ПРОИЗВОДНОЕ ИЗОИНДОЛИНА, ЕГО ФАРМАЦЕВТИЧЕСКИЙ СОСТАВ И ПРИМЕНЕНИЕ Российский патент 2023 года по МПК C07D401/14 A61K31/496 A61P35/00 

Перекрестная ссылка на родственные заявки

[0001] Настоящая заявка испрашивает приоритет заявки на патент Китая № CN 202010067409.0, поданной 20 января 2020 г., и заявки на патент Китая № CN 202010413162.3, поданной 15 мая 2020 г. Обе эти заявки ссылкой полностью включены в настоящее описание.

Область техники

[0002] Настоящее изобретение относится к производному изоиндолина, его промежуточному соединению, способу его получения, фармацевтическому составу на его основе и его применению.

Предпосылки создания изобретения

[0003] Цереблон представляет собой белок, который у человека кодируется геном CRBN. Цереблон образует комплекс убиквитинлигазы Е3 с поврежденным ДНК-связывающим белком 1 (DDB1), куллином-4А (CUL4A) и регулятором куллина 1 (ROC1). Множество других белков подвергаются убиквитинированию путем образования такого комплекса. Благодаря механизму, который до конца не выяснен, убиквитинирование цереблоном белков-мишеней приводит к повышению уровня фактора роста фибробластов 8 (FGF8) и фактора роста фибробластов 10 (FGF10), а FGF8, в свою очередь, регулирует множество процессов развития.

[0004] Многочисленные исследования показывают, что основанные на леналидомиде иммуномодуляторы могут связываться с белком цереблоном и изменять специфичность комплекса, вызывая убиквитинирование и деградацию Ikaros (IKZF1) и Aiolos (IKZF3). IKZF1 и IKZF3 являются ключевыми факторами транскрипции при множественной миеломе. Одна аминокислотная замена IKZF3 придает устойчивость к деградации, индуцированной основанными на леналидомиде иммуномодуляторами, и устойчивость к ингибированию роста клеток, индуцированному основанными на леналидомиде иммуномодуляторами. Точно так же мы обнаружили, что продуцирование IL2, индуцированное иммуномодулятором леналидомидом, в Т-клетках связано с уменьшением уровней IKZF1 и IKZF3. Эти результаты раскрывают новый терапевтический механизм действия, то есть изменение активности убиквитинлигазы E3, что подвергает определенные мишени избирательному разрушающему воздействию (Jan Krönke et al., Lenalidomide Causes Selective Degradation of IKZF1 and IKZF3 in Multiple Myeloma Cells, Science, 2014, 343(6168): 301-5).

[0005] В данной области техники существует растущая потребность в эффективном лечении опухолей, а также острая потребность в разработке низкомолекулярного терапевтического средства, которое было бы специфически нацелено на различные ассоциированные с опухолью белки и регулируют их, используя субстратную специфичность цереблона.

Сущность изобретения

[0006] В настоящем изобретении предложено производное изоиндолина, способ его получения, фармацевтический состав на его основе и его применение. Производные изоиндолина настоящего изобретения могут специфически воздействовать на различные белки, ассоциированные с опухолью, и осуществлять их регуляцию путем связывания с Цереблоном, тем самым обеспечивая эффективное лечение онкологических заболеваний и других сходных с ними заболеваний.

[0007] Настоящее изобретение относится к производному изоиндолина, представленному общей формулой (I), его фармацевтически приемлемой соли, сольвату, полиморфу, метаболиту, пролекарству или стереоизомеру:

Общая формула (I)

где каждый из R₁ и R₂ независимо выбран из H, галогена, -CN, замещенного или незамещенного (C₁-С₁₂)алкила, замещенной или незамещенной (C₁-С₁₂)алкокси-группы или -ОН, при условии, что: R₁ и R₂ одновременно не представляют собой Н;

Х выбран из О или NH;

каждый из X₁, X₂, X₃, X₄ и Х₅ независимо выбран из C или N;

каждый из R₄, R₅, R₆, R₇ и R₈ независимо отсутствует или выбран из H, галогена, замещенного или незамещенного (C₁-С₁₂)алкила, замещенной или незамещенной (C₁-С₁₂)алкокси-группы, замещенного или незамещенного (C₃-С₆)циклоалкила, -CH=CH₂, , -ОН, -CN, -NO₂, , или , где каждый из R₉ и R₁₀ независимо выбран из H, D или замещеного или незамещеного (C₁-С₁₂)алкила, при условии, что: по меньшей мере один из R₄, R₅, R₆, R₇ и R₈ выбран из -CN, -NO₂, -СН=СН₂, , , , (С₁-С₁₂)алкила, замещенного одним или несколькими галогенами, (C₁-С₁₂)алкокси-группы, замещенной одним или несколькими галогенами, (C₁-С₁₂)алкила, замещенного одним или несколькими D, или (C₁-С₁₂)алкокси-группы, замещенной одним или несколькими D;

заместители в замещенном (C₁-С₁₂)алкиле и замещенной (C₁-С₁₂)алкокси-группе выбирают из одного или нескольких D, одного или нескольких галогенов или одного или нескольких (C₃-С₆)циклоалкилов;

углерод, помеченный *, представляет собой асимметрический атом углерода.

[0008] Предпочтительно, чтобы в общей формуле (I) по меньшей мере один из R₁ и R₂ был выбран из галогена, -CN, замещенного или незамещенного (C₁-С₁₂)алкила, замещенной или незамещенной (C₁-С₁₂)алкокси-группы или -ОН.

[0009] Предпочтительно, чтобы в общей формуле (I) по меньшей мере один из R₁ и R₂ был выбран из F, Cl, Br, -CN, -CH₃, -ОСН₃, -CF₃ или -OCF₃.

[0010] Более предпочтительно, чтобы в общей формуле (I) по меньшей мере один из R₁ и R₂ представлял собой F.

[0011] Предпочтительно, чтобы Х в общей формуле (I) представлял собой О.

[0012] В одном варианте осуществления Х в общей формуле (I) представляет собой О, и каждый из Х₁, X₂, X₃, X₄ и Х₅ независимо представляет собой С.

[0013] В одном варианте осуществления X представляет собой O, и по меньшей мере один из X₁, X₂, X₃, X₄ и Х₅ представляет собой N.

[0014] Предпочтительно, чтобы Х в общей формуле (I) представлял собой NH.

[0015] В одном варианте осуществления Х в общей формуле (I) представляет собой NH, и каждый из X₁, X₂, X₃, X₄ и Х₅ независимо представляют собой С.

[0016] В одном варианте осуществления X представляет собой NH, и по меньшей мере один из X₁, X₂, X₃, X₄ и Х₅ представляет собой N.

[0017] В одном варианте осуществления R₄ в общей формуле (I) выбран из -CN, -NO₂, , , (С₁-С₁₂)алкила, замещенного одним или несколькими галогенами, (C₁-С₁₂)алкокси-группы, замещенной одним или несколькими галогенами, (C₁-С₁₂)алкила, замещенного одним или несколькими D, или (C₁-С₁₂)алкокси-группы, замещенной одним или несколькими D, где каждый из R₉ и R₁₀ независимо выбран из H, D или замещенного или незамещенного (C₁-С₁₂)алкила; и каждый из R₅, R₆, R₇ и R₈ независимо выбран из H или галогена.

[0018] В одном варианте осуществления R₄ выбран из -CN, (C₁-С₁₂)алкила, замещенного одним или несколькими галогенами, (C₁-С₁₂)алкокси-группы, замещенной одним или несколькими галогенами, (C₁-С₁₂)алкила, замещенного одним или несколькими D, или (C₁-С₁₂)алкокси-группы, замещенной одним или несколькими D, и каждый из R₅, R₆, R₇ и R₈ независимо представляет собой H.

[0019] В одном варианте осуществления R₅ в общей формуле (I) выбран из -CN, -NO₂, , , (С₁-С₁₂)алкила, замещенного одним или несколькими галогенами, (C₁-С₁₂)алкокси-группы, замещенной одним или несколькими галогенами, (C₁-С₁₂)алкила, замещенного одним или несколькими D, или (C₁-С₁₂)алкокси-группы, замещенной одним или несколькими D, где каждый из R₉ и R₁₀ независимо выбран из H, D или замещенного или незамещенного (C₁-С₁₂)алкила; и каждый из R₄, R₆, R₇ и R₈ независимо выбран из H или галогена.

[0020] В одном варианте осуществления R₅ выбран из -CN, (C₁-С₁₂)алкила, замещенного одним или несколькими галогенами, (C₁-С₁₂)алкокси-группы, замещенной одним или несколькими галогенами, (C₁-С₁₂)алкила, замещенного одним или несколькими D, или (C₁-С₁₂)алкокси-группы, замещенной одним или несколькими D, и каждый из R₄, R₆, R₇ и R₈ более предпочтительно независимо выбран из H.

[0021] В одном варианте осуществления R₆ в общей формуле (I) выбран из -CN, -NO₂, , , (С₁-С₁₂)алкила, замещенного одним или несколькими галогенами, (C₁-С₁₂)алкокси-группы, замещенной одним или несколькими галогенами, (C₁-С₁₂)алкила, замещенного одним или несколькими D, или (C₁-С₁₂)алкокси-группы, замещенной одним или несколькими D, где каждый из R₉ и R₁₀ независимо выбран из H, D или замещенного или незамещенного (C₁-С₁₂)алкила; и каждый из R₄, R₅, R₇ и R₈ независимо выбран из H или галогена.

[0022] В одном варианте осуществления R₆ выбран из -CN, (C₁-С₁₂)алкила, замещенного одним или несколькими галогенами, (C₁-С₁₂)алкокси-группы, замещенной одним или несколькими галогенами, (C₁-С₁₂)алкила, замещенного одним или несколькими D, или (C₁-С₁₂)алкокси-группы, замещенной одним или несколькими D, и каждый из R₄, R₅, R₇ и R₈ более предпочтительно независимо выбран из H.

[0023] В одном варианте осуществления R₇ в общей формуле (I) выбран из -CN, -NO₂, , , (С₁-С₁₂)алкила, замещенного одним или несколькими галогенами, (C₁-С₁₂)алкокси-группы, замещенной одним или несколькими галогенами, (C₁-С₁₂)алкила, замещенного одним или несколькими D, или (C₁-С₁₂)алкокси-группы, замещенной одним или несколькими D, где каждый из R₉ и R₁₀ независимо выбран из H, D или замещенного или незамещенного (C₁-С₁₂)алкила; и каждый из R₄, R₅, R₆ и R₈ независимо выбран из H или галогена.

[0024] В одном варианте осуществления R₇ выбран из -CN, (C₁-С₁₂)алкила, замещенного одним или несколькими галогенами, (C₁-С₁₂)алкокси-группы, замещенной одним или несколькими галогенами, (C₁-С₁₂)алкила, замещенного одним или несколькими D, или (C₁-С₁₂)алкокси-группы, замещенной одним или несколькими D, и каждый из R₄, R₅, R₆ и R₈ более предпочтительно независимо выбран из H.

[0025] В одном варианте осуществления R₈ в общей формуле (I) выбран из -CN, -NO₂, , , (С₁-С₁₂)алкила, замещенного одним или несколькими галогенами, (C₁-С₁₂)алкокси-группы, замещенной одним или несколькими галогенами, (C₁-С₁₂)алкила, замещенного одним или несколькими D, или (C₁-С₁₂)алкокси-группы, замещенной одним или несколькими D, где каждый из R₉ и R₁₀ независимо выбран из H, D или замещенного или незамещенного (C₁-С₁₂)алкила; и каждый из R₄, R₅, R₆ и R₇ независимо выбран из H или галогена.

[0026] В одном варианте осуществления R₈ выбран из -CN, (C₁-С₁₂)алкила, замещенного одним или несколькими галогенами, (C₁-С₁₂)алкокси-группы, замещенной одним или несколькими галогенами, (C₁-С₁₂)алкила, замещенного одним или несколькими D, или (C₁-С₁₂)алкокси-группы, замещенной одним или несколькими D, и каждый из R₄, R₅, R₆ и R₇ более предпочтительно независимо представляет собой H.

[0027] Предпочтительно, чтобы в общей формуле (I) асимметрический атом углерода относился к ахиральному углероду, углероду с (S)-конфигурацией, углероду с преобладающей (S)-конфигурацией, углероду с (R)-конфигурацией, углероду с преобладающей (R)-конфигурацией или рацемату.

[0028] Предпочтительно, чтобы в общей формуле (I) галоген представлял собой F, Cl, Br или I.

[0029] Предпочтительно, чтобы в общей формуле (I) замещенный или незамещенный (C₁-С₁₂)алкил был выбран из замещенного или незамещенного (C₁-С₆)алкила, и более предпочтительно - из замещенного или незамещенного (C₁-С₄)алкила, где замещенный или незамещенный (C₁-С₄)алкил наиболее предпочтительно выбирают из замещенного или незамещенного метила, замещенного или незамещенного этила, замещенного или незамещенного н-пропила, замещенного или незамещенного изопропила, замещенного или незамещенного н-бутила, замещенного или незамещенного изобутила или замещенного или незамещенного трет-бутила; причем заместитель, описанный во фразе «замещенный или незамещенный», выбран из одного или нескольких из D, галогена или (C₃-С₆)циклоалкила, предпочтительно, чтобы он был выбран из D, F, Cl, Br, I, циклопропила, циклобутила, циклопентила или циклогексила, более предпочтительно - из D, F, Cl, циклопропила или циклобутила, и наиболее предпочтительно - из F.

[0030] В одном варианте осуществления замещенный или незамещенный (C₁-С₁₂)алкил предпочтительно выбирают из метила, этила, н-пропила, изопропила, н-бутила, изобутила, трет-бутила, -CD₃, -CD₂H, -CDH₂, -CF₃, -CH₂F, -CHF₂, , , или , более предпочтительно - из метила, этила, н-пропила, изопропила, -CD₃, -CF₃, -CH₂F, -CHF₂, или , и наиболее предпочтительно - из метила, этила, -CD₃, -CF₃, -CH₂F или -CHF₂.

[0031] Предпочтительно, чтобы в производном изоиндолина, представленном общей формулой (I), его фармацевтически приемлемой соли, сольвате, полиморфе, метаболите, пролекарстве или стереоизомере, замещенная или незамещенная (С₁-С₁₂)алкокси-группа была выбрана из замещенной или незамещенной (C₁-С₆)алкокси-группы, и более предпочтительно - из замещенной или незамещенной (C₁-С₄)алкокси-группы, где замещенная или незамещенная (C₁-С₄)алкокси-группа наиболее предпочтительно выбрана из замещенной или незамещенной метокси-группы, замещенной или незамещенной этокси-группы, замещенноой или незамещенной н-пропокси-группы, замещенноой или незамещенной изопропокси-группы, замещенной или незамещенной н-бутокси-группы, замещенной или незамещенной изобутокси-группы или замещенной или незамещенной трет-бутокси-группы; причем заместитель, описанный во фразе «замещенный или незамещенный», выбран из одного или нескольких из D, галогена или (C₃-С₆)циклоалкила, предпочтительно, чтобы он был выбран из D, F, Cl, Br, I, циклопропила, циклобутила, циклопентила или циклогексила, более предпочтительно - из D, F, Cl, циклопропила или циклобутила, и наиболее предпочтительно - из D или F.

[0032] В одном варианте осуществления замещенная или незамещенная (C₁-С₁₂)алкокси-группа предпочтительно выбрана из метокси-, этокси-, н-пропокси-, изопропокси-, н-бутокси-, изобутокси-, трет-бутокси-групп, -OCD₃, -OCD₂H, -OCDH₂, -OCF₃, -OCH₂F, -OCHF₂, , , или , более предпочтительно - из метокси-, этокси-, н-пропокси-, изопропокси-групп, -OCD₃, -OCF₃, -OCH₂F, -OCHF₂, или , и наиболее предпочтительно - из метокси-, этокси-групп, -OCD₃, -OCF₃, -OCH₂F или -OCHF₂.

[0033] В одном варианте осуществления замещенный или незамещенный (C₃-С₆)циклоалкил выбирают из замещенного или незамещенного циклопропила, замещенного или незамещенного циклобутила, замещенного или незамещенного циклопентила или замещенного или незамещенного циклогексила.

[0034] В одном варианте осуществления R₁ выбран из H, F, Cl, Br, -CN, метила, метокси-группы или -ОН; причем предпочтительно, чтобы R₁ был выбран из F, Cl, -CH₃, -CN или -OH, и более предпочтительно, чтобы R₁ представлял собой F.

[0035] В одном варианте осуществления R₂ выбран из H, F, Cl, Br, -CN, метила, метокси-группы или -ОН, причем предпочтительно, чтобы R₂ был выбран из F, Cl, -CH₃, -CN или -OH, и более предпочтительно, чтобы R₂ представлял собой F.

[0036] В одном варианте осуществления R₁ выбран из F, Cl, Br, -CN, -CH₃, -OCH₃, -CF₃, или -OCF₃, а R₂ представляет собой H.

[0037] В одном варианте осуществления R₂ выбран из F, Cl, Br, -CN, -CH₃, -OCH₃, -CF₃, или -OCF₃, а R₁ представляет собой H.

[0038] В одном варианте осуществления R₁ представляет собой F, а R₂ представляет собой Н.

[0039] В одном варианте осуществления R₂ выбран из F, а R₁ выбран из Н.

[0040] Предпочтительно в общей формуле (I) один из R₄, R₅, R₆, R₇ и R₈ выбран из -CN, -NO₂, -СН=СН₂, , , , , -OCF₃, -OCH₂F, -OCHF₂, -CD₃, -OCD₃ или -CF₃.

[0041] В одном варианте осуществления R₄ выбран из H, F, Cl, Br, -CH₃, -CH₂CH₃, -CF₃, -OCH₃, -OCH₂CH₃, -CH=CH₂, , -OCF₃, -OCH₂F, -OCHF₂, -CD₃, -OCD₃, -CN, -NO₂, , , , , , , или ; причем предпочтительно, чтобы R₄ был выбран из H, F, -CN, -OCH₃, -OCF₃, -OCD₃ или -CD₃; более предпочтительно, чтобы R₄ был выбран из Н или F; и наиболее предпочтительно, чтобы R₄ представлял собой H.

[0042] В одном варианте осуществления R₅ выбран из H, F, Cl, Br, -CH₃, -CH₂CH₃, -CF₃, -OCH₃, -OCH₂CH₃, -CH=CH₂, , -OCF₃, -OCH₂F, -OCHF₂, -CD₃, -OCD₃, -CN, -NO₂, , , , , , , или ; причем предпочтительно, чтобы R₅ был выбран из H, F, -CN, -OCH₃, -OCF₃, -OCD₃ или -CD₃; более предпочтительно, чтобы R₅ был выбран из H или F; и наиболее предпочтительно, чтобы R₅ представлял собой H.

[0043] В одном варианте осуществления R₆ выбран из H, F, Cl, Br, -CH₃, -CH₂CH₃, -CF₃, -OCH₃, -OCH₂CH₃, -CH=CH₂, , -OCF₃, -OCH₂F, -OCHF₂, -CD₃, -OCD₃, -CN, -NO₂, , , , , , , или ; причем предпочтительно, чтобы R₆ был выбран из H, F, -CN, -OCH₃, -OCF₃, -OCD₃ или -CD₃; более предпочтительно, чтобы R₆ был выбран из Н или -CN; и наиболее предпочтительно, чтобы R₆ представлял собой -CN.

[0044] В одном варианте осуществления R₇ выбран из H, F, Cl, Br, -CH₃, -CH₂CH₃, -CF₃, -OCH₃, -OCH₂CH₃, -CH=CH₂, , -OCF₃, -OCH₂F, -OCHF₂, -CD₃, -OCD₃, -CN, -NO₂, , , , , , , или ; причем предпочтительно, чтобы R₇ был выбран из H, F, -CN, -OCH₃, -OCF₃, -OCD₃ или -CD₃; более предпочтительно, чтобы R₇ был выбран из H, F или -OCH₃; и наиболее предпочтительно, чтобы R₇ представлял собой -OCH₃.

[0045] В одном варианте осуществления R₈ выбран из H, F, Cl, Br, -CH₃, -CH₂CH₃, -CF₃, -OCH₃, -OCH₂CH₃, -CH=CH₂, , -OCF₃, -OCH₂F, -OCHF₂, -CD₃, -OCD₃, -CN, -NO₂, , , , , , , илил ; причем предпочтительно, чтобы R₈ был выбран из H, F, -CN, -OCH₃, -OCF₃, -OCD₃ или -CD₃; более предпочтительно, чтобы R₈ был выбран из F или H; и наиболее предпочтительно, чтобы R₈ представлял собой F.

[0046] Предпочтительно выбирать производное изоиндолина, представленное общей формулой (I), из любого из следующих соединений:

[0047] Дейтерий (D или ²Н) представляет собой стабильный нерадиоактивный изотоп водорода с атомной массой 2,0144. Водород в природе существует в виде смеси изотопов H (водород или протий), D (²H или дейтерий) и T (³H или тритий), причем содержание дейтерия составляет 0,0156%. Согласно общепринятым техническим знаниям в данной области техники, во всех соединениях, структура которых содержит природные атомы водорода, атом водорода фактически представляет собой смесь H, D и T. Следовательно, если соединение содержит дейтерий, содержание которого больше природного их содержания, т.е. более 0,0156% в любом положении, то эти соединения следует рассматривать как неприродные или обогащенные дейтерием, и, таким образом, эти соединения являются новыми по сравнению с их необогащенными аналогами.

