитель отгоняют при пониженном давлении. Остаток очищают с помощью колоночной хроматографии на силикагеле, в качестве элюента используют смесь этилацетат - петролейный эфир и перекристаллизовывают из этанола. Выход 61%. Т. пл. 136-138°С. Спектр ЯМР ¹Н, (400 МГц, ДМСО-d₆), δ, м.д.: 8.28 (д, J=8.0 Гц, 1Н), 7.75-7.67 (м, 2Н), 4.79 (дд, J=5.3, 3.3 Гц, 1H), 3.49 (дд, J=18.5, 5.5 Гц, 1Н), 3.33 (дд, J=18.5, 3.2 Гц, 1Н), 2.33 (с, ЗН), 2.10 (с, 3Н). Спектр ЯМР ¹³С, (100 МГц, ДМСО-d₆), δ, м.д.: 204.8, 197.3, 169.6, 152.1, 136.1, 128.3, 126.8, 122.6, 119.6, 62.4, 45.2, 30.1, 24.6. Полученное соединение 1 представляет собой бесцветное кристаллическое вещество, растворимое в хлороформе, ацетоне, этилацетате, горячем этаноле.

Пример 2. Для характеристики антимикотической активности соединений использовали стандартные параметры: минимальная подавляющая концентрация (МПК), которую определяли модифицированным методом двукратных серийных разведений [Методические рекомендации: Грибы рода Candida. Методы выделения, идентификации на видовом уровне и определение чувствительности к противогрибковым препаратам, Москва, 2009; МУК 4.2.1890-04 Определение чувствительности микроорганизмов к антибактериальным препаратам] и минимальная фунгицидная концентрация (МФК).

Тесты проводили с использованием культуры модельных микроорганизмов Candida albicans АТСС 10231 на питательной среде Мюллера-Хинтона с добавлением 2% глюкозы в 96-луночных полистироловых планшетах. Концентрация микроорганизмов в лунках перед началом культивирования составляла 2,5*105 КОЕ/мл. Культивирование проводили при 37°С без перемешивания. Определение МПК и высевы для определения МФК производили через 24 ч. Исследуемые соединения растворяли в диметилсульфоксиде (ДМСО) до полного растворения в концентрации 20 мг/мл и ниже, в зависимости от растворимости. Вносили в питательную среду так, чтобы количество DMSO не превышало 5%.

Пример 3. Острую токсичность (ЛД₅₀, мг/мл) соединения 1 определяли по методу Г.Н. Першина [Першин Г.Н. Методы экспериментальной химиотерапии // М., С.100, 1971, 109-117]. Соединение 1 вводили внутрибрюшинно белым мышам массой 16-18 г в виде взвеси в 2% крахмальной слизи и наблюдали за поведением и гибелью животных в течение 10 суток. Для исследуемого соединения 1 ЛД₅₀ составляет >500 мг/кг.

Согласно классификации токсичности препаратов, соединение 1 относится к IV классу мало токсичных препаратов [Измеров Н.Ф., Саноцкий И.В., Сидоров К.К. Параметры токсикометрии промышленных ядов при однократном воздействии: Справочник. М., 1977, стр. 196]. Результаты испытаний представлены в таблице:

Как видно из таблицы, заявляемое соединение 1 по антимикотической активности превышает препарат сравнения (кетоконазол) в 3 раза по отношению к С.albicans. Таким образом, 1-ацетил-2-(2-оксопропил)-5-хлориндолин-3-он 1 проявляет более высокую активность по сравнению с эталоном сравнения, что делает возможным его использование для создания новых лекарственных средств, целенаправленного действия.

Изобретение относится к области органической химии и фармацевтики, а именно к применению противогрибкового средства в отношении дрожжевых грибов. Раскрывается применение 1-ацетил-2-(2-оксопропил)-5-хлориндолин-3-она в качестве противогрибкового средства в отношении дрожжевых грибов. Изобретение обеспечивает эффективное противогрибковое дедйствие в отношении дрожжевых грибов. 1 табл., 2 пр.

Применение 1-ацетил-2-(2-оксопропил)-5-хлориндолин-3-она:

в качестве противогрибкового средства в отношении дрожжевых грибов.