Противопаразитарное средство и способ терапии овец при паразитарных инвазиях Российский патент 2024 года по МПК A61K31/4184 A61K31/7048 A61K36/484 A61P33/00 

Изобретение относится к ветеринарной паразитологии, а именно к средствам и способам лечения паразитарных болезней животных, в частности овец.

Паразитозы сельскохозяйственных животных имеют повсеместное распространение и существенно снижают продуктивность и качество получаемой продукции.

Смешанные инвазии у животных, обусловленные эндо- и эктопаразитами, являются наиболее часто встречающейся формой проявления паразитарной патологии (М.А. Шихалиева, М.И. Биттирова, С.Ш. Мантаева, 3.X. Юсупова, С.Ш. Чилаев. Численность и ассоциации паразитов у крупного рогатого скота и коз в регионе Северного Кавказа // Российский паразитологический журнал. - 2014. - вып.4. - С.16-21; Марченко В.А., Ефремова Е.А., Саитов В.Р., Айрапетян А.Р. Паразитокомплекс мясных пород крупного рогатого скота в хозяйствах Республики Алтай // Ветеринарный врач: Научно-производственный журнал (Казань). - 2015 - №4. - С. 50-55).

Зоопаразитокомплекс овец характеризуется разнообразием и представлен практически всеми основными классами возбудителей - нематотодами, трематодами, цестодами, насекомыми, паукообразными и пентастомами, с учетом редких нозоформ - это более 30 заболеваний. Сложившаяся эпизоотическая обстановка предполагает привлечение комплексных противопаразитарных средств широкого спектра действия с целью минимизации объема и кратности применения препаратов.

Возбудители арахноэнтомозов и гельминтозов как компоненты паразитоценозов обитают на хозяевах в различных ассоциациях, обуславливая многовекторное вредоносное влияние. Паразитические насекомые и клещи в сочетании друг с другом, а также с гельминтами вызывают наиболее тяжелое течение болезней, которое характеризуется многообразием негативных воздействий на организм хозяина, приводит к возникновению вторичного иммунодефицита, нарушениям механизмов гомеостаза макроорганизма (Чебышев Н.В., Богоявленский Е.А., Гришина Е.А. Гельминтозы: органно-системные процессы в их патогенезе. М.: Медицина, 1998. - 236 с.). Поэтому профилактика и лечение смешанных паразитозов - одна из наиболее актуальных задач современной ветеринарии.

Наукой и практикой накоплен значительный опыт применения в животноводстве различных антигельминтиков и противопаразитарных средств химического происхождения. Они относятся к различным классам соединений и, как правило, обладают эффективностью против определенного круга паразитов.

Одним из широко применяемых антигельминтиков для борьбы с гельминтозами является фенбендазол (син.: панакур, фебтал, фенкур), который, в основном, обладает нематодоцидным действием в дозе 5-10 мг/кг (Варламова А.И., Лимова Ю.В., Садов К.М., Садова А.К., Белова Е. Е., Радионов А.В., Халиков С.С., Чистяченко Ю.С., Душкин А.В., Скира В.Н., Архипов И.А. Эффективность супрамолекулярного комплекса фенбендазола при нематодозах овец // Российский паразитологический журнал, 2016, 35 (1): 76-81).

Фенбендазол применяют на овцах, козах и крупном рогатом скоте против гельминтозов, включая желудочно-кишечные стронгилятозы, диктиокаулез, стронгилоидоз, трихоцефалез; лошадям против параскаридоза, стронгилятозов; плотоядным против токсокароза, токсаскаридоза, унцинариоза и других нематодозов. Препарат безопасен для организма животных, не обладает побочным действием. Назначают его перорально с кормом в дозе 5 мг/кг - овцам, 10 мг/кг - молодняку крупного рогатого скота, 50 мг/кг три дня подряд - собакам, 10-15 мг/кг - лошадям (Архипов И.А. Антигельминтики: фармакология и применение. М.: Изд-во РАСХН, 2009. - 405 с.).

Недостатком фенбендазола является низкая растворимость в воде, плохая абсорбция слизистой оболочкой кишечника и, как следствие, плохая биодоступность и высокие дозы против гельминтозов, особенно плотоядных животных (Bossche Н., RochetteF., Horig С. Anthelmintic efficacy of fenbendazole. Veterinary Record,1982, 78 (3): 876-877; Takagi Т., Ramachandran Ch., Bermejo M., Yamashita S., Yu L.X., Amidon G.L. A Provisional Biopharmaceutical Classification of the Top 200 Oral Drug Products in the United States, Great Britaion, Spain and Japan. Molecular Pharmaceutics, 2006,3 (6): 631-646).