[0048] В настоящем изобретении «D», «дейтерий» или «обогащенное дейтерием» соединение относится к соединению общей формулы (I) или этому соединению в виде фармацевтически приемлемой соли, сольвата, полиморфа, стереоизомера, метаболита или пролекарства, в которых содержание дейтерия в любом соответствующем положении больше, чем его естественное содержание в этом положении. Следовательно, в соединении с «D», «дейтерием» или «обогащенном дейтерием» соединении содержание дейтерия в любом из соответствующих положений скорее всего находится в пределах от более чем 0,0156% до 100%. Положение, обогащенное дейтерием, представлено буквой D, тогда как положение, не обогащенное дейтерием, представлено буквой H. Согласно общепринятым техническим знаниям в данной области техники, символ H может быть опущен в положении, не обогащенном дейтерием. Примером способа получения соединения, обогащенного дейтерием, является замена водорода дейтерием или использование для синтеза соединения исходного материала, обогащенного дейтерием.

[0049] В настоящем изобретении процентное содержание дейтерия в обогащенном дейтерием или содержание дейтерия относится к молярному процентному содержанию.

[0050] В настоящем изобретении фраза «необогащенный дейтерием» относится к водороду в природе, а именно к водороду в форме смеси изотопов H (водород или протий), D (²H или дейтерий) и T (³Н или тритий).

[0051] Настоящее изобретение также относится к способу получения производного изоиндолина, представленного общей формулой (I), которое можно синтезировать из поступающего в продажу сырья с помощью способов, обычно используемых в области химического синтеза, например, приведена ссылка на способы синтеза, раскрытые в WO 2016065980 A1, WO 2019014100 A1 и т.д.

[0052] В одном варианте осуществления соединение общей формулы (I) может быть получено взаимодействием соединения A-01,

где значения X, X₁-X₅, *, R₁, R₂, R₄, R₅, R₆, R₇ и R₈ такие, как определено выше, один из Ra и Rb соответствует , а другой соответствует , или , и R^a' и R^b' независимо представляют собой H.

[0053] В настоящем изобретении также предложен фармацевтический состав, содержащий терапевтически и/или профилактически эффективное количество вышеуказанного производного изоиндолина, представленного общей формулой (I), его фармацевтически приемлемой соли, сольвата, полиморфа, метаболита, пролекарства или стереоизомера.

[0054] В соответствии с вариантами осуществления настоящего изобретения фармацевтический состав можно готовить в любой форме для введения, включая инъекцию (внутривенную), введение через слизистую оболочку, пероральное введение (твердые и жидкие препараты), ингаляцию, глазное введение, ректальное введение, местное или парентеральное введение (инфузионное, инъекционное, имплантационное, подкожное, внутривенное, внутриартериальное и внутримышечное) введение. Фармацевтический состав настоящего изобретения также может быть лекарственной формой с контролируемым высвобождением или отсроченным высвобождением. Примеры твердых пероральных препаратов включают, но не ограничиваются ими, порошки, капсулы, каплеты, мягкие капсулы и таблетки. Примеры жидких препаратов для перорального введения или введения через слизистую оболочку включают, но не ограничиваются ими, суспензии, эмульсии, эликсиры и растворы. Примеры препаратов для местного применения включают, но не ограничиваются ими, эмульсии, гели, мази, кремы, пластыри, пасты, пены, лосьоны, капли или сывороточные препараты. Примеры препаратов для парентерального введения включают, но не ограничиваются ими, растворы для инъекций, сухие препараты, которые можно растворять или суспендировать в фармацевтически приемлемом носителе, суспензии для инъекций и эмульсии для инъекций. Примеры других подходящих препаратов соединения общей формулы (I), его фармацевтически приемлемой соли, сольвата, полиморфа, метаболита, пролекарства или стереоизомера включают, но не ограничиваются ими, глазные капли и другие офтальмологические препараты; аэрозоль: например, назальные спреи или ингаляторы; жидкие лекарственные формы, подходящие для парентерального введения; суппозитории и пастилки.

[0055] Фармацевтический состав настоящего изобретения может дополнительно содержать фармацевтически приемлемое формообразующее, такое как те, которые широко используются в области производства лекарств. Формообразующее в основном используют для получения безопасного, стабильного и действенного фармацевтического состава, оно также может обеспечивать растворение активных ингредиентов с желаемой скоростью после введения субъекту, или для стимулирования эффективного всасывания активных ингредиентов после введедния состава субъекту. Формообразующее может представлять собой инертные формообразующие или выполнять определенные функции, такие как стабилизация общего значения рН в составе или предотвращение разложения активных ингредиентов в составе.

[0056] В соответствии с вариантами осуществления настоящего изобретения фармацевтически приемлемое формообразующее может включать один или несколько адгезивов, суспендирующих средств, эмульгаторов, разбавителей, наполнителей, средств для гранулирования, адгезивов, разрыхлителей, смазывающих веществ, средств против прилипания, средств, улучшающих скольжение, смачивающих средств, желирующих средств, средств, замедляющих всасывание, замедлителей растворения или структурирующих добавок, адсорбентов, буферов, хелатирующих средств, консервантов, красителей, ароматизаторов и подсластителей. Фармацевтически приемлемый носитель может быть в различных формах в зависимости от формы препарата, желательного для введения. Например, для жидкого перорального препарата подходящие носители и добавки включают воду, гликоли, масла, спирты, усилители вкуса, консерванты, красители и т.д. В качестве другого иллюстративного примера для твердого перорального препарата подходящие носители и добавки включают крахмал, сахар, разбавители, средства для гранулирования, смазывающие вещества, адгезивы, разрыхлители и т.д. Фармацевтически приемлемые носители или формообразующие обычно должны быть нетоксичными. Фармацевтический состав настоящего изобретения может содержать один или несколько подходящих носителей/формообразующих. Количество и тип формообразующего будут изменяться в зависимости от конкретных требований. Специалисты в данной области техники могут легко определить подходящий(е) носитель(и)/формообразующее(ие), которые следует включить в фармацевтический состав настоящего изобретения, на основании настоящего раскрытия.

[0057] Фармацевтический состав настоящего изобретения, т.е. состав, содержащий терапевтически или профилактически эффективное количество соединения общей формулы (I), его фармацевтически приемлемой соли, сольвата, полиморфа, метаболита, пролекарства или стереоизомера, предложенных в настоящем изобретении, можно получать в соответствии с раскрытием любым способом, известным специалистам в данной области. Например, фармацевтический состав настоящего изобретения можно приготовить путем смешивания соединения общей формулы (I), его фармацевтически приемлемой соли, сольвата, полиморфа, стереоизомера, метаболита или пролекарства с фармацевтически приемлемым носителем в соответствии с обычными технологиями смешивания лекарственных средств, которые включают, но не ограничиваются ими, обычные процессы смешивания, растворения, гранулирования, эмульгирования, измельчения, инкапсулирования, заливки или лиофилизации.

[0058] В соответствии с вариантами осуществления настоящего изобретения, помимо одного или нескольких соединений общей формулы (I), их фармацевтически приемлемой соли, сольвата, полиморфа, метаболита, пролекарства или стереоизомера, фармацевтический состав может дополнительно содержать одно или несколько дополнительных терапевтических средств. Более подробная информация о дополнительных терапевтических средствах, которые могут быть включены в фармацевтическую комбинацию настоящего изобретения, будет раскрыта ниже. Количество и тип дополнительных терапевтических средств будут зависеть от заболеваний, нарушений или болезненных состояний, которые необходимо лечить или предотвратить; тяжести заболеваний, расстройств или болезненных состояний; конкретных обстоятельств субъекта, которому вводят композицию, таких как возраст, вес и физическое состояние; способа введения и т.д.

[0059] В некоторых вариантах осуществления настоящего изобретения терапевтическое или профилактическое количество соединения общей формулы (I), его фармацевтически приемлемой соли, сольвата, полиморфа, метаболита, пролекарства или стереоизомера или его любого фармацевтического состава, препарата и т.д., можно вводить субъекту в течение периода времени (периода введения), за которым следует перерыв во введении соединения (период отсутствия введения), посредством способа настоящего изобретения. Период введения и период отсутствия введения можно повторять столько раз, сколько потребуется. Желаемые продолжительность и число периодов введения или периодов отсутствия введения будут зависеть от типа и/или тяжести заболеваний, нарушений или болезненных состояний, подлежащих лечению или предупреждению, а также от пола, возраста, веса и других параметров (например, биологическое, физическое и физиологическое состояние отдельного субъекта и т.д.) отдельного субъекта. С учетом содержания, раскрываемого в заявке, квалификации специалистов в данной области достаточно, чтобы определить соответствующие продолжительность и число периодов введения и/или периодов отсутствия введения.

[0060] В соответствии с вариантами осуществления настоящего изобретения комбинированное применение соединения, представленного общей формулой (I), его фармацевтически приемлемой соли, сольвата, полиморфа, метаболита, пролекарства или стереоизомера настоящего изобретения с дополнительными терапевтическими средсвами может оказывать синергетическое действие при лечении или предупреждении любого заболевания, расстройства или болезненного состояния в соответствии с содержанием, раскрываемым в настоящем изобретении.

[0061] В соответствии с вариантами осуществления настоящего изобретения дополнительные терапевтические средства могут быть натуральными, полусинтетическими или синтетическими соединениями. В другом варианте дополнительные терапевтические средства могут представлять собой малые молекулы, такие как синтетические органические или неорганические молекулы; или более крупные молекулы или биомолекулы, такие как белки или нуклеиновые кислоты, обладающие фармакологическим действием. В другом варианте осуществления дополнительные терапевтические средства могут представлять собой анти-ангиогенное соединение, иммуномодулирующее соединение, иммунотерапевтическое соединение, химиотерапевтическое соединение или гормональное соединение.

[0062] В одном варианте осуществления настоящего изобретения субъекту одновременно вводят состав, содержащий соединение общей формулы (I), его фармацевтически приемлемую соль, сольват, полиморф, метаболит, пролекарство или стереоизомер, и дополнительное терапевтическое средство. В другом варианте осуществления соединение общей формулы (I), его фармацевтически приемлемую соль, сольват, полиморф, метаболит, пролекарство или стереоизомер и дополнительное терапевтическое средство вводят последовательно. В другом варианте осуществления соединение общей формулы (I), его фармацевтически приемлемую соль, сольват, полиморф, метаболит, пролекарство или стереоизомер и дополнительное терапевтическое средство вводят раздельно. Дополнительное терапевтическое средство можно вводить перед, последовательно с или после введения соединения общей формулы (I), его фармацевтически приемлемой соли, сольвата, полиморфа, метаболита, пролекарства или стереоизомера настоящего изобретения.

[0063] Одно или несколько дополнительных терапевтических средств, которые можно вводить в комбинации с соединением общей формулы (I) или его фармацевтически приемлемой солью, сольватом, полиморфом, метаболитом, пролекарством или стереоизомером настоящего изобретения, будут зависеть от различных обстоятельств, таких как заболевания, расстройства или болезненные состояния, которые необходимо предотвратить или лечить. Специалисты в данной области могут легко определить подходящие дополнительные терапевтические средства для применения в комбинации с производным изоиндолина, представленным общей формулой (I), его фармацевтически приемлемой солью, сольватом, полиморфом, метаболитом, пролекарством или стереоизомером в соответствии с содержанием, раскрываемым в настоящем изобретении.

[0064] В соответствии с одним вариантом осуществления настоящего изобретения, если соединение общей формулы (I), его фармацевтически приемлемую соль, сольват, полиморф, метаболит, пролекарство или стереоизомер настоящего изобретения вводят в комбинации с дополнительными терапевтическими средствами, терапевтически эффективное количество соединения, представленного общей формулой (I), его фармацевтически приемлемой соли, сольвата, полиморфа, метаболита, пролекарства или стереоизомера будет меньше, чем терапевтически эффективное количество того же соединения, которое требуется при введении соединение общей формулы (I), его фармацевтически приемлемой соли, сольвата, полиморфа, метаболита, пролекарства или стереоизомера без дополнительных терапевтических средств. В другом варианте осуществления терапевтически эффективное количество дополнительного терапевтического средства будет меньше, чем его эффективное количество в том случае, когда соединение общей формулы (I), его фармацевтически приемлемую соль, сольват, полиморф, метаболит, пролекарство или стереоизомер не вводят.

[0065] В соответствии с вариантами осуществления настоящего изобретения, если субъекту вводят соединение общей формулы (I), его фармацевтически приемлемую соль, сольват, полиморф, метаболит, пролекарство или стереоизомер и дополнительные терапевтические средства для лечения или профилактики заболеваний, расстройств или болезненных состояний, то соединение общей формулы (I), его фармацевтически приемлемую соль, сольват, полиморф, метаболит, пролекарство или стереоизомер и дополнительные терапевтические средства можно вводить одним и тем же путем или другим путем. Дополнительные терапевтические средства можно вводить любым путем, описанным в настоящем документе, включая, но не ограничиваясь этим, пероральное введение, ингаляцию, инъекцию, глазное введение, введение через слизистую оболочку, ректальное введение, эмульсионное введение, липосомное введение, имплантационное введение длительного действия или путем равномерного контролируемого высвобождения. Конкретный путь введения дополнительного терапевтического средства будет зависеть от самого дополнительного терапевтического средства и препарата, а также от заболеваний, нарушений или болезненных состояний, которые необходимо предотвратить или лечить. С учетом содержания настоящего раскрытия квалификации специалиста в данной области достаточно, чтобы определить пути введения дополнительного терапевтического средства.

[0066] Соединение общей формулы (I), его фармацевтически приемлемая соль, сольват, полиморф, метаболит, пролекарство или стереоизомер согласно настоящему изобретению пригодно для различных применений, которые включают, но не ограничиваются этим, применение для изготовлении лекарственного средства для лечения соответствующих заболеваний, нарушений или болезненных состояний путем индуцирования убиквитинирования и деградации белков-мишеней в клетках.

[0067] Таким образом, в другом общем аспекте настоящее изобретение относится к применению соединения общей формулы (I), его фармацевтически приемлемой соли, сольвата, полиморфа, метаболита, пролекарства или стереоизомера при получении лекарственного средства. для лечения или профилактики заболеваний, нарушений или болезненных состояний. В другом аспекте настоящее изобретение относится к способу лечения или профилактики соответствующих заболеваний, нарушений или болезненных состояний путем индуцирования убиквитинирования и деградации белков-мишеней в клетках, где способ включает введение субъекту терапевтически или профилактически эффективного количества производного изоиндолина. представленного общей формулой (I), его фармацевтически приемлемой соли, сольвата, метаболита, пролекарства или стереоизомера. В соответствии со способом настоящего изобретения примеры таких заболеваний, нарушений и болезненных состояний, требующих лечения или предотвращения, включают, но не ограничиваются ими, онкологические заболевания.

[0068] В предпочтительном варианте осуществления заболевания, расстройства или болезненные состояния представляют собой онкологические заболевания, предпочтительно - множественную миелому.

[0069] В данном документе цитируются или описываются различные публикации, статьи и патенты. Цитирование или описание этих ссылок или их полное включение в настоящий документ или их обсуждение предназначены для иллюстрации предпосылок создания настоящего изобретения, но это не означает, что их содержание составляет часть предшествующего уровня техники настоящего изобретения.

[0070] Если не указано иное, все технические и научные термины, используемые здесь, имеют то же значение, которое обычно понимается специалистами в области, к которой относится настоящее изобретение. В остальном некоторые используемые здесь термины имеют значения, изложенные в данном описании. Все патенты, опубликованные патентные заявки и публикации, цитируемые здесь, включены посредством ссылки, как если бы они были полностью приведены в данном документе. Следует отметить, что формы единственного числа, используемые здесь и в прилагаемой формуле изобретения, включают значение множественного числа, если контекст явно не требует иного.

[0071] В данном контексте, если конкретная соль, состав, формообразующее и т.д. упоминаются как «фармацевтически приемлемые», это означает, что соль, состав, формообразующее и т.д. обычно нетоксичны, безопасны и подходят для применения субъектом, предпочтительно - млекопитающим, более предпочтительно - человеком.

[0072] В данном контексте термин «фармацевтически приемлемая соль» относится к фармацевтически приемлемой органической или неорганической соли.

[0073] Используемый здесь термин «метаболит» относится к действующему веществу, образующемуся после того, как химическая структура молекулы лекарственного средства претерпевает изменения in vivo, и действующее вещество, как правило, является производным молекулы вышеупомянутого лекарственного средства, а также оно может быть модифицировано химическим путем.

[0074] В данном контексте термин «полиморф», и если не указано иное, относится к одной или нескольким кристаллическим структурам, в которых при кристаллизации молекулы по-разному расположены в пространстве решетки.

[0075] Используемый здесь термин «сольват» относится к кристаллической форме соединения общей формулы (I), его фармацевтически приемлемой соли, полиморфу, стереоизомеру, метаболиту или пролекарству, которая дополнительно содержит одну или несколько молекул растворителя, включенных в кристаллическую структуру. Сольват может включать стехиометрическое количество или нестехиометрическое количество растворителя, и молекула растворителя в растворителе может находиться в упорядоченном или неупорядоченном положении. Сольват, содержащий нестехиометрическое количество молекул растворителя, можно получать, удаляя по меньшей мере одну молекулу растворителя (но не все) из сольвата. В конкретном варианте осуществления сольват относится к гидрату, что означает, что кристаллическая форма соединения дополнительно содержит молекулы воды в качестве растворителя.

[0076] В данном контексте термин «пролекарство», если не указано иное, относится к производному соединения, содержащему биологически реакционноспособную функциональную группу таким образом, что биологически реакционноспособная функциональная группа может быть отщеплена от соединения или по-другому вступать в реакцию, чтобы получить соединение в биологических условиях (in vitro или in vivo). Обычно пролекарство неактивно или, по крайней мере, имеет более низкую активность, чем активность самого соединения, так что соединение начинает проявлять свою активность, пока оно не отщеплено от биологически реакционноспособной функциональной группы. Биологически активная функциональная группа может быть гидролизована или окислена в биологических условиях, чтобы обеспечить требуемое соединение. Например, пролекарство может содержать гидролизуемую в биологических условиях группу. Примеры биологически гидролизуемой группы включают, но не ограничиваются ими: биологически гидролизуемую фосфатную, биологически гидролизуемую сложноэфирную, биологически гидролизуемую амидную, биологически гидролизуемую карбонатную, биологически гидролизуемую карбаматную и биологически гидролизуемую уреидную группы.

[0077] Соединение общей формулы (I), его фармацевтически приемлемая соль, сольват, полиморф, стереоизомер, метаболит или пролекарство настоящего изобретения могут содержать один или несколько асимметрических центров («стереоизомеров»). Используемый здесь термин «стереоизомер» относится ко всем стереоизомерам, включая энантиомеры, диастереоизомеры, эпимеры, эндо-экзоизомеры, атропоизомеры, региоизомеры, цис- и транс-изомеры и т.д. «Стереоизомер» в данном документе также включает «чистый стереоизомер» и «преобладающий стереоизомер» или «рацемат» различных вышеупомянутых стереоизомеров. Эти стереоизомеры можно разделить, очистить и обогатить с помощью методов асимметричного синтеза или методов хирального разделения (включая, помимо прочего, тонкослойную хроматографию, ротационную хроматографию, колоночную хроматографию, газовую хроматографию и жидкостную хроматографию высокого давления), а также их можно получать с помощью хирального разделения за счет образования связей (химической связи и т.д.) или образования солей (физической связи) с другими хиральными соединениями и т.д. «Чистый стереоизомер» в данном контексте относится к стереоизомеру рассматриваемого соединения с массовым содержанием не менее 95% по отношению к другим стереоизомерам соединения. «Преобладающий стереоизомер» в данном контексте относится к стереоизомеру рассматриваемого соединения с массовым содержанием не менее 50% по отношению к другим стереоизомерам соединения. Термин «рацемат» в данном контексте относится к стереоизомеру соединения, массовое содержание которого равно массовому содержанию других стереоизомеров соединения.

[0078] Используемый в данном контексте термин «субъект» относится к любому животному, которому будут вводить или вводили соединение или состав в соответствии с вариантами осуществления настоящего изобретения, и предпочтительно относится к млекопитающим, и наиболее предпочтительно - к человеку. Используемый в данном контексте термин «млекопитающие» включает любое млекопитающее. Примеры млекопитающих включают, но не ограничиваются ими, крупный рогатый скот, лошадь, овцу, свинью, кошку, собаку, мышь, крысу, кролика, морскую свинку, обезьяну, человека и т.д., наиболее предпочтительно - это человек.

