Применение 2,4-дифенил-9H-карбазола в качестве противогрибкового средства в отношении дрожжевых грибов Российский патент 2023 года по МПК C07D209/82 A61K31/403 A61P31/10 

Изобретение относится к области органической химии - новым биологически активным соединениям - замещенным карбазолам, а именно к 2,4-дифенил-9H-карбазолу 1 формулы:

соединение 1 обладает антимикотической активностью, что позволяет предположить его использование в медицине в качестве потенциального лекарственного средства с антимикотическими свойствами.

Аналогом по структуре заявляемому соединению является 6-циклогексил-11H-бензо[b]карбазол 2b, обладающий антимикотической активностью [J. Org. Chem. 2011, 76, 1212-1227; doi: 10.1021/jo102507c] формулы:

Эталоном сравнения был выбран кетоконазол 3 формулы:

который широко применяется в лечебной практике, и является аналогом по действию [Машковский М.Д. Лекарственные средства. - 16-е изд., перераб., испр. и доп. - М.: Новая волна, 2012. - с. 918; Med. Chem. Res. 2013, 22, 211-218; doi: 10.1007/s00044-012-0021-2].

Задачей изобретения является поиск в ряду замещенных карбазолов веществ с выраженным антимикотическим действием и низкой токсичностью.

Поставленная задача достигается получением 2,4-дифенил-9H-карбазола, который обладает антимикотической активностью.

Заявляемое соединение 1 синтезируют обработкой N-фенил-[1,1':3',1''-терфенил]-5'-амина ацетатом палладия в уксусной кислоте при нагревании с выделением целевого продукта стандартными методами синтетической органической химии по схеме:

Пример 1. Получение соединения 1. К раствору N-фенил-[1,1':3',1''-терфенил]-5'-амина (128 мг, 0.4 ммоль) в уксусной кислоте (7 мл) добавляют ацетат палладия (180 мг, 0.8 ммоль, 2 эквивалента). Реакционную массу перемешивают при температуре 100°С в течение 5 часов после чего фильтруют через тонкий слой силикагеля. Соединение 1 очищают методом колоночной хроматографии на силикагеле с использованием в качестве элюента смеси петролейного эфира и дихлорметана в соотношении 2:1. Выход 99 мг (78%). R_f=0.37 (петролейный эфир/этилацетат 4:1). ЯМР ¹Н (400 МГц, хлороформ-d₁): δ=7.93 (уш. с, 1H), 7.61-7.56 (м, 4Н), 7.45-7.42 (м, 2Н), 7.41-7.37 (м, 3Н), 7.36-7.32 (м, 2Н), 7.27 (d, ⁴J=1.4 Гц, 1H), 7.42-7.21 (м, 3Н), 6.89 (ддд, ³J=8.1; 5.6 Гц, ⁴J=2.6 Гц, 1H) м.д. ЯМР ¹³С {1H} (100 МГц, хлороформ-d₁): δ=141.7, 141.4, 140.7, 140.4, 139.2, 138.1, 129.4 (2С), 128.9 (2С), 128.6 (2С), 127.76, 127.65 (2С), 127.3, 125.9, 123.0, 122.6, 121.0, 120.3, 119.4, 110.6, 108.1 ppm. HRMS (ESI/TOF) m/z: [М+Н]^•+ вычислено для C₂₄H₁₈N^•+ 320.1434, найдено 320.1434. Полученное соединение 1 представляет собой светло-желтое масло, растворимое в этаноле, толуоле, ацетоне, хлороформе, этилацетате.

Пример 2. Для характеристики антимикотической активности соединений использовали стандартные параметры: минимальная подавляющая концентрация (МПК), которую определяли модифицированным методом двукратных серийных разведений (Методические рекомендации: Грибы рода Candida. Методы выделения, идентификации на видовом уровне и определение чувствительности к противогрибковым препаратам, Москва, 2009; МУК 4.2.1890-04 Определение чувствительности микроорганизмов к антибактериальным препаратам) и минимальная фунгицидная концентрация (МФК).

Тесты проводили с использованием культуры модельных микроорганизмов Candida albicans АТСС 10231 на питательной среде Мюллера-Хинтона с добавлением 2% глюкозы в 96-луночных полистироловых планшетах. Концентрация микроорганизмов в лунках перед началом культивирования составляла 2,5*10⁵ КОЕ/мл. Культивирование проводили при 37°С без перемешивания. Определение МПК и высевы для определения МФК производили через 24 ч. Исследуемые соединения растворяли в диметилсульфоксиде (ДМСО) до полного растворения в концентрации 20 мг/мл и ниже, в зависимости от растворимости. Вносили в питательную среду так, чтобы количество DMSO не превышало 5%.

Пример 3. Острую токсичность (ЛД₅₀, мг/мл) соединения 1 определяли по методу Г.Н. Першина [Першин Г.Н. Методы экспериментальной химиотерапии // М., С. 100, 1971, 109-117]. Соединение 1 вводили внутрибрюшинно белым мышам массой 16-18 г в виде взвеси в 2% крахмальной слизи и наблюдали за поведением и гибелью животных в течение 10 суток. Для исследуемого соединения 1 ЛД₅₀ составляет >1500 мг/кг.

Согласно классификации токсичности препаратов, соединение 1 относится к V классу практически нетоксичных препаратов [Измеров Н.Ф., Саноцкий И.В., Сидоров К.К. Параметры токсикометрии промышленных ядов при однократном воздействии: Справочник. М., 1977, стр. 196]. Результаты испытаний представлены в таблице:

Антимикотическая активность и острая токсичность соединения 1.

Как видно из таблицы, заявляемое соединение 1 превосходит в полтора раза по антимикотической активности препарат сравнения (Кетоконазол) по отношению к С. albicans. Таким образом, это делает возможным использование 2,4-дифенил-9H-карбазола 1 для создания новых лекарственных средств противогрибкового действия в отношении дрожжевых грибов.

Настоящее изобретение относится к применению 2,4-дифенил-9Н-карбазола

в качестве противогрибкового средства в отношении дрожжевых грибов. Технический результат – повышение антимикотической активности в отношении дрожжевых грибов, а также низкая токсичность. 1 табл., 3 пр.

Применение 2,4-дифенил-9Н-карбазола

в качестве противогрибкового средства в отношении дрожжевых грибов.