Изобретение относится к области органической химии, а именно к применению индивидуальных соединений класса 2-фенил-1-тиа-3,6-диазаспиро[4.4]нон-2,8-диен-4,7-дионов, которые могут быть использованы в фармакологии в качестве противомикробного средства в отношении культуры S. Aureus.
Заявленные соединения 9-ароил-8-гидрокси-6-(2-гидроксифенил)-2-фенил-1-тиа-3,6-диазаспиро[4.4]нон-2,8-диен-4,7-дионы и способ синтеза их производных известны из уровня техники. Производные заявляемых соединений являются продуктами взаимодействия 3-ароилпирроло[2,1-с][1,4]бензоксазин-1,2,4-трионов с тиобензамидом (Патент РФ №2631432, C07D 513/10, А61Р 31/04, опубл. 22.09.2017, Бюл. №27), образующихся по следующей схеме:
Противомикробная активность была изучена у 9-бензоил-8-гидрокси-6-(2-гидроксиэтил)-2-фенил-1-тиа-3,6-диазаспиро[4.4]нон-2,8-диен-4,7-диона (заявка на изобретение РФ №2022119918, A61K 31/426, A61K 31/438, реш. о выд. патента 06.12.2022).
Задачей изобретения является изыскание новых соединений, обладающих противомикробной активностью и более высокой активностью, а также расширение арсенала средств воздействия на живой организм.
Поставленная задача решается тем, что соединение 8-гидрокси-6-(2-гидроксиэтил)-9-(4-метилбензоил)-2-фенил-1-тиа-3,6-диазаспиро[4.4]нон-2,8-диен-4,7-дион проявляет более высокую противомикробную активность в концентрации в 7.8-62.5 мкг/мл.
Синтезируют заявляемое соединение путем взаимодействия 8-(4-метилбензоил)-3,4-дигидро-1H-пирроло[2,1-с][1,4]оксазин-1,6,7-триона с тиобензамидом в среде растворителя с последующим выделением целевых продуктов, по следующей схеме:
Процесс ведут при температуре 110°C, а в качестве растворителя используют безводный толуол.
Изобретение иллюстрируется следующими примерами.
Пример 1. 8-Гидрокси-6-(2-гидроксиэтил)-9-(4-метилбензоил)-2-фенил-1-тиа-3,6-диазаспиро[4.4]нон-2,8-диен-4,7-дион (4).
К раствору 1.0 ммоль 8-(4-метилбензоил)-3,4-дигидро-1H-пирроло[2,1-с][1,4]оксазин-1,6,7-триона (3) в 4 мл безводного толуола добавляли 1.0 ммоль тиобензамида, кипятили 15 мин, охлаждали, образовавшийся осадок отфильтровывали. Выход 97%, т.пл. 189-191°C.
Соединение (4) C22H18N2O5S.
Найдено, %: С 62.83; Н 4.14; N 6.48; S 7.32
Вычислено, %: С 62.55; Н 4.29; N 6.63; S 7.59. Соединение (4) - бесцветное кристаллическое вещество, легкорастворимое в ДМСО и ДМФА, труднорастворимое в ацетоне, этилацетате, хлороформе, 1,4-диоксане, среднерастворимое в этаноле, нерастворимое в ароматических углеводородах, алканах и воде. Устойчиво при хранении в обычных условиях.
В ИК спектре соединения (4), записанном в виде пасты в вазелиновом масле, присутствуют полосы валентных колебаний спиртовой группы ОН в виде узкого пика при 3517 см-1, енольной группы ОН в виде широкой полосы при 3084 см-1, двух лактамных карбонильных групп при 1720 см-1 и при 1702 см-1 и ароильной карбонильной группы при 1629 см-1.
В спектре ЯМР 1H соединения (4), записанном в растворе в ДМСО-d6, кроме сигналов протонов ароматических колец, присутствуют синглет метальных протонов 4-метилбензоильного фрагмента при 2.37 м.д. (с, 3Н), группа из 4 метиленовых протонов гидроксиэтильного заместителя при 3.16-3.26 м.д, (м, 1Н), 3.36 м.д. (ддд, 1Н, J 13.8, 7.7, 5.9 Гц), 3.48 м.д. (ддд, 1Н, J 10.6, 7.7, 5.6 Гц), 3.56-3.64 м.д. (м, 1Н) соответственно, и уширенный синглет протона группы ОН гидроксиэтильного заместителя при 6.14 м.д.
Пример 2. Фармакологическое исследование соединения (4) на наличие противомикробной активности.
Для исследований использовали общепринятый метод двукратных серийных разведений в жидкой питательной среде микрометодом [Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ - М.: Изд-во Медицина, 2005]. Готовили исходные разведения микроорганизмов в физиологическом растворе из суточной агаровой культуры по оптическому стандарту мутности (ОСО) на 5 ME с использованием денситометра. После ряда разведений конечная концентрация клеток в опыте составляла 2,5×105 клеток/мл.
Противомикробные свойства химического вещества изучали на 3-х коллекционных условно-патогенных штаммах микроорганизмов: Staphylococcus aureus (штамм 906), Escherichia coli (штамм 1257), Candida albicans (РКПГУ 1353/1277), полученных в ФГБУ «Научный центр экспертизы средств медицинского применения» Минздравсоцразвития России. Факт ингибирования (торможения роста) микробных клеток в разведениях препаратов отмечали после 20-часового термостатирования при 37°С. Окончательные результаты фиксировали через 7 суток после высева на скошенный агар РПА, Максимально испытанная концентрация соединений соответствовала 1000,0 мкг/мл. Противомикробную (ингибирующую, бактерицидную) активность оценивали по минимально действующей концентрации.
Анализ полученных данных показал:
соединение 4 обладает антимикробным действием в отношении культуры S. aureus; ингибирующим действием в концентрации 7,8 мкг/мл, гибель наступает от концентрации в 500,0 мкг/мл, а также обладает ингибирующим действием в отношении культуры С albicans в концентрации 62,5 мкг/мл и гибель наступает от концентрации в 1.000,0 мкг/мл.
Предлагаемое вещество 8-гидрокси-6-(2-гидроксиэтил)-9-(4-метилбензоил)-2-фенил-1-тиа-3,6-диазаспиро[4.4]нон-2,8-диен-4,7-дион (4) обладает противомикробной активностью и может найти применение в фармакологии в качестве потенциального лекарственного средства.
Изобретение относится к применению 8-гидрокси-6-(2-гидроксиэтил)-9-(4-метилбензоил)-2-фенил-1-тиа-3,6-диазаспиро[4.4]нон-2,8-диен-4,7-диона 
в качестве средства, обладающего противомикробной активностью. Технический результат – выраженная противомикробная активность 8-гидрокси-6-(2-гидроксиэтил)-9-(4-метилбензоил)-2-фенил-1-тиа-3,6-диазаспиро[4.4]нон-2,8-диен-4,7-диона. 1 табл., 2 пр.
Применение 8-гидрокси-6-(2-гидроксиэтил)-9-(4-метилбензоил)-2-фенил-1-тиа-3,6-диазаспиро[4.4]нон-2,8-диен-4,7-диона
в качестве средства, обладающего противомикробной активностью.
