СПОСОБ СНИЖЕНИЯ НЕЙРОТОКСИЧНОСТИ, ВЫЗВАННОЙ КОМПЛЕКСОМ ПРОТИВОТУБЕРКУЛЕЗНЫХ ПРЕПАРАТОВ, В ЭКСПЕРИМЕНТЕ Российский патент 2024 года по МПК A61K31/42 A61K31/455 A61K31/525 A61K31/194 A61K47/12 A61K31/47 A61P43/00 G09B23/28 

Область техники, к которой относится изобретение

Изобретение относится к медицине, в частности, к фтизиатрии и фармакологии и может быть использовано для обоснования клинического применения нового способа снижения нейротоксичности, возникающей у больных туберкулезом, на применение комплекса современных противотуберкулезных средств.

Уровень техники

Нейротоксичность как нежелательное явление нередко возникает при использовании многих лекарственных препаратов, особенно в условиях длительного и комплексного применения лекарств. Для препаратов, применяемых для лечения туберкулеза легких, характерен весь спектр нейротоксических реакций, которые могут проявляться в форме нарушений моторных, сенсорных функций, интегративных функций мозга и эмоционального статуса (Kass J.S., Shandera W.X. Nervous system effects of antituberculosis therapy.// CNS Drugs. 2010 Aug;24(8):655-67). Наиболее токсичным препаратом, который используется для лечения впервые выявленных больных туберкулезом и при наличии лекарственной чувствительности возбудителя, является изониазид, который нарушает обмен витаминов группы В, глютаминовой кислоты, проникает через гематоэнцефалический барьер и вызывает нейротоксические реакции, проявляющиеся головной болью, головокружением, нарушением сна, невритом или атрофией зрительного нерва, периферическими полиневритами, мышечными подергиваниями и судорогами. Разработаны способы снижения токсичности изониазида в эксперименте и клинических условиях: применение витамина В6 (Тюлькова Т. Е. Влияние пиридоксина и препаратов гидразида изоникотиновой кислоты на нервную систему при лечении туберкулеза // Туберкулёз и болезни лёгких. – 2018. – Т. 96, № 11. – С. 69-73); использование таурина и витамина В6 (RU2574027, 15.12.2014); масла семян амаранта (RU2597788, 18.08.2015).

Однако в настоящее время большую озабоченность вызывает лечение больных туберкулезом с множественной и широкой лекарственной устойчивостью возбудителя (МЛУ/ШЛУ ТБ). Эффективность лечения таких больных в Российской федерации ниже 50% ([Профиль туберкулеза: Российская Федерация за 2021 год ВОЗ https://worldhealthorg.shinyapps.io/tb_profiles/?_inputs_&entity_type=%22country%22&lan=%22EN%22&iso2=%22RU%22], а частота развития нейротоксических реакций в спектре нежелательных явлений существенна (Мышкова Е. П., Петренко Т. И., Колпакова Т. А. Сравнительный анализ эффективности и безопасности различных схем противотуберкулезной терапии больных с МЛУ/ШЛУ-туберкулезом // Туберкулёз и болезни лёгких. - 2022. - Т. 100, № 5. - С. 35-40). Для лечения больных МЛУ/ШЛУ ТБ используются комбинации высокоэффективных препаратов (моксифлоксацин, левофлоксацин, бедаквилин, линезолид, деламанид, клофазимин, циклосерин) в сочетании с традиционными резервными препаратами (Клинические рекомендациями «Туберкулез у взрослых», 2020). Для каждого из препаратов описан свой механизм нейротоксического действия (Можокина Г. Н., Самойлова А. Г., Васильева И. А. Проблема нейротоксичности лекарственных препаратов при лечении больных туберкулезом // Туберкулёз и болезни лёгких. - 2020. - Т. 98, № 10. - С. 58-63.). Нейротоксичность, вызванная моксифлоксацином, может быть обусловлена ингибированием связывания ГАМК со своим рецептором или активацией возбуждающих рецепторов (NMDA, аденозиновые, аминокислотные, дофаминовые и опиоидные рецепторы). Циклосерин также связывается с рецепторами NMDA, что приводит к формированию эксайтотоксичности (Alghamdi WA, Alsultan A, Al-Shaer MH et al.. Cycloserine population pharmacokinetics and pharmacodynamics in patients with tuberculosis. Antimicrob Agents Chemother 2019, 63:e00055-19.). Механизм токсического действия линезолида связан с ингибированием фермента МАО, который отвечает за метаболизм моноаминовых нейротрансмиттеров.

