СТАБИЛИЗАТОР ЛИОФИЛИЗИРОВАННОЙ ФЛАКОННОЙ ГОТОВОЙ ЛЕКАРСТВЕННОЙ ФОРМЫ ВАКЦИНЫ ЖЕЛТОЙ ЛИХОРАДКИ Российский патент 2024 года по МПК A61K39/12 A61K47/18 A61K47/26 A61K47/02 A61K47/42 A61P31/12 

ОБЛАСТЬ ТЕХНИКИ, К КОТОРОЙ ОТНОСИТСЯ ИЗОБРЕТЕНИЕ

Заявленное изобретение относится к химико-фармацевтической промышленности и касается нового состава стабилизатора лиофилизированной флаконной готовой лекарственной формы вакцины желтой лихорадки.

УРОВЕНЬ ТЕХНИКИ

Желтая лихорадка - острое вирусное геморрагическое заболевание с высокой смертностью, вызываемое арбовирусом рода flavivirus.

По данным Всемирной организации здравоохранения, желтая лихорадка по-прежнему актуальна в странах Африки, Южной и Центральной Америки, где ежегодно регистрируется от 84 000 до 170 000 серьезных случаев и от 29 000 до 60 000 смертей (Bacha, Johanson. Yellow fever. EDITORIAL, Rev. Assoc. Med. Bras. 63 (4), Apr 2017).

В зависимости от переносчика различают две формы желтой лихорадки: лесную и городскую. При инфекциях лесной формы комары-переносчики относятся к родам Haemagogus и/или Sabethes, обитающим обычно в кронах деревьев. Источником инфекции в этом случае являются приматы, реже человек. При инфекциях городской формы переносчиком вируса являются комары рода Aedes - насекомые, чрезвычайно приспособленные к городским условиям. В этом случае люди являются единственным источником инфекции. На сегодняшний день наиболее распространенной является лесная форма заболевания.

В Бразилии последний случай городской формы желтой лихорадки зарегистрирован в 1942 г. В то же время в отношении лесной формы произошло расширение ареалов передачи с севера и Среднего Запада на юг и юго-восток. В 2017 г. страна столкнулась с серьезной вспышкой болезни, главным образом в штатах Минас-Жерайс, Эспириту-Санту и Рио-де-Жанейро. В 2018 году его досягаемость простиралась от Минас-Жерайса до Сан-Паулу (Litvoc et al., Yellow fever. Rev Assoc Med Bras, 1992, 2018 Feb; 64(2): 106-113).

В Соединенных штатах Америки в начале 20 века вспышки желтой лихорадки, вызванные завозными случаями, происходили с определенной регулярностью (Waggoner et al. Yellow Fever Virus: Diagnostics for a Persistent Arboviral Threat. Journal List, J Clin Microbiol, v. 56(10); 2018 Oct).

Желтая лихорадка имеет инкубационный период от 3 до 6 дней и внезапное появление симптомов с высокой температурой, миалгией, головной болью, тошнотой/рвотой и повышением активности трансаминаз. Заболевание протекает от бессимптомной до тяжелой формы.

Тяжелая форма желтой лихорадки наблюдается примерно у 12% инфицированных и может проявляться желтухой, кровоизлиянием и полиорганной недостаточностью. Хотя уровень летальности при тяжелой форме желтой лихорадки составляет около 47%, показатель летальности для всех форм желтой лихорадки оценивается в 5%. Это происходит из-за того, что большинство инфекций желтой лихорадки у людей протекают бессимптомно или приводят к легкой, недифференцированной системной лихорадке, которая может не требовать медицинской помощи.

Легкие и бессимптомные случаи создают серьезные проблемы в диагностике желтой лихорадки и, подобно иным родственным флавивирусным инфекциям, способствуют недооценке заболеваемости в районах, эндемичных по желтой лихорадке (Waggoner et al. Yellow Fever Virus: Diagnostics for a Persistent Arboviral Threat. Journal List, J Clin Microbiol, v. 56(10); 2018 Oct).

На данный момент препарата, действующего на возбудителя желтой лихорадки, не существует, сократить вероятность смертельного исхода позволяет предоставление лечения от дегидратации, печеночной или почечной недостаточности и повышенной температуры. Сопутствующие основному заболеванию бактериальные инфекции лечат с помощью антибиотиков.

Основным способом предотвращения распространения данного заболевания является своевременная массовая вакцинация лиц, проживающих в тропических районах Африки и Центральной и Южной Америки, а также лиц, совершающих поездки в районы, эндемичные по желтой лихорадке.

