Новые агенты на основе изопулегола, вызывающие гипотермию у животных Российский патент 2024 года по МПК A61K31/4178 A61P43/00 C07D405/12 

Изобретение относится к области медицинской химии. Описываются новые производные октагидро-2H-хромена общей формулы I

где R может быть H, алкил, галоген, OMe, в том числе их стереоизомеры и фармацевтически приемлемые соли, предназначенные для инициирования гипотермического состояния у млекопитающих.

Актуальной задачей для сохранения жизни пациентов в полевых условиях при различных травмах, которые требуют неотложной медицинской помощи, и/или при необходимости транспортировки до пункта оказания квалифицированной помощи при катастрофах и авариях, является разработка фармакологического средства для создания обратимой гипотермии. Терапевтическая эффективность гипотермии подтверждена многочисленными клиническими исследованиями [J. Cereb. Blood Flow Metab. 2016]. Гипотермия широко и успешно применяется при остановке сердца или ишемии головного мозга [Trends Cardiovasc. Med. 2016, Pediatr. Res. 2017].

В настоящее время известны способы введения в состояние гипотермии, используя комплексное воздействие на организм фармакологических средств и устройств для охлаждения тела [US 7951183]. Наиболее близким аналогом технического решения по формированию состояния гипотермии без использования устройств для охлаждения тела, являются изобретения, в которых используются смеси фармацевтических препаратов [US 8969297, RU 2669400 C1]. Так в патенте [RU 2669400 C1] используется лекарственная смесь, содержащая бета-блокатор пропранолол, симпатолитик резерпин, антиангинальный препарат ивабрадин, антигистаминовый препарат дифенгидрамин, нейролептический препарат перициазин, серотонинергическое средство серотонина гидрохлорид, антитиреоидное средство пропицил, сульфат магния и фармацевтически приемлемый растворитель. Недостатком этого средства является применение сложной многокомпонентной смеси препаратов, каждый из которых имеет собственные побочные эффекты, и возможность только внутривенного введения смеси.

Задачей настоящего изобретения является разработка и создание новых агентов для инициирования гипотермии у млекопитающих.

Технический результат: получены новые производные октагидро-2H-хромена, показана их способность вызывать обратимую гипотермию у млекопитающих.

Поставленная задача решается использованием в качестве агентов, вызывающих состояние гипотермии, новых соединений общей формулы I, у которых выявлена способность обратимо вводить животных (мыши и крысы) в состояние гипотермии.

Соединения общей формулы I могут быть синтезированы взаимодействием 2-хлорацетамидов II с имидазолом III (Фиг. 1).

Соединения II могут быть синтезированы из изопулегола IV и альдегидов V в хлорацетонитриле (Фиг. 2).

Для получения различных стереоизомеров можно использовать разные энантиомеры изопулегола в качестве исходных соединений.

При пероральном введении соединений общей формулы I лабораторным мышам и крысам наблюдается быстрое понижение температуры тела, которая через 5 часов восстанавливается практически до значений контрольных животных.

Соединения общей формулы I, после проведения углубленных фармакологических исследований, могут использоваться для дальнейшей разработки новых высокоэффективных агентов для инициирования гипотермии у млекопитающих.

Ниже приводятся конкретные примеры реализации заявляемого технического решения.

Спектральные исследования выполнены в Химическом Сервисном Центре коллективного пользования СО РАН.

Пример 1. Синтез 2-хлоро-N-((2R,4R,4aS,7R,8aR)-4,7-диметил-2-(п-толил)октагидро-2H-хромен-4-ил)ацетамида IIa (Фиг. 3).

Смесь (-)-изопулегола IV 1.000 г (6.49 ммоль), п-метилбензальдегида Va 0.779 г (6.49 ммоль) и хлорацетонитрила (2 мл) охлаждали до 0°С и при перемешивании добавляли концентрированную серную кислоту 1.264 г (12.9 ммоль). Затем смесь перемешивали в течение 2 часов. Для удаления остаточной кислоты добавляли насыщенный водный раствор NaHCO₃ до полной нейтрализации, а затем добавляли EtOAc. После этого органическую фазу промывали насыщенным водным раствором NaCl, сушили над Na₂SO₄. Продукт был очищен методом колоночной хроматографии на силикагеле, в качестве элюента использовалась смесь гексан-этилацетат. Выход соединения IIa составил 55%.

