СПОСОБ ЦВЕТОВОЙ ДИАГНОСТИКИ ФАЗЫ ЦИКЛА ЯИЧНИКОВ Российский патент 2024 года по МПК A61B1/02 A61B1/303 

Область техники

Настоящее изобретение относится к способу определения фазы цикла яичников с помощью измерения спектров полного пропускания и анализа цветовых изображений через приложения ColorPicker или аналогичных.

Уровень техники

Из уровня техники известен способ доклинической диагностики преждевременного истощения яичников у женщин репродуктивного возраста (см. патент РФ 2625723, МПК G01N33/48, опубл. 18.07.2017), включающий ультразвуковое исследование яичников и определение уровня антимюллерова гормона (АМГ) в сыворотке крови. При трансвагинальном ультразвуковом исследовании яичников на 5-7 день менструального цикла осуществляют подсчет антральных фолликулов, при выявлении суммарного количества антральных фолликулов в обоих яичниках 6 и менее дополнительно назначают исследование уровня АМГ иммуноферментным методом и на основании полученных данных вычисляют коэффициент P=(F*G):V, где Р - коэффициент преждевременного истощения яичников, F - число антральных фолликулов, G - концентрация АМГ в сыворотке крови в абсолютных единицах, V - возраст женщины в годах, при получении значения Р, равного 0,33 и менее, диагностируют преждевременное истощение яичников и осуществляют перевод пациентки в центры репродукции для проведения программ ВРТ.

Однако данный способ достаточно трудоемкий и дорогостоящий, требует наличие лаборатории с дорогостоящей аппаратурой, реактивами и высококвалифицированных специалистов для подсчета фолликулов (подразумевается фолликулярная фаза цикла). Данный способ не применим для определения других фаз цикла.

Известен способ отбора пациенток с синдромом слабого ответа яичников, нуждающихся в переводе на программу лечения с использованием донорских ооцитов , путем исследования гормонов крови (см. патент РФ 2565449, МПК G01N 33/53, G01N 33/74, опубл. 20.10.2015). У пациентки на 2-3-й дни менструального цикла, предшествующие проведению гонадотропной стимуляции, исследуют в сыворотке крови уровень антимюллерова гормона (АМГ) и, если уровень АМГ составит 0,1-0,5 нг/мл, дополнительно определяют концентрацию фолликулостимулирующего гормона (ФСГ), выраженную в мМЕ/мл, рассчитывают соотношение ФСГ/АМГ и, если величина полученного соотношения равна или превышает 51, производят коррекцию лечения и перевод пациентки на программу лечения с использованием донорских ооцитов.

Однако данный способ дорогостоящий.

Известен способ эхографической диагностики недостаточности лютеиновой фазы менструального цикла (см. патент РФ 2238040, МПК A61B 8/00, опубл. 20.10.2004), в котором проводят ультразвуковое трансвагинальное исследование яичников в середину секреторной фазы менструального цикла. Определяют объем яичника и объем желтого тела. Вычисляют их отношение и при его значении 0,22 и менее диагностируют недостаточность лютеиновой фазы.

Недостатком предложенного способа является необходимость высокой квалификации и опыта специалиста УЗИ, поскольку полученные значения и относительная точность визуализируемых параметров достигаются глазами диагноста, наличие дорогостоящего аппарата УЗИ. Также, обследование проводится в определенный период фазы цикла, что может содержать потенциальную ошибку, т.к. фаза определяется со слов пациенток, также возможет сбой цикла и др.

Известен способ оценки состояния яичников при трансректальной комплексной трехмерной эхографии у девственниц пубертатного периода с синдромом поликистозных яичников (см. патент РФ 2574188, МПК A61B 8/08, A61B 8/06, опубл. 10.02.2016), включающий проведение комплексной трехмерной эхографии трансректальным доступом с вычислением размеров яичников, определением характера расположения фолликулов, диаметра фолликулов по данным 3D реконструкции. При увеличенных яичниках с наличием равновеликих фолликулов, расположенных по всему объему стромы, диагностируют диффузный равнокалиберный тип строения фолликулярного аппарата, а при увеличенных яичниках с наличием фолликулов разного диаметра, расположенных хаотично, диагностируют хаотический разнокалиберный тип строения фолликулярного аппарата.