При развитии нейротоксических реакций у больных туберкулезом возникает необходимость отмены ответственного за нейротоксичность препарата или снижение его дозы, изменение схемы, что может негативно сказаться на эффективности лечения. Поэтому актуальна профилактика или снижение выраженности нейротоксических реакций с помощью эффективных нейропротекторов. Однако при сочетанном применении препаратов с различным механизмом нейротоксичности выбор нейропротектора представляет сложную задачу, т.к. он гипотетически должен обладать разнообразными рецепторотропными свойствами, проявлять антиэксайтотоксическое действие, антигипоксическое, антиоксидантное и т.д.

Чаще всего нейротоксические реакции связывают с линезолидом (Hewison C, Khan U, Bastard M, Lachenal N, Coutisson S e. a. Safety of Treatment Regimens Containing Bedaquiline and Delamanid in the endTB Cohort. Clin Infect Dis. 2022 Sep 29;75(6):1006-1013), которые проявляются энцефалопатией, периферической невропатией, невритом зрительного нерва (Narita M, Tsuji BT, Yu VL. Linezolid-associated peripheral and optic neuropathy, lactic acidosis, and serotonin syndrome. Pharmacotherapy. 2007 Aug;27(8):1189-97; Frippiat F, Bergiers C, Michel C, Dujardin JP, Derue G. Severe bilateral optic neuritis associated with prolonged linezolid therapy. J Antimicrob Chemother. 2004 Jun;53(6):1114-5; Bressler AM, Zimmer SM, Gilmore JL, Somani J. Peripheral neuropathy associated with prolonged use of linezolid. Lancet Infect Dis. 2004 Aug; 4(8):528-31). Согласно метаанализу, 64% пациентов с МЛУ ТБ прекратили прием линезолида из-за периферической нейропатии (Lan, Z., Ahmad, N., Baghaei, P., Barkane, L., Benedetti, A., Brode, S. K., et al. Drug-associated adverse events in the treatment of multidrug-resistant tuberculosis: An individual patient data meta-analysis. The lancet. Respir. Med. 2020. 8 (4), 383-394). Частота токсических реакций на линезолид дозозависима: периферическая невропатия чаще возникала у пациентов на суточную дозу 600 мг, чем на дозу 1200 мг, при которой чаще развивалась миелосупрессия (Zhang X, Falagas ME, Vardakas KZ, Wang R, Qin R, Wang J, Liu Y. Systematic review and meta-analysis of the efficacy and safety of therapy with linezolid containing regimens in the treatment of multidrug-resistant and extensively drug-resistant tuberculosis. J Thorac Dis. 2015 Apr;7(4):603-15). Доклинические исследования токсичности линезолида, проведенные Pharmacia/Upjohn на крысах и собаках, свидетельствуют о митохондриальной токсичности линезолида (Soriano, A., , O., Mensa, J. Mitochondrial toxicity associated with linezolid. N. Engl. J. Med. (2005). 353, 2305-2306). Изучена ультраструктура митохондрий, активность ферментов дыхательной цепи митохондрий и митохондриальная ДНК (мтДНК) в образцах мышц, печени и почек, полученных от пациента, у которого развилась оптическая нейропатия, энцефалопатия, скелетная миопатия, лактоацидоз и почечная недостаточность после длительного приема линезолида. Было установлено снижение активности ферментов митохондриальной дыхательной цепи в пораженных тканях, но без ультраструктурных аномалий митохондрий и без мутаций в мт- ДНК. В эксперименте на крысах, получавших различные дозы препарата или плацебо, линезолид также индуцировал зависимое от дозы и времени снижение активности ферментов дыхательной цепи, включая комплексы I, III, IV и V в мышцах и ткани печени и уменьшение количества белка этих комплексов (De Vriese, A. S., Van Coster, R., Smet, J., Seneca, S., Lovering, A e.а. Linezolid-induced inhibition of mitochondrial protein synthesis. Clin. Infect. Dis. (2006). 42, 1111-1117). В основе патогенеза линезолид-ассоциированной невропатии лежит митохондриальное повреждение с последующей аксональной дегенерацией и повреждением так называемых мелких (немиелинизированных) волокон. Повреждение аксонов определяет и характерную клиническую картину: первыми поражаются самые длинные волокна, идущие к дистальным отделам нижних конечностей (Д.А. Иванова, Ж.Х. Заруди, Т.И. Иванова Лекарственные поражения периферической нервной системы при лечении больных ТБ// Туберкулёз и социально значимые заболевания. - 2014. №3 -С.58-64).