¹H NMR (400 MHz, CDCl₃, δ, м.д., J/Гц): 0.93 (d, J = 6.5, 3H), 0.94-1.01 (m, 1H), 1.08-1.19 (m, 2H), 1.43-1.51 (m, 1H), 1.49 (s, 3H), 1.69-1.79 (m, 3H), 2.00 (dm, J = 12.5, 1H), 2.10-2.15 (m, 1H), 2.29 (s, 3H), 2.34 (dd, J = 14.1, 1.9, 1H), 3.41 (ddd, J = 10.5, 10.2, 4.2, 1H), 3.91 (m, 2H), 4.47 (dd, J = 11.7, 1.7, 1H), 6.37 (brs, 1H), 7.09 (d, J = 7.8, 2H), 7.20 (d, J = 7.8, 2H).

¹³C NMR (101 MHz, CDCl₃, δ, м.д.): 18.41, 20.95, 21.98, 23.43, 31.19, 34.17, 41.37, 42.85, 45.23, 47.56, 55.55, 75.32, 75.68, 125.81, 128.81, 136.91, 138.99, 164.62.

= +0.6 (c 0.31, CHCl₃). T_пл = 149.6-153.1°C.

Найдено: m/z= 349.1800 [M]⁺ (C₂₀H₂₈ClNO₂)⁺. Вычислено: m/z= 349.1803.

Пример 2. Синтез 2-хлоро-N-((2R,4R,4aS,7R,8aR)-2-(4-изопропилфенил)-4,7-диметилоктагидро-2H-хромен-4-ил)ацетамида Iib (Фиг. 4).

Смесь (-)-изопулегола IV 1.000 г (6.49 ммоль), п-изопропилбензальдегида Vb 0.960 г (6.49 ммоль) и хлорацетонитрила (2 мл) охлаждали до 0°С и при перемешивании добавляли концентрированную серную кислоту 1.264 г (12.9 ммоль). Затем смесь перемешивали в течение 2 часов. Для удаления остаточной кислоты добавляли насыщенный водный раствор NaHCO₃ до полной нейтрализации, а затем добавляли EtOAc. После этого органическую фазу промывали насыщенным водным раствором NaCl, сушили над Na₂SO₄. Продукт был очищен методом колоночной хроматографии на силикагеле, в качестве элюента использовалась смесь гексан-этилацетат. Выход соединения IIb составил 40%.

¹H NMR (400 MHz, CDCl₃, δ, м.д., J/Гц): 0.90-1.03 (m, 1H), 0.93 (d, J = 6.5, 3H), 1.07-1.22 (m, 2H), 1.18 (s, 3H), 1.20 (s, 3H), 1.43-1.52 (m, 1H), 1.50 (s, 3H), 1.68-1.81 (m, 3H), 2.00 (dm, J = 12.5, 1H), 2.10-2.19 (m, 1H), 2.35 (brd, J = 13.3, 1H), 2.84(sept, J = 6.7, 1H), 3.42 (ddm, J = 10.5, 10.2, 1H), 3.91 (s, 2H), 4.48 (brd, J = 11.7, 1H), 6.38 (brs, 1H), 7.14 (d, J = 7.7, 2H), 7.25 (d, J = 7.7, 2H).

¹³C NMR (101 MHz, CDCl₃, δ, м.д.): 18.40, 21.98, 23.40, 23.84, 23.88, 31.16, 33.68, 34.14, 41.34, 42.84, 45.09, 47.51, 55.54, 75.37, 75.67, 125.91, 126.21, 139.27, 148.01, 164.63.

=+8.0 (c 0.60, CHCl₃). T_пл = 112.5-120.3°C.

Найдено: m/z= 377.2121 [M]⁺ (C₂₂H₃₂ClNO₂)⁺. Вычислено: m/z= 377.2116.

Пример 3. Синтез 2-хлоро-N-((2R,4S,4aS,7R,8aR)-2-(4-изопропилфенил)-4,7-диметилоктагидро-2H-хромен-4-ил)ацетамида S-IIb (Фиг. 5).