Недостатком данного способа является относительная точность полученных результатов, поскольку при нарушении цикла возможно ошибочное определение дня цикла и соответственно соотнесение полученных результатов с нормой. Требуется повторное регулярное проведение дорогостоящего исследования - 3D эхографии. Результаты интерпретируются лично врачом, что напрямую зависит от его опыта, личных качеств (внимательности, качества зрения и т.д.), медицинской эрудиции и навыков

Раскрытие сущности

Техническая проблема, на решение которой направлено изобретение, состоит в разработке способа экспресс определения фазы яичника с помощью цифровой камеры лапароскопа. Для этого не требуется ожидание анализов крови на гормоны и специальной подготовки.

Технический результат заключается в упрощении и ускорении клинической диагностики фолликулярной фазы и лютеиновой фазы цикла яичников.

Технический результат достигается с тем, что в способе цветовой диагностики фазы цикла яичников, согласно решению, получают цветовые изображения яичников с помощью камеры лапороскопа, анализируют цветовые изображения для определения параметров цвета в единицах RGB, при этом при значениях R от 100 до 140, G от 54 до 81, B от 48 до 74 делают вывод о фолликулярной фазе цикла, при R от 52 до 87, G от 6 до 14, B от 4 до 13 делают вывод о лютеиновой фазе.

Краткое описание чертежей

Изобретение поясняется чертежами, где

- на фиг. 1 изображены фотографии исследуемых типичных светлых образцов яичников кошек,

- на фиг. 2 изображены фотографии исследуемых типичных темных образцов яичников кошек

- на фиг. 3 изображена фолликулярная фаза по результатам гистологического исследования

- на фиг. 4 изображена лютеиновая фаза по результатам гистологического исследования.

Осуществление изобретения

В заявляемом изобретении предложен способ экспресс определения фазы яичника с помощью цифровой камеры лапароскопа.

Способ цветовой диагностики фазы цикла яичников характеризуется тем, что получение цифрового изображения яичников происходит с помощью камеры лапороскопа, выполненной с возможностью определения параметров цвета в единицах RGB. При изучении изображения яичников, сравнивают цветовые значения характерные для светлых яичников (фолликулярная фаза) и для темных яичников (лютеиновая фаза) через приложение ColorPicker или аналогичные.

Яичники брали от беспородных кошек в возрасте от 1 года до 12 лет с диагнозом «клинически здорова» после лапароскопической овариэктомии и овариогистерэктомии. По данным визуального осмотра все запланированные к исследованию яичники были разделены на две группы: «светлые» (n=50) и «темные» (n=50) и исследованы гистологически (фиг. 1 и фиг. 2).

Гистологические исследования in vitro проводили с использованием половин каждого яичника, которые вручную разрезали скальпелем и фиксировали. Остальные половины яичников использовали для ex vivo измерения цвета. Для анализа цвета снимали показатель RGB (red, green, blue) в приложении ColorPicker для 15 точек различных областей каждого яичника, затем усредняли вручную и считали это параметром каждого образца (для 50 «светлых» и 50 «темных») (фиг. 1 и фиг. 2).

По результатам гистологического исследования доказано, что для исследования были выбраны здоровые, патологически неизмененные ткани, темные образцы содержат желтое тело и соответствуют лютеиновой фазе (фиг. 4), а светлые образцы содержат множественные фолликулы, что соответствует фолликулярной фазе цикла (фиг. 3).

Таблица 1.Цветовые параметры образцов яичников кошек

№ образца Светлые Темные R G B R G B 1 124 70 74 54 7 6 2 126 72 70 60 8 6 3 126 61 57 58 10 11 4 133 70 68 70 7 5 5 122 68 63 70 11 8 6 127 71 60 52 6 6 7 121 67 62 74 6 6 8 116 68 63 76 12 9 9 124 69 62 63 13 13 10 112 69 61 87 13 12 11 125 70 56 75 11 6 12 130 69 54 54 10 11 13 119 74 54 66 14 11 14 114 67 49 68 13 7 15 136 66 52 60 8 6 16 111 68 48 55 10 4 17 113 66 51 71 9 5 18 127 71 55 67 13 9 19 135 59 55 55 8 7 20 118 73 68 69 11 9 21 114 64 59 58 12 8 22 123 69 63 72 9 4 23 131 71 69 64 12 9 24 114 78 72 54 7 5 25 139 54 51 61 14 6 26 128 58 49 68 6 6 27 121 73 66 65 9 7 28 119 65 58 73 8 8 29 115 76 70 57 12 10 30 132 68 61 79 10 8 31 138 62 55 84 11 9 32 122 60 52 65 13 11 33 114 73 68 63 6 5 34 125 77 71 59 8 7 35 128 68 63 70 11 10 36 117 69 60 62 9 5 37 131 81 72 56 10 8 38 135 78 70 78 14 9 39 115 63 54 64 12 12 40 123 75 64 81 13 11 41 140 79 71 72 9 7 42 128 69 60 57 8 5 43 139 70 62 65 6 4 44 132 75 69 53 6 5 45 110 62 55 82 13 9 46 119 74 60 54 7 7 47 116 68 59 60 10 8 48 127 62 54 54 11 7 49 129 61 49 65 8 6 50 136 65 51 74 10 5 Среднее 124±3 69±2 60±2 65±2 10±0.7 8±0.7

По данным визуального осмотра все запланированные к исследованию яичники были разделены на две группы: «светлые» (фиг. 1) и «темные» (фиг. 2).