[0079] В одном варианте осуществления «лечить» или «получать лечение» относится к улучшению, предупреждению или обращению вспять заболевания или нарушения или по меньшей мере одного его выявляемого симптома, например, к лечению рака и нежелательных нарушений, связанных с ангиогенезом, путем уменьшения или стабилизации симптомов онкологических заболеваний или расстройств. В другом варианте осуществления термин «лечить» или «получать лечение» относится к улучшению, предупреждению или обращению вспять по меньшей мере одного измеримого параметра организма при заболевании или нарушении, подлежащем лечению, которое может быть еще не выявлено у млекопитающих. Однако в другом варианте осуществления «лечить» или «получать лечение» относится к замедлению прогрессирования заболевания или расстройства либо физически, например, благодаря стабилизации выявляемого симптома, либо физиологически, например, благодаря стабилизации показателя организма, либо за счет и того и другого. В другом варианте осуществления «лечить» или «получать лечение» относится к отсрочке начала заболевания или расстройства.

[0080] В некоторых вариантах осуществления представляющее интерес соединение вводят в качестве меры предосторожности. Используемый в данном контексте термин «предотвращать» или «быть предотвращенным» относится к снижению риска возникновения данного заболевания или расстройства. В предпочтительном варианте осуществления указанное соединение вводят в качестве меры предосторожности субъекту, такому как субъект, имеющий рак в семейном анамнезе или склонность к развитию рака или аутоиммунных заболеваний.

[0081] Используемый в данном контексте термин «терапевтически эффективное количество» относится к количеству соединения или состава, которое может привести к биологическому или медицинскому ответу (который стремятся достичь исследователи, ветеринары, врачи или другие клиницисты) в системе тканей, у животного или человека, что может включать облегчение симптомов заболевания или расстройства, подлежащего лечению. В предпочтительном варианте осуществления терапевтически эффективное количество представляет собой количество, достаточное для эффективного лечения, улучшения лечения или предотвращения рака, нарушений или нежелательных состояний, связанных с кровеносными сосудами.

[0082] Термин «профилактически эффективное количество» относится к количеству активного соединения или лекарственного средства, которое может предотвращать возникновение расстройства (к чему стремятся исследователи, ветеринары, врачи или другие клиницисты) у субъекта. Профилактически эффективное количество соединения относится к количеству терапевтического средства, используемого отдельно или в комбинации с дополнительным терапевтически действенным соединением, которое может обеспечить терапевтический эффект при лечении или предупреждении заболеваний, расстройств или болезненных состояний.

[0083] Если не указано иное, форма единственного числа используемого здесь термина также включает форму множественного числа.

[0084] Если не указано иное, термин «или» или «и» в данном контексте относится к «и/или».

[0085] Если не указано иное, "" или "", показанный в определенных группах в данном контексте, относится к положению присоединения.

[0086] Без отклонения от общедоступных знаний в данной области техники, вышеупомянутые различные предпочтительные условия можно по желанию комбинировать таким образом, чтобы получать различные предпочтительные примеры настоящего изобретения.

[0087] Все реагенты и исходные материалы, используемые в настоящем изобретении, поступают в продажу.

[0088] Положительный эффект настоящего изобретения заключается в том, что: производное изоиндолина, представленное общей формулой (I) в настоящем изобретении, может индуцировать убиквитинирование и деградацию белков-мишеней в клетках, тем самым обеспечивая эффективное лечение онкологических заболеваний и других сходных с ними заболеваний.

[0089] Экспериментальные данные показывают, что соединение согласно настоящей заявке оказывает хорошее подавляющее действие на множественную миелому.

Подробное описание вариантов осуществления

[0090] Пример 1

[0091] Соединение I-1

[0092] Схема синтеза:

[0093] Стадия A. 3-Гидрокси-2-метилбензойную кислоту (CAS 603-80-5, 30,0 г, 197 ммоль) в атмосфере азота растворяли в безводном метаноле (400 мл) и по каплям при 0°С добавляли DMF (ДМФА) (2 мл) и тионилхлорид (70,3 г, 591 ммоль). После завершения капельного добавления реакционный раствор нагревали до температуры кипения с обратным холодильником и проводили реакцию в течение ночи. Затем реакционный раствор охлаждали до комнатной температуры (25°С) и концентрировали досуха при пониженном давлении. Остаток растворяли в этилацетате (250 мл). Смесь последовательно промывали насыщенным водным раствором бикарбоната натрия (250 мл), водой (250 мл) и насыщенным соляным раствором (250 мл), сушили над безводным сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении, получая метил-3-гидрокси-2-метилбензоат в виде твердого вещества серого цвета (30,5 г, выход: 93%).

[0094] ¹H ЯМР (CDCl₃, 300 МГц): δ 7,41 (dd, J = 8,1, 1,2 Гц, 1H), 7,10 (td, J = 7,8, 0,6 Гц, 1H), 6,94 (dd, J = 8,1, 1,2 Гц, 1H),5,25 (s, 1H), 3,89 (s, 3H), 2,45 (s, 3H).

[0095] Стадия B. Метил-3-гидрокси-2-метилбензоат (30,5 г, 184 ммоль) и имидазол (31,2 г, 459 ммоль) в атмосфере азота растворяли в безводном DMF (ДМФА) (200 мл) и полученный раствор охлаждали до 0°C на ледяной бане. К раствору порциями добавляли TBDMSCl (трет-бутилдиметилсилилхлорид, 33,2 г, 220 ммоль). Полученную смесь нагревали до комнатной температуры и перемешивали в течение ночи. Реакционный раствор концентрировали при пониженном давлении, добавляли этилацетат (250 мл) и воду (250 мл) и органическую фазу отделяли. Водную фазу снова экстрагировали этилацетатом (250 мл). Органические фазы объединяли, последовательно промывали водой (250 мл) и насыщенным соляным раствором (250 мл), сушили над безводным сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении, получая метил-3-((трет-бутилдиметилсилил)окси)-2-метилбензоат в виде желтой жидкости (51,5 г, выход: 100%), который сразу использовали в следующей реакции.

[0096] ¹H ЯМР (CDCl₃, 300 МГц): δ 7,42 (dd. J = 7,8, 1,2 Гц, 1H), 7,05-7,11 (m, 1H), 7,42 (dd, J = 8,1, 1,2 Гц, 1H), 3,87 (s, 3H), 2,42 (s, 3H), 1,02 (s, 9H), 0,21 (s, 6H).

[0097] Стадия C. Соединение метил-3-((трет-бутилдиметилсилил)окси)-2-метилбензоат (51,5 г, 184 ммоль), AIBN (азобисизобутиронитрил) (1,49 г, 9,2 ммоль) и NBS (N-бромсукцинимид) (39,3 г, 220 ммоль) добавляли к четыреххлористому углероду (600 мл). Реакционный раствор кипятили с обратным холодильником и проводили реакцию в течение ночи. Реакционный раствор концентрировали при пониженном давлении, а затем остаток подвергали колоночной хроматографии (петролейный эфир/этилацетат = 20/1), получая метил-2-бромметил-3-((трет-бутилдиметилсилил)окси)бензоат в виде светло-желтой жидкости (63,1 г, выход: 96%).

[0098] ¹H ЯМР (CDCl₃, 300 МГц): δ 7,51 (dd, J = 7,5,1,2 Гц, 1H), 7,22 (t, J = 8,1 Гц, 1H), 6,98 (dd. J = 8,4. 1,5 Гц, 1H), 5,02 (s, 2H), 3,92 (s, 3H), 1,06 (s, 9H), 0,30 (s, 6H).

[0099] Стадия D. Соединение метил-2-бромметил-3-((трет-бутилдиметилсилил)окси)бензоат (5,00 г, 13,9 ммоль) и соединение (CAS 108607-02-9, 3,65 г, 15,3 ммоль) растворяли в безводном ацетонитриле (50 мл) и добавляли по каплям диизопропилэтиламин (5,20 мл, 29,2 ммоль) в атмосфере азота при комнатной температуре (30°C). Реакционный раствор нагревали до 40°С и перемешивали в течение ночи. Реакционный раствор концентрировали при пониженном давлении. Остаток разбавляли дихлорметаном (100 мл), промывали водой (50 мл × 2) и насыщенным соляным раствором (30 мл), сушили над безводным сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении, получая светло-желтое масло. Полученное масло растворяли в DMF (ДМФА) (17,2 мл) и по каплям при 0°C добавляли раствор K₂CO₃ (884 мг, 6,40 ммоль) в воде (1,89 мл). После завершения капельного добавления реакционный раствор нагревали до комнатной температуры (25°С) и перемешивали в течение 50 минут. Реакционный раствор нейтрализовали, добавляя по каплям 1 н. разбавленную соляную кислоту (11 мл) при 0°C, и концентрировали при пониженном давлении. Затем остаток подвергали колоночной хроматографии (дихлорметан/метанол = 50/1), получая I-1 в виде белой пены (1,40 г, выход: 22%).

[0100] 1H ЯМР (CDCl₃, 300 МГц): δ 8,81 (br s, 1H), 7,20-7,31 (m, 2H), 6,95-6,98 (m, 2H), 6,09 (br s, 1H), 4,94-4,99 (m, 1H), 4,56 (d, J = 17,7 Гц, 1H), 4,43 (d, J = 17,4 Гц, 1H), 2,08-2,35 (m, 4H), 1,39 (s, 9H).

[0101] Пример 2

[0102] Соединение I-2

[0103] Схема синтеза:

[0104] Стадия A. 2-фтор-4-метилбензойную кислоту (50 г, 324,4 ммоль, CAS 7697-23-6) растворяли в 400 мл DMF (ДМФА) и вносили K₂CO₃ (67 г, 486 ммоль). Реакционный раствор перемешивали при комнатной температуре в течение 0,5 часа, при 0°C добавляли йодметан (26,3 мл, 422 ммоль) и в полученной смеси проводили реакцию при комнатной температуре в течение 16 часов. Реакционный раствор выливали в 1500 мл воды. Смесь экстрагировали, используя EtOAc (500 мл × 2), промывали насыщенным соляным раствором (500 мл × 2), сушили и концентрировали при пониженном давлении, получая продукт метил-2-фтор-4-метилбензоат (51 г, выход: 94%) в виде белого твердого вещества, которое без очистки сразу использовали на следующей стадии.

[0105] Стадия B. Метил 2-фтор-4-метилбензоат (48 г, 285 ммоль) растворяли в 400 мл CCl₄, добавляли NBS (N-бромсукцинимид, 55,9 г, 314 ммоль) и BPO (бензоилпероксид, 13,8 г, 57,2 ммоль), реакционный раствор нагревали до 80°C на масляной бане и проводили реакцию в течение ночи. Реакционный раствор охлаждали до комнатной температуры, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении, а остаток диспергировали в 500 мл EtOAc, затем промывали насыщенным соляным раствором (500 мл × 2), сушили и концентрировали при пониженном давлении, получая продукт метил-4-(бромметил)-2-фторбензоат в виде твердого вещества желтого цвета (70 г). Вышеупомянутый твердый продукт метил-4-(бромметил)-2-фторбензоат (70 г) и N-Boc-пиперазин (35 г, 0,188 моль, CAS 57260-71-6) добавляли к DMF (ДМФА) (500 мл) и вносили K₂CO₃ (65 г, 0,47 моль). Смесь нагревали до 70°С на масляной бане и проводили реакцию в течение 16 часов. Реакционный раствор охлаждали до комнатной температуры, затем фильтровали и промывали EtOAc (200 мл) и экстрагировали EtOAc (500 мл × 3). Экстракт промывали водой и соляным раствором и сушили, а фильтрат концентрировали досуха при пониженном давлении, получая продукт трет-бутил 4-(3-фтор-4-(метоксикарбонил)бензил)пиперазин-1-карбоксилат, в виде желтого масла (80 г). МС (ESI) масса/заряд 353,4 [M+H]⁺.

[0106] Стадия C. Соединение трет-бутил-4-(3-фтор-4-(метоксикарбонил)бензил)пиперазин-1-карбоксилат (80 г) растворяли в EtOAc (500 мл) и добавляли HCl/EtOAc (5 н., 400 мл). Реакционный раствор перемешивали в течение 16 часов при комнатной температуре, выпавшее в осадок твердое вещество отфильтровывали, и полученное твердое вещество концентрировали досуха при пониженном давлении, получая гидрохлорид I-2. MC (ESI) масса/заряд 253,2[M+H]⁺.

[0107] Пример 3

[0108] Соединение CM-1

[0109] Схема синтеза:

[0110] Стадия А. Соединение СМ-1А (3,4-дифторбензонитрил, 11,8 г, 84,83 ммоль, CAS 64248-62-0) и N-Boc-пиперазин (18,96 г, 101,8 ммоль) вносили в DMSO (ДМСО) (100 мл) и добавляли K₂CO₃ (17,56 г, 127,2 ммоль). Полученную смесь нагревали до 100°С на масляной бане в течение ночи, охлаждали до комнатной температуры, а затем выливали в 600 мл воды. Смесь перемешивали в течение 15 минут, затем отфильтровывали и промывали водой, и осадок на фильтре концентрировали досуха при пониженном давлении, используя масляный насос, получая СМ-1С в виде белого твердого вещества (28 г). Затем добавляли HCl/EA(этилацетат) (5 М, 300 мл), полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи и отфильтровывали, а осадок на фильтре концентрировали досуха при пониженном давлении, используя масляный насос, получая СМ-1D (3-фтор-4-(пиперазин-1-ил)бензонитрила гидрохлорид, 23,0 г) в виде белого твердого вещества, МС: [M+H]⁺ = 206,1.

[0111] Стадия B. CM-1E, а именно, 2-хлор-4-метилбензойную кислоту (5 г, 29,3 ммоль, CAS 7697-25-8) растворяли в 40 мл DMF (ДМФА) и вносили K₂CO₃ (6,1 г, 44 ммоль). Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 0,5 часа, добавляли йодметан (5,4 г, 38,1 ммоль) при 0°C и в реакционном растворе проводили реакцию при комнатной температуре в течение 4 часов. Реакционный раствор выливали в 300 мл воды. Полученную смесь экстрагировали, используя EtOAc (200 мл × 2), затем промывали насыщенным соляным раствором (200 мл × 2), сушили и концентрировали при пониженном давлении, получая продукт CM-1F в виде желтого масла (метил-2-хлор-4-метилбензоат, 5,2 г, выход: 96%), который сразу без очистки использовали на следующей стадии.

[0112] Стадия C. CM-1F (5,0 г, 27,1 ммоль, CAS 195318-63-9) растворяли в 100 мл CCl₄, добавляли NBS (N-бромсукцинимид, 5,7 г, 32,5 ммоль) и BPO (бензоилпероксид, 354 мг, 1,46 ммоль), реакционный раствор нагревали до 80°С на масляной бане и проводили реакцию в течение ночи. Реакционный раствор охлаждали до комнатной температуры и фильтровали. Фильтрат промывали насыщенным соляным раствором (100 мл × 2), сушили и концентрировали при пониженном давлении, а остаток очищали колоночной хроматографией на силикагеле (PE/EtOAc = 100:1-80:1), получая СМ-1G в виде желтой жидкости (метил-4-(бромметил)-2-хлорбензоат, 4,4 г, выход: 61%).

[0113] ¹H ЯМР (400 МГц, CDC1₃) δ 7,83-7,81 (m , 1H), 7,69 (s, 1H), 7,54-7,52 (m, 1H), 4,74 (s, 2H), 3,86 (s, 3H).

[0114] Стадия D. Соединение СМ-1G (4,0 г, 15 ммоль) и СМ-1D (3,62 г, 15 ммоль) вносили в CH₃CN (80 мл), а затем добавляли K₂CO₃ (2,34 г, 38 ммоль). Полученную смесь нагревали до 80°С на масляной бане в течение 16 ч, охлаждали до комнатной температуры, затем фильтровали, промывали, используя EtOAc, и экстрагировали, используя EtOAc (50 мл × 2). Экстракт промывали водой и соляным раствором и сушили, а фильтрат упаривали досуха при пониженном давлении, получая СМ-1Н (метил-2-хлор-4-((4-(4-циано-2-фторфенил)пиперазин-1-ил)метил)бензоат, 4,5 г, 11,6 ммоль, 77%) в виде твердого вещества желтого цвета. МС: [M+H]⁺ = 388,1.

[0115] Стадия E. Применяя методику синтеза, приведенную в стадиях B-D в примере 7 (соединение CM-3), можно синтезировать соединение CM-1L - трет-бутил-(S)-5-амино-4-(4-((2-хлор-4-((4-(4-циано-2-фторфенил)пиперазин-1-ил)метил)бензил)окси)-1-оксоизоиндолин-2 -ил)-5-оксопентаноат, заменив CM-3C на CM-1H.

МС: [M+H]⁺ = 676,2.

[0116] Стадия F. Применяя методику синтеза, приведенную в стадиях E-F в примере 9 (соединение CM-6), можно синтезировать соединение CM-1, заменив CM-6G, т.е. трет-бутил-(S)-5-амино-4-(4-((4-((4-(4-циано-3-(трифторметил)фенил)пиперазин-1-ил)метил)-2-фторбензил)окси)-1-оксоизоиндолин-2-ил)-5- оксопентаноат, на CM-1L.

[0117] ¹H ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) δ 10,96 (s, 1H), 7,70-7,57 (m, 2H), 7,49-7,48 (m, 3H), 7,38-7,34 (m, 3H), 7,14-7,09 (m, 1H), 5,29 (s, 2H), 5,13-5,09 (m, 1H), 4,41 (d, J = 17,6 Гц, 1H), 4,26 (d, J = 17,6 Гц, 1H), 3,57 (s, 2H), 3,20-3,18 (m, 4H), 2,95-2,86 (m, 1H), 2,59-2,39 (m, 6H), 2,00-1,95 (m, 1H).

[0118] МС: [M+H]+ = 602,2.

[0119] ее = 99,8%

[0120] Пример 4

[0121] Соединение CM-2

[0122] Схема синтеза

[0123] К ацетонитрилу (30 мл) добавляли 1,2-дифтор-4-нитробензол (1,50 г, 9,43 ммоль), I-2 (2,72 г, 9,43 ммоль) и N,N,-диизопропилэтиламин (4,26 г, 33,00 ммоль) и полученную смесь нагревали при 80°С на масляной бане и перемешивали в течение 16 часов. Реакционный раствор концентрировали при пониженном давлении и остаток очищали препаративной высокоэффективной жидкостной хроматографией, получая продукт СМ-2С в виде твердого вещества коричневого цвета (метил-2-фтор-4-((4-(2-фтор-4-нитрофенил)пиперазин-1-ил)метил)бензоат, 1,72 г, выход: 47%).

[0124] ¹H ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) δ 8,02-7,98 (m, 2H), 7,89-7,85 (m, 1H), 7,32-7,30 (m, 2H), 7,18-7,14 (m, 1H), 3,85 (s, 3H), 3,62 (s, 2H), 3,36-3,27 (m, 4H), 2,57-2,50 (m, 4H). MC (ESI) масса/заряд 392,4 [M+H]⁺.

[0125] Применяя методику синтеза соединения CM-6, приведенную в примере 9, можно синтезировать соединение CM-2 (т.е. (S)-3-(4-((2-фтор-4-((4-(2-фтор-4-нитрофенил)пиперазин-1-ил)метил)бензил)окси)-1-оксоизоиндолин-2-ил)пиперидин-2,6-дион), заменив соединение CM-6C (т.е. метил-4-((4-(4-циано-3-(трифторметил)фенил)пиперазин-1-ил)метил)-2-фторбензоат) соответствующим исходным соединением CM-2C.

[0126] ¹H ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) δ 10,95 (s, 1H), 8,06-7,96 (m, 2H), 7,61-7,48 (m, 2H), 7,42-7,31 (m, 2H), 7,28-7,11 (m, 3H), 5,27 (s, 2H), 5,13-5,08 (m, 1H), 4,38 (d, J = 17,6 Гц, 1H), 4,22 (d, J = 17,6 Гц, 1H), 3,58 (s, 2H), 3,23-3,14 (m, 4H), 2,96-2,83 (m, 1H), 2,60-2,52 (m, 5H), 2,48-2,37 (m, 1H), 1,99-1,96 (m, 1H).

[0127] MC (ESI) масса/заряд 606,2 [M+H]⁺. e.e. = 99,4%

[0128] Пример 5

[0129] Соединение CM-5

[0130] Применяя методику синтеза соединения CM-2, приведенную в примере 4, можно синтезировать соединение CM-5 (т.е. (S)-4-(4-(4-(((2-(2,6-диоксопиперидин-3-ил)-1-оксоизоиндолин-4-ил)окси)метил)-3-фторбензил)пиперазин-1-ил)-2-фторбензонитрил), заменив исходное соединение CM-2A соединением (CAS 3939-09-1).

[0131] ¹H ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) δ 10,95 (s, 1H), 7,61-7,49 (m, 3H), 7,40-7,34 (m, 2H), 7,24-7,20 (m, 2H), 6,95-6,83 (m, 2H), 5,27 (s, 2H), 5,13-5,08 (m, 1H), 4,38 (d, J = 17,6 Гц, 1H), 4,22 (d, J = 17,6 Гц, 1H), 3,56 (s, 2H), 3,45-3,36 (m, 4H), 2,96-2,83 (m, 1H), 2,61-2,53 (m, 1H), 2,48-2,40 (m, 5H), 1,99-1,96 (m, 1H).

[0132] MC (ESI) масса/заряд 586,2 [M+H]⁺.