Смесь (-)-изопулегола IV 1.000 г (6.49 ммоль), п-изопропилбензальдегида Vb 0.960 г (6.49 ммоль) и хлорацетонитрила (2 мл) охлаждали до 0°С и при перемешивании добавляли концентрированную серную кислоту 1.264 г (12.9 ммоль). Затем смесь перемешивали в течение 2 часов. Для удаления остаточной кислоты добавляли насыщенный водный раствор NaHCO₃ до полной нейтрализации, а затем добавляли EtOAc. После этого органическую фазу промывали насыщенным водным раствором NaCl, сушили над Na₂SO₄. Продукт был очищен методом колоночной хроматографии на силикагеле, в качестве элюента использовалась смесь гексан-этилацетат. Выход соединения S-IIb составил 30%.

¹H NMR (400 MHz, CDCl₃, δ, м.д., J/Гц): 0.91-1.07 (m, 2H), 0.95 (d, J = 6.5, 3H), 1.07-1.31 (m, 3H), 1.19 (s, 3H), 1.20 (s, 3H), 1.42-1.55 (m, 2H), 1.44 (s, 3H), 1.76-1.82 (m, 1H), 1.94-2.00 (m, 1H), 2.05 (dm, J = 12.5, 1H), 2.85 (sept, J = 6.8, 1H), 2.99 (dd, J = 14.1, 1.9, 1H), 3.44 (ddd, J = 10.5, 10.2, 4.2, 1H), 3.98-4.09 (m, 2H), 4.47 (d, J = 11.7, 1H), 6.67 (brs, 1H), 7.14 (d, J = 7.9, 2H), 7.23 (d, J = 7.9, 2H).

¹³C NMR (101 MHz, CDCl₃, δ, м.д.): 21.91, 22.90, 23.85, 23.88, 24.16, 31.14, 33.69, 34.23, 41.35, 42.19, 43.34, 50.64, 54.15, 74.56, 74.96, 125.80, 126.18, 139.25, 147.89, 164.68.

=+34.7 (c 0.17, CHCl₃). T_пл = 128.1-136.5°C.

Найдено: m/z= 377.2122 [M]⁺ (C₂₂H₃₂ClNO₂)⁺. Вычислено: m/z= 377.2116.

Пример 4. Синтез N-((2R,4R,4aS,7R,8aR)-4,7-диметил-2-(п-толил)октагидро-2H-хромен-4-ил)-2-(1H-имидазол-1-ил)ацетамида Ia (Фиг. 6).

К 0.009 г (0.37 ммоль) NaH в свежеперегнанном ТГФ (3 мл) добавили 0.024 г (0.34 ммоль) имидазола. Перемешивали реакционную смесь в течение 10 минут, после этого добавили раствор соединения IIa 0.120 г (0.34 ммоль) в 2 мл ТГФ. Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 3 часов. После этого в реакционную смесь добавили 10 мл EtOAc и промыли насыщенным раствором NaCl (3x10 мл), органическую фазу сушили над Na₂SO₄. Затем отфильтровали от осушителя, и растворитель отогнали на ротационном испарителе. Целевое соединение было очищено методом колоночной хроматографии на силикагеле, в качестве элюента использовалась смесь гексан-этилацетат, ацетон. Выход соединения Ia составил 88%.

¹H NMR (400 MHz, CDCl₃, δ, м.д., J/Гц): 7.50 (s, 1H, H-15), 7.19 (d, J=8.0, 2H, H-20, H-22), 7.15 (s, 1H, H-16), 7.09 (d, J=8.1, 3H, H-19, H-23), 6.92 (s, 1H, H-17), 5.21 (s, 1H, NH), 4.53 (s, 2H, H-14), 4.43 (dd, J=11.9, 2.2, 1H, H-3), 3.35 (td, J=10.4, 4.2, 1H, H-1), 2.32 - 2.24 (m, 1H, H-4), 2.29 (s, 3H, H-24), 2.09 - 2.00 (m, 1H, H-4’), 2.00 - 1.92 (m, 1H, H-10), 1.71 - 1.63 (m, 1H, H-8), 1.58 (ddd, J=12.9, 9.9, 3.2, 1H, H-6), 1.47 - 1.35 (m, 2H, H-9, H-7), 1.39 (s, 3H, H-12), 1.15 - 0.95 (m, 2H, H-10’, H-7’), 0.93 - 0.80 (m, 1H, H-8’), 0.90 (d, J=6.6, 3H, H-11).