Вакцина против желтой лихорадки состоит из ослабленного живого вируса штамма 17D с двумя субштаммами: 17DD, используемого в Бразилии, и 17D-204, используемого в других странах.

В Институте полиомиелита и вирусных энцефалитов АМН СССР группой ученых в начале 70-х годов была разработана на основе штамма 17D собственная вакцина для профилактики желтой лихорадки (ВЖЛ). Были проведены исследования, направленные на разработку методов биологического контроля качества ВЖЛ в соответствии с международными требованиями, предъявляемыми к производству и контролю указанного препарата [Tech. Rep. №179, WHO, 1959].

Защита, достигающая уровня выше 95%, начинается после десятого дня применения. Текущие данные показывают, что защита, обеспечиваемая вакциной, является длительной, возможно, пожизненной, и поэтому рекомендаций по ревакцинации не существует даже в случаях последующего перемещения в эндемичные районы.

Вакцина желтой лихорадки представлена на рынке в виде лиофилизата для приготовления раствора для подкожного введения, помещенного в ампулу. Как правило, ампула содержит 2 дозы, 5 доз или 10 доз.

Использование многодозовой фасовки вакцины для профилактики желтой лихорадки связано с широким применением вакцины в эпидемических очагах, удаленных от мест производства, в странах с низким уровнем экономического развития. Эти особенности диктуют необходимость производить вакцину в форме, позволяющей обеспечить население эпидемических очагов в кратчайшие сроки большим количеством вакцины невысокой себестоимости. Стеклянные ампулы широко используются для упаковки инъекционных лекарств. Они являются идеальным контейнером на этапе хранения и транспортировки препарата до момента применения. Однако соблюдение асептических условий для препарата в открытых ампулах на этапе проведения вакцинации очень сложно. Использование многодозового препарата в ампулах в жарких странах связано с повышенным риском контаминации и невозможностью дальнейшего применения.

По данным ЮНИСЕФ и Красного Креста, отходы от неиспользованных доз многодозовой вакцины в ампулах составляют 15-20% во время проведения мероприятий по вакцинации. В связи с чем производителям рекомендовано разработать и внедрить в производство флаконную форму выпуска вакцинных препаратов.

Управление по надзору за качеством пищевых продуктов и медикаментов США (FDA) совместно со Всемирной организацией здравоохранения (ВОЗ) разработало руководство для фармацевтической промышленности [Guidance for Industry. Allowable excess volume and labeled vial fillsize ininjectable drug and biological products], фактически закрепляющее приоритетность использования флакона в качестве первичного контейнера для расфасовки инъекционных препаратов, включая иммунобиологические, по отношению к ампуле. Требование использовать флаконы в качестве первичных контейнеров для асептической расфасовки включено в условия типового контракта на поставку вакцин всех закупочных агентств ООН, включая ЮНИСЕФ.

По данным экспертов ВОЗ, флаконная форма выпуска многодозовых препаратов, предназначенная для проведения массовых вакцинаций, обеспечивает сохранность и стабильность препарата на момент проведения манипуляций с флаконом при его эксплуатации, так как стоппер не вскрывается и постоянно герметично закрывает препарат от воздействий внешней среды и человеческого фактора.

Помимо приведенных выше, флаконная форма вакцинных препаратов имеет следующие преимущества:

- снижен риск контаминации разлитого препарата в первичную упаковку (флаконы), так как препарат предварительно предукупоривается на линии розлива и транспортируется в сублимационную установку в закрытом виде;

- снижен риск контаминации препарата в процессе сублимации, поскольку препарат находится в установке в предукупоренном виде;

- улучшается качество лиофилизации препарата, так как влияние процессов сублимации и молекул воды из кристалла таблетки в процессе нагревания происходит более равномерно;

- снижен риск контаминации лиофильного препарата в укупоренных флаконах, так как флаконы укупориваются под вакуумом внутри сублимационной установки и транспортируются на машину вальцовки в закрытом виде, что снижает риск потери продукта от влияния условий окружающей среды на высушенный препарат (контаминация, влажность);

- возможность организации производства в изоляторной технологии с понижением класса чистоты производственной зоны, так как предукупоренный препарат имеет преимущество по сниженному риску взаимодействия и влияния окружающей среды на качество препарата, что, в свою очередь, несет значительные финансово-экономические преимущества;