[0133] Пример 6

[0134] Соединение CM-7

[0135] Применяя методику синтеза соединения CM-2, приведенную в примере 4, можно синтезировать соединение CM-7 (т.е. (S)-4-(4-(4-(((2-(2,6-диоксопиперидин-3-ил)-1-оксоизоиндолин-4-ил)окси)метил)-3-фторбензил)пиперазин-1-ил)-2-метоксибензонитрил), заменив исходное соединение CM-2A соединением (CAS191014-55-8).

[0136] ¹H ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) δ 10,95 (s, 1H), 7,58-7,49 (m, 2H), 7,43-7,34 (m, 3H), 7,24-7,21 (m, 2H), 6,60-6,52 (m, 2H), 5,28 (s, 2H), 5,13-5,08 (m, 1H), 4,38 (d, J = 17,6 Гц, 1H), 4,22 (d, J = 17,6 Гц, 1H), 3,86 (s, 3H), 3,37 (s, 2H), 3,40-3,34 (m, 4H), 2,96-2,85 (m, 1H), 2,60-2,51 (m, 5H), 2,47-2,37 (m, 1H), 1,99- 1,96(m, 1H).

[0137] MC (ESI) масса/заряд 598,3 [M+H]⁺.

[0138] Пример 7

[0139] Соединение CM-3

[0140] Схема синтеза:

[0141] Стадия A. Соединение I-2 (метил-2-фтор-4-(пиперазин-1-илметил)бензоата гидрохлорид, 2,70 г, 9,35 ммоль), CM-1A (3,4-дифторбензонитрил, 1,18 г, 8,50 ммоль) и DIEA (ДИПЭА) (3,29 г, 25,5 ммоль) добавляли к DMSO (ДМСО) (15 мл) и полученную смесь нагревали до 100°С на масляной бане и перемешивали в течение 3 часов. Реакционный раствор выливали в воду со льдом и экстрагировали, используя EtOAc (60 мл × 3), органическую фазу промывали насыщенным соляным раствором, сушили и концентрировали, а остаток подвергали препаративной хроматографии с обращенной фазой, получая продукт СМ-3С в виде твердого вещества желтого цвета (метил-4-((4-(4-циано-2-фторфенил)пиперазин-1-ил)метил)-2-фторбензоат, 2,50 г, 6,74 ммоль, выход: 79%). МС: [M+H]⁺ = 372,1.

[0142] Стадия B. Соединение CM-3C (2,50 г, 6,74 ммоль) растворяли в THF(ТГФ)/MeOH (30 мл/10 мл), порциями при 0°C добавляли LiBH₄ (0,51 г, 23,55 ммоль) и полученную смесь перемешивали в атмосфере азота при комнатной температуре в течение 16 часов. Реакционный раствор выливали в воду со льдом и смесь экстрагировали, используя EtOAc (50 мл × 3). Органическую фазу промывали насыщенным соляным раствором, сушили и концентрировали, а остаток подвергали препаративной хроматографии с обращенной фазой, получая продукт СМ-3D в виде грязно-белого твердого вещества (3-фтор-4-(4-(3-фтор-4-(гидроксиметил)бензил)пиперазин-1-ил)бензонитрил, 1,20 г, выход: 52%).

[0143] ¹H ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ 7,39-7,34 (m, 2H), 7,28-7,24 (m, 1H), 7,13-7,08 (m, 2H), 6,92-6,88 (m, 1H), 4,75 (s, 2H), 3,56 (s, 2H), 3,49 (s, 1H), 3,24-3,22 (m, 4H), 2,63-2,60 (m, 4H). MC [M+H]⁺ = 344,4.

[0144] Стадия C. К раствору соединения СМ-3D (1,20 г, 3,50 ммоль) в DCM (ДХМ) (15 мл) при 0°C медленно добавляли SOCl₂ (1,25 г, 10,50 ммоль) и полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 3 часов. Реакционный раствор концентрировали, получая неочищенный продукт СМ-3Е (4-(4-(4-(хлорметил)-3-фторбензил)пиперазин-1-ил)-3-фторбензонитрила гидрохлорид, 1,4 г) в виде белого твердого вещества.

[0145] MC [M+H]⁺ = 362,1.

[0146] Стадия D. Соединение I-1 (611 мг, 1,83 ммоль), CM-3Е (800 мг.2,01 ммоль) и Cs₂CO₃ (1,49 г, 4,57 ммоль) добавляли к ДМСО (15 мл) и полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов. Реакционный раствор фильтровали, осадок на фильтре промывали, используя EtOAc, и фильтрат выливали в воду со льдом. Смесь экстрагировали, используя EtOAc (50 мл × 3), органическую фазу промывали насыщенным соляным раствором (100 мл × 3), сушили и концентрировали, и полученный неочищенный продукт подвергали препаративной хроматографии с обращенной фазой, получая продукт CM-3G (трет-бутил-(S)-5-амино-4-(4-((4-((4-(4-циано-2-фторфенил)пиперазин-1-ил)метил)-2-фторбензил)окси)-1-оксоизоиндолин-2-ил)-5-оксопентаноат, 600 мг, 0,91 ммоль, выход: 50%) в виде грязно-белого твердого вещества.

[0147] ¹H ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ 7,48-7,35 (m, 4H), 7,29-7,25 (m, 1H), 7,18-7,12 (m, 3H), 6,93-6,89 (m, 1H), 6,32 (m, 1H), 5,32 (m, 1H), 5,19 (s, 2H), 4,93-4,85 (m, 1H), 4,55-4,36 (m, 2H), 3,59 (s, 2H), 3,28-3,22 (m, 4H), 2,70-2,58 (m, 4H), 2,42-2,08 (m, 4H), 1,42 (s, 9H). MS [M+H]⁺ = 660,2.

[0148] Стадия E. Раствор соединения СМ-3G (600 мг, 0,91 ммоль) и п-толуолсульфокислоты (469 мг, 2,73 ммоль) в CH₃CN (15 мл) перемешивали при 90°C в течение 4 часов. Реакционный раствор концентрировали, а затем разбавляли смесью EtOAc/THF(ТГФ) (30 мл/30 мл) и добавляли водный раствор NaHCO₃ при 0°C-5°C до pH>7. Органическую фазу промывали насыщенным соляным раствором (80 мл), сушили и концентрировали, а полученный неочищенный продукт очищали препаративной ВЭЖХ, получая продукт СМ-3 ((S)-4-(4-(4-(((2-(2,6-диоксопиперидин-3-ил)-1-оксоизоиндолин-4-ил)окси)метил)-3-фторбензил)пиперазин-1-ил)-3-фторбензонитрил, 170 мг, 0,29 ммоль, выход: 32%) в виде грязно-белого твердого вещества.

[0149] ^lH ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) δ 10,95 (s, 1H), 7,71-7,65 (m, 1H), 7,60-7,47 (m, 3H), 7,42-7,31 (m, 2H), 7,25-7,08 (m, 3H), 5,27 (s, 2H), 5,15-5,05 (m, 1H), 4,38 (d, J = 17,6 Гц, 1H), 4,22 (d, J = 17,6 Гц, 1H), 3,57 (s, 2H), 3,23-3,14 (m, 4H), 2,96-2,83 (m, 1H), 2,60-2,52 (m, 5H), 2,48-2,37 (m, 1H), 2,02-1,92 (m, 1H).

[0150] MC (ESI) масса/заряд 586,2 [M+H]⁺.

[0151] Пример 8

[0152] Соединение CM-4

[0153] Стадия A. Метил-3-фтор-4-метилбензоат (5 г, 29,8 ммоль, CAS: 87808-48-8), NBS (N-бромсукцинимид, 5,56 г, 31,25 ммоль) и BPO (бензоилпероксид, 1,44 г, 5,95 ммоль) добавляли к CCl₄ (60 мл) и полученную смесь нагревали при 80°С на масляной бане, проводя реакцию в течение ночи. Реакционный раствор фильтровали, фильтрат концентрировали при пониженном давлении и остаток очищали колоночной хроматографией на силикагеле (РЕ/EtOAc = 100/1-30/1), получая соединения СМ-4D (метил-4-(бромметил)-3-фторбензоат, 7 г, неочищенный) в виде желтого масла.

[0154] Стадия B. Соединение СМ-4D (2,23 г, 9,04 ммоль), CM-1D (2,40 г, 9,94 ммоль) и K₂CO₃ (3,12 г, 22,6 ммоль) добавляли к DMF (ДМФА) (25 мл) и полученную смесь перемешивали при 70°С в течение 16 часов. Реакционный раствор фильтровали, фильтрат концентрировали при пониженном давлении и остаток очищали препаративной высокоэффективной жидкостной хроматографией, получая продукт СМ-4Е (метил-4-((4-(4-циано-2-фторфенил)пиперазин-1-ил)метил)-3-фторбензоат, 2,4 г, выход: 71%) в виде грязно-белого твердого вещества. МС (ESI) масса/заряд 372,4 [M+H]⁺.

[0155] Стадия C. Соединение СМ-4Е (2,40 г, 6,47 ммоль) растворяли в THF(ТГФ)/МеОН (20 мл/20 мл) и порциями при 0°С добавляли LiBH₄ (0,35 г, 16,17 ммоль). Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 16 часов. Реакционный раствор выливали в воду со льдом и смесь экстрагировали, используя EtOAc (50 мл × 3). Органическую фазу промывали насыщенным соляным раствором, сушили и концентрировали, а остаток очищали препаративной высокоэффективной жидкостной хроматографией, получая продукт CM-4F (3-фтор-4-(4-(2-фтор-4-(гидроксиметил)бензил)пиперазин-1-ил)бензонитрил, 1,3 г, выход: 58%) в виде белого твердого вещества.

[0156] ¹H ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) δ 7,70-7,66 (m, 1H), 7,57-7,54 (m, 1H), 7,38-7,34 (m, 1H), 7,13-7,08 (m, 3H), 5,27 (t, J = 6,4 Гц, 1H), 4,49 (d, J = 6,4 Гц, 2H), 3,57 (s, 2H), 3,18-3,16 (m, 4H), 2,54-2,49 (m, 4H). MC (ESI) масса/заряд 344,1 [M+H]⁺.

[0157] Стадия D. К раствору соединения СМ-4F (1,3 г, 3,79 ммоль) в DCM (ДХМ) (30 мл) при 0°C медленно добавляли SOCl₂ (1,35 г, 11,37 ммоль) и полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 3 часов. Реакционный раствор концентрировали при пониженном давлении, получая продукт СМ-4G (4-(4-(4-(хлорметил)-2-фторбензил)пиперазин-1-ил)-3-фторбензонитрила гидрохлорид, 1,4 г) в виде грязно-белого твердого вещества.

[0158] MC (ESI) масса/заряд 362,1, 364,1 [M+H]⁺.

[0159] Стадия Е. Смешанный раствор соединения СМ-4G (1,50 г, 3,77 ммоль), соединения I-1 (1,15 г, 3,44 ммоль) и К₂СО₃ (1,18 г, 8,57 ммоль) в NMP (N-метилпирролидин, 15 мл) перемешивали при 50°C в течение 16 часов. Реакционный раствор фильтровали и фильтрат выливали в воду со льдом. Смесь экстрагировали, используя EtOAc (50 мл × 3), органическую фазу промывали насыщенным соляным раствором (100 мл), сушили и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали препаративной высокоэффективной жидкостной хроматографией, получая продукт СМ-4H (трет-бутил (S)-5-амино-4-(4-((4-((4-(4-циано-2-фторфенил)пиперазин-1-ил)метил)-3-фторбензил)окси)-1-оксоизоиндолин-2-ил)-5-оксопентаноат, 1,80 г, выход: 79%) в виде грязно-белого твердого вещества.

[0160] ¹H ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) δ 7,70-7,66 (m, 1H), 7,57-7,44 (m, 4H), 7,34-7,27 (m, 4H), 7,17-7,08 (m, 2H), 5,26 (s, 2H), 4,76-4,70 (m, 1H), 4,58-4,42 (m, 2H), 3,60 (s, 2H), 3,22-3,10 (m, 4H), 2,60-2,52 (m, 4H), 2,19-2,00 (m, 4H), 1,32 (s, 9H). MC (ESI) масса/заряд 660,2 [M+H]⁺.

[0161] Стадия F. Раствор соединения СМ-4H (0,90 г, 1,36 ммоль) и п-толуолсульфокислоты (0,705 г, 4,10 ммоль) в CH₃CN (20 мл) нагревали до 90°C на масляной бане и перемешивали в течение 4 часов. Реакционный раствор концентрировали при пониженном давлении, а затем разбавляли смесью EtOAc/THF(ТГФ) (30 мл/30 мл) и при 0°C-5°C добавляли водный раствор NaHCO₃ раствор до pH>7. Органическую фазу промывали насыщенным соляным раствором (100 мл), сушили и концентрировали при пониженном давлении, а остаток очищали с помощью препаративной высокоэффективной жидкостной хроматографии, получая продукт СМ-4 ((S)-4-(4-(4-(((2-(2,6-диоксопиперидин-3-ил)-1-оксоизоиндолин-4-ил)окси)метил)-2-фторбензил)пиперазин-1-ил)-3-фторбензонитрил, 415 мг, выход: 52%) в виде белого твердого вещества.

[0162] ¹H ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) δ 10,97 (s, 1H), 7,70-7,66 (m, 1H), 7,7-7,44 (m, 3H), 7,35-7,31 (m, 4H), 7,13-7,08 (m, 1H), 5,26 (s, 2H), 5,14-5,09 (m, 1H), 4,45 (d, J= 17,2 Гц, 1H), 4,29 (d, J = 17,2 Гц, 1H), 3,60 (s, 2H), 3,24-3,11 (m, 4H), 2,98-2,84 (m, 1H), 2,64-2,52 (m, 5H), 2,49-2,37 (m, 1H), 2,05-1,93 (m, 1H).

[0163] MC (ESI) масса/заряд 586,2 [M+H]⁺.

[0164] Пример 9

[0165] Соединение CM-6

[0166] Стадия А. Соединение СМ-6А (4-фтор-2-(трифторметил)бензонитрил, 1,5 г, 7,93 ммоль, CAS 194853-86-6), I-2 (метил-2-фтор-4-(пиперазин-1-илметил)бензоата гидрохлорид, 2,29 г, 7,93 ммоль) и K₂CO₃ (2,74 г, 19,83 ммоль) добавляли к DMSO (ДМСО) (20 мл) и полученную смесь нагревали до 90°C на масляной бане и проводили реакцию в течение 7 часов. Реакционный раствор охлаждали до комнатной температуры, затем фильтровали и промывали, используя EtOAc. Фильтрат концентрировали досуха при пониженном давлении и остаток очищали колоночной хроматографией на силикагеле (PE: EtOAc = 5: м), получая продукт СМ-6С (метил-4-((4-(4-циано-3-(трифторметил)фенил)пиперазин-1-ил)метил)-2-фторбензоат, 3,0 г, выход 90%) в виде твердого вещества желтого цвета. MC (ESI) масса/заряд 422,3 [M+H]⁺.

[0167] Стадия B. Соединение CM-6С (3,0 г, 7,12 ммоль) растворяли в THF(ТГФ)/МеОН (50 мл, 5 мл) и в реакционную колбу на ледяной бане порциями вносили LiBH₄ (0,93 г, 42,8 ммоль). Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 16 часов. Реакцию гасили на ледяной бане, добавляя воду. Реакционную смесь экстрагировали, используя EtOAc (100 мл × 2), затем промывали соляным раствором (100 мл), сушили и концентрировали при пониженном давлении, а остаток очищали колоночной хроматографией на силикагеле (PE : EtOAc = 5:1, 1:1, EtOAc), получая продукт СМ-6D (4-(4-(3-фтор-4-(гидроксиметил)бензил)пиперазин-1-ил)-2-(трифторметил)бензонитрил, 2,5 г, выход: 90%) в виде белого твердого вещества.

[0168] ¹H ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) δ 7,82 (d, J = 8,8 Гц, 1H), 7,42-7,30 (m, 1H), 7,29-7,08 (m, 3H), 5,21 (t, J = 5,6 Гц, 1H), 4,53 (d, J = 5,6 Гц, 2H), 3,53 (s, 2H), 3,47-3,44 (m, 4H), 2,51-2,47 (m, 4H).

[0169] Стадия C. Соединение СМ-6D (2,40 г, 6,10 ммоль) растворяли в CH₃CN (15 мл) и в реакционную колбу на ледяной бане вносили SOCl₂ (2,18 г, 18,3 ммоль) и полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. Реакционный раствор концентрировали досуха при пониженном давлении, а остаток суспендировали в EtOAc, затем фильтровали и концентрировали при пониженном давлении, получая продукт СМ-6Е (4-(4-(4-(хлорметил)-3-фторбензил)пиперазин-1-ил)-2-(трифторметил)бензонитрила гидрохлорид, 2,4 г, выход: 88%) в виде грязно-белого твердого вещества.

[0170] ¹H ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) δ 11,96 (s, 1H), 7,92 (d, J = 8,8 Гц, 1H), 7,67-7,62 (m, 2H), 7,49-7,40 (m, 2H), 7,31-7,28 (m, 1H), 4,82 (s, 2H), 4,39 (s, 2H), 4,23-4,20 (m, 2H), 3,55-3,49 (m, 2H), 3,36-3,33(m, 2H), 3,12-3,10 (m, 2H).

[0171] Стадия D. Соединение CM-6E (1,70 г, 3,79 ммоль) растворяли в DMSO (ДМСО) (10 мл) и добавляли Cs₂CO₃ (3,1 г, 9,5 ммоль) и соединение I-1 (1,27 г, 3,80 ммоль) при комнатной температуре. Полученную смесь перемешивали при 25°С в течение 2 часов. Реакционный раствор фильтровали через диатомит и затем промывали, используя EtOAc. Фильтрат выливали в воду со льдом и смесь экстрагировали, используя EtOAc (50 мл × 3). Органическую фазу промывали насыщенным соляным раствором (100 мл × 3), сушили и концентрировали при пониженном давлении, а полученный сырой продукт очищали с помощью препаративной высокоэффективной жидкостной хроматографии, получая продукт СМ-6G (трет-бутил-(S)-5-амино-4-(4-((4-((4-(4-циано-3-(трифторметил)фенил)пиперазин-1-ил)метил)-2-фторбензил)окси)-1-оксоизоиндолин-2-ил)-5-оксопентаноат, 2,0 г, выход: 74%) в виде твердого вещества желтого цвета. МС (ESI) масса/заряд 710,3 [M+H]⁺.

[0172] Стадия E. Соединение СМ-6G (1,05 г, 1,48 ммоль) растворяли в DMF (ДМФА) (3 мл) и добавляли 4 н. HCl в диоксане (30 мл). Реакционный раствор перемешивали при комнатной температуре в течение 16 часов и концентрировали при пониженном давлении, получая СМ-6Н ((S)-5-амино-4-(4-((4-((4-(4-циано-3-(трифторметил)фенил)пиперазин-1-ил)метил)-2-фторбензил)окси)-1-оксоизоиндолин -2-ил)-5-оксопентановую кислоту, 1,0 г) в виде желтого масла. МС (ESI) масса/заряд 654,6 [M+H]⁺.

[0173] Стадия F. Соединение СМ-6Н (1,2 г, неочищенное) растворяли в DMF/DCM (ДМФА/ДХМ) (8 мл/25 мл) и полученную смесь охлаждали до -40°С. По каплям добавляли SOCl₂ (881 мг, 7,40 ммоль) и после проведения реакции в полученной смеси в течение 1,5 часов добавляли пиридин (1,17 г, 14,8 ммоль). После перемешивания смеси при -40°C в течение 1 часа медленно по каплям добавляли Et₃N (747 мг, 7,40 ммоль) и полученную смесь перемешивали в течение 1 часа. Реакцию гасили, медленно добавляя 10 мл воды и поддерживая температуру ниже -40°С. Реакционную смесь доводили до pH=8 водным раствором NaHCO₃ при -20°C, затем экстрагировали, используя EtOAc/ТГФ(THF) (60/30 мл, × 3), сушили над Na₂SO₄ и концентрировали досуха при пониженном давлении, остаток очищали препаративной ВЭЖХ, получая продукт СМ-6 ((S)-4-(4-(4-(((2-(2,6-диоксопиперидин-3-ил)-1-оксоизоиндолин-4-ил)окси)метил)-3-фторбензил)пиперазин-1-ил) -2-(трифторметил)бензонитрил, 202 мг, выход за две стадии: 21%) в виде белого твердого вещества.

[0174] ¹H ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) δ 10,95 (s, 1H), 7,84-7,82 (m, 1H), 7,57-7,51 (m, 2H), 7,40-7,20 (m, 6H), 5,28 (s, 2H), 5,13-5,08 (m, 1H), 4,39 (d, J = 17,6 Гц, 1H), 4,23 (d, J = 17,6 Гц, 1H), 3,57-3,45 (m, 6H), 2,95-2,86 (m, 1H), 2,59-2,42 (m, 6H), 1,99-1,95 (m, 1H).

[0175] MC (ESI) масса/заряд 636,3 [M+H]⁺.

[0176] Пример 10

[0177] Применяя методику синтеза соединения СМ-6, приведенную в примере 9, и используя соответствующие реагенты, получали соединения СМ-8, СМ-9, СМ-11, СМ-27, СМ-28, СМ-29, СМ-30, СМ-31 и СМ- 35.