¹³C NMR (101 MHz, CDCl₃, δ, м.д.): 165.64 (C-13), 138.93 (C-18), 137.92 (C-15), 137.01 (C-21), 130.66 (C-16), 128.86 (C-19, C-23), 125.77 (C-20, C-22), 119.38 (C-17), 75.62 (C-1), 75.27 (C-3), 55.68 (C-5), 50.61 (C-14), 47.57 (C-6), 45.43 (C-4), 41.30 (C-10), 34.08 (C-8), 31.13 (C-9), 23.36 (C-7), 21.95 (C-11), 20.98 (C-24), 18.54 (C-12).

= +10.0 (c 0.14, CHCl₃). T_пл = 231.1-234.4°C.

Найдено: m/z= 381.2408 [М]⁺ (C₂₃H₃₁N₃O)⁺. Вычислено: m/z= 381.2411.

Пример 5. Синтез 2-(1H-имидазол-1-ил)-N-((2R,4R,4aS,7R,8aR)-2-(4-изопропилфенил)-4,7-диметилоктагидро-2H-хромен-4-ил)ацетамида Ib (Фиг. 7).

К 0.045 г (1.86 ммоль) NaH в свежеперегнанном ТГФ (5 мл) добавили 0.102 г (1.50 ммоль) имидазола. Перемешивали реакционную смесь в течение 10 минут, после этого добавили раствор соединения IIb 0.470 г (1.25 ммоль) в 5 мл ТГФ. Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 3 часов. После этого в реакционную смесь добавили 10 мл EtOAc и промыли насыщенным раствором NaCl (3x10 мл), органическую фазу сушили над Na₂SO₄. Затем отфильтровали от осушителя, и растворитель отогнали на ротационном испарителе. Целевое соединение было очищено методом колоночной хроматографии на силикагеле, в качестве элюента использовалась смесь гексан-этилацетат, ацетон. Выход соединения Ib составил 82%.

¹H NMR (400 MHz, CDCl₃, δ, м.д., J/Гц): 7.47 (s, 1H, H-15), 7.23 - 7.20 (m, 2H, H-20, H-22), 7.16 - 7.11 (m, 3H, H-16, H-19, H-23), 6.91 (s, 1H, H-17), 5.43 (s, 1H, NH), 4.51 (s, 2H, H-14), 4.43 (dd, J=11.8, 2.1, 1H, H-3), 3.35 (td, J=10.4, 4.3, 1H, H-1), 2.84 (hept, J=6.9, 1H, H-24), 2.29 (dd, J=13.3, 2.2, 1H, H-4), 2.13 - 2.04 (m, 1H, H-4’), 1.99 - 1.92 (m, 1H, H-10), 1.70 - 1.55 (m, 2H, H-6, H-8), 1.49 - 1.39 (m, 2H, H-9, H-7), 1.39 (s, 3H, H-12), 1.18 (d, J=6.9, 6H, H-25, H-26), 1.14 - 1.04 (m, 1H, H-10’), 1.06 - 0.95 (m, 1H, H-7’), 0.89 (d, J=6.5, 3H, H-11), 0.89 - 0.79 (m, 1H, H-8’).

¹³C NMR (101 MHz, CDCl₃, δ, м.д.): 165.63 (C-13), 148.12 (C-21), 139.19 (C-18), 137.85 (C-15), 130.48 (C-16), 126.25 (C-19, C-23), 125.86 (C-20, C-22), 119.43 (C-17), 75.64 (C-1), 75.34 (C-3), 55.68 (C-5), 50.50 (C-14), 47.51 (C-6), 45.30 (C-4), 41.28 (C-10), 34.05 (C-8), 33.68 (C-24), 31.11 (C-9), 23.88, 23.84 (C-25, C-26), 23.36 (C-7), 21.92 (C-11), 18.54 (C-12).

= +7.69 (c 0.13, CHCl₃). T_пл = 205.8°C с разложением.

Найдено: m/z= 409.2727 [М]⁺ (C₂₅H₃₅N₃O₂)⁺. Вычислено: m/z= 409.2724.