- возможность уменьшения времени цикла лиофилизации за счет того, что дно флаконов имеет более ровную и более широкую площадь, что обеспечивает наилучшее прилегание флаконов к полке сублимационной установки. Таким образом обеспечивается более ровное распределение влияния температуры полки на контактную поверхность препарата и снижение времени, необходимого для формирования кристалла таблетки (стадия глубокой заморозки) и элиминации молекул воды из кристалла при нагревании, что также приводит к значительным финансово-экономическим преимуществам за счет снижения трудовых и временных параметров производственного цикла и возможности масштабирования производства с использованием тех же объемов производственных мощностей;

- снижение количества эмбрионированных яиц кур (первичной культуры производства) в составе препарата на одну дозу, так как модернизированный состав стабилизатора позволяет формировать кристалл таблетки при сублимационном процессе за счет формообразователя. Таким образом, данное изменение внесет положительные финансово-экономические перспективы, приведет к улучшению качества производимого препарата по показателям количества побочных явлений на вакцинацию за счет снижения общего белка и овальбумина на дозу вакцины.

Однако перевод производства вакцины желтой лихорадки с ампульной формы на флаконную сопряжен с рядом трудностей. Так, например, жесткие требования предъявляются к стабильности флаконной формы вакцины при ее хранении и эксплуатации в субтропическом, тропическом и субэкваториальном климате, в которых расположены основные эндемические районы желтой лихорадки. Следует также учитывать, что флаконная форма подразумевает кратное и относительно длительное использование - в течение всего срока вакцина должна сохранять свои свойства.

РАСКРЫТИЕ СУЩНОСТИ ИЗОБРЕТЕНИЯ

В связи с растущей потребностью рынка и рекомендациями международных организаций была начата разработка вакцины для профилактики желтой лихорадки (ВЖЛ) живой, сухой во флаконной форме - СинСаВак. Для осуществления данной задачи был проведен комплекс мероприятий, который, помимо прочего, включил в себя разработку нового состава стабилизатора для полуфабриката и/или готовой ВЖЛ во флаконах.

Переход на флаконную форму первичной упаковки ВЖЛ, которая, по сравнению с запаянной ампулой, подвержена риску частичной разгерметизации, особенно при изменении окружающей температуры, требует нового эффективного состава стабилизатора.

Таким образом, технической задачей настоящего изобретения являлась разработка набора компонентов для приготовления стабилизатора, пригодного для применения в составе полуфабриката и/или готовой флаконной лекарственной формы вакцины желтой лихорадки, характеризующейся высокой эффективностью, низким содержанием иммуноген-ных примесей (или добавок), стабильной при хранении и эксплуатации в субтропическом, тропическом и субэкваториальном климате.

Основными способами повышения стабильности вакцин является их лиофильное высушивание и соблюдение температурного режима хранения. Лиофилизированные вакцины для профилактики желтой лихорадки без стабилизаторов очень быстро портятся при воздействии температуры выше 20°С. [A.A. Adebayo, J.-W. Sim-Brandenburg, Н. Emmel, D.О. Olaleyef and M. Niedrig Stability of 17D Yellow Fever virus vaccine using different stabilizers. Biologicals (1998) 26, 309-316 Article No. bg 980157]. Термолабильность живых аттенуированных вакцин является очень важной проблемой при проведении прививок в субтропических странах, эндемичных по желтой лихорадке, где транспортировка с соблюдением условий холодовой цепи затруднена. По оценкам ВОЗ, треть вакцины, используемой в этих странах, теряет свою эффективность во время перевозки из-за нарушения холодовой цепи. [Monath ТР. Stability of yellow fever vaccine. Dev Biol Stand 1996; 87: 219-225].

Еще одним способом повышения стабильности вакцины является добавление в ее состав стабилизаторов.

В составе ампульной формы вакцины желтой лихорадки используется стабилизатор, разработанный в Институте Пастера (см. документ ЕР 0065905, 1984 г).

К компонентам добавляется вода для инъекций до 1 литра.

Главным недостатком данного решения является принципиальная невозможность его использования для создания флаконной формы вакцины ввиду ее низкой стабильности, а также невозможность формирования таблетки лиофилизата.