[0178] Соединение CM-8

[0179] ¹H ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) δ 10,95 (s, 1H), 8,16 (d, J = 2,0 Гц, 1H), 8,07-8,05 (m, 1H), 7,58-7,49 (m, 3H), 7,40-7,34 (m, 2H), 7,24-7,20 (m, 2H), 5,27 (s, 2H), 5,12-5,08 (m, 1H), 4,38 (d, J= 17,6 Гц, 1H), 4,22 (d, J = 17,6 Гц, 1H), 3,57 (s, 2H), 3,09-2,97 (m, 4H), 2,96-2,83 (m, 1H), 2,61-2,42 (m, 6H), 2,04-1,90 (m, 1H).

[0180] MC (ESI) масса/заряд 636,2 [M+H]⁺.

[0181] Соединение CM-9

[0182] ¹H ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) δ 10,95 (s, 1H), 7,98-7,93 (m, 1H), 7,76-7,73 (m, 1H), 7,58-7,49 (m, 2H), 7,40-7,34 (m, 2H), 7,25-7,20 (m, 3H), 5,27 (s, 2H), 5,13-5,08 (m, 1H), 4,38 (d, J= 17,6 Гц, 1H), 4,23 (d, J= 17,6 Гц, 1H), 3,59 (s, 2H), 3,12 (br s, 4H), 2,95-2,86 (m, 1H), 2,56-2,38 (m, 6H), 2,00-1,95 (m, 1H).

[0183] MC (ESI) масса/заряд 602,2 [M+H]⁺.

[0184] Соединение CM-11

[0185] ¹H ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) δ 10,95 (s, 1H), 7,58-7,48 (m, 3H), 7,40-7,34 (m, 2H), 7,24-7,20 (m, 2H), 6,92 (s, 1H), 6,84-6,82 (m, 1H), 5,27 (s, 2H), 5,13-5,08 (m, 1H), 4,38 (d, J = 18,0 Гц, 1H), 4,23 (d, J = 18,0 Гц, 1H), 3,56 (s, 2H), 3,34-3,29 (m, 4H), 2,90-2,87 (m, 1H), 2,59-2,54 (m, 1H), 2,51-2,42 (m, 5H), 2,07 (s, 3H), 2,01-1,95 (m, 1H).

[0186] MC (ESI) масса/заряд 582,3 [M+H]⁺.

[0187] Соединение CM-27

[0188] ¹H ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) δ 10,96 (s, 1H), 7,59-7,48 (m, 2H), 7,42-7,31 (m, 4H), 7,24-7,19 (m, 2H), 6,96 (d, J = 8,0 Гц, 1H), 5,27 (s, 2H), 5,14-5,07 (m, 1H), 4,38 (d, J= 17,6 Гц, 1H), 4,22 (d, J= 17,6 Гц, 1H), 3,82 (s, 3H), 3,56 (s, 2H), 3,18-3,01 (m, 4H), 2,96-2,82 (m, 1H), 2,61-2,52 (m, 5H), 2,47-2,38 (m, 1H), 2,02-1,90 (m, 1H).

[0189] MC (ESI) масса/заряд 598,2 [M+H]⁺.

[0190] Соединение CM-28

[0191] ¹H ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) δ 10,96 (s, 1H), 8,41 (d, J = 2,4 Гц, 1H), 7,75 (d, J = 8,8 Гц, 1H), 7,60- 7,48 (m, 2H), 7,42-7,32 (m, 3H), 7,26-7,19 (m, 2H), 5,27 (s, 2H), 5,14-5,07 (m, 1H), 4,38 (d, J = 17,6 Гц, 1H), 4,22 (d, J = 17,2 Гц, 1H), 3,57 (s, 2H), 3,46-3,37 (m, 4H), 2,97-2,83 (m, 1H), 2,61-2,53 (m, 1H), 2,49-2,37 (m,5H), 2,02-1,91 (m, 1H).

[0192] MC (ESI) масса/заряд 569,2 [M+H]⁺.

[0193] Соединение CM-29

[0194] ¹H ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) δ 10,97 (s, 1H), 8,47 (s, 1H), 7,86-7,83 (m, 1H), 7,58-7,50 (m, 2H), 7,41- 7,34 (m, 2H), 7,24-7,20 (m, 2H), 6,93-6,91(m, 1H), 5,27 (s, 2H), 5,13-5,08 (m, 1H), 4,41 (d, J = 17,6 Гц, 1H), 4,25 (d, J = 17,6 Гц, 1H), 3,68- 3,66 (m, 4H), 3,55 (s, 2H), 3,12 (m, 4H), 2,95-2,86 (m, 1H), 2,59-2,51 (m, 1H), 2,50-2,42 (m, 5H), 2,00-1,95 (m, 1H).

[0195] MC (ESI) масса/заряд 569,2 [M+H]⁺.

[0196] Соединение CM-30

[0197] ¹H ЯМР(400 МГц, DMSO-d₆) δ 10,96 (s, 1H), 8,25 (s, 1H), 7,97-7,91 (m, 1H), 7,60-7,48 (m, 2H), 7,42-7,32 (m, 2H), 7,26-7,20 (m, 3H), 5,27 (s, 2H), 5,15-5,06 (m, 1H), 4,38 (d, J = 17,6 Гц, 1H), 4,22 (d, J = 17,6 Гц, 1H), 3,59 (s, 2H), 3,43-3,36 (m, 4H), 2,96-2,83 (m, 1H), 2,61-2,52 (m, 5H), 2,47-2,36 (m, 1H), 2,00-1,91 (m, 1H).

[0198] MC (ESI) масса/заряд 593,2 [M+H]⁺.

[0199] Соединение CM-31

[0200] ¹H ЯМР(400 МГц, DMSO-d₆) δ 10,97 (s, 1H), 7,60-7,50 (m, 4H), 7,41-7,34(m, 2H), 7,24-7,21 (m, 2H), 7,11-7,08 (m, 1H), 5,27 (s, 2H), 5,13-5,09 (m, 1H), 4,41 (d, J = 17,6 Гц, 1H), 4,25 (d, J = 17,6 Гц, 1H), 3,58 (s, 2H), 2,95-2,86 (m, 5H), 2,58-2,54 (m, 5H), 2,46-2,42 (m, 1H), 2,25 (s, 3H), 1,99-1,95 (m, 1H).

[0201] MC (ESI) масса/заряд 582,2 [M+H]⁺.

[0202] Соединение CM-35

[0203] 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) δ 10,97 (s, 1H), 7,64-7,50 (m, 4H), 7,41-7,15 (m, 5H), 5,27 (s, 2H), 5,28 (s, 2H), 5,13-5,09 (m, 1H), 4,41 (d, J = 17,6 Гц, 1H), 4,20 (d, J = 17,6 Гц, 1H), 3,58 (s, 2H), 2,92 (m, 5H), 2,55-2,50 (m, 8H), 1,98-1,96 (m, 1H), 1,22 (t, J = 7,2 Гц, 3H).

[0204] MC (ESI) масса/заряд 596,2 [M+H]⁺.

[0205] Пример 11

[0206] Соединение CM-12

[0207] Стадия А: Йодэтан (2,56 г, 16,41 ммоль) добавляли к перемешанному раствору соединения СМ-12А (2-гидрокси-4-фторбензонитрил, 1,50 г, 10,94 ммоль) и K₂CO₃ (3,02 г, 21,88 ммоль) в DMF (ДМФА) (20 мл) и в полученной смеси проводили реакцию при комнатной температуре в течение 16 часов. Добавляли воду (100 мл) и смесь экстрагировали этилацетатом (100 мл × 2). Органическую фазу промывали насыщенным соляным раствором, затем сушили над безводным сульфатом натрия и концентрировали, получая продукт СМ-12В (2-этокси-4-фторбензонитрил, 1,60 г, выход 88%) в виде грязно-белого твердого вещества.

[0208] Стадия В: K₂CO₃ (2,67 г, 19,38 ммоль) добавляли к раствору соединения СМ-12В (2-этокси-4-фторбензонитрил, 1,60 г, 9,69 ммоль) и I-2 (метил-2-фтор-4-(пиперазин-1-илметил)бензоата гидрохлорид, 3,15 г, 10,43 ммоль) в DMSO (ДМСО) (20 мл) и смешанный раствор перемешивали при 90°С в течение 16 часов. Реакционный раствор выливали в воду (60 мл) и смесь экстрагировали, используя EtOAc (50 мл × 2). Органическую фазу промывали насыщенным соляным раствором (60 мл × 3), затем сушили над безводным Na₂SO₄, отфильтровывали и концентрировали. Остаток подвергали препаративной хроматографии с обращенной фазой, получая продукт СМ-12D (метил-4-((4-(4-циано-3-этоксифенил)пиперазин-1-ил)метил)-2-фторбензоат, 1,90 г, выход: 49%) в виде твердого вещества желтого цвета.

[0209] Стадия С: Соединение СМ-12D (1,90 г, 4,78 ммоль) растворяли в смешанном растворе THF (ТГФ) (40 мл), МеОН (10 мл) и LiBH₄ (0,32 г, 14,36 ммоль) добавляли порциями при 0°C. Реакционный раствор перемешивали при комнатной температуре в течение 16 часов. Реакционный раствор медленно выливали в ледяной водный раствор хлорида аммония и смесь экстрагировали этилацетатом (40 мл × 3). Органическую фазу промывали насыщенным соляным раствором (80 мл) и затем экстрагировали. Полученную органическую фазу промывали насыщенным соляным раствором (80 мл), затем сушили над безводным Na₂SO₄, отфильтровывали и концентрировали, получая неочищенный продукт, который подвергали препаративной хроматографии с обращенной фазой, получая продукт СМ-12Е (2-этокси-4-(4-(3-фтор-4-(гидроксиметил)бензил)пиперазин-1-ил)бензонитрил, 1,20 г, выход: 68%) в виде белого твердого вещества.

[0210] Стадия D: К раствору соединения СМ-12Е (1,20 г, 3,25 ммоль) в DCM (ДХМ) (30 мл) при 0°С медленно добавляли SOCl₂ (1,46 г, 12,24 ммоль) и полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 16 часов. Реакционный раствор концентрировали, получая твердое вещество коричневого цвета (1,38 г, неочищенное). Упомянутое выше коричневое твердое вещество (1,38 г, 3,25 ммоль), I-1 (трет-бутил-(S)-5-амино-4-(4-гидрокси-1-оксоизоиндолин-2-ил)-5-оксопентаноат, 1,08 г, 3,25 ммоль) и Cs₂CO₃ (3,18 г, 9,75 ммоль) добавляли к DMSO (ДМСО) (20 мл) при комнатной температуре и полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов. Реакционный раствор выливали в воду со льдом и смесь экстрагировали этилацетатом (50 мл × 2). Органическую фазу промывали насыщенным соляным раствором (80 мл × 3), затем сушили над безводным Na₂SO₄ и отфильтровывали, и фильтрат концентрировали. Остаток подвергали препаративной хроматографии с обращенной фазой, получая продукт СМ-12G (трет-бутил-(S)-5-амино-4-(4-((4-((4-(4-циано-3-этоксифенил)пиперазин-1-ил)метил)-2-фторбензил)окси)-1-оксоизоиндолин-2- ил)-5-оксопентаноат, 1,50 г, выход: 67%) в виде твердого вещества желтого цвета.

[0211] ¹H ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) δ 7,57-7,31 (m, 6H), 7,25-7,16 (m, 3H), 6,57-6,54 (m, 2H), 5,27 (s, 2H), 4,72-4,69 (m, 1H), 4,51 (d, J = 17,6 Гц, 1H), 4,37 (d, J = 17,6 Гц, 1H), 4,18-4,10 (m, 2H), 3,57 (s, 2H), 3,40-3,32(m, 4H), 2,49-2,43 (m, 4H), 2,19-2,00 (m, 4H), 1,31 (s, 9H).

[0212] MC (ESI) масса/заряд 686,2 [M+H]⁺.

[0213] Стадия F: Раствор HCl в диоксане (4 н., 30 мл) добавляли к раствору СМ-12G (1,50 г, 2,19 ммоль) в диоксане (20 мл) при комнатной температуре. Реакционный раствор перемешивали при 30°С в течение 2 часов. Реакционный раствор концентрировали, получая промежуточное соединение. R раствору вышеуказанного промежуточного соединения в DCM/DMF (ДХМ/ДМФА) (70 мл/10 мл) при -45°С в атмосфере азота добавляли SOCl₂ (1,30 г, 10,94 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при -45°С в течение 1 часа. Медленно добавляли пиридин (1,73 г, 21,90 ммоль) и реагенты перемешивали при -45°С в течение 1 часа. К реакционному раствору при -45°С медленно добавляли триэтиламин (1,10 г, 10,94 ммоль) и реагенты перемешивали при -45°С в течение 1 часа. Реакционный раствор гасили водой (10 мл), а затем доводили до pH>7, добавляя водный раствор NaHCO₃, и органическую фазу отделяли. Водную фазу экстрагировали EA/THF (ЭА/ТГФ) (30 мл × 3, об/об = 1/1). Органические фазы объединяли и промывали насыщенным раствором NaCl, затем сушили и концентрировали, получая неочищенный продукт, который подвергали препаративной ВЭЖХ, получая СМ-12 в виде грязно-белого твердого вещества (383 мг, выход: 29%).

[0214] ¹H ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) δ 10,97 (s, 1H), 7,59-7,50 (m, 2H), 7,43-7,34 (m, 3H), 7,25-7,20 (m, 2H), 6,56-6,54 (m, 2H), 5,27 (s, 2H), 5,13-5,09 (m, 1H), 4,38 (d, J = 17,6 Гц, 1H), 4,24-4,11 (m, 3H), 3,56 (s, 2H), 3,35-3,33 (m, 4H), 2,90-2,87 (m, 1H), 2,58-2,53 (m, 1H), 2,49-2,42 (m, 5H), 2,99-1,96 (m, 1H), 1,34 (t. J = 7,2 Гц, 3H).

[0215] MC (ESI) масса/заряд 612,3 [M+H]⁺.

[0216] Пример 12

[0217] Применяя методику синтеза соединения СМ-12, приведенную в примере 11, и используя соответствующие реагенты, синтезировали CM-10, CM-24, CM-33, CM-34 и CM-39.

[0218] Соединение CM-10

[0219] ¹H ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) δ 10,96 (s, 1H), 7,58-7,50 (m, 4H), 7,40-7,34 (m, 2H), 7,24-7,20 (m, 2H), 7,01-6,99 (m, 2H), 5,27 (s, 2H), 5,13-5,08 (m, 1H), 4,41 (d, J = 17,6 Гц, 1H), 4,25 (d, J = 17,6 Гц, 1H), 3,56 (s, 2H), 3,35-3,33 (m, 4H), 2,95-2,86 (m, 1H), 2,59-2,51 (m, 1H), 2,50-2,38 (m, 5H), 2,00-1,96 (m, 1H).

[0220] MC (ESI) масса/заряд 568,3 [M+H]⁺.

[0221] Соединение CM-24

[0222] ¹H ЯМР(400 МГц, DMSO-d₆) δ 10,96 (s, 1H), 7,86 (s, 1H), 7,65-7,41 (m, 4H), 7,34-7,21 (m, 5H), 7,06-7,02 (m, 1H), 5,27 (s, 2H), 5,13-5,08 (m, 1H), 4,39 (d, J = 17,6 Гц, 1H), 4,22 (d, J = 17,6 Гц, 1H), 3,57 (s, 2H), 3,16-3,02 (m, 4H), 2,95-2,86 (m, 1H), 2,64-2,52 (m, 5H), 2,48-2,39 (m, 1H), 1,99-1,95 (m, 1H).

[0223] MC (ESI) масса/заряд 604,3 [M+H]⁺.

[0224] СМ-33

[0225] ¹H ЯМР(400 МГц, DMSO-d₆) δ 10,96 (s, 1H), 7,90 (s, 1H), 7,78-7,70 (m, 2H), 7,66-7,46 (m, 3H), 7,44-7,32 (m, 2H), 7,27-7,09 (m, 3H), 5,26 (s, 2H), 5,15-5,06 (m, 1H), 4,38 (d, J = 17,6 Гц, 1H), 4,22 (d, J = 17,6 Гц, 1H), 3,56 (s, 2H), 3,17-3,05 (m, 4H), 2,97-2,84 (m, 1H), 2,62-2,54 (m, 1H), 2,48-2,37 (m, 5H), 2,00-1,91 (m, 1H).

[0226] MC (ESI) масса/заряд 611,2 [M+H]⁺.

[0227] СМ-34

[0228] ¹H ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) δ 10,96 (s, 1H), 8,39-8,34 (m, 1H), 7,78-7,66 (m, 2H), 7,60-7,47 (m, 2H), 7,43-7,31 (m, 2H), 7,27-7,09 (m, 3H), 5,27 (s, 2H), 5,16-5,05 (m, 1H), 4,38 (d, J = 17,6 Гц, 1H), 4,22 (d, J = 17,6 Гц, 1H), 3,56 (s, 2H), 3,16-3,00 (m, 4H), 2,97-2,83 (m, 1H), 2,80-2,70 (m, 3H), 2,60-2,53 (m, 1H), 2,49-2,37 (m, 5H), 2,02-1,91 (m, 1H).

[0229] MC (ESI) масса/заряд 625,2 [M+H]⁺.

[0230] Соединение CM-39

[0231] ¹H ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) δ 10,96 (s, 1H), 7,66-7,59 (m, 3H), 7,58-7,50 (m, 2H), 7,40-7,14 (m, 3H), 6,98-6,96 (m, 1H), 5,28 (s, 2H), 5,13-5,08 (m, 1H), 4,41 (d, J = 17,6 Гц, 1H), 4,25 (d, J = 17,6 Гц, 1H), 3,56 (s, 2H), 3,39- 3,32 (m, 4H), 2,95-2,86 (m, 1H), 2,59-2,54 (m, 1H), 2,50-2,42 (m, 5H), 1,99-1,96 (m, 1H).

[0232] MC (ESI) масса/заряд 602,2 [M+H]⁺.

[0233] Пример 13

[0234] Соединение CM-18

[0235] Стадия А: Применяя условия синтеза соединения СМ-12, приведенные в примере 11, получали СМ-18С (т.е. метил-4-((4-(4-циано-3-фторфенил)пиперазин-1-ил)метил)-2-фторбензоат) в виде твердого вещества цвета желтого цвета (3,0 г, выход: 45%) из СМ-1А (3,4-дифторбензонитрил, 2,5 г, 18,0 ммоль, CAS3939-09-1). МС (ESI) масса/заряд 372,2 [M+H]⁺.

[0236] Стадия В: Соединение СМ-18С (3,0 г, 8,08 ммоль) вносили в реакционную колбу и растворяли в DMSO(ДМСО)/EtOH (60 мл/160 мл), а затем добавляли водный раствор NaOH (1 н., 100 мл, 100,0 ммоль) и 30%-ную H₂O₂ (30 мл) и перемешивали при 35°C в течение 16 часов. Реакционный раствор выливали в воду (500 мл) и смесь подкисляли до рН=1 концентрированной соляной кислотой, затем выстаивали, чтобы осадить белое твердое вещество, которое отфильтровывали. Осадок на фильтре концентрировали досуха при пониженном давлении, используя масляный насос, получая продукт CM-18D (4-((4-(4-карбамоил-3-фторфенил)пиперазин-1-ил)метил)-2-фторбензойная кислота, 3,0 г) в виде белого твердого вещества. MC (ESI) масса/заряд 376,2 [M+H]⁺.

[0237] Стадия С: Соединение CM-18D (3,0 г, неочищенное) добавляли в реакционную колбу и растворяли в DMF (ДМФА) (40 мл), добавляли K₂CO₃ (2,21 г, 16,0 ммоль) и MeI (1,13 г, 8,00 ммоль) и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Добавляли воду (300 мл) и полученную смесь экстрагировали, используя EtOAc (150 мл × 2). Органические фазы объединяли, затем промывали соляным раствором (300 мл), сушили над Na₂SO₄, отфильтровывали и концентрировали, получая продукт СМ-18Е (метил-4-((4-(4-карбамоил-3-фторфенил)пиперазин-1-ил)метил)-2-фторбензоат, 1,80 г, выход за две стадии: 57%). MC (ESI) масса/заряд 390,2 [M+H]⁺.

[0238] Стадия D: Применяя методику синтеза, приведенную в примере 11, получали соединение CM-18 (т.е. (S)-4-(4-(4-(((2-(2,6-диоксопиперидин-3-ил)-1-оксоизоиндолин- 4-ил)окси)метил)-3-фторбензил)пиперазин-1-ил)-2-фторбензамид из соединения СМ-18Е.

[0239] ¹H ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) δ 10,95 (s, 1H), 7,63-7,50 (m, 3H), 7,41-7,31 (m, 3H), 7,24-7,18 (m, 3H), 6,79-6,69 (m, 2H), 5,27 (s, 2H), 5,13-5,08 (m, 1H), 4,39 (d, J = 17,6 Гц, 1H), 4,23 (d, J = 17,6 Гц, 1H), 3,56 (s, 2H), 3,30-3,28 (m, 4H), 2,95-2,86 (m, 1H), 2,54-2,32 (m, 6H), 1,99-1,95 (m, 1H).

