Способ прогнозирования риска прогрессирования роста опухоли при раке молочной железы Российский патент 2024 года по МПК G01N33/53 G01N33/574 A61B5/00 

Способ относится к медицине, патологической анатомии и онкологии.

Периваскулярная и интраваскулярная инвазия опухоли являются онкопатологическими процессами, ассоциированными с многими видами раков. Несмотря на то, что в настоящее время нет универсального прогностического значения данных видов инвазии, очевидным остается тот факт, что данные процессы ассоциированы с неблагоприятным исходом, во всех известных карциномах.

Так, в последние годы наличие феноменов интраваскулярной и периваскулярной инвазии карцином активно изучалось как способ прогнозирования поведения опухолей самых разных локализаций в ассоциации с клиническим исходом.

Изучение интраваскулярной инвазии имеет чрезвычайно высокую актуальность ввиду известной прогностической значимости феномена лимфоваскулярной инвазии. Под лимфоваскулярной инвазией (ЛФИ) подразумевается наличие опухолевых клеток в лимфатических пространствах, кровеносных сосудах или в том и другом, или в перитуморальной области

Широко известна роль ЛФИ как критерия неблагоприятного прогноза. Так, по данными исследования Rakha et al., основанного на изучении инвазивного рака молочной железы у 3812 пациенток, ЛФИ определялась в 1129 случаях (29,6%). Пациентки с интактными лимфатическими узлами и с наличием феномена ЛФИ имели менее благоприятную выживаемость, эквивалентную вовлечению 1 или 2 лимфатических узлов.

Таким образом, более точная оценка феномена ЛФИ позволяет предположить прогноз выживаемости как качественно независимого критерия, в том числе и при отсутствии более типичных критериев оценки прогноза (например, пораженных лимфоузлов). Так, например, согласно практическим рекомендациям RUSSCO за 2023 год, патоморфологический и заключительные клинический диагнозы устанавливаются в соответствии с действующими классификациями ВОЗ и TNM, при этом, в перечне критериев, необходимых для полноценной патоморфологической оценки, указана лимфоваскулярная инвазия.

Наиболее близким является метод Mete O., изучающих периваскулярную и интраваскулярную инвазии при раке щитовидной железы, который принимается нами за прототип. «Mete, O., Asa, S. Pathological definition and clinical significance of vascular invasion in thyroid carcinomas of follicular epithelial derivation. Mod.Pathol 24, 1545-1552 (2011). https://doi.org/10.1038/modpathol.2011.119)»

Недостатком прототипа является недостаточная визуализация единичных опухолевых клеток, распространенных интраваскулярно и/или периваскулярно.

Технический результат заключается в разработке способа определения интраваскулярной инвазии при раке молочной железы, как прогностического фактора опухолевой прогрессии.

Технический результат достигается тем, что способ состоит из двух этапов: на первом этапе проводят гистологическую диагностику при окраске препаратов гематоксилином и эозином, после чего определяют наличие или отсутствие опухолевых клеток в просвете кровеносных сосудов, затем на втором этапе проводят иммуногистохимическое исследование c антителами к CD 31 - белку клеточной адгезии и антителами АЕ1/АЕ3 к панцитокератину, которые окрашивают клетки кровеносных сосудов и клетки опухоли в отличающиеся друг от друга цвета, затем определяют наличие клеток опухоли в просвете кровеносных сосудов, после чего определяют прогноз течения заболевания, и, если на любом из этапов установлено наличие интраваскулярной инвазии, то существует высокая степень вероятности прогрессирования роста опухоли, а если на двух этапах установлено отсутствие интраваскулярной инвазии, то существует низкая степень вероятности прогрессирования роста опухоли.

ИЗОБРЕТЕНИЕ ПОЯСНЯЕТСЯ ФИГУРАМИ (ФИГ. 1-5).

На фиг. 1-5 представлены диагностические паттерны для оценки наличия периваскулярной и интраваскулярной инвазии.

На фиг. 1 Интраваскулярная инвазия протокового рака молочной железы неспецифического типа. Окраска гематоксилином и эозином (увеличение х100).

На фиг. 2 Интраваскулярная инвазия протокового рака молочной железы неспецифического типа. Окраска гематоксилином и эозином (Увеличение х200).