Таким образом, цитопатическим механизмом повреждающего действия линезолида, а также других высокоактивных противотуберкулезных препаратов, является митохондриальная дисфункция, приводящая к нарушению энергетики и оксидативному повреждению тканей ((Kalghatgi S, Spina CS, Costello JC, Liesa M, Morones-Ramirez JR, Slomovic S, Molina A, Shirihai OS, Collins JJ. Bactericidal antibiotics induce mitochondrial dysfunction and oxidative damage in Mammalian cells. Sci Transl Med. 2013 Jul 3;5(192):192ra85; Soriano, A., , O., Mensa, J. Mitochondrial toxicity associated with linezolid. N. Engl. J. Med. (2005). 353, 2305-2306). В связи с этим для снижения линезолидовой нейротоксичности целесообразно использовать препараты, целенаправленно влияющие на митохондриальную дисфункцию, одним из которых является Цитофлавин (ООО НТФФ «ПОЛИСАН», Россия).

Фармакологические эффекты цитофлавина обусловлены комплексным воздействием входящих в состав препарата компонентов: Инозин (рибоксин) + Никотинамид + Рибофлавин + Янтарная кислота. Янтарная кислота - эндогенный внутриклеточный метаболит цикла Кребса, выполняющий в клетках организма универсальную энергосинтезирующую функцию. Янтарная кислота улучшает тканевое дыхание за счет активации транспорта электронов в митохондриях. При участии кофермента флавинадениндинуклеотида (ФАД) и рибофлавина (кофермент ФАД) янтарная кислота митохондриальным ферментом сукцинатдегидрогеназой быстро трансформируется в фумаровую кислоту и далее в другие метаболиты цикла трикарбоновых кислот. Стимулирует аэробный гликолиз и синтез АТФ в клетках. Инозин является производным пурина, предшественником АТФ. Обладает способностью активировать ряд ферментов цикла Кребса, стимулируя синтез ключевых ферментов-нуклеотидов: ФАД и НАД. НАД и его фосфат (НАДФ) образуются из никотинамида путем каскада биохимических реакций. Таким образом, все компоненты препарата Цитофлавин^® являются естественными метаболитами организма и стимулируют тканевое дыхание. Сбалансированный состав данного препарата позволяет реализовывать целый ряд метаболических эффектов: антигипоксантный, антиоксидантный, антиастенический, энергизирующий, нейропротективный, противоишемический. (Шабанов П.Д. Сукцинатсодержащие нейропротекторы // Поликлиника. - 2014. - № 5-1. - С. 32-34).

Нейропротекторное действие цитофлавина, позволяющего целенаправленно влиять на митохондриальную дисфункцию, показано при ишемическом повреждении головного мозга [Федин А.И., Румянцева С.А., Пирадов М.А. и соавт. Клиническая эффективность Цитофлавина у больных с хронической ишемией головного мозга (многоцентровое плацебоконтролируемое рандомизированное исследование. Врач. 2006; 13:52-58.], при коррекции митохондриальной дисфункции, вызываемой вирусом SARS-CoV-2 (А.Е. Терешин, В.В. Кирьянова, Д.А. Решетник. Коррекция митохондриальной дисфункции в комплексной реабилитации пациентов, перенесших COVID-19 // Журнал неврологии и психиатрии им. C.C. Корсакова. - 2021. - Т. 121. - № 8. - С. 25-29). Установлено нейропротективное действие цитофлавина в условиях острых отравлений различными нейротоксикантами (Васильев С.А. Нейрометаболическая терапия острых тяжёлых отравлений: Автореф. дис. … д. м.н., Санкт-Петербург, 2008. - 35 с.) для адекватной доставки кислорода (как комбинированный антигипоксант), за счет стабилизации энергетического статуса (как энергосубстратный препарат в период тотального энергодефицита) (Г.А. Ливанов, Б.В. Батоцыренов, С.И. Глушков, М.Л. Калмансон, А.Н. Лодягин, В.Н. Мирошниченко, М.В. Александров, В.П. Амагыров Применение Цитофлавина при токсической и постгипоксической энцефалопатии. Пособие для врачей, 2009), в том числе при острой алкогольной интоксикации в составе детоксикационно-инфузионной терапии (В.Г. Белов, Ю.А. Парфенов, С.В. Оковитый. Терапия синдрома алкогольной зависимости с использованием цитофлавина//Журнал неврологии и психиатрии»; 2013. Т. 6; Вып. 2; стр. 47-50).