Для гистологического исследования фиксировали 10 светлых и 10 темных образцов от разных кошек. Для фиксации использовали 10% забуференный формалин. Для получения гистологических сканов использовали цифровой слайд-конвертер Aperio AT2 (экранный диагностический сканер), оснащенный светодиодным источником света и средствами калибровки. Толщина срезов тканей для сканирования составляла 2-3 мкм. Для гистологического исследования всех образцов использовали метод окраски гематоксилин-эозином. Здоровую ткань яичников брали от беспородных кошек в возрасте от 1 года до 12 лет с диагнозом «клинически здоровая».

При гистологическом исследовании светлых и темных образцов выявлены корковое и мозговое вещество; также была обнаружена капсула яичника, включающая зародышевый эпителий (однослойный кубовидный эпителий) и белочную оболочку (субэпителиальный эпителий). В строении яичников определяется четкое деление на мозговой сосудисто-фиброзный и кортикальный слои.

В светлых яичниках выявлены многочисленные группы примордиальных фолликулов с близлежащими первичными и вторичными фолликулами (фиг. 3). Примордиальные фолликулы состоят из первичного ооцита, окруженного одним слоем уплощенных фолликулярных клеток. Первичные фолликулы включают более крупный ооцит и сформированный вокруг него слой или слои кубовидных гранулезных клеток и блестящую кожуру фолликула (фиг. 4). Вторичные фолликулы имеют полость, отделяющую ооцит с прилежащими к нему гранулезными клетками (лучистой коронкой) от слоев гранулезных клеток, выстилающих фолликул с внутренней стороны базальной мембраны. Вне таких фолликулов слои тека-клеток визуализируются плохо. Фолликулы коркового слоя расположены в гиперклеточной тощей волокнистой соединительной ткани, среди которой встречаются единичные рубцовоподобные структуры.

В темных экземплярах яичников корковое вещество хорошо развито, доминирует над стромой, хорошо визуализируется интерстициальная соединительная ткань и желтое тело (фиг. 4). В некоторых образцах обнаруживается гиперплазия желтого тела без атипии. Строма представлена типичной тканью теки без отека, развита умеренно, капиллярная сеть множественная, отмечаются мелкоочаговые свежие кровоизлияния, в некоторых пробах множественные. Визуализируются разбросанные атретические фолликулы с внутренней и наружной фолликулярной текой с обилием кровеносных сосудов.

По результатам гистологического исследования доказано, что выбранные «нормальные, неизмененные» ткани у темных образцов содержат желтое тело и соответствуют лютеиновой фазе, а у светлых образцов содержат множество фолликулов, что соответствует фолликулярной фазе, что имеет важное практическое применение при криоконсервации, новых репродуктивных технологиях и имплантации яичников.

Настоящее изобретение относится к медицине, а именно к гинекологии и акушерству, и может быть использовано для цветовой диагностики фазы цикла яичников. Получают цветовые изображения яичников с помощью камеры лапороскопа. Анализируют цветовые изображения для определения параметров цвета в единицах RGB. При значениях R от 100 до 140, G от 54 до 81, B от 48 до 74 делают вывод о фолликулярной фазе цикла. При значениях R от 52 до 87, G от 6 до 14, B от 4 до 13 делают вывод о лютеиновой фазе. Способ обеспечивает упрощение и ускорение клинической диагностики фолликулярной фазы и лютеиновой фазы цикла яичников за счет определения параметров цвета в единицах RGB изображений цифровой камеры лапароскопа. 4 ил., 1 табл.

Способ цветовой диагностики фазы цикла яичников, характеризующийся тем, что получают цветовые изображения яичников с помощью камеры лапороскопа, анализируют цветовые изображения для определения параметров цвета в единицах RGB, при этом при значениях R от 100 до 140, G от 54 до 81, B от 48 до 74 делают вывод о фолликулярной фазе цикла, при R от 52 до 87, G от 6 до 14, B от 4 до 13 делают вывод о лютеиновой фазе.