На фиг. 3 Периваскулярная и интраваскулярная инвазия протокового рака молочной железы неспецифического типа. Окраска гематоксилином и эозином (Увеличение х100).

На фиг. 4 Интраваскулярная инвазия протокового рака молочной железы неспецифического типа. ИГХ реакции с антителами к CD31 (коричневая метка) и с антителами к AE1/AE3 (красная метка) (Увеличение х200).

На фиг. 5 Интраваскулярная инвазия протокового рака молочной железы неспецифического типа с двумя ИГХ-реакциями. ИГХ реакции с антителами к CD31 (коричневая метка) и с антителами к AE1/AE3 (красная метка) (увеличение х200).

Способ осуществляется следующим образом: гистологические препараты изготавливают из операционного или биопсийного материала стандартным способом, затем проводят гистологическую диагностику при окраске препаратов гематоксилином и эозином. Определяют наличие или отсутствие интраваскулярной инвазии опухолевых клеток визуально. Интраваскулярная инвазия определялась как обнаружение опухолевых клеток в просвете кровеносных сосудов. Именно наличие эндотелия было необходимым условием для дифференциальной диагностики интраваскулярной инвазии от псевдоэмболов, при которых опухолевые клетки могут заполнять просвет ацинусов молочной железы, которые не имеют эндотелия.

На втором этапе проводят иммуногистохимическое исследование для определения наличия или отсутствия экспрессии c антителами к CD 31 - белку клеточной адгезии, который в большом количестве содержится на клеточной мембране эндотелиоцитов, и антителами АЕ1/АЕ3 к панцитокератину, который экспрессируется в цитоплазме опухолевых клеток. Используют антитела к CD 31 и к панцитокератину с различными между собой цветовыми метками. Таким образом, достигается цветовой контраст между тканью опухоли и сосудами, что облегчает оценку интраваскулярной инвазии опухоли.

После чего определяют прогноз течения заболевания, и, если установлено наличие интраваскулярной инвазии, то существует высокая степень вероятности прогрессирования роста опухоли, а если не установлено наличие интраваскулярной инвазии, то существует низкая степень вероятности прогрессирования роста опухоли.

Периваскулярная инвазия определяется как обнаружение опухолевых клеток в 0-2 микрометрах от адвентициальной оболочки кровеносных сосудов, при интактных стенках самих сосудов. Наличие периваскулярной инвазии обособленно от интраваскулярной не несет прогностической значимости.

ПРИМЕРЫ КЛИНИЧЕСКОГО ПРИМЕНЕНИЯ СПОСОБА

Исследование проводилось на базе Института Морфологии Человека им. А.П. Авцына.

Пациентка И. 52 года с диагнозом рак молочной железы. Был произведен серийный забор биопсийного материала, посредством транскутанной биопсии молочных желез, с последующим исследованием с использованием способа определения интраваскулярной инвазии.

На первом этапе исследования гистологические срезы изготавливали по стандартной методике и окрашивали гематоксилином и эозином. При световой микроскопии было обнаружено 5 участков интраваскулярной инвазии.

На втором этапе проводили иммуногистохимическое исследование с антителами к CD 31 и антителами АЕ1/АЕ3 к панцитокератину. Достигнут цветовой контраст клеток кровеносного сосуда и клеток опухоли, дополнительно обнаружено 3 участка интраваскулярной инвазии.

Сделан прогноз о высоком риске прогрессирования роста опухоли. Назначена неоадьювантная химиотерапия, после чего проведена мастэктомия с лимфодиссекцией.

Пациентка К. 48 лет с диагнозом рак молочной железы. Был произведен серийный забор биопсийного материала, посредством транскутанной биопсии молочных желез, с последующим исследованием с использованием способа определения интраваскулярной инвазии.

На первом этапе исследования гистологические срезы изготавливали по стандартной методике и окрашивали гематоксилином и эозином. При световой микроскопии не было обнаружено участков интраваскулярной инвазии.

На втором этапе проводили иммуногистохимическое исследование с антителами к CD 31 и антителами АЕ1/АЕ3 к панцитокератину. Достигнут цветовой контраст клеток кровеносного сосуда и клеток опухоли, обнаружены 2 участка интраваскулярной инвазии.

Сделан прогноз о высоком риске прогрессирования роста опухоли. Назначена неоадьювантная химиотерапия, после чего проведена мастэктомия с лимфодиссекцией.