[0240] MC (ESI) масса/заряд 603,8 [M+H]⁺.

[0241] Пример 14

[0242] Соединение CM-19

[0243] Стадия А: К соединению CM-19A (2-фтор-4-бромбензойная кислота, 10,0 г, 45,70 ммоль, CAS 112704-79-7) при 0°C добавляли SOCl₂ (27,2 г, 16,5 мл, 0,228 моль) и смесь кипятили с обратным холодильником при 85°С в течение 2 ч. Избыток SOCl₂ выпаривали, получая соединения в виде твердого вещества коричневого цвета. Затем соединение растворяли в DCM (ДХМ) (50 мл) и при 0°C добавляли смесь MeNH₂.HCl (9,25 г, 0,14 моль) и Et₃N/DCM(ДХМ) (25 мл/100 мл). Полученной смеси давали прореагоровать при комнатной температуре в течение 2 ч, добавляли воду (100 мл), разделяли твердую и жидкую фазы, и водную фазу экстрагировали, используя DCM (ДХМ) (100 мл), затем промывали соляным раствором (200 мл), высушили над Na₂SO₄, отфильтровывали и концентрировали, получая продукт СМ-19В (4-бром-2-фтор-N-метилбензамид, 10,0 г, выход: 94%). MC (ESI) масса/заряд 233,9 [M+1]⁺.

[0244] Стадия В: Соединения СМ-19В (6,00 г, 25,86 ммоль) и I-2 (метил-2-фтор-4-(пиперазин-1-илметил)бензоат гидрохлорид, 6,51 г, 25,80 ммоль), Pd(OAc)₂ (580 мг, 2,59 ммоль), Xantphos (3,00 г, 5,18 ммоль, CAS 161265-03-8) и Cs₂CO₃ (16,8 г, 51,80 ммоль) вносили в диоксан (100 мл), смесь нагревали до 110°С на масляной бане и проводили реакцию в течение 16 ч в атмосфере N₂. Реакционную смесь выливали в воду (100 мл) и затем полученную смесь экстрагировали, используя EtOAc (100 мл × 2). Органическую фазу промывали насыщенным соляным раствором (200 мл), затем сушили над Na₂SO₄, отфильтровывали и концентрировали досуха при пониженном давлении, а остаток очищали колоночной хроматографией на силикагеле (EA/PE 10%-50%), получая продукт CM-19С (метил-2-фтор-4-((4-(3-фтор-4-(метилкарбамоил)фенил)пиперазин-1-ил)метил)бензоат, 3,70 г, выход: 35%) в виде светло-желтого твердого вещества. MC (ESI) масса/заряд 404,1 [M+1]⁺.

[0245] Что касается остальных стадий получения соединения СМ-19, то его можно получать, применяя условия синтеза, приведенные в примере 11, и используя соответствующие реагенты.

[0246] ¹H ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) δ 10,96 (s, 1H), 7,76-7,74 (m, 1H), 7,58-7,50 (m, 3H), 7,41-7,34 (m, 2H), 7,24-7,20 (m, 2H), 6,78-6,71 (m, 2H), 5,27 (s, 2H), 5,13-5,09 (m, 1H), 4,39 (d, J = 17,6 Гц, 1H), 4,23 (d, J = 17,6 Гц, 1H), 3,56 (s, 2H), 3,32-3,28 (m, 4H), 2,95-2,86 (m, 1H), 2,75-2,74 (m, 3H), 2,58-2,50 (m, 1H), 2,50-2,42 (m, 5H), 1,98-1,95 (m, 1H).

[0247] MC (ESI) масса/заряд 618,3 [M+H]⁺.

[0248] Пример 15

[0249] Соединение CM-17

[0250] Стадия А: Исходные материалы СМ-17А (2-фтор-5-бромбензонитрил, 5,00 г, 25,00 ммоль), N-Boc-пиперазин (3,88 г, 20,80 ммоль), Pd₂(dba)₃ (0,95 г, 1,04 ммоль), BINAP (2,2'-бис(дифенилфосфино)-1,1’-бинафтил, 1,30 г, 2,08 ммоль) и Cs₂CO₃ (10,17 г, 31,20 ммоль) вносили в толуол (50 мл) и в полученной смеси проводили реакцию при 80°С в течение 16 часов в атмосфере азота. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, фильтровали через диатомит и затем промывали этилацетатом, фильтрат концентрировали и остаток подвергали колоночной хроматографии (PE/EA(петролейный эфир/этилацетат) = 10/1 до 5/1), получая продукт CM-17С (трет-бутил-4-(3-циано-4-фторфенил)пиперазин-1-карбоксилат, 2,50 г, выход: 39%) в виде грязно-белого твердого вещества.

[0251] Стадия В: CM-17C (2,50 г, 8,19 ммоль) растворяли в этилацетате (20 мл), медленно добавляли раствор хлористого водорода в этилацетате (4 М, 30 мл) и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 3 часов, а затем концентрировали, получая промежуточное соединение (1,98 г, неочищенное). Промежуточное соединение (1,98 г, 8,16 ммоль), соединение CM-17D (метил-4-(бромметил)-2-фторбензоат, 2,62 г, 10,61 ммоль) и K₂CO₃ (3,37 г, 24,48 ммоль) вносили в DMF (ДМФА) (20 мл) и смесь перемешивали при 55°С в течение 5 часов. Реакционный раствор промывали этилацетатом, фильтрат концентрировали и остаток подвергали препаративной хроматографии с обращенной фазой, получая продукт СМ-17Е (метил-4-((4-(3-циано-4-фторфенил)пипкразин)-1-ил)метил)-2-фторбензоат, 1,90 г, выход: 62%) в виде твердого вещества желтого цвета. MC (ESI) масса/заряд 372,1 [M+H]⁺.

[0252] Что касается остальных стадий получения соединения СМ-17, то его можно получать, применяя условия синтеза, приведенные в примере 11, и используя соответствующие реагенты.

[0253] ¹H ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) δ 10,95 (s, 1H), 7,58-7,49 (m, 2H), 7,40-7,33 (m, 5H), 7,24-7,20 (m, 2H), 5,27 (s, 2H), 5,13-5,08 (m, 1H), 4,38 (d, J = 17,6 Гц, 1H), 4,22 (d, J = 17,6 Гц, 1H), 3,56 (s, 2H), 3,22- 3,11 (m, 4H), 2,98-2,83 (m, 1H), 2,61-2,52 (m, 5H), 2,48-2,37 (m, 1H), 2,03-1,92 (m, 1H).

[0254] MC (ESI) масса/заряд 586,2 [M+H]⁺.

[0255] Пример 16

[0256] Соединение CM-14

[0257] Стадия А: Дифторхлорацетат натрия (7,70 г, 50,50 ммоль, CAS: 1895-39-2) вносили в смешанный раствор соединения СМ-14А (4-бром-2-гидроксибензонитрил, 5,00 г, 25,25 ммоль) и K₂CO₃ (4,18 г, 30,30 ммоль) в DMF(ДМФ)/H₂O (50 мл/5 мл), и в смеси проводили реакцию при 100°C в течение 3 часов. Добавляли воду (100 мл) и полученную смесь экстрагировали, используя EtOAc (80 мл × 2). Органическую фазу промывали насыщенным соляным раствором, затем сушили над безводным сульфатом натрия и концентрировали, получая неочищенный продукт, который очищали колоночной хроматографией на силикагеле (PE/EtOAc = 100/1-20/1), получая продукт CM-14В (4-бром-2-дифторметоксибензонитрил, 4,60 г, выход: 73%) в виде светло-желтого твердого вещества.

[0258] Стадия В: Соединения СМ-14В (4-бром-2-дифторметоксибензонитрил, 2,00 г, 8,06 ммоль), I-2 (метил-2-фтор-4-(пиперазин-1-илметил)бензоата гидрохлорид, 2,21 г, 8,77 ммоль), xphos Pd G2 (0,32 г, 0,41 ммоль) и CS₂CO₃ (3,91 г, 12,00 ммоль) вносили в диоксан (25 мл) и проводили реакцию в атмосфере азота при 100°С в течение 16 часов. Реакционный раствор фильтровали через диатомит, осадок на фильтре промывали, используя EtOAc, фильтрат подвергали ротационному выпариванию и концентрировали досуха при пониженном давлении с использованием водяного насоса. Остаток очищали колоночной хроматографией на силикагеле (РЕ/EtOAc = 10/1-4/1), получая продукт СМ-14D (метил-4-((4-(4-циано-3-(дифторметокси)фенил)пиперазин-1-ил)метил)-2-фторбензоат, 2,00 г, 4,77 ммоль, выход: 59%) в виде твердого вещества желтого цвета. MC (ESI) масса/заряд 420,4 [M+H]⁺.

[0259] Что касается остальных стадий получения соединения СМ-14, то условия синтеза можно посмотреть в примере 9.

[0260] ¹H ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) δ 10,95 (s, 1H), 7,61-7,34 (m, 6H), 7,24-7,20 (m, 2H), 6,88-6,80 (m, 2H), 5,28 (s, 2H), 5,13-5,08 (m, 1H), 4,38 (d, J = 17,6 Гц, 1H), 4,22 (d, J = 17,6 Гц, 1H), 3,57 (s, 2H), 3,40- 3,38 (m, 4H), 2,95-2,84 (m, 1H), 2,59-2,53 (m, 1H), 2,50-2,40 (m, 5H), 1,99-1,96 (m, 1H).

[0261] MC (ESI) масса/заряд 634,2 [M+H]⁺.

[0262] Пример 17

[0263] Соединение CM-13

[0264] Применяя условия синтеза, приведенные для стадии А в примере 11, получали , заменяя йодэтан йодметилциклопропаном (CAS 33574-02-6);

что же касается остальных стадий, то соединение СМ-13 можно получать, следуя методике, приведенной в примере 9.

[0265] ¹H ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) δ 10,98 (s, 1H), 7,58-7,50 (m, 2H), 7,42-7,34 (m, 3H), 7,24-7,20 (m, 2H), 6,56-6,52 (m, 2H), 5,27 (s, 2H), 5,13-5,09 (m, 1H), 4,38 (d, J = 17,6 Гц, 1H), 4,22 (d, J = 17,6 Гц, 1H), 3,94 (d, J = 6,8 Гц, 2H), 3,56 (s, 2H), 3,34-3,32 (m, 4H), 2,95-2,86 (m, 1H), 2,61-2,53 (m, 1H), 2,50-2,42 (m, 5H), 1,98-1,95 (m, 1H), 1,25-1,18 (m, 1H), 0,60-0,56 (m, 2H), 0,35-0,29 (m, 2H).

[0266] MC (ESI) масса/заряд 638,3 [M+H]⁺.

[0267] Пример 18

[0268] Соединение CM-16

[0269] Стадия А: Исходные вещества CM-16A (метил-2-фтор-4-(пиперазин-1-илметил)бензоат, 2,20 г, 8,73 ммоль), CM-16B (4-бром-2-фтор-1-(трифторметил)бензол, 2,12 г , 8,73 ммоль), Pd₂(dba)₃ (0,80 г, 0,87 ммоль), BINAP (2,2'-бис(дифенилфосфино)-1,1’-бинафтил, 1,08 г, 1,74 ммоль) и Cs₂CO₃ (4,27 г, 13,90 ммоль) вносили в 1,4-диоксан (50 мл) и проводили реакцию в атмосфере азота при 85°С в течение 16 часов. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, фильтровали через диатомит и промывали этилацетатом, фильтрат концентрировали и остаток подвергали колоночной хроматографии (PE/EA = 10/1 до 5/1), получая продукт CM-16C (метил-2-фтор-4-((4-(3-фтор-4-(трифторметил)фенил)пиперазин-1-ил)метил)бензоат, 2,00 г, выход: 53,5%) в виде твердого вещества желтого цвета. MC (ESI) масса/заряд 415,4 [M+H]⁺.

[0270] Что касается остальных стадий получения соединения СМ-16, то можно применять методику синтеза, приведенную в примере 11, используя соответствующие реагенты.

[0271] ¹H ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) δ 10,97 (s, 1H), 7,60-7,33 (m, 5H), 7,26-7,19 (m, 2H), 6,97-6,90 (m, 1H), 6,86-6,81 (m, 1H), 5,27 (s, 2H), 5,15-5,07 (m, 1H), 4,38 (d, J = 17,6 Гц, 1H), 4,22 (d, J = 17,6 Гц, 1H), 3,56 (s, 2H), 3,32-3,28 (m, 4H), 2,96-2,84 (m, 1H), 2,61-2,52 (m, 1H), 2,49-2,37 (m, 5H), 2,01-1,91 (m, 1H).

[0272] MC (ESI) масса/заряд 629,2 [M+H]⁺.

[0273] Пример 19

[0274] Соединение CM-25

[0275] Применяя методику синтеза, приведенную в примере 11, и используя соответствующие реагенты, получили соединение СМ-25.

[0276] ¹H ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) δ 10,99 (s, 1H), 8,60 (d, J = 2,4 Гц, 1H), 7,60 (d, J = 2,4 Гц, 1H), 7,51-7,45 (m, 2H), 7,35-7,30 (m, 4H), 5,27 (s, 2H), 5,15-5,10 (m, 1H), 4,35 (d, J = 17,6 Гц, 1H), 4,28 (d, J = 17,6 Гц, 1H), 3,61-3,54 (m, 6H), 2,99-2,85 (m, 1H), 2,61-2,52 (m, 5H), 2,48-2,37 (m, 1H), 2,01-1,98 (m, 1H).

[0277] MC (ESI) масса/заряд 637,3 [M+H]⁺.

[0278] Пример 20

[0279] Соединение CM-22

[0280] Стадия А: K₂CO₃ (45,54 г, 0,13 моль) вносили в раствор соединения CM-22A (метил-4-(бромметил)-3-фторбензоат, 32,00 г, 0,13 моль) и N-Boc-пиперазина (24,21 г, 0,13 моль) в ацетонитриле ( 250 мл) и смесь перемешивали при 70°С в течение 16 часов. Реакционный раствор фильтровали, фильтрат концентрировали и остаток очищали колоночной хроматографией, получая продукт СМ-22В (трет-бутил-4-(2-фтор-4-(метоксикарбонил)бензил)пиперазин-1-карбоксилат, 36,00 г, выход: 78%) в виде светло-желтого твердого вещества. MC (ESI) масса/заряд 353,4 [M+H]⁺.

[0281] Стадия В: 4 н. HCl/EA(этилацетат) (200 мл) медленно добавляли к раствору соединения CM-22B (36,00 г, 0,10 моль) в этилацетате (100 мл) и проводили реакцию при комнатной температуре в течение 24 часов. Реакционный раствор концентрировали до объема примерно 100 мл, затем отфильтровывали и осадок на фильтре сушили, получая продукт CM-22C (метил-3-фтор-4-(пиперазин-1-илметил)бензоата дигидрохлорид, 29,00 г, выход: 89%) в виде грязно-белого твердого вещества. MC (ESI) масса/заряд 253,2 [M+H]⁺.

[0282] Стадия С: Основываясь на примере 22 и используя соответствующие реагенты, получали соединение CM-22D (т.е. 4-фтор-2-(метокси-d₃)бензонитрил). K₂CO₃ (2,22 г, 16,12 ммоль) при 25°С вносили в раствор соединения СМ-22С (метил-3-фтор-4-(пиперазин-1-илметил)бензоата дигидрохлорид, 2,62 г, 8,06 ммоль) и CM-22Д (1,25 г, 8,06 ммоль) в DMSO (ДМСО) (20 мл) и смесь перемешивали при 90°С в течение 16 часов. Реакционный раствор выливали в воду (60 мл) и смесь экстрагировали, используя EtOAc (50 мл × 2). Органическую фазу промывали насыщенным соляным раствором (60 мл × 3), затем сушили над безводным Na₂SO₄, отфильтровывали и концентрировали. Остаток подвергали препаративной хроматографии с обращенной фазой, получая продукт СМ-22Е (метил 4-((4-(4-циано-3-(метокси-d₃)фенил)пиперазин-1-ил)метил)-3-фторбензоат, 1,60 г, 4,15 ммоль, выход: 51%) в виде твердого вещества желтого цвета. MC (ESI) масса/заряд 387,1 [M+H]⁺.

[0283] Что касается остальных стадий получения соединения СМ-22, то его можно получать, применяя условия синтеза, приведенные в примере 11, и используя соответствующие реагенты.

[0284] ¹H ЯМР(400 МГц, DMSO-d₆) δ 10,98 (s, 1H), 7,53-7,28 (m, 7H), 6,58-6,51 (m, 2H), 5,26 (s, 2H), 5,16-5,08 (m, 1H), 4,44 (d, J = 17,6 Гц, 1H), 4,29 (d, J = 17,2 Гц, 1H), 3,59 (s, 2H), 3,40-3,32 (m, 4H), 2,96-2,86 (m, 1H), 2,59-2,53 (m, 1H), 2,49-2,40 (m, 5H), 2,01-1,97 (m, 1H).

[0285] MC (ESI) масса/заряд 601,3 [M+H]⁺.

[0286] Пример 21

[0287] Соединение CM-40

[0288] Стадия А: При температуре 0°C-5°C хлорметилметиловый эфир (4,05 г, 50,32 ммоль, CAS: 107-30-2) медленно добавляли к перемешиваемому раствору соединения СМ-40А (3-гидрокси-4-фторбензонитрил, 4,60 г, 33,55 ммоль, CAS: 186590-04-5) и DIEA (ДИПЭА) (8,66 г, 67,10 ммоль) в DCM (ДХМ) (50 мл) и проводили реакцию при комнатной температуре в течение 16 часов. Добавляли воду (60 мл) и полученную смесь экстрагировали этилацетатом (50 мл × 2). Органическую фазу промывали насыщенным соляным раствором, затем сушили над безводным сульфатом натрия и концентрировали, получая продукт СМ-40В (4-фтор-3-(метоксиметокси)бензонитрил, 7,00 г, неочищенный) в виде светло-желтой жидкости, которую сразу использовали в следующей реакции.

[0289] Стадия В: Cs₂CO₃ (30,97 г, 95,00 ммоль) добавляли к раствору соединения СМ-40В (7,00 г, 38,67 ммоль) и пиперазина (16,63 г, 193,37 ммоль) в DMSO (ДМСО) (100 мл) и смесь перемешивали при 100°С в течение 16 часов. Реакционный раствор выливали в воду (200 мл) и смесь экстрагировали, используя EtOAc (150 мл × 2). Органическую фазу промывали насыщенным соляным раствором (300 мл × 3), затем сушили над безводным Na₂SO₄, отфильтровывали и концентрировали, получая продукт СМ-40С (3-(метоксиметокси)-4-(пиперазин-1-ил)бензонитрил, 6,60 г, выход 56%) в виде твердого вещества желтого цвета, которое сразу использовали на следующей реакции.

[0290] Стадия С: К раствору соединения СМ-40С (6,60 г, 26,69 ммоль) и СМ-40D (метил-4-(бромметил)-2-фторбензоат, 6,60 г, 26,69 ммоль) в DMF (ДМФА) (80 мл) добавляли DIEA (ДИПЭА) (6,89 г, 53,44 ммоль) и смешанный раствор перемешивали при 100°С в течение 2 часов. Реакционный раствор концентрировали и остаток подвергали колоночной хроматографии (РЕ/EtOAc = 4/1), получая продукт СМ-40Е (метил-4-((4-(4-циано-2-(метоксиметокси)фенил)пиперазин-1-ил)метил)-2-фторбензоат, 8,00 г, выход: 72%) в виде твердого вещества желтого цвета;

что же касается остальных стадий получения соединения СМ-40, то можно применять синтез, приведенный в примере 11, используя соответствующие реагенты.

[0291] ¹H ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) δ 10,96 (s, 1H), 10,02 (s, 1H), 7,60-7,47 (m, 2H), 7,44-7,30 (m, 2H), 7,26-7,15 (m, 3H), 7,06-7,01 (m, 1H), 6,94-6,87 (m, 1H), 5,27 (s, 2H), 5,14-5,06 (m, 1H), 4,38 (d, J = 17,6 Гц, 1H), 4,22 (d, J = 17,6 Гц, 1H), 3,56 (s, 2H), 3,17-3,05 (m, 4H), 2,94-2,85 (m, 1H), 2,60-2,51 (m, 5H), 2,48-2,40 (m, 1H), 2,01-1,92 (m, 1H).

[0292] MC (ESI) масса/заряд 584,3 [M+H]⁺.

[0293] Пример 22

[0294] Соединение CM-32

[0295] Стадия А: К смешанному раствору соединения СМ-32А (3-гидрокси-4-фторбензонитрил, 1,50 г, 10,95 ммоль) и K₂CO₃ (3,02 г, 21,88 ммоль) в DMF (ДМФА) (20 мл) добавляли дейтерированный йодметан (2,06 г, 14,23 ммоль) и в смеси проводили реакцию при комнатной температуре в течение 16 часов. Добавляли воду (60 мл) и полученную смесь экстрагировали этилацетатом (30 мл × 2). Органическую фазу промывали насыщенным соляным раствором, затем сушили над безводным сульфатом натрия и концентрировали, получая продукт СМ-32В (4-фтор-3-(метокси-d₃)бензонитрил, 1,50 г, выход: 89%) в виде твердого вещества серого цвета, которое сразу использовали в следующей реакции.