Авторы настоящего изобретения решают приведенную выше техническую задачу разработкой набора компонентов для изготовления стабилизатора, пригодного для применения в составе полуфабриката и/или готовой флаконной лекарственной формы вакцины желтой лихорадки, характеризующегося следующим составом:

Натрия хлорид (NaCl) - 8 г

Калия хлорид (KCl) - 0,2 г

Динатрия фосфат дигидрат (Na₂HPO₄⋅2Н₂О) - 1,13 г

Калия дигидрофосфат (KH₂PO₄) - 0,2 г

Кальция хлорида дигидрат (CaCl₂⋅2Н₂О) - 0,13 г

Магния сульфат гептагидрат (MgSO₄⋅7Н₂О) - 0,076 г

Лактоза - 61,5 г

Сорбитол - 30,8 г

L-гистидин - 2,4 г

L-аланин - 1,37 г

Желатин - 9-10 г.

Стабилизация желатинсодержащим продуктом по изобретению осуществляется за счет снижения поверхностного натяжения, образования оболочек на поверхности фазы. Основной функцией стабилизатора в составе препарата является защита живого вируса от воздействия потенциально негативных факторов внешней среды, включая шоковые перепады температуры (от -45°С до 25°С) при лиофилизации, а также физико-химических изменений в процессе хранения в течение заявленного срока годности. Эффективность стабилизатора определяется составом и количеством компонентов. Количественное и качественное сочетание компонентов в составе стабилизатора по настоящему изобретению определяет его высокие стабилизирующие свойства, не создавая при этом высокую белковую нагрузку на организм пациента, получающего вакцину.

Заявленный набор используется для приготовления стабилизатора, используемого при производстве вакцины желтой лихорадки живой сухой во флаконной форме.

Предлагаемый стабилизатор характеризуется высокими стабилизирующими свойствами. Стабилизатор подходит для создания флаконных форм вакцинных препаратов желтой лихорадки и их полуфабрикатов. Препараты, включающие стабилизатор предлагаемого состава, сохраняют стабильность в течение длительного времени.

Немаловажной особенностью препаратов, содержащих заявленный стабилизатор, является возможность их хранения и эксплуатации в течение длительного срока после вскрытия упаковки без потери качества. Как правило, флаконная форма препарата содержит 10 доз. Однако не все дозы могут быть введены пациентам в течение малого временного отрезка. Сохранение свойств препарата в течение длительного времени после вскрытия упаковки даже при высокой температуре, обусловленной климатической зоной эндемичного района, является значимым преимуществом заявленного изобретения.

Приведенные выше свойства могут быть расценены как технический результат, обеспечиваемый изобретением.

ПОДРОБНОЕ РАСКРЫТИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Ниже приведены пояснения, направленные на лучшее понимание сущности изобретения.

Количество желатина в составе набора стабилизатора может составлять 9-10 г. Более подробно, количество желатина может составлять 9,1; 9,2; 9,3; 9,4; 9,5; 9,6; 9,7; 9,8; 9,9; 10 г.

Компоненты набора могут быть помещены в одну емкость или размещены в различных емкостях.

В конкретном варианте такие компоненты, как L-гистидин, L-аланин, лактоза, сорбит, NaCl, KCl, Na₂HPO₄⋅2H₂O, KH₂PO₄, CaCl₂⋅2H₂O, MgSO₄⋅7H₂O, могут быть размещены в одной емкости, желатин - в другой емкости.

Стабилизатор ВЖЛ готовится путем последовательного или одновременного растворения компонентов набора в воде для инъекций. Воду берут из того расчета, что из набора компонентов может быть приготовлен 1 литр состава стабилизатора.

Соответственно, при приготовлении состава стабилизатора добавляется вода для инъекций - до 1 л.

Растворенные в воде компоненты набора могут добавляться к полуфабрикату вакцины вместе или отдельно. Растворенные в воде компоненты набора могут быть добавлены к полуфабрикату вакцины в виде нескольких растворов.

Компоненты набора могут быть растворены в одной или раздельных емкостях. Компоненты набора могут быть размещены и храниться в виде одного или более водных растворов.

Согласно изобретению, набор компонентов применяется для приготовления стабилизатора, используемого при производстве вакцины желтой лихорадки живой сухой во флаконной форме.

Для определения оптимального количества желатина были проведены сравнительные исследования стабильности серий вакцины СинСаВак с различным содержанием желатина.

ОСУЩЕСТВЛЕНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Следующие примеры приведены для понимания настоящего изобретения. Однако они приведены только с целью иллюстрации и не предназначены для ограничения объема настоящего изобретения.

Количества взятых компонентов определяются объемом изготовляемой партии.

ПОДГОТОВКА И ВЗВЕШИВАНИЕ СЫРЬЯ

Реактивы, используемые для изготовления стабилизатора вакцины, должны соответствовать требованиям Европейской Фармакопеи и подвергаться входному контролю в отделе контроля качества согласно спецификациям.