Пример 6. Синтез 2-(1H-имидазол-1-ил)-N-((2R,4S,4aS,7R,8aR)-2-(4-изопропилфенил)-4,7-диметилоктагидро-2H-хромен-4-ил)ацетамида S-Ib (Фиг. 8).

К 0.036 г (1.50 ммоль) NaH в свежеперегнанном ТГФ (5 мл) добавили 0.088 г (1.30 ммоль) имидазола. Перемешивали реакционную смесь в течение 10 минут, после этого добавили раствор соединения S-IIb 0.415 г (1.10 ммоль) в 5 мл ТГФ. Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 3 часов. После этого в реакционную смесь добавили 10 мл EtOAc и промыли насыщенным раствором NaCl (3x10 мл), органическую фазу сушили над Na₂SO₄. Затем отфильтровали от осушителя, и растворитель отогнали на ротационном испарителе. Целевое соединение было очищено методом колоночной хроматографии на силикагеле, в качестве элюента использовалась смесь гексан-этилацетат, ацетон. Выход соединения S-Ib составил 75%.

¹H NMR (400 MHz, CDCl₃, δ, м.д., J/Гц): 7.58 (s, 1H, H-15), 7.23 - 7.18 (m, 3H, H-16, H-20, H-22), 7.14 (d, J=8.2, 2H, H-19, H-23), 7.00 (s, 1H, H-17), 5.16 (s, 1H, NH), 4.62 (s, 2H, H-14), 4.28 (dd, J=11.7, 2.0, 1H, H-1), 2.98 - 2.90 (m, 2H, H-3, H-4), 2.84 (hept, J=7.0, 1H, H-24), 1.94 - 1.88 (m, 1H, H-10), 1.72 (dq, J=13.1, 3.3, 1H, H-7), 1.64 (dt, J=12.9, 2.9, 1H, H-8), 1.44 (dd, J=14.0, 11.8, 1H, H-4’), 1.37 (s, 3H, H-25), 1.31 - 1.16 (m, 7H, H-9, H-25, H-26), 1.15 - 1.07 (m, 1H, H-6), 1.01 (td, J=12.2, 10.7, 1H, H-10’), 0.90 - 0.78 (m, 4H, H-11, H-8’) 0.37 (qd, J=12.8, 3.5, 1H, H-7’).

¹³C NMR (101 MHz, CDCl₃, δ, м.д.): 165.93 (C-13), 147.95 (C-21), 138.98 (C-18), 137.96 (C-15), 131.02 (C-16), 126.18 (C-19, C-23), 125.69 (C-20, C-22), 119.47 (C-17), 74.79 (C-1), 74.47 (C-3), 54.01 (C-5), 50.76 (C-14), 50.02 (C-6), 42.03 (C-4), 41.11 (C-10), 33.96 (C-8), 33.65 (C-24), 30.92 (C-9), 24.07 (C-12), 23.83, 23.85 (C-25, C-26), 22.41 (C-7), 21.76 (C-11).

= −5.9 (c 0.27, CHCl₃).

Найдено: m/z= 409.2727 [М]⁺ (C₂₅H₃₅N₃O₂)⁺. Вычислено: m/z= 409.2724.

Пример 7. Синтез N-((2R,4R,4aS,7R,8aR)-4,7-диметил-2-(4-фторфенил)октагидро-2H-хромен-4-ил)-2-(1H-имидазол-1-ил)ацетамида Ic (Фиг. 9).

К 0.007 г (0.30 ммоль) NaH в свежеперегнанном ТГФ (2 мл) добавили 0.018 г (0.27 ммоль) имидазола. Перемешивали реакционную смесь в течение 10 минут, после этого добавили раствор соединения IIc 0.082 г (0.23 ммоль) в 3 мл ТГФ. Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 3 часов. После этого в реакционную смесь добавили 10 мл EtOAc и промыли насыщенным раствором NaCl (3x10 мл), органическую фазу сушили над Na₂SO₄. Затем отфильтровали от осушителя, и растворитель отогнали на ротационном испарителе. Целевое соединение было очищено методом колоночной хроматографии на силикагеле, в качестве элюента использовалась смесь гексан-этилацетат, ацетон. Выход соединения Ic составил 65%.