Пациентка Н. 50 лет с диагнозом рак молочной железы. Был произведен серийный забор биопсийного материала, посредством транскутанной биопсии молочных желез, с последующим исследованием с использованием способа определения интраваскулярной инвазии.

На первом этапе исследования гистологические срезы изготавливали по стандартной методике и окрашивали гематоксилином и эозином. При световой микроскопии не было обнаружено участков интраваскулярной инвазии.

На втором этапе проводили иммуногистохимическое исследование с антителами к CD 31 и антителами АЕ1/АЕ3 к панцитокератину. Достигнут цветовой контраст клеток кровеносного сосуда и клеток опухоли, обнаружены 1 участок интраваскулярной инвазии.

Сделан прогноз о возможном риске дальнейшего прогрессирования роста. Назначена неоадьювантная химиотерапия, после чего проведена мастэктомия с лимфодиссекцией.

Пациентка П. 55 лет с диагнозом рак молочной железы. Был произведен серийный забор биопсийного материала, посредством транскутанной биопсии молочных желез, с последующим исследованием с использованием способа определения интраваскулярной инвазии.

На первом этапе исследования гистологические срезы изготавливали по стандартной методике и окрашивали гематоксилином и эозином. При световой микроскопии не было обнаружено интраваскулярной инвазии.

На втором этапе проводили иммуногистохимическое исследование с антителами к CD 31 и антителами АЕ1/АЕ3 к панцитокератину. Достигнут цветовой контраст клеток кровеносного сосуда и клеток опухоли, участков интраваскулярной инвазии не обнаружено.

Сделан прогноз о низком риске прогрессирования роста опухоли. Проведена мастэктомия с биопсией сторожевого лимфатического узла, объем лимфодиссекции сокращен.

Таким образом, способ определения интраваскулярной инвазии при раке молочной железы позволяет установить прогноз о степени риска прогрессирования роста опухоли, который влияет на тактику лечения заболевания.

Изобретение относится к медицине, патологической анатомии и онкологии и касается способа прогнозирования риска прогрессирования роста опухоли при раке молочной железы. Определяют интраваскулярную инвазию путем гистологического исследования и иммуногистохимического исследования с антителами к CD 31, при этом способ состоит из двух этапов. На первом этапе проводят гистологическую диагностику при окраске препаратов гематоксилином и эозином, после чего определяют наличие или отсутствие опухолевых клеток в просвете кровеносных сосудов. Затем на втором этапе проводят иммуногистохимическое исследование c антителами к CD 31 – белку клеточной адгезии и антителами АЕ1/АЕ3 к панцитокератину, которые окрашивают клетки кровеносных сосудов и клетки опухоли в отличающиеся друг от друга цвета. Затем определяют наличие клеток опухоли в просвете кровеносных сосудов. Если на любом из этапов установлено наличие интраваскулярной инвазии, то существует высокая степень вероятности прогрессирования роста опухоли. Если на двух этапах установлено отсутствие интраваскулярной инвазии, то существует низкая степень вероятности прогрессирования роста опухоли. Изобретение обеспечивает прогрессирование роста опухоли при раке молочной железы. 5 ил., 4 пр.

Способ прогнозирования риска прогрессирования роста опухоли при раке молочной железы, включающий определение интраваскулярной инвазии путем гистологического исследования и иммуногистохимического исследования с антителами к CD 31, отличающийся тем, что способ состоит из двух этапов: на первом этапе проводят гистологическую диагностику при окраске препаратов гематоксилином и эозином, после чего определяют наличие или отсутствие опухолевых клеток в просвете кровеносных сосудов, затем на втором этапе проводят иммуногистохимическое исследование c антителами к CD 31 – белку клеточной адгезии и антителами АЕ1/АЕ3 к панцитокератину, которые окрашивают клетки кровеносных сосудов и клетки опухоли в отличающиеся друг от друга цвета, затем определяют наличие клеток опухоли в просвете кровеносных сосудов, после чего определяют прогноз течения заболевания, и если на любом из этапов установлено наличие интраваскулярной инвазии, то существует высокая степень вероятности прогрессирования роста опухоли, а если на двух этапах установлено отсутствие интраваскулярной инвазии, то существует низкая степень вероятности прогрессирования роста опухоли.