Взвешивание компонентов набора проводят на электронных весах КтВР.2.2. Для надежности взвешивания перед работой производят калибровку весов согласно инструкции по эксплуатации и СОП «Порядок эксплуатации электронных весов».

NaCl - 8 г

KCl - 0,2 г

Na₂HPO₄⋅2H₂O - 1,13 г

КН₂РО₄ - 0,2 г

CaCl₂⋅2H₂O - 0,13 г

MgSO₄⋅7H₂O - 0,076 г

Лактоза - 61,5 г

Сорбитол - 30,8 г

L-гистидин - 2,4 г

L-аланин - 1,37 г.

ПРОИЗВОДСТВО ПЕРВОГО КОМПОНЕНТА СТАБИЛИЗАТОРА

Приготовление буферного раствора включало в себя ряд последовательных этапов: растворение соответствующих заданному объему навесок солей, лактозы, сорбитола и аминокислот в воде для инъекций (ВДИ) (подтвержденного качества) до 1 литра, смешивание растворов составных частей стабилизатора, отбор проб на микробиологическую чистоту и рН перед фильтрацией, проведение стерилизующей фильтрации с розливом стабилизатора в стеклянные бутылки, их укупорка и маркировка.

Процессы производства первого компонента стабилизатора проводят с соблюдением требований надлежащей производственной практики.

ПРОИЗВОДСТВО ПЕРВОГО КОМПОНЕНТА СТЕРИЛЬНОГО СТАБИЛИЗАТОРА

При стерилизующей фильтрации используют фильтродержатель с гидрофильной мембраной с конечным размером пор 0,2-0,22 мкм.

Стерилизующую фильтрацию проводят с одновременным розливом по 400 мл в стеклянные бутылки, укупоривают резиновыми пробками и закатывают алюминиевыми колпачками; бутыли со стабилизатором маркируют с указанием номера серии, даты изготовления.

В процессе стерилизующей фильтрации отбираются пробы полученного стабилизатора:

- в начале, середине и конце розлива для контроля стерильности системы розлива;

- по окончании розлива проверяют целостность гидрофильной мембраны 0,22 мкм методом точки пузырька. Проверку целостности гидрофильных и гидрофобных мембран многоразовых фильтров-картриджей и капсул с фильтром (далее по тексту - мембрана фильтра) необходимо проводить после работы фильтра. Если целостность мембраны фильтра не подтверждена, то разрешается повторная фильтрация продукта в течение двух часов при использовании другого стерильного фильтра;

- контроль серии полученного стабилизатора проводят в отделе контроля качества (ОКК).

ПРОИЗВОДСТВО ВТОРОГО КОМПОНЕНТА СТАБИЛИЗАТОРА - ЖЕЛАТОЗЫ РАСТВОР (10%)

Состав: желатин - 100 г; вода для инъекций (ВДИ) - до 1 л.

Взвесить навеску желатина на заданный объем серии. Всыпать навеску в стеклянную бутыль и залить расчетным объемом ВДИ. Оставить на ночь при комнатной температуре для набухания желатина. На следующий день бутыль с набухшим желатином помещают в паровой стерилизатор для полного растворения навески желатина при температуре от 126°С до 128°С в течение 90 мин. После охлаждения раствора и осветления яичным белком раствор кипятят в течение 20 мин, горячий раствор фильтруют через префильтр АР 25 и разливают по 300 мл в бутылки объемом 450 мл. Бутылки с раствором укупоривают резиновыми пробками и завальцовывают алюминиевыми колпачками, затем стерилизуют в паровом стерилизаторе при температуре от 119°С до 121°С в течение 60 мин. Срок годности - 6 месяцев. В ОКК контролируют показатели качества желатозы раствора 10%.

ПРОИЗВОДСТВО РАСТВОРА НАТРИЯ ХЛОРИДА (0,9%)

Взвесить навеску натрия хлорида на заданный объем серии раствора (9 г/л).

Налить в реактор ВДИ - 80% от объема серии раствора. Высыпать навеску в реактор, включить мешалку и перемешивать до полного растворения соли. Довести объем натрия хлорида ВДИ до конечного объема. Измерить рН раствора, рН раствора должен быть в пределах от 5,0 до 7,0. Герметизировать реактор, провести стерилизующую фильтрацию.

Разливают раствор при избыточном давлении не более 2 атм в бутылки объемом 250 мл через систему фильтров с конечным размером пор 0,22 мкм. Бутылки укупоривают резиновыми пробками и закатывают алюминиевыми колпачками.