[0296] Стадия В: В раствор соединения СМ-32B (1,30 г, 8,44 ммоль) и пиперазина (3,63 г, 42,2 ммоль) в DMSO (ДМСО) (15 мл) вносили Cs₂CO₃ (5,50 г, 16,08 ммоль) и смешанный раствор перемешивали при 100°С в течение 16 часов. Реакционный раствор выливали в воду (60 мл) и смесь экстрагировали, используя EtOAc (50 мл × 2). Органическую фазу промывали насыщенным соляным раствором (60 мл × 3), затем сушили над безводным Na₂SO₄, отфильтровывали и концентрировали, получая продукт СМ-32D (3-(метокси-d₃)-4-(пиперазин-1-ил)бензонитрил, 1,80 г, выход: 97%) в виде светло-желтого твердого вещества, которое сразу использовали в следующей реакции.

[0297] Стадия С: К раствору соединения СМ-32D (1,70 г, 7,72 ммоль) и CM-40D (метил-4-(бромметил)-2-фторбензоат, 2,38 г, 9,66 ммоль) в DMSO (ДМСО) (15 мл) добавляли DIEA (ДИПЭА) (2,99 г, 23,16 ммоль) и смешанный раствор перемешивали при 90°С в течение 8 часов. Реакционный раствор концентрировали и остаток подвергали колоночной хроматографии, получая продукт CM-32F (метил-4-((4-(4-циано-2-(метокси-d₃)фенил)пиперазин-1-ил)метил)-2-фторбензоат, 1,80 г, выход: 60%) в виде твердого вещества желтого цвета, MC (ESI) масса/заряд 387,5 [M+H]⁺.

[0298] Что касается остальных стадий получения соединения СМ-32, то можно применять методику синтеза, приведенную в примере 11, используя соответствующие реагенты.

[0299] ¹H ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) δ 10,96 (s, 1H), 7,58-7,50 (m, 2H), 7,41-7,20 (m, 6H), 6,97-6,95 (m, 1H), 5,27 (s, 2H), 5,13-5,08 (m, 1H), 4,38 (d, J = 17,6 Гц, 1H), 4,22 (d, J = 17,6 Гц, 1H), 3,56 (s, 2H), 3,18- 3,01 (m, 4H), 2,94-2,83 (m, 1H), 2,58-2,51 (m, 1H), 2,49-2,38 (m, 5H), 1,98-1,95 (m, 1H).

[0300] MC (ESI) масса/заряд 601,2 [M+H]⁺.

[0301] Применяя методику синтеза соединения СМ-32 и используя соответствующие реагенты, были получены соединения СМ-15 и СМ-36.

[0302] Соединение CM-15

[0303] ¹H ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) δ 10,95 (s, 1H), 7,58-7,49 (m, 2H), 7,43-7,34 (m, 3H), 7,24-7,21 (m, 2H), 6,57-6,54 (m, 2H), 5,28 (s, 2H), 5,13-5,08 (m, 1H), 4,38 (d, J = 17,6 Гц, 1H), 4,22 (d, J = 17,6 Гц, 1H), 3,57 (s, 2H), 3,38-3,32 (m, 4H), 2,93-2,85 (m, 1H), 2,60-2,53 (m, 1H), 2,49-2,40 (m, 5H), 1,99-1,95 (m, 1H).

[0304] MC (ESI) масса/заряд 601,3 [M+H]⁺.

[0305] Соединение CM-36

[0306] ¹H ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) δ 10,97 (s, 1H), 7,57-7,50 (m, 2H), 7,41-7,22 (m, 6H), 6,96-6,94 (m, 1H), 5,27 (s, 2H), 5,13-5,09 (m, 1H), 4,41 (d, J = 17,6 Гц, 1H), 4,25 (d, J = 17,6 Гц, 1H), 4,09-4,04 (m, 2H), 3,56 (s, 2H), 3,12 (m, 4H), 2,95-2,86 (m, 1H), 2,58-2,50 (m, 5H), 2,46-2,40 (m, 1H), 1,99-1,96 (m, 1H), 1,34 (t, J = 6,8 Гц,3H).

[0307] MC (ESI) масса/заряд 612,2 [M+H]⁺.

[0308] Пример 23

[0309] Соединение CM-41

[0310] СМ-41С (метил-4-((4-(3-бром-4-цианофенил)пиперазин-1-ил)метил)-2-фторбензоат, 3,50 г, 8,10 ммоль), этилбороновую кислоту (1,20 г, 16,20 ммоль), Pd₂(dppf)Cl₂ (0,18 г, 0,24 ммоль) и карбонат калия (1,72 г, 16,20 ммоль) вносили в смесь диоксан/вода (30 мл/7 мл) и в смеси проводили реакцию в атмосфере азота при 90°С в течение 16 часов. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, фильтровали через диатомит и затем промывали этилацетатом. Фильтрат концентрировали, получая неочищенный продукт, который подвергали препаративной хроматографии с обращенной фазой, получая продукт СМ-41D (метил-4-((4-(4-циано-3-этилфенил)пиперазин-1-ил)метил)-2-фторбензоат, 1,00 г, 2,62 ммоль, выход: 32%) в виде белого твердого вещества. MC (ESI) масса/заряд 382,5 [M+H]⁺.

[0311] Что касается остальных стадий получения соединения СМ-41, то можно применять методику синтеза, приведенную в примере 11, используя соответствующие реагенты.

[0312] ¹H ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) δ 10,96 (s, 1H), 7,60-7,47 (m, 3H), 7,42-7,32 (m, 2H), 7,26-7,18 (m, 2H), 6,93-6,81 (m, 2H), 5,27 (s, 2H), 5,15-5,06 (m, 1H), 4,38 (d, J = 17,6 Гц, 1H), 4,22 (d, J = 17,6 Гц, 1H), 3,56 (s, 2H), 3,34-3,31 (m, 4H), 2,96-2,84 (m, 1H), 2,68 (q, J = 7,2 Гц, 2H), 2,58-2,52 (m, 1H), 2,49-2,37 (m, 5H), 2,01-1,93 (m, 1H), 1,19 (t,7,2 Гц, 3H).

[0313] MC (ESI) масса/заряд 596,2 [M+H]⁺.

[0314] Применяя методику синтеза соединения СМ-41, получали соединение СМ-37, заменяя этилбороновую кислоту на циклопропилбороновую кислоту.

[0315] Соединение CM-37

¹H ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) δ 10,96 (s, 1H). 7,60-7,32 (m, 5H), 7,25-7,18 (m, 2H), 6,83-6,78 (m, 1H),6,42(d, J = 2,0 Гц, 1H).5,27(s, 2H), 5,15-5,06 (m, 1H), 4,38 (d, J = 17,6 Гц, 1H), 4,22 (d, J = 17,6 Гц,1H), 3,55 (s, 2H), 3,32-3,29 (m, 4H), 2,97-2,83 (m, 1H), 2,59-2,52 (m, 1H), 2,49-2,37 (m, 5H), 2,10-1,91 (m, 2H), 1,05-0,98 (m, 2H), 0,85-0,78 (m, 2H).

[0316] MC (ESI) масса/заряд 608,2 [M+H]⁺.

[0317] Пример 24

[0318] Соединение CM-43

[0319] Применяя методику синтеза, приведенную в примере 11, и используя соответствующие реагенты, получали соединение CM-43G.

[0320] Соединения СМ-43G (200 мг, 0,31 ммоль) и СМ-43H (триметил((4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)этинил)силан, 210 мг, 0,93 ммоль, CAS 159087-46-4) растворяли в 8 мл диоксан/вода (6 мл/2 мл) и вносили Pd(dppf)₂Cl₂ (91,5 мг, 0,125 ммоль) и Et₃N (126 мг, 1,25 ммоль). Реакционную систему 3 раза продували азотом, а затем нагревали при 80°С в течение 2,5 ч в атмосфере азота до завершения реакции. Реакционный раствор фильтровали через диатомит, затем промывали EtOAc (10 мл) и концентрировали при пониженном давлении, а остаток очищали препаративной хроматографией с обращенной фазой (10%-80% ACN (ацетонитрил)), получая CM-43I ((S)-3-(4-((2-фтор-4-((4-(2-фтор-4-((триметилсилил)этинил)фенил)пиперазин-1-ил)метил)бензил)окси)-1-оксоизоиндолин-2-ил)пиперидин-2,6-дион, 100 мг, выход: 42%).

[0321] Раствор n-Bu₄NF/THF(ТГФ) (1 М, 1 ммоль, 1 мл) добавляли к раствору СМ-43I (100 мг, 0,15 ммоль) в THF (ТГФ) (5 мл), смешанный раствор перемешивали при комнатной температуре в течение 1 часа до завершения реакции. Реакционный раствор экстрагировали, используя EtOAc (10 мл), затем промывали водой (10 мл × 6) и концентрировали, а остаток подвергали препаративной хроматографии среднего давления с обращенной фазой, а затем очищали препаративной ВЭЖХ (TFA(ТФУК)), получая соль продукта и TFA (15 мг). Соль растворяли в DMF (ДМФА) и полученную смесь медленно добавляли по каплям к водн. NaHCO₃ (20 мл) для осаждения белого твердого вещества. Твердое вещество отфильтровывали и сушили в вакууме, используя масляный насос, получая соединения СМ-43 (7,8 мг, выход: 9%).

[0322] ¹H ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) δ 10,97 (s, 1H), 7,58-7,50 (m, 2H). 7,41-7,21 (m, 6H), 7,01-6,97 (m, 1H), 5,27 (s, 2H), 5,13-5,08 (m, 1H), 4,41-4,13 (m, 3H), 3,57 (s, 2H), 3,07-2,95 (m, 4H), 2,95-2,86 (m, 1H), 2,58-2,51 (m, 4H), 2,46-2,32 (m, 2H), 1,98-1,94 (m, 1H).

[0323] MC (ESI) масса/заряд [M+H]+ = 585,3.

[0324] Применяя методику синтеза соединения CM-43, получали CM-38, заменяя CM-43H на (CAS 608534-34-5).

[0325] Соединение CM-38

[0326] ¹H ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) δ 10,96 (s, 1H), 7,58-7,50 (m, 2H), 7,41-7,16 (m, 6H), 7,00-6,95 (m, 1H), 6,67-6,60 (m, 1H), 5,73 (d, J = 17,6 Гц, 1H), 5,27 (s, 2H), 5,19-5,08 (m, 2H), 4,38 (d, J = 17,6 Гц, 1H),4,22 (d, J = 17,6 Гц, 1H), 3,57 (s, 2H), 3,04-2,95 (m, 4H), 2,95-2,86 (m, 1H), 2,58-2,51 (m, 5H), 2,46-2,39 (m, 1H), 1,99-1,95 (m, 1H).

[0327] MC (ESI) масса/заряд [M+H]⁺ = 587,2.

[0328] Пример 25

[0329] Соединение CM-42

[0330] Применяя методику, приведенную в примере 11, синтезировали соединение CM-42F. СМ-42F (трет-бутил-(S)-5-амино-4-(4-((4-((4-(3-бром-4-цианофенил)пиперазин-1-ил)метил)-2-фторбензил)окси)-1-оксоизоиндолин-2-ил)-5-оксопентаноат, 1,00 г, 1,46 ммоль), Zn(CN)₂ (1,00 г, 256,23 ммоль), Pd₂(dba)₃ (0,12 г, 0,13 ммоль) и dppf (0,14 г, 0,26 ммоль) вносили в DMF (ДМФА) (10 мл) и смесь подвергали реакции в атмосфере азота при 100°С в течение 5 часов. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, добавляли воду (50 мл) и полученную смесь экстрагировали этилацетатом (30 мл × 2). Органические фазы объединяли и затем промывали насыщенным соляным раствором (50 мл × 3). Органическую фазу сушили над безводным сульфатом натрия, затем отфильтровывали и концентрировали, получая неочищенный продукт, который подвергали препаративной хроматографии с обращенной фазой, получая продукт СМ-42G (трет-бутил(S)-5-амино-4-(4-((4-((4-(3,4-дицианофенил)пиперазин-1-ил)метил)-2-фторбензил)окси)-1-оксоизоиндолин-2-ил)-5-оксопентаноат, 700 мг, выход: 72%) в виде белого твердого вещества.

[0331] Что касается остальных стадий получения соединения СМ-42, то его можно получить, следуя примеру 11 и используя соответствующие реагенты.

[0332] ¹H ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) δ 10,95 (s, 1H), 7,80 (d, J = 9,2 Гц, 1H),7,60-7,48 (m, 3H), 7,42-7,18 (m, 5H), 5,27 (s, 2H), 5,15-5,06 (m, 1H), 4,38 (d, J = 17,6 Гц,1H), 4,22 (d, J = 17,6 Гц, 1H), 3,56 (s, 2H), 3,48-3,42 (m, 4H), 2,96-2,84 (m, 1H), 2,58-2,52 (m, 1H), 2,49-2,37 (m, 5H), 2,01-1,93 (m, 1H).

[0333] MC (EST) масса/заряд 593,2 [M+H]⁺.

[0334] Пример 26

[0335] Соединение CM-44

[0336] Стадия А: К раствору соединения СМ-44А (метил 4-((4-(4-циано-2-(метоксиметокси)фенил)пипкразин-1-ил)метил)-2-фторбензоат, 3,00 г, 7,26 ммоль) в DCM (ДХМ) (20 мл) при 0°C-5°C добавляли TFA (ТФУК) (20 мл) и смешанный раствор перемешивали при комнатной температуре в течение 1,5 часов. Реакционный раствор концентрировали, а затем разбавляли EtOAc и добавляли водный раствор NaHCO₃, доводя смесь до pH = 8-9. Полученную смесь экстрагировали, используя EtOAc (30 мл × 3). Органические фазы объединяли, затем промывали насыщенным соляным раствором (50 мл), сушили над безводным Na₂SO₄, отфильтровывали и концентрировали, получая продукт СМ-44B (метил-4-((4-(4-циано-2-гидроксифенил)пиперазин-1-ил)метил)-2-фторбензоат, 1,70 г, выход: 91%) в виде твердого вещества желтого цвета. MC (ESI) масса/заряд 370,1 [M+H]⁺

[0337] Стадия В: Соединение СМ-44B (800 мг, 2,17 ммоль) растворяли в THF (ТГФ) (8 мл) и смесь охлаждали до -15°С. Порциями вносили гидрид натрия (104 мг, 4,34 ммоль) и поддерживали температуру ниже -5°С. Через 30 минут по каплям добавляли воду (78 мг, 4,34 ммоль). Через 10 минут порциями добавляли СМ-44С (диэтил(бромдифторметил)фосфонат, 1,16 г, 4,34 ммоль) и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 часа. Реакционный раствор выливали в воду и полученную смесь экстрагировали этилацетатом (30 мл × 3). Органическую фазу промывали насыщенным соляным раствором (80 мл), затем сушили над безводным Na₂SO₄, отфильтровывали и концентрировали, а остаток подвергали препаративной хроматографии с обращенной фазой, получая продукт СМ-44D (метил-4-((4-(4-циано-2-(дифторметокси)фенил)пиперазин-1-ил)метил)-2-фторбензоат, 0,35 г, 0,83 ммоль, выход: 38%) в виде белого твердого вещества.

[0338] Что касается остальных стадий получения СМ-44, то его можно получить, следуя примеру 11 и используя соответствующие реагенты.

[0339] ¹H ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) δ 10,95 (s, 1H), 7,68-7,48 (m, 4H), 7,42-6,95 (m, 6H), 5,27 (s, 2H), 5,14- 5,06 (m, 1H),4,38(d, J = 17,6 Гц, 1H), 4,22 (d, J = 17,6 Гц, 1H), 3,56 (s, 2H), 3,20-3,06 (m, 4H), 2,97-2,82 (m, 1H). 2,62-2,52 (m, 5H), 2,48-2,40 (m, 1H), 2,01-1,92 (m, 1H).

[0340] MC (ESI) масса/заряд 634,2 [M+H]⁺.

[0341] Пример 27

[0342] Стадия А: Соединение CM-48A (CAS 115843-99-7, 15,00 г, 66,82 ммоль), 1,1'-бис(дифенилфосфино)ферроцен (dppf) (3,70 г, 6,68 ммоль), Pd₂(dba)₃ (3,06 г, 3,34 ммоль) и Zn(CN)₂ (10,16 г, 86,84 ммоль) добавляли к DMF (ДМФА) (150 мл), нагревали до 100°С в атмосфере азота и проводили реакцию в течение 16 часов. Реакционный раствор охлаждали и отфильтровывали, а осадок на фильтре промывали, используя EtOAc (80 мл). Фильтрат концентрировали и остаток подвергали хроматографии на колонке с силикагелем (PE/EA = 2/1), получая продукт CM-48B (9,00 г, 52,76 ммоль, выход: 79%) в виде грязно-белого твердого вещества.

[0343] Стадия В: В MeCN (90 мл) вносили CuI (20,34 г, 106,49 ммоль) и изоамилнитрит (12,48 г, 106,49 ммоль). Реакционный раствор нагревали до 65°С и по каплям добавляли раствор СМ-48В (9,00 г, 52,79 ммоль) в ацетонитриле (90 мл). Капельное добавление было завершено за 30 минут, и реакция продолжалась в течение 5 часов. Реакционный раствор концентрировали и остаток подвергали колоночной хроматографии (PE/EA = 20/1), получая продукт СМ-48С (5,00 г, 17,77 ммоль, выход: 33%) в виде грязно-белого твердого вещества. MC (ESI) масса/заряд 281,9 [M+H]⁺.

[0344] Стадия С: Соединения CM-16A (2,70 г, 10,71 ммоль) и CM-48C (3,00 г, 10,71 ммоль), xphos Pd G2 (0,86 г, 1,07 ммоль) и Cs₂CO₃ (5,24 г, 16,06 ммоль) вносили в 1,4-диоксан (30 мл) и проводили реакцию в атмосфере азота при 110°С в течение 16 часов. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, фильтровали через диатомит и затем промывали этилацетатом. Фильтрат концентрировали и остаток подвергали колоночной хроматографии (PE/EA = 10/1-5/1), получая продукт CM-48E в виде твердого вещества желтого цвета (2,07 г, 5,10 ммоль, выход: 47,6%).

[0345] Что касается остальных стадий получения соединения СМ-48, то можно применять синтез, приведенный в примере 11, используя соответствующие реагенты.

[0346] ¹H ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) δ 10,96 (s, 1H), 7,68 (d, J = 8,8 Гц, 1H), 7,59-7,49 (m, 2H), 7,41-7,33 (m, 2H), 7,24-7,19 (m, 2H), 7,13-7,07(m, 1H), 5,27 (s, 2H), 5,14-5,07 (m, 1H), 4,38 (d, J = 17,6 Гц, 1H), 4,22 (d, J = 17,6 Гц, 1H), 3,57 (s, 2H), 3,30-3,27 (m, 4H), 2,96-2,85 (m, 1H), 2,60-2,52 (m, 5H), 2,49-2,39 (m, 1H), 2,00-1,94 (m, 1H).

[0347] MC (ESI) масса/заряд 620,2 [M+H]⁺.

[0348] Применяя методику синтеза соединения СМ-48 и используя соответствующие реагенты, были получены соединения СМ-47 и СМ-49.

[0349] ¹H ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) δ 10,96 (s, 1H), 7,80 (d, J = 8,8 Гц, 1H), 7,59-7,34 (m, 5H), 7,24-7,20 (m, 1H), 5,27 (s, 2H), 5,13-5,08 (m, 1H), 4,36 (d, J = 17,2 Гц, 1H), 4,21 (d, J = 17,6 Гц, 1H), 3,57 (s, 2H), 3,32-3,27 (m, 4H), 2,95-2,86 (m, 1H), 2,59-2,54 (m, 5H), 2,50-2,38 (m, 1H), 1,99-1,96 (m, 1H).

[0350] MC (ESI) масса/заряд 654,3 [M+H]⁺.

[0351] ¹H ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) δ 10,97 (s, 1H), 7,59-7,34(m, 5H), 7,25-7,19 (m, 2H), 6,85-6,79 (m, 1H), 5,27 (s, 2H), 5,14-5,07 (m, 1H), 4,38 (d, J = 17,6 Гц, 1H), 4,22 (d, J = 17,2 Гц, 1H), 3,99 (d, J = 1,2 Гц, 1H), 3,57 (s, 2H), 3,22-3,15 (m, 4H), 2,92-2,85 (m, 1H), 2,60-2,52 (m, 5H), 2,49-2,39 (m, 1H), 2,00-1,94 (m, 1H).

[0352] MC (ESI) масса/заряд 616,3 [M+H]⁺.

[0353] Пример 28

[0354] Применяя условия синтеза соединения СМ-12, приведенные в примере 11, и используя соответствующие реагенты, синтезировали соединение СМ-46.