¹H NMR (400 MHz, CDCl₃, δ, м.д., J/Гц): 7.52 (s, 1H, H-15), 7.30 - 7.25 (m, 2H, H-19, H-23), 7.16 (s, 1H, H-16), 7.00 - 6.94 (m, 2H, H-20, H-22), 6.93 (s, 1H, H-17), 5.12 (s, 1H, NH), 4.54 (s, 2H, H-14), 4.44 (dd, J=11.9, 2.1, 1H, H-3), 3.35 (td, J=10.4, 4.2, 1H, H-1), 2.29 (dd, J=13.3, 2.2, 1H, H-4), 2.04 (t, J=12.6, 1H, H-4’), 2.00 - 1.93 (m, 1H, H-10), 1.71 - 1.64 (m, 1H, H-8), 1.58 (ddd, J=12.8, 9.9, 3.2, 1H, H-6), 1.46 - 1.35 (m, 2H, H-9, H-7), 1.38 (s, 3H, H-12), 1.10 (q, J=11.8, 1H, H-10’), 1.01 (qd, J=12.9, 3.4, 1H, H-7’), 0.90 (d, J=6.5, 3H, H-11), 0.92 - 0.82 (m, 1H, H-8’).

¹³C NMR (101 MHz, CDCl₃, δ, м.д.): 165.72 (C-13), 162.86 (C-21), 137.93 (C-15), 137.76, 137.74 (C-18), 130.74 (C-16), 127.52, 127.46 (C-19, C-23), 119.35 (C-17), 115.07, 114.93 (C-20, C-22), 75.70 (C-1), 74.78 (C-3), 55.60 (C-5), 50.64 (C-14), 47.47 (C-6), 45.46 (C-4), 41.26 (C-10), 34.05 (C-8), 31.13 (C-9), 23.32 (C-7), 21.92 (C-11), 18.55 (C-12).

= +7.65 (c 0.18, CHCl₃). T_пл = 223.2-224.3°C.

Найдено: m/z= 385.2163 [М]⁺ (C₂₂H₂₈N₃O₂F)⁺. Вычислено: m/z= 385.2160.

Пример 8. Синтез 2-(1H-имидазол-1-ил)-N-((2R,4R,4aS,7R,8aR)-2-(4-метоксифенил)-4,7-диметилоктагидро-2H-хромен-4-ил)ацетамида Id (Фиг. 10).

К 0.011 г (0.47 ммоль) NaH в свежеперегнанном ТГФ (2 мл) добавили 0.030 г (0.43 ммоль) имидазола. Перемешивали реакционную смесь в течение 10 минут, после этого добавили раствор соединения IId 0.130 г (0.36 ммоль) в 3 мл ТГФ. Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 3 часов. После этого в реакционную смесь добавили 10 мл EtOAc и промыли насыщенным раствором NaCl (3x10 мл), органическую фазу сушили над Na₂SO₄. Затем отфильтровали от осушителя, и растворитель отогнали на ротационном испарителе. Целевое соединение было очищено методом колоночной хроматографии на силикагеле, в качестве элюента использовалась смесь гексан-этилацетат, ацетон. Выход соединения Id составил 53%.

¹H NMR (400 MHz, CDCl₃, δ, м.д., J/Гц): 7.46 (s, 1H, H-15), 7.23 - 7.19 (m, 2H, H-119, H-23), 7.11 (s, 1H, H-16), 6.91 (s, 1H, H-17), 6.84 - 6.77 (m, 2H, H-20, H-22), 4.50 (s, 2H, H-14), 4.40 (d, J=11.7, 1H, H-3), 3.74 (s, 3H, H-24), 3.34 (td, J=10.6, 3.7, 1H, H-1), 2.25 (d, J=13.5, 1H, H-4), 2.12 - 2.04 (m, 1H, H-4’), 1.94 (d, J=12.5, 1H, H-10), 1.69 - 1.56 (m, 2H, H-8, H-6), 1.47 - 1.38 (m, 2H, H-7, H-9), 1.37 (s, 3H, H-12), 1.12 - 0.95 (m, 2H, H-10’, H-7’), 0.88 (d, J=5.9, 3H, H-11), 0.88 - 0.79 (m, 1H, H-8’).