Контроль раствора проводят в ОКК.

РАЗРАБОТКА ЖИДКОГО ПОЛУФАБРИКАТА ВАКЦИНЫ

Получение незараженной/зараженной суспензии куриных эмбрионов проводится в соответствии с TRS №872 (технические рекомендации ВОЗ к производству вакцины желтой лихорадки). Эмбрионированные яйца помещают на 120 ч в инкубатор (Инкубатор Rcom Маш 380 Deluxe МАХ или аналогичный по техническим характеристикам) при температуре от 37,0°С до 38,0°С. На 12 сутки инкубирования незараженные эмбрионированные яйца просматривают под овоскопом (Овоскоп ОН-10 или аналогичный по техническим характеристикам), отбирают яйца, имеющие подвижный зародыш и ясно видимую при просвечивании сеть кровеносных сосудов хорионаллантоисной оболочки. Вскрытие эмбрионов производят в асептических условиях. Изъятые эмбрионы помещают в стакан для гомогенизатора в объеме 72 шт. и добавляют разбавитель - первый компонент стабилизатора вакцины. Количество добавляемого разбавителя добавляют до получения 66 - 70 об.% суспензии.

Содержимое колбы через край сливают в стакан гомогенизатора и гомогенизируют при 15000 об/мин в течение 10 мин. Гомогенат переливают в полипропиленовый флакон и закрывают крышкой. На флакон наклеивают этикетку, на которой указывают номер первичного вирусного сбора, номер гомогената, количество тушек, объем гомогената в мл, дату гомогенизации.

Проводят контроль гомогенатов:

- из каждого флакона с гомогенатом, первичного вирусного сбора, отбирают пробу для контроля стерильности (контроль отделения);

- из одного флакона с гомогенатом отбирают пробы: для контроля специфической активности и на отсутствие микоплазм.

Гомогенат переливают в центрифужные стаканы объемом 1000 мл с добавлением равного объема растворителя - стабилизатора вакцины (первый компонент). Центрифужные стаканы устанавливают в центрифугу и центрифугируют содержимое при 2500 об/мин (2000 × g) в течение 55-65 мин при температуре 0°С. Все операции проводят в асептических условиях под ламинарным укрытием в чистом помещении. Вируссодержащую надосадочную жидкость после центрифугирования сливают в бутыль, добавляют желатозы раствор 10% (второй компонент) до конечной концентрации 1% в жидком полуфабрикате вакцины и доводят объем полуфабриката до заданного, добавляя стабилизатор вакцины (первый компонент).

Полуфабрикат до розлива рекомендуется хранить в охлажденном виде при соблюдении температурного режима 2-8°С. Смесь для розлива хранится ограниченное время с постоянным перемешиванием для сохранения заявленных свойств субстанции и предотвращения формирования осадка.

РОЗЛИВ И УКУПОРКА ВО ФЛАКОНЫ

Розлив осуществляют на разливочной машине, а ручной розлив осуществляется вручную, пипеткой во флаконы из стекла Ф-6R-cl-HCB Nipro PharmaPackaging Ural LLC no 1,0 мл при постоянном перемешивании содержимого бутыли. Укупорка осуществляется пробками 20А с фиксированной высотой шляпки 3,3 мм, силиконизированными, стерильными/готовыми к стерилизации.

Заполненные и укупоренные на высоту 20% флаконы из-под шприцевого устройства машины перемещаются в металлические кассеты, кассеты накрывают стерильными салфетками из двухслойной безворсовой ткани. Салфетки прижимают металлической рамкой. Кассеты по мере наполнения маркируют в соответствии с порядком розлива и устанавливают на полки сушильной камеры лиофилизационной установки.

Процессы производства проводят с соблюдением требований надлежащей производственной практики.

ЛИОФИЛИЗАЦИЯ ВО ФЛАКОНАХ

Сушку проводят на исправных и технически подготовленных аппаратах. При проведении сушки рекомендуется проводить полную загрузку полок или не менее 50% загрузки машины.

ВАЛЬЦОВКА ФЛАКОНОВ

Вальцовку осуществляют на разливочной машине колпачки алюминиевые и комбинированные для укупорки лекарственных средств. Вальцовка осуществляется в стандартном режиме, без каких-либо изменений в цикле.