Другим недостатком этого препарата является то, что он неактивен в отношении эктопаразитов.

В последние годы разработаны и предложены к применению новые противопаразитарные препараты, которые имеют широкий спектр действия против многих эндо- и эктопаразитов животных и птиц. К числу таких препаратов относятся антигельминтики, содержащие в качестве действующего вещества (ДВ) ивермектин, который является высокоэффективным лечебным средством против нематод и эктопаразитов (Campbell W.C., Benz G.W. Ivermectin: a review of efficacy and safety. J. Vet. Pharmacol. Ther., 1984, 7(1): 1-16; Campbell J.D., Fairey P.J. Informational and normative routes to conformity: The effect of faction size as a function of norm extremity and attention to the stimulus. Journal of Personality and Social Psychology, 1989, 57 (3): 457-468. https://doi.org/10.1037/0022-3514.57.3.457).

Однако инъекционные препараты на основе ивермектина, в которых в качестве растворителя используются такие вещества, как глицероформаль, пропиленгликоль и поливинилпирролидон, имеют ряд недостатков. Эти лекарственные формы обладают высокой вязкостью, что затрудняет инъекцию, вызывают раздражение и другие реакции в месте введения, а в результате преципитации ивермектина в тканях могут оказывать токсическое действие на организм животных. Также недостатком ивермектина и его лекарственных форм является ограниченный спектр его противопаразитарного действия: антгельминтик не обладают противоцестодозным действием и неэффективен при трематодозах животных.

Известны препараты и способы их использования для лечения гельминтозов животных на основе физиологических водорастворимых полимеров, содержащие в качестве антигельминтика только супрамолекулярные комплексы альбендазола, фенбендазола, ивермектина (Халиков С.С, Чистяченко Ю.С., Душкин А.В., Метелева Е.С., Поляков Н.Э., Архипов И.А., Варламова А.И., Гламаздин И.И., Данилевская Н.В., Создание антигельминтных препаратов повышенной эффективности на основе межмолекулярных комплексов действующих веществ с водорастворимыми полимерами, в том числе с полисахаридами. Химия в интересах устойчивого развития, 2015, 23 (5): 567-577; Варламова А.И., Архипов И.А., Садов К.М., Халиков С.С. Эффективность супрамолекулярного комплекса фенбендазола против нематод при комиссионном производственном испытании. Российский паразитологический журнал, 2020, 14 (2): 93-97; Мусаев М.Б., Защепкина В.В., Вацаев Ш.В., Джамалова А.З., Ильин М.М., Халиков С.С. Эффективность супрамолекулярного комплекса ивермектина в условиях производства при нематодозах пищеварительного тракта лошадей табунного содержания. Российский паразитологический журнал, 2020, 14 (3): 104-108).

Супрамолекулярный комплекс наноразмерных систем доставки антигельминтиков позволяет лекарственным формам действовать по принципу: лекарство - орган-мишень и создавать оптимальную концентрацию препарата для достижения лечебного эффекта, а также значительно снижать токсичность за счет уменьшения дозы.

Известны также противопаразитарные средства, содержащие супрамолекулярный комплекс фенбендазола с добавлением биологически активных добавок - арабиногалактана, экстракта солодки (Архипов И.А., Варламова А.И., Халиков С.С, Садов К.М., Душкин А.В. Влияние механохимической технологии на антигельминтную эффективность супрамолекулярных комплексов фенбендазола с экстрактом солодки. Российский паразитологический журнал, 2020, 14 (1): 70-74; Патент РФ №2558922. Антигельминтное средство и способ его получения / Варламова А.И., Архипов И.А., Халиков С.С., Душкин А.В., Чистяченко Ю.С., Халиков М.С., Данилевская Н.В. Заявл. 07.05.2014; опубл. 10.08.2015, бюл. №22).

Биологически активные добавки способствуют значительному снижению токсического действия антигельминтных препаратов (за счет антиоксидантных, иммуномодулирующих свойств), а также адресной доставке основного действующего вещества.

Однако эти препараты содержат в своем составе только одно антигельминтное действующее вещество (ДВ), что значительно снижает качество противопаразитарных обработок животных, ограничивает спектр противопаразитарного действия препарата.

Наиболее близким решением, принятым за прототип, является противопаразитарная композиция на основе супрамолекулярного комплекса альбендазола с водорастворимым полимером арабиногалактаном, в которой дополнительно в качестве антгельминтика используют супрамолекулярный комплекс ивермектина с арабиногалактаном и в качестве наполнителя натриевую соль карбоксиметилцеллюлозы (бланозы) (Патент РФ №2699799. Противопаразитарная композиция и способ ее применения для лечения паразитозов жвачных животных / Марченко В.А., Василенко Ю.А., Ефремова Е.А., Халиков М.С., Халиков С.С., Ким А.С. Заявл. 10.01.2019; опубл. 11.09.2019, бюл. №26).