¹³C NMR (101 MHz, CDCl₃, δ, м.д.): 165.62 (C-13), 158.79 (C-21), 134.06 (C-18), 137.80 (C-15), 130.32 (C-16), 127.09 (C-19, C-23), 113.52 (C-20, C-22), 119.43 (C-17), 75.59 (C-1), 74.98 (C-3), 55.61 (C-5), 55.11 (C-24), 50.39 (C-14), 47.30 (C-6), 45.20 (C-4), 41.23 (C-10), 33.98 (C-8), 31.06 (C-9), 23.29 (C-7), 21.91 (C-11), 18.52 (C-12).

= +5.55 (c 0.36, CHCl₃). T_пл = 216.8-222.6°C.

Найдено: m/z= 397.2356 [М]⁺ (C₂₃H₃₁N₃O₃)⁺. Вычислено: m/z= 397.2360.

Пример 9. Синтез N-((2R,4R,4aS,7R,8aR)-4,7-диметил-2-фенилоктагидро-2H-хромен-4-ил)-2-(1H-имидазол-1-ил)ацетамида Ie (Фиг. 11).

К 0.011 г (0.45 ммоль) NaH в свежеперегнанном ТГФ (2 мл) добавили 0.029 г (0.42 ммоль) имидазола. Перемешивали реакционную смесь в течение 10 минут, после этого добавили раствор соединения IIe 0.118 г (0.35 ммоль) в 3 мл ТГФ. Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 3 часов. После этого в реакционную смесь добавили 10 мл EtOAc и промыли насыщенным раствором NaCl (3x10 мл), органическую фазу сушили над Na₂SO₄. Затем отфильтровали от осушителя, и растворитель отогнали на ротационном испарителе. Целевое соединение было очищено методом колоночной хроматографии на силикагеле, в качестве элюента использовалась смесь гексан-этилацетат, ацетон. Выход соединения Ie составил 70%.

¹H NMR (400 MHz, CDCl₃, δ, м.д., J/Гц): 7.39 (s, 1H, H-15), 7.23 - 7.17 (m, 4H, H-19, H-20, H-22, H-23), 7.16 - 7.10 (m, 1H, H-21), 6.91 (s, 1H, H-16), 6.87 (s, 1H, H-17), 4.44 - 4.37 (m, 3H, H-14, H-3), 3.33 (td, J=10.4, 4.1, 1H, H-1), 2.17 (dt, J=13.2, 2.0, 1H, H-4), 2.04 (t, J=12.5, 1H, H-4’), 1.92-1.85 (m, 1H, H-10), 1.69 - 1.58 (m, 2H, H-8, H-6), 1.56-1.50 (m, 1H, H-7), 1.40-1.31 (m, 1H, H-9), 1.34 (s, 3H, H-12), 1.08 - 0.92 (m, 2H, H-10’, H-7’), 0.88 - 0.76 (m, 1H, H-8’), 0.83 (d, J=6.8, 3H, H-11).

¹³C NMR (101 MHz, CDCl₃, δ, м.д.): 165.79 (C-13), 141.55 (C-18), 137.40 (C-15), 128.54 (C-16), 127.99 (C-20, C-22), 127.25 (C-21), 125.70 (C-19, C-23), 119.71 (C-17), 75.64 (C-1), 75.41 (C-3), 55.25 (C-5), 49.76 (C-14), 46.90 (C-6), 44.95 (C-4), 41.01 (C-10), 33.88 (C-8), 30.97 (C-9), 23.22 (C-7), 21.70 (C-11), 18.13 (C-12).

= −1.73 (c 0.23, CHCl₃). T_пл = 235.2°C с разложением.

Найдено: m/z= 367.2255 [М]⁺ (C₂₂H₂₉N₃O₂)⁺. Вычислено: m/z= 367.2254.

Пример 10. Изучение гипотермического эффекта полученных соединений на мышах.

Все эксперименты были проведены на самцах мышей линии CD-1 массой 22-25 г (SPF-виварий Института цитологии и генетики Сибирского отделения РАН). Экспериментальные группы были сформированы по 6 животных в каждой. Агенты растворяли в водном растворе, содержащем 0.5% Tween 80, непосредственно перед использованием и вводили однократно внутрижелудочно в дозе 5 мг/кг. Контрольным животным вводили соответствующий растворитель. Температура тела животных измерялась ректально через заданные промежутки времени: 0, 0.5, 1, 2, 4, 5 ч.