КОНТРОЛЬ СТАБИЛЬНОСТИ ИМИТАТОРА ТАБЛЕТКИ ПРЕПАРАТА ВО ФЛАКОНАХ

Испытания препарата на соответствие заявленным требованиям проводят в специализированной аккредитованной лаборатории по утвержденным и квалифицированным методикам. Также производитель может выбрать свой дизайн исследований, исходя из целей проведения данного исследования. Объем и параметры испытаний определяются производителем.

Рекомендовано: на первых этапах исследования предлагаемой технологии проводить первичные испытания для сокращения расходов на полноценный контроль препарата, так как в этом нет необходимости. На второй стадии испытаний необходим весь спектр испытаний в соответствии со спецификацией на препарат, но не меньше, чем утверждено в рекомендациях ВОЗ к препарату - вакцина желтой лихорадки.

Предлагаемый алгоритм первичных испытаний:

Испытания стабильности имитатора во флаконах проводить на предмет устойчивости таблетки лиофилизата к влияниям окружающей среды, включая воздействие низких и высоких температур. Количество испытуемых образцов в каждой группе должно составлять 100 флаконов. Каждый флакон в группе проходит визуальный контроль, высота столба таблетки, подъемы таблетки также отмечаются маркером. Оценка результатов испытаний проводится путем визуального контроля на основании фиксации видимых изменений таблетки.

При проведении анализа испытаний модификации технологии производства готовой формы препарата вакцины желтой лихорадки должно быть учтено соблюдение всех требований надлежащей производственной практики, условий производства имитатора на всех этапах исследования, учтены отклонения от спецификации и отклонения в процессе производства. Необходимо соблюдать требования системы менеджмента качества в области обеспечения качества производимой продукции.

Данная технология применима к вакцине желтой лихорадки живой сухой и ни к какой другой. Вакцина должна производиться на аттенуированных штаммах вируса на первичной культуре клеток - эмбрионированные яйца кур.

ИСПЫТАНИЯ СТАБИЛЬНОСТИ (ВАКЦИНА ДЛЯ ПРОФИЛАКТИКИ ЖЕЛТОЙ ЛИХОРАДКИ ЖИВАЯ АТТЕНУИРОВАННАЯ) С РАЗЛИЧНЫМ СОДЕРЖАНИЕМ ЖЕЛАТИНА

Для определения необходимого и достаточного содержания желатина в вакцине СинСаВак (Вакцина для профилактики желтой лихорадки живая аттенуированная) было проведено изучение стабильности 12 серий препарата с различным содержанием желатина (таблица 2).

Условия храпения: температура от 2°С до 8°С.

Длительность испытания: 2 года и последующие 3 месяца. Исследования проводили раз в 3 месяца (8 контрольных точек, начиная с 0 точка выпуска).

Методы испытаний. Методы испытаний стабильности соответствовали методам испытания готового продукта, описанным в методиках испытаний на основании нормативной документации:

Испытания проводили согласно СОИ: Код №СОП-06000-043 «Испытание стабильности препаратов», GPMP/ICH/2736/99 Stability Testing of new Drug Substances and Products.

При оценке критериев качества вакцины СинСаВак (Вакцина для профилактики желтой лихорадки живая аттенуированная) в точке 0 было показано, что серии препарата, не содержащие желатин (ЭП100417/1, ЭП100417/2, ЭП100417/3), а также серии с содержанием 0,5% желатина (ЭП110417/1, ЭП110417/2, ЭП110417/3) не прошли испытание по показателям «Описание» и «Термостабильность». В указанных сериях при визуальном просмотре флаконов в проходящем свете на белом фоне таблетка имела неровные края, трещины вдоль всей таблетки или множественные тонкие трещины на верхней части таблетки.

После закладки испытуемых образцов для контроля по показателю «Термостабильность» таблетка растаяла ранее регламентированного времени проведения испытания при температуре от 36°С до 38°С, что не соответствует требованиям НД.

Серии ЭП130417/1, ЭП130417/2, ЭШ130417/3 (с содержанием желатина 3%) и 001, 002, 003 (с содержанием желатина 1%) полностью соответствовали требованиям НД и были использованы в дальнейших испытаниях стабильности в течение 2-х лет и последующих 3-х месяцев.

Результаты контроля термостабильности, биохимического контроля (описание, время растворения, цветность, прозрачность, потеря в массе при высушивании, белковый азот, бактериальные эндотоксины), содержание овальбумина, аномальной токсичности вакцины СинСаВак указывают на соответствие серий ЭП130417/1, ЭП130417/2, ЭП1130417/3 (с содержанием желатина 3%) и 001, 002, 003 (с содержанием желатина 1%) требованиям НД в течение всего времени испытания стабильности.