Однако противопаразитарный препарат альбендазол активен в основном против эндопаразитов и не обладает активностью против эктопаразитов. Арабиногалактан, используемый в препарате, не нашел широкого применения из-за его высокой стоимости. Данная композиция также требует введения наполнителя (бланозы), что значительно повышает трудоемкость ее применения в условиях производственного овцеводства.

Технический результат предлагаемого изобретения - расширение арсенала противопаразитарных средств, эффективных для терапии овец при паразитарных инвазиях.

Задача решается противопаразитарным средством, состоящим из твердой дисперсии фенбендазола с экстрактом солодки в массовом соотношении 1:4 и твердой дисперсии ивермектина с экстрактом солодки в массовом соотношении 1:4.

Сущность изобретения также заключается в том, что заявляемое противопаразитарное средство применяют для терапии овец при паразитарных инвазиях в виде водной суспензии, перорально в дозе 0,8 мл, содержащей 3 мг фенбендазола и 0,2 мг ивермектина, на 1 кг массы животного, однократно, индивидуально.

Примеры осуществления изобретения.

1. Получение противопаразитарного средства.

Для получения противопаразитарной композиции использовали известные антигельминтики - Фенбендазол (ФБЗ) и Ивермектин (ИВМ) - в форме твердых дисперсий (ТД) с экстрактом солодки (ЭС). Твердые дисперсии ФБЗ и ИВМ с ЭС были получены методом механохимической технологии по методу (Патент РФ №2546535 (2015). Противопаразитарное средство на основе альбендазола и способ его использования для лечения кишечных гельминтозов млекопитающих / Халиков С.С., Душкин А.В., Чистяченко Ю.С., Халиков М.С., Архипов И.А., Гламаздин И.И., Одоевская И.М., Ляхов Н.З. Заявл. 09.04.2014; опубл. 10.04.2015, бюл. №10).

В металлический барабан последовательно загрузили 20,0 г ивермектина (содержание 97,5%; производство ShandongQiluKing-PharPharmacutical Co.Ltd., Changzhou, КНР, серия 316050130), 80,0 г экстракта солодки (производство ООО «Вистерра», Алтайский край, серия 29032016) и 32 металлических шара (шары ООО «Техно Центр», Рыбинск, диаметр 25 мм; масса каждого шара 54 г). После предварительного перемешивания в течение 10 мин отобрали пробу физической смеси. При этом объем загрузки барабана 55%. Модуль процесса механообработки (м/о) 1:17. После 4-часовой механообработки при скорости вращения барабана 60-65 об/мин получили продукт, который выгрузили, отделяя его от шаров с помощью сетки с ячейкой 1-2 мм. Получили 99,3 г продукта в виде коричневого сыпучего порошка, который представляет собой твердую дисперсию (ТД) состава ИВМ:ЭС=1:4.

Как показал анализ, растворимость продукта в воде превысила растворимость исходного ИВМ почти в 5 раз (табл. 1).

В металлический барабан последовательно загрузили 20,0 г фенбендазола (содержание 99,0%; производство Changzhou Jialing Medicine Industry Co.Ltd., Changzhou, КНР, серия 140823), 80,0 г экстракта солодки (производство ООО «Вистерра», Алтайский край, серия 29032016) и 32 металлических шара (шары ООО «Техно Центр», Рыбинск, диаметр 25 мм; масса шара 54 г). После предварительного перемешивания в течение 10 мин отобрали пробу физической смеси. При этом объем загрузки барабана 50%. Модуль процесса механообработки 1:17. После 4-часовой механообработки при скорости вращения барабана 60-65 об/мин получили продукт, который выгрузили, отделяя его от шаров с помощью сетки с ячейкой 1-2 мм. Получили 97,5 г продукта в виде коричневого сыпучего порошка, который представляет собой ТД состава ФБЗ:ЭС=1:4.

Как показал анализ, растворимость продукта в воде превысила растворимость исходного ФБЗ почти в 2,5 раза (табл. 1).

Сухие заявляемые антигельминтные композиции (ФБЗ с ЭС) и (ИВМ с ЭС) тщательно перемешивали до однородной массы, получая таким образом сухой концентрат суспензии, готовый к применению. Воду добавляли непосредственно перед введением противопаразитарного средства животным к сухому концентрату и встряхивали до образования стойкой водной суспензии.