[0355] ¹H ЯМР (400 МГц, DMSO) δ 10,97 (s, 1H), 7,51-7,30 (m, 7H), 6,55-6,53 (m, 2H), 5,27 (s, 2H), 5,14-5,09 (m, 1H), 4,43 (d, J = 17,2 Гц, 1H), 4,27 (d, J = 17,6 Гц, 1H), 4,16- 4,11 (m, 2H), 3,59 (s, 2H), 3,33 (m, 4H), 2,96-2,87 (m, 1H), 2,61-2,50 (m, 5H), 2,43-2,40 (m, 1H), 2,01-1,98 (m, 1H), 1,33 (t, J = 6,8 Гц, 3H).

[0356] MC (ESI) масса/заряд 612,3 [M+H]⁺.

[0357] Применяя методику синтеза соединения СМ-46, приведенную в примере 28, и используя соответствующие реагенты, синтезировали СМ-20, СМ-21, СМ-23, СМ-26 и СМ-45.

[0358] Соединение CM-20

[0359] ¹H ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) δ 10,97 (s, 1H), 7,61-7,44 (m, 3H), 7,35-7,31 (m, 4H), 6,95-6,91 (m, 1H), 6,85-6,82 (m, 1H), 5,26 (s, 2H), 5,14-5,09 (m, 1H), 4,45 (d, J = 17,6 Гц, 1H), 4,29 (d, J = 17,6 Гц, 1H), 3,59 (s, 2H), 3,38-3,32 (m, 4H), 2,91-2,87 (m, 1H), 2,60-2,55 (m, 1H), 2,49-2,40 (m, 5H), 2,01-1,98 (m, 1H).

[0360] MC (ESI) масса/заряд 586,2 [M+H]⁺.

[0361] Соединение CM-21

[0362] ¹H ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) δ 10,99 (s, 1H), 7,49-7,30 (m, 7H), 6,56-6,54 (m, 2H), 5,26 (s, 2H), 5,14-5,10 (m, 1H), 4,47 (d, J = 17,2 Гц, 1H), 4,31 (d, J = 17,2 Гц, 1H), 3,86 (s, 2H), 3,35-3,33 (m, 4H), 2,96-2,87 (m, 1H), 2,60-2,50 (m, 5H), 2,50-2,40 (m, 1H), 2,01-1,97 (m, 1H).

[0363] MC (ESI) масса/заряд 598,2 [M+H]⁺.

[0364] Соединение CM-23

[0365] ¹H ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) δ 10,98 (s, 1H), 7,86 (s, 1H), 7,67-7,58 (m, 2H), 7,52-7,43 (m, 2H),7,36-7,27 (m, 5H), 7,06-6,99 (m, 1H), 5,26 (s, 2H), 5,15-5,08(m, 1H), 4,45 (d, J = 17,6 Гц, 1H), 4,29 (d, J = 17,6 Гц, 1H), 3,60 (s, 2H), 3,15-3,00 (m, 4H), 2,98-2,83 (m, 1H), 2,64-2,52 (m, 5H), 2,48-2,39 (m, 1H), 2,04-1,93 (m, 1H).

[0366] MC (ESI) масса/заряд 604,2 [M+H]⁺.

[0367] Соединение CM-26

[0368] ¹H ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) δ 10,97 (s, 1H), 7,51-7,44 (m, 2H), 7,35-7,31 (m, 4H), 7,17-7,15 (m, 1H), 6,18-6,16 (m, 1H), 5,26 (s, 2H), 5,14-5,09 (m, 1H), 4,45 (d, J = 17,6 Гц, 1H), 4,31-4,22 (m, 3H), 3,65 (s, 3H), 3,57 (s, 2H), 3,32-3,30 (m, 4H), 2,96-2,87 (m, 1H), 2,67-2,56 (m, 1H), 2,51-2,49 (m, 5H), 2,00-1,96 (m, 1H), 1,28 (t, J=6,8 Гц, 3H).

[0369] MC (ESI) масса/заряд 618,2 [M+H]⁺.

[0370] Соединение CM-45

[0371] ¹H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 10,97 (s, 1H), 7,76-7,72 (m, 1H), 7,59-7,43 (m, 3H), 7,36-7,30 (m, 4H), 6,79-6,69 (m, 2H), 5,26 (s, 2H), 5,15-5,07 (m, 1H), 4,45 (d. J = 17,6 Гц, 1H), 4,29 (d, J = 17,2 Гц, 1H),3,58 (s, 2H), 3,30-3,24 (m, 4H), 2,93-2,87 (m, 1H), 2,74 (d, J = 4,4 Гц, 3H), 2,62-2,52 (m, 5H), 2,49-2,41 (m, 1H), 2,02-1,97 (m, 1H).

[0372] MC (ESI) масса/заряд 618,2 [M+H]+.

[0373] Примеры эффективности действия

[0374] Экспериментальный метод исследования ингибирования клеточной пролиферации с помощью анализа MTS:

[0375] Пролиферирующие клетки миеломы MM.1S (ATCC, кат. № CRL-2974) суспендировали в среде RPMI-640 (Gibco, кат. № A10491-01) и подсчитывали, используя автоматический счетчик клеток. Суспензию клеток разводили до необходимой плотности и высевали по 100 мкл (15000 клеток) суспензии клеток на лунку в 96-луночный планшет. Планшет культивировали в инкубаторе при 37°C и 5% CO₂ в течение 24 часов. В день введения каждое соединение готовили в виде 20 мМ исходного раствора с ДМСО (Sigma, кат. № D2650), разбавляли средой до необходимой концентрации, а затем добавляли в соответствующие лунки для исследования подавления пролиферации клеток с лекарственным средством при 4-кратном серийном разведении 10 раз. Конечная концентрация ДМСО составляла 0,5%. После внесения лекарственного средства 96-луночный планшет культивировали в инкубаторе при 37°C и 5% CO₂ в течение 72 часов. Затем в каждую лунку добавляли по 20 мкл MTS (Promega, кат. № G3581) и планшет культивировали в течение 2 часов в инкубаторе при 37°C и 5% CO₂, а затем регистрировали поглощение при 490 нм в каждой лунке, используя прибор Ensight. Данные, считанные с клеток на 0-й день, использовали в качестве отрицательного контроля, а данные, считанные на 3-й день с клеток с 0,5% ДМСО, использовали в качестве положительного контроля. Кривую подавления пролиферации клеток строили с использованием программного обеспечения GraphPad Prism 5 и рассчитывали значение IC50. Результаты эксперимента приведены в таблице 1.

Контроль 1

Таблица 1. Результаты подавления пролиферации клеток MM.1S

Соединения MM.1S IC₅₀ (нМ) Контроль 1 23,0691 СМ-1 0,1025 СМ-2 0,0139 СМ-3 0,0064 СМ-4 0,0153 СМ-5 0,0063 СМ-6 0,0409 СМ-7 0,0054 СМ-8 0,0211 СМ-9 0,0136 СМ-10 0,0105 СМ-11 0,0091 СМ-12 0,0067 СМ-13 0,0271 СМ-14 0,0148 СМ-15 0,0062 СМ-16 0,1886 СМ-17 0,0139 СМ-18 0,0188 СМ-19 0,0338 СМ-20 0,0132 СМ-21 0,0111 СМ-22 0,0136 СМ-23 0,0581 СМ-24 0,0388 СМ-25 0,0291 СМ-26 0,4648 СМ-27 0,1339 СМ-28 0,1020 СМ-29 0,2006 СМ-30 0,1092 СМ-31 0,1657 СМ-32 0,0706 СМ-33 0,0781 СМ-34 0,0766 СМ-35 0,0962 СМ-36 0,1479 СМ-37 0,1193 СМ-38 1,2090 СМ-39 0,0631 СМ-40 0,3778 СМ-41 0,1158 СМ-42 0,1143 СМ-43 0,5762 СМ-44 0,1265

[0376] Экспериментальный способ исследования подавления клеточной пролиферации с помощью анализа CTG:

[0377] Активность соединений, подавляющую пролиферацию в модели клеток миеломы MM.1S, определяли с помощью люминесцентного анализа жизнеспособности клеток (Luminescent Cell Viability Assay) CellTiter-Glo (CTG) (Promega). Клетки MM.1S (ATCC, кат. № CRL-2974) в экспоненциальной фазе повторно суспендировали в среде RPMI-1640 (Gibco, кат. № 11875-093), 10% FBS, 1% пенициллина/стрептомицина, 2 мМ Glutamax, и подсчитывали с использованием автоматического счетчика клеток (ViCellXR). В соответствии с оптимизированной плотностью посева клеток в предварительных экспериментах, 40 мкл клеточной суспензии с плотностью 100 000 клеток/мл высевали в соответствующие лунки 384-луночного планшета (4000 клеток/лунка), что позволило клеткам в контрольной группе быть в фазе линейного роста в ходе пятидневного эксперимента. Засеянный 384-луночный планшет культивировали в инкубаторе при 37°C и 5% CO₂ в течение 24 часов. В день введения каждое соединение готовили в виде 10 мМ исходного раствора с DMSO (ДМСО) (Sigma, какт. № 276855-1L) и исходный раствор дополнительно разбавляли, используя DMSO (ДМСО), чтобы получить 20 мкМ и 20 нМ рабочие растворы. Обработку клеток MM.1S лекарственным средством начинали с концентрации до 100 нМ, лекарственное средство серийно четырехкратно разбавляли 10 раз в трех повторностях. Нанолитровые объемы растворов соединений добавляли в соответствующие лунки 384-луночного планшета в соответствии с необходимой концентрацией методом бесконтактного распыления с помощью автоматического микродозатора HPD300 (Tecan). Конечная концентрация DMSO (ДМСО) составляла 0,5%. После внесения лекарственного средства 384-луночный планшет культивировали в инкубаторе при 37°C и 5% CO₂ в течение 120 часов. После пяти дней обработки лекарственным средством в каждую лунку добавляли 25 мкл реагента CTG (Promega, кат. № G7573) и планшет встряхивали на шейкере для планшетов в течение 10 минут, чтобы добиться полного лизиза клеток, а затем выстаивали 10 минут при комнатной температуре, чтобы CTG в достаточной степени прореагировал с субстратом с получением стабильного люминесцентного сигнала. Сигнал пропорционален количеству АТФ в лизате клеток, т.е. количеству метаболически активных клеток. Хемилюминесценцию клеток в планшете регистрировали на приборе EnSpire. Данные, считанные с клеток на 0-й день, использовали в качестве контроля для клеток в начальной точке роста, а данные, считанные на 5-ый день с клеток с 0,5% ДМСО, использовали в качестве контроля для клеток в стадии роста. Кривую подавления клеточной пролиферации строили с использованием программного обеспечения XLFit и рассчитывали значение IC50. Результаты эксперимента приведены в таблице 2.

Таблица 2. Результаты подавления пролиферации клеток MM.1S

Соединения MM.1S IC₅₀ (нМ) Контроль 1 119,0859 СМ-45 0,0938 СМ-46 0,0687 СМ-47 0,1351 СМ-48 0,0365 СМ-49 0,0606

Группа изобретений относится к области органической химии и включает производное изоиндолина общей формулы (I), его фармацевтически приемлемую соль, стереоизомер, способ получения фармацевтический состав на его основе и применение. В формуле (I) каждый из R₁ и R₂ независимо выбран из Н и галогена, при условии, что R₁ и R₂ одновременно не представляют собой Н; X представляет собой О; каждый из X₁, Х₂ независимо выбран из С или N; каждый из Х₃, Х₄ и Х₅ представляет собой С; каждый из R₄, R₅, R₆, R₇ и R₈ независимо отсутствует или выбран из Н, галогена, незамещенного (С₁-С₁₂)алкила или замещенного 1-3 галогенами, незамещенной (C₁-С₁₂)алкоксигруппы или замещенной 1-3 заместителями, выбранными из D, галогена или (С₃-С₆)циклоалкила, незамещенного (С₃-С₆)циклоалкила, -CH=CH₂, -C≡CH, -CN, -ОН, -NO₂, или где каждый из R₉ и R₁₀ независимо выбран из Н или незамещенного (С₁-С₁₂)алкила, при условии, что по меньшей мере один из R₄, R₅, R₆, R₇ и R₈ выбран из -CN, -NO₂, -CH=CH₂, -C≡CH, (С₁-С₁₂)алкила, замещенного 1-3 галогенами, (C₁-С₁₂)алкоксигруппы, замещенной 1-3 галогенами, или (С₁-С₁₂)алкоксигруппы, замещенной 1-3 D. Технический результат – производное изоиндолина общей формулы (I), применяемое для лечения множественной миеломы. 4 н. и 11 з.п. ф-лы, 2 табл., 29 пр.

1. Производное изоиндолина, представленное общей формулой (I), его фармацевтически приемлемая соль или стереоизомер:

где каждый из R₁ и R₂ независимо выбран из Н и галогена, при условии, что R₁ и R₂ одновременно не представляют собой Н;

X представляет собой О;

каждый из X₁, Х₂ независимо выбран из С или N;

каждый из Х₃, Х₄ и Х₅ представляет собой С;

каждый из R₄, R₅, R₆, R₇ и R₈ независимо отсутствует или выбран из Н, галогена, незамещенного (С₁-С₁₂)алкила или замещенного 1-3 галогенами, незамещенной (C₁-С₁₂)алкоксигруппы или замещенной 1-3 заместителями, выбранными из D, галогена или (С₃-С₆)циклоалкила, незамещенного (С₃-С₆)циклоалкила, -CH=CH₂, -C≡CH, -CN, -ОН, -NO₂ или где каждый из R₉ и R₁₀ независимо выбран из Н или незамещеного (С₁-С₁₂)алкила, при условии, что по меньшей мере один из R₄, R₅, R₆, R₇ и R₈ выбран из -CN, -NO₂, -CH=CH₂, -C≡CH, (С₁-С₁₂)алкила, замещенного 1-3 галогенами, (C₁-С₁₂)алкоксигруппы, замещенной 1-3 галогенами, или (С₁-С₁₂)алкоксигруппы, замещенной 1-3 D;

атом углерода, помеченный *, представляет собой асимметрический атом углерода и асимметрический атом углерода относится к ахиральному углероду, углероду с (S)-конфигурацией, углероду с преобладающей (S)-конфигурацией, углероду с (R)-конфигурацией, углероду с преобладающей (R)-конфигурацией или рацемату.

2. Производное изоиндолина, представленное общей формулой (I), его фармацевтически приемлемая соль или стереоизомер согласно п. 1, где в общей формуле (I) по меньшей мере один из R₁ и R₂ выбран из F, Cl или Br.

3. Производное изоиндолина, представленное общей формулой (I), его фармацевтически приемлемая соль или стереоизомер согласно п. 1, где в общей формуле (I) по меньшей мере один из R₁ и R₂ представляет собой F.

4. Производное изоиндолина, представленное общей формулой (I), его фармацевтически приемлемая соль или стереоизомер согласно п. 1, где в общей формуле (I) R₄ выбран из -CN, -NO₂, (С₁-С₁₂)алкила, замещенного 1-3 галогенами, (C₁-С₁₂)алкоксигруппы, замещенной 1-3 галогенами, или (С₁-С₁₂)алкоксигруппы, замещенной 1-3 D; каждый из R₅, R₆, R₇ и R₈ независимо выбран из Н или галогена;

или в общей формуле (I) R₅ выбран из -CN, -NO₂, (С₁-С₁₂)алкила, замещенного 1-3 галогенами, (С₁-С₁₂)алкоксигруппы, замещенной 1-3 галогенами, или (С₁-С₁₂)алкоксигруппы, замещенной 1-3 D; каждый из R₄, R₆, R₇ и R₈ независимо выбран из Н или галогена;

или в общей формуле (I) R₆ выбран из -CN, -NO₂, (С₁-С₁₂)алкила, замещенного 1-3 галогенами, (С₁-С₁₂)алкоксигруппы, замещенной 1-3 галогенами, или (С₁-С₁₂)алкоксигруппы, замещенной 1-3 D; каждый из R₄, R₅, R₇ и R₈ независимо выбран из Н или галогена;

или в общей формуле (I) R₇ выбран из -CN, -NO₂, (С₁-С₁₂)алкила, замещенного 1-3 галогенами, (С₁-С₁₂)алкоксигруппы, замещенной 1-3 галогенами, или (С₁-С₁₂)алкоксигруппы, замещенной 1-3 D; каждый из R₄, R₅, R₆ и R₈ независимо выбран из Н или галогена;

или в общей формуле (I) R₈ выбран из -CN, -NO₂, (С₁-С₁₂)алкила, замещенного 1-3 галогенами, (С₁-С₁₂)алкоксигруппы, замещенной 1-3 галогенами, или (С₁-С₁₂)алкоксигруппы, замещенной 1-3 D; более предпочтительно каждый из R₄, R₅, R₆ и R₇ независимо выбран из Н или галогена.

5. Производное изоиндолина, представленное общей формулой (I), его фармацевтически приемлемая соль или стереоизомер согласно п. 1, где R₁ выбран из F, Cl и Br, a R₂ представляет собой Н; или R₂ выбран из F, Cl и Br, a R₁ представляет собой Н.

6. Производное изоиндолина, представленное общей формулой (I), его фармацевтически приемлемая соль или стереоизомер согласно п. 1, где R₁ представляет собой F, a R₂ представляет собой Н; или R₂ представляет собой F, a R₁ представляет собой Н.

7. Производное изоиндолина, представленное общей формулой (I), его фармацевтически приемлемая соль или стереоизомер согласно п. 1, где

R₄ выбран из Н, F, Cl, Br, -СН₃, -СН₂СН₃, -CF₃, -ОСН₃, -ОСН₂СН₃, -СН=СН₂, -C≡CH, -OCF₃, -OCH₂F, -OCHF₂, -OCD₃, -CN, -NO₂,

R₅ выбран из Н, F, Cl, Br, -СН₃, -СН₂СН₃, -CF₃, -ОСН₃, -ОСН₂СН₃, -СН=СН₂, -C≡CH, -OCF₃, -OCH₂F, -OCHF₂, -OCD₃, -CN, -NO₂,

R₆ выбран из Н, F, Cl, Br, -СН₃, -СН₂СН₃, -CF₃, -ОСН₃, -ОСН₂СН₃, -СН=СН₂, -C≡CH, -OCF₃, -OCH₂F, -OCHF₂, -OCD₃, -CN, -NO₂,

R₇ выбран из Н, F, Cl, Br, -СН₃, -СН₂СН₃, -CF₃, -ОСН₃, -ОСН₂СН₃, -СН=СН₂, -C≡CH, -OCF₃, -OCH₂F, -OCHF₂, -OCD₃, -CN, -NO₂,

и R₈ выбран из H, F, Cl, Br, -CH₃, -CH₂CH₃, -CF₃, -OCH₃, -OCH₂CH₃, -CH=CH₂, -C≡CH, -OCF₃, -OCH₂F, -OCHF₂, -OCD₃, -CN, -NO₂,

8. Производное изоиндолина, представленное общей формулой (I), его фармацевтически приемлемая соль или стереоизомер согласно п. 1, где

R₄ выбран из Н, F, CN, -ОСН₃, -OCF₃ или -OCD₃;

R₅ выбран из Н, F, -CN, -ОСН₃, -OCF₃ или -OCD₃;

R₆ выбран из Н, F, -CN, -ОСН₃, -OCF₃ или -OCD₃;

R₇ выбран из Н, F, -CN, -ОСН₃, -OCF₃ или -OCD₃;

и R₈ выбран из Н, F, -CN, -ОСН₃, -OCF₃ или -OCD₃.

9. Производное изоиндолина, представленное общей формулой (I), его фармацевтически приемлемая соль или стереоизомер согласно п. 1, где

R₄ выбран из Н или F;

R₅ выбран из Н или F;

R₆ выбран из F или -CN;

R₇ выбран из Н, F или -ОСН₃; и R₈ выбран из F или Н.

10. Производное изоиндолина, представленное общей формулой (I), его фармацевтически приемлемая соль или стереоизомер согласно п. 1, где каждый X₁, Х₂, Х₃, Х₄ и Х₅ независимо представляет собой С.

11. Производное изоиндолина, представленное общей формулой (I), его фармацевтически приемлемая соль или стереоизомер согласно любому из пп. 1-10, где галоген представляет собой F, Cl, Br или I.

12. Производное изоиндолина, представленное общей формулой (I), его фармацевтически приемлемая соль или стереоизомер по любому из пп. 1-10, где соединение общей формулы (I) представляет собой любое из следующих соединений:

13. Способ получения производного изоиндолина, представленного общей формулой (I), согласно любому из пп. 1-12, включающий следующую стадию:

получение соединения общей формулы (I) из соединения А-01 по реакции

,

где X, Х₁-Х₅, *, R₁, R₂, R₄, R₅, R₆, R₇ и R₈ принимают такие значения, как описано в любом из пп. 1-12, один из Ra и Rb представляет собой а другой - или и R^a' и R^b' независимо представляют собой Н.

14. Фармацевтический состав для лечения множественной миеломы, содержащий терапевтически эффективное количество производного изоиндолина, представленного общей формулой (I), его фармацевтически приемлемой соли или стереоизомера согласно любому из пп. 1-12 и фармацевтически приемлемое формообразующее.

15. Применение производного изоиндолина, представленного общей формулой (I), его фармацевтически приемлемой соли или стереоизомера согласно любому из пп. 1-12 для получения лекарственного средства для лечения множественной миеломы.