Результаты испытания стабильности серий вакцины СинСаВак по основному критическому показателю (специфическая активность) представлены в таблице 4.

Результаты испытаний показывают незначительное снижение специфической активности при хранении в течение 2-х лет и последующих 3-х месяцев у серий СинСаВак (Вакцина для профилактики желтой лихорадки живая аттенуированная) ЭП130417/1, ЭП130417/2, ЭП1130417/3, 001, 002, 003. Минимальный титр вируса значительно превышают минимально допустимые значения по спецификации (min допустимое значение титра=3,2 lg БОЕ/доза). Статистически значимых различий в уровне специфической активности серий вакцины, с концентрацией желатина 1 и 3%, не установлено.

Таким образом, показано, что серии вакцины СинСаВак (Вакцина для профилактики желтой лихорадки) с содержанием желатина менее 1% не соответствуют требованиям НД. Серии препарата с концентрацией желатина 1% и 3% сохраняют свои свойства в пределах установленных норм в течение 2-х лет и 3-х месяцев при температуре хранения от 2°С до 8°С.

Учитывая полученные результаты и основываясь на одном из основных принципов разработки вакцин (внесение минимального количества чужеродного вещества в организм человека при сохранении эффективности для минимизации иммуногенных компонентов в составе препарата и для снижения белковой нагрузки), можно сделать вывод о том, что концентрация желатина 1% (5 мг на дозу) является оптимальной при использовании флаконов в качестве контейнеров для первичной упаковки вакцины.

Группа изобретений относится к химико-фармацевтической промышленности и касается нового состава для приготовления стабилизатора, используемого при производстве вакцины желтой лихорадки живой сухой во флаконной форме, содержащей следующие компоненты: Натрия хлорид (NaCl) - 8 г; Калия хлорид (KCl) - 0,2 г; Динатрия фосфат дигидрат (Na₂HPO₄⋅2H₂O) - 1,13 г; Калия дигидрофосфат (KH₂PO₄) - 0,2 г; Кальция хлорида дигидрат (CaCl₂⋅2H₂O) - 0,13 г; Магния сульфат гептагидрат (MgSO₄⋅7H₂O) - 0,076 г; Лактоза - 61,5 г; Сорбитол - 30,8 г; L-гистидин - 2,4 г; L-аланин - 1,37 г; Желатин - 9-10 г. Стабилизатор готовится растворением набора компонентов в воде для инъекций. Техническим результатом группы изобретений является обеспечение высоких стабилизирующих свойств состава, не создавая при этом высокую белковую нагрузку на организм пациента, получающего вакцину. Предлагаемый стабилизатор характеризуется высокими стабилизирующими свойствами и подходит для создания флаконных форм вакцинных препаратов желтой лихорадки и их полуфабрикатов. Препараты, включающие стабилизатор предлагаемого состава, сохраняют стабильность в течение длительного времени, в том числе, в течение длительного срока после вскрытия упаковки без потери качества и даже при высокой температуре, обусловленной климатической зоной эндемичного района. 2 н. и 5 з.п. ф-лы, 4 табл.

1. Набор для приготовления стабилизатора, используемого при производстве вакцины желтой лихорадки живой сухой во флаконной форме, содержащий следующие компоненты:

Натрия хлорид (NaCl) - 8 г

Калия хлорид (KCl) - 0,2 г

Динатрия фосфат дигидрат (Na₂HPO₄⋅2H₂O) - 1,13 г

Калия дигидрофосфат (KH₂PO₄) - 0,2 г

Кальция хлорида дигидрат (CaCl₂⋅2H₂O) - 0,13 г

Магния сульфат гептагидрат (MgSO₄⋅7H₂O) - 0,076 г

Лактоза - 61,5 г

Сорбитол - 30,8 г

L-гистидин - 2,4 г

L-аланин - 1,37 г

Желатин - 9-10 г.

2. Набор по п.1, в котором содержание желатина составляет 9 г.

3. Набор по п.1, в котором содержание желатина составляет 10 г.

4. Набор по п.1, в котором компоненты помещены в одну емкость.

5. Набор по п.1, в котором компоненты размещены в разных емкостях.

6. Стабилизатор, приготовленный растворением набора компонентов по п.1 в воде для инъекций.

7. Стабилизатор по п.6, в котором растворенные компоненты набора добавляют к полуфабрикату вакцины последовательно.