Противопаразитарное средство задавали овцам индивидуально в виде водной суспензии перорально в дозе 0,8 мл/кг массы животного (м.ж.), из шприца с резиновой трубочкой на корень языка.

2. Определение эффективности заявляемого средства при различных паразитозах овец

Изучение паразитоцидной эффективности при кишечных гельминтозах проводили в период с 23 сентября по 27 ноября 2020 г. на отарах овец в Шебалинском районе на животноводческих стоянках в урочище «Марчела» и в с. Улус-Черга. Группы формировали по принципу аналогов из спонтанно инвазированных гельминтами и эктопаразитами животных: опытные - по 10-15 голов, контрольные - по 20-25 голов. Всего было сформировано 6 групп.

Животным 2-, 3-, 4-й групп задавали индивидуально перорально испытуемое противопаразитарное средство в виде водной суспензии, в дозе 0,8 мг на кг массы животного, включающее соответственно фенбендазол с экстрактом солодки, в дозах 1,2 и 3,0 мг/кг м.ж. по ФБЗ и ивермектин в дозе 0,2 мг/кг м.ж. по ИВМ с экстрактом солодки.

Животным 5-й и 6-й групп вводили индивидуально перорально соответственно водные суспензии базовых препаратов - субстанций ФБЗ и ИВМ в регламентируемых изготовителем дозах: 0,2 мг/кг - для ивермектина, 10,0 мг/кг - для фенбендазола.

Овцы контрольной группы (группа 1) препарат не получали.

Антигельминтную эффективность заявленного противопаразитарного средства определяли по результатам копрологических исследований проб фекалий животных до и спустя 15 и 30 дней после дачи препаратов. Учет эффективности осуществляли по типу «контрольный тест» с расчетом среднего числа обнаруженных яиц гельминтов в счетной камере ВИГИС. Инсектицидную эффективность препарата оценивали сравнением численности имагинальных форм кровососок до и через 10 дней после использования средства.

Гельминтокопроовоскопические исследования проб биоматериала от животных опытных и контрольных групп осуществляли с применением общепринятых в паразитологии методов. Яйца кишечных гельминтов подотряда Strongylata и цестод подотряда Anoplocephalata (мониезии) выделяли флотационным методом по Котельникову-Хренову, яйца трематод (дикроцелии) и личинок легочных нематод выявляли соответственно седиментационным методом последовательных промываний и ларвоскопическим методом по Берману-Орлову.

Пример 1. Результаты испытаний противопаразитарного средства при стронгилятозах желудочно-кишечного тракта овец

В опытной группе 2, по которой оценивали заявляемый препарат в виде водной суспензии по ДВ фенбендазола в дозе 1,0 мг и ивермектина в дозе 0,2 мг по ДВ на 1 кг массы животного экстенсэффективность (ЭЭ) и интенсэффективность (ИЭ) соответственно составила 60,8 и 95,3% (табл. 2).

Эффективность заявляемого средства в дозировках по ФБЗ 2,0 и 3,0 мг/кг м.ж. (группа 3 и 4) составила 100%.

Базовый препарат фенбендазола (группа 5) в дозировке 10,0 мг/кг м.ж. показал достаточно высокую эффективность (ЭЭ - 76,5%, ИЭ - 96,7%), близкую активность продемонстрировала исходная субстанция ивермектина (группа 6).

Пример 2. Результаты испытаний противопаразитарного средства при легочных стронгилятозах овец В опытной группе 2, по которой оценивали препарат, содержащий фенбендазол в дозе 1,0 мг и ивермектин в дозе 0,2 мг на 1 кг массы животного, экстенсэффективность (ЭЭ) и интенсэффективность (ИЭ) соответственно составила 60,0 и 88,5% (табл. 3).

Эффективность заявляемого средства в дозировках по ФБЗ 2,0 и 3,0 мг/кг м.ж. (группа 3 и 4) составила, соответственно, 86,2 (ЭЭ), 95,1 (ИЭ) и 100%(ЭЭ и ИЭ).

Базовые препараты фенбендазола (группа 5) в дозе 10,0 мг/кг м.ж. и ивермектина (группа 6) в дозе 0,2 мг/кг м.ж. также продемонстрировали более низкую активность при легочных стронгилятозах.

Пример 3. Результаты испытаний противопаразитарного средства при мониезиозе овец

В опытной группе 2, по которой оценивали препарат, содержащий фенбендазол в дозе 1,0 мг и ивермектин в дозе 0,2 мг на 1 кг массы животного, экстенсэффективность (ЭЭ) и интенсэффективность (ИЭ) соответственно составила 46,8 и 92,3% (табл. 4).