На Фиг.12 приведена диаграмма изменения температуры тела мышей после введения соединений Ia-e. Можно заметить, что уже через 30 минут после введения наблюдается сильное снижение температуры до 32.5°C (соединение Ib). После этого температура тела начинает восстанавливаться и через 5 часов соответствует таковой у контрольных мышей.

На Фиг.13 приведена диаграмма изменения температуры тела мышей после введения соединения S-Ib, который является диастереомером соединения Ib положения атома углерода связанного с атомом азота амидной группы. Через 30 минут после введения наблюдается снижение температуры до 34.5°C, снижение температуры тела выраженно слабее чем при введении соединения Ib. Через 2 часа температура тела начинает восстанавливаться и через 5 часов соответствует таковой у контрольных мышей.

Пример 11. Изучение гипотермического эффекта соединения Ib на крысах

Для наиболее эффективного соединения Ib были проведены исследования на самцах крыс линии сток Вистар массой 200-250 г. (Виварий Института цитологии и генетики Сибирского отделения РАН). Экспериментальные группы были сформированы по 5 животных в каждой. Соединение Ib растворяли в водном растворе, содержащем 0.5% Tween 80, непосредственно перед использованием и вводили однократно внутрижелудочно в дозе 5 мг/кг. Контрольным животным вводили соответствующий растворитель. Температура тела животных измерялась ректально через заданные промежутки времени: 0, 0.5, 1, 2, 4, 5 ч.

На Фиг.14 приведена диаграмма изменения температуры тела после введения соединения Ib. Можно заметить, что уже через 30 минут наблюдается сильное снижение температуры тела крыс вплоть до 34.2°C, которая через 4.5 часа восстанавливается практически до значений контрольных животных.

Пример 12. Определение острой токсичности соединения Ia на мышах

Мышам линии CD-1 (n=5) массой 25-31 г однократно перорально вводили соединение Ia в дозе 1000 мг/кг. Вещество предварительно смешивали с несколькими каплями твин-80. Летальность составила 2 животных из 5.

Литература

Dumitrascu, O.M., Lamb, J., Lyden, P.D. Still cooling after all these years: metaanalysis of pre-clinical trials of therapeutic hypothermia for acute ischemic stroke. J. Cereb. Blood Flow Metab. 2016, 36, 1157-1164. doi:10.1177/0271678X16645112.

Silverman, M.G., Scirica, B.M. Cardiac arrest and therapeutic hypothermia. Trends Cardiovasc. Med. 2016, 26, 337-344. doi:10.1016/j.tcm.2015.10.002

Gunn, A.J., Laptook, A.R., Robertson, N.J., Barks, J.D., Thoresen, M., Wassink, G., Bennet, L. Therapeutic hypothermia translates from ancient history in to practice. Pediatr. Res. 2017, 81, 202-209. doi:10.1038/pr.2016.198.

DOBAK J.D. Medical procedure. Патент США № US 7951183 (2011-05-31).

KATZ L.M. METHODS AND COMPOSITIONS FOR THE INDUCTION OF HYPOTHERMIA. Патент США № US 8969297 (2015-03-03).

Бирюков, С.В., Захарова, Н.М., Комелина, Н.П., Фадеева, И.С. Патент РФ № RU 2669400 C1 (11.08.2017).

Изобретение относится к применению соединений, представляющих собой производные октагидро-2H-хромена общей формулы I, где R может быть H, алкил, галоген, OMe, в том числе их стереоизомеров и фармацевтически приемлемых солей, в качестве средства для инициирования гипотермического состояния у млекопитающих. Технический результат - получены новые производные октагидро-2H-хромена, которые могут найти применение в медицине в качестве эффективного средства для инициирования гипотермического состояния у млекопитающих. 14 ил., 12 пр.

Применение новых соединений, представляющих собой производные октагидро-2H-хромена общей формулы I

,

где R может быть H, алкил, галоген, OMe, в том числе их стереоизомеров и фармацевтически приемлемых солей, в качестве средства для инициирования гипотермического состояния у млекопитающих.