В дозе по ДВ ФБЗ 2,0 мг/кг м.ж. (группа 3) ЭЭ составила 73,6%, ИЭ - 95,8%.

Эффективность препарата по ДВ ФБЗ в дозе 3,0 мг/кг м.ж. (группа 4) при мониезиозе составила 100%.

Базовый препарат фенбендазола (группа 5) в дозе 10,0 мг/кг м.ж. показал более низкую активность (ЭЭ - 20,0%, ИЭ - 96,5%,), субстанция ивермектина (группа 6) не продемонстрировала паразитоцидной активности.

Пример 4. Результаты испытаний противопаразитарного средства при дикроцелиозе овец В опытной группе 2, по которой оценивали препарат, содержащий фенбендазол в дозе 1,0 мг и ивермектин в дозе 0,2 мг на 1 кг массы животного, экстенсэффективность (ЭЭ) и интенсэффективность (ИЭ) соответственно составила 33,4 и 79,4% (табл. 5).

В дозе по ДВ ФБЗ 2,0 мг/кг м.ж. (группа 3) ЭЭ составила 55,7%, ИЭ - 89,5%.

Эффективность препарата по ДВ ФБЗ в дозе 3,0 мг/кг м.ж. (группа 4) была максимальной и составила 100%.

Базовый препарат фенбендазола (группа 5) в дозе 10,0 мг/кг м.ж. показал более низкую активность (ЭЭ - 33,4%, ИЭ - 89,2%,), субстанция ивермектина (группа 6) не продемонстрировала паразитоцидной активности при дикроцелиозе.

Пример 5. Результаты испытаний противопаразитарного средства при мелофагозе овец

В опытной группе 2, по которой оценивали препарат, содержащий фенбендазол и ивермектин в дозе соответственно 1,0 и 0,2 мг/ кг массы животного, экстенсэффективность (ЭЭ) и интенсэффективность (ИЭ) соответственно составила 66,7 и 90,7% (табл. 6).

В дозе по ДВ ФБЗ 2,0 мг/кг м.ж. (группа 3) ЭЭ составила 53,4%, ИЭ -87,8%.

Эффективность препарата по ДВ ФБЗ в дозе 3,0 мг/кг м.ж. (группа 4) составила 73,4%, ИЭ - 89,5%.

Базовый препарат фенбендазола (группа 5) в дозе 10,0 мг/кг м.ж. показал низкую активность (ЭЭ - 20,0%, ИЭ - 5,3%,), субстанция ивермектина (группа 6) продемонстрировала высокую активность (ЭЭ -70,0%, ИЭ - 86,6%) при мелофагозе овец.

В результате проведенных опытов установлено, что заявляемое противопаразитарное средство на основе твердой дисперсии фенбендазола с экстрактом солодки, твердой дисперсии ивермектина с экстрактом солодки в дозе по действующему веществу фенбендазола 3,0 мг/кг массы животного, ивермектина 0,2 мг/кг массы животного, введенное перорально, однократно в дозе 0,8 мл на кг м.ж., показало 100%-ную эффективность при стронгилятозах желудочно-кишечного тракта и дыхательной системы, а также при мониезиозе и дикроцелиозе овец, инсектицидная эффективность при мелофагозе предлагаемого нами препарата была также максимальной - ЭЭ и ИЭ составили 73,4 и 89,5% соответственно.

Группа изобретений относится к области фармацевтики и ветеринарии. 1 объект представляет собой противопаразитарное средство, состоящее из твердой дисперсии фенбендазола с экстрактом солодки в массовом соотношении 1:4 и твердой дисперсии ивермектина с экстрактом солодки в массовом соотношении 1:4. 2 объект – способ терапии овец при паразитарных инвазиях, включающий добавление воды к противопаразитарному средству с получением водной суспензии и ее пероральное введение в дозе 0,8 мл, содержащей 3,0 мг фенбендазола и 0,2 мг ивермектина, на 1 кг массы животного, однократно, индивидуально. Технический результат заключается в терапии овец при паразитарных инвазиях. 2 н.п. ф-лы, 6 табл., 5 пр.

1. Противопаразитарное средство, состоящее из твердой дисперсии фенбендазола с экстрактом солодки в массовом соотношении 1:4 и твердой дисперсии ивермектина с экстрактом солодки в массовом соотношении 1:4.

2. Способ терапии овец при паразитарных инвазиях, включающий добавление воды к противопаразитарному средству по п. 1 с получением водной суспензии и ее пероральное введение в дозе 0,8 мл, содержащей 3,0 мг фенбендазола и 0,2 мг ивермектина, на 1 кг массы животного, однократно, индивидуально.