Известен способ профилактики побочных нейро-, кардио- и гепатотоксических реакций на противотуберкулезные препараты, заключающийся в использовании мексидола ежедневно по 0,125 г три раза в сутки в течение первого месяца химиотерапии туберкулеза (RU2362558, 02.11.2007). Пациентам с лекарственно-чувствительным туберкулезом было назначено лечение, включающее изониазид, рифампицин, пиразинамид, этамбутол или стрептомицин в общепринятых дозах. Использование мексидола позволило снизить частоту развития токсических реакций и восстановить активность антиоксидантной системы. Однако в описании изобретения не указано, как проявлялась нейротоксичность у пациентов, которые не получали мексидол, с учетом того, что основным нейротоксичным препаратом в схеме химиотерапии был изониазид, механизм токсического действия которого связан с нарушением обмена пиридоксина и глютаминовой кислоты. Современные схемы лечения больных туберкулезом с множественной лекарственной устойчивостью возбудителя основаны на комбинациях высокоактивных препаратов с различными механизмами действия (фторхинолоны, линезолид, бедаквилин, деламанид и т.д.) и изониазид в эти схемы не входит.

Известен способ лечения лекарственных полинейропатий, вызванных противотуберкулезными препаратами, заключающийся в применении мексидола по схеме: в течение 10 дней ежедневно внутримышечно по 200 мг (4 мл) в день, затем переходят на таблетированную форму по 0,125 г три раза в сутки в течение 14 дней (RU2353360, 27.04.2009). Лекарственная полинейропатия была диагностирована на 3-5 месяце от начала лечения. В неврологическом статусе пациентов выявлялись чувствительные, вегетативные, двигательные и трофические расстройства. При применении мексидола регресс неврологической симптоматики, исчезновение чувства онемения и «мурашек», восстановление двигательных и чувствительных функций наблюдался у 75% пациентов против 35,7% больных, не получавших мексидол. Однако причиной полинейропатии было длительное применение изониазида, который был основным нейротоксичным препаратом в схеме лечения большинства больных (изониазид, рифампицин, пиразинамид, стрептомицин или этамбутол). В схемы лечения больных туберкулезом с множественной лекарственной устойчивостью возбудителя изониазид не входит.

Известен способ лечения побочных нейротоксических реакций, вызванных противотуберкулезными препаратами (RU2312667C1 2006.05.25), основанный на использовании кортексина по 10 мг на физиологическом растворе, который вводят внутримышечно, на курс 10 инъекций. Кортексин представляет собой комплекс полипептидов, выделенных из коры головного мозга телят или поросят. Препарат обладает тканеспецифическим действием и стимулирует репаративные процессы в головном мозге, регулирует соотношение тормозных и возбуждающих аминокислот, восстанавливает биоэлектрическую активность головного мозга. Применение кортексина позволяет продолжить прием нейротоксичного и наиболее эффективного противотуберкулезного препарата изониазида. Однако данный способ направлен на профилактику нейротоксических реакций, вызванных изониазидом, который не применяется в схемах лечения лекарственно-устойчивого туберкулеза.

Технической проблемой, на решение которой направлено заявляемое изобретение, является разработка способа профилактики нейрототоксических реакций на комплекс высокоэффективных противотуберкулезных средств с включением линезолида, применяемых для лечения лекарственно-устойчивого туберкулеза.

Раскрытие изобретения

Техническим результатом заявляемого способа является снижение нейротоксических реакций, вызванных комплексом противотуберкулезных препаратов с включением линезолида и проявляющихся значительным нарушением двигательной активности (в основном, горизонтальной, на 34%), исследовательской активности (в 5 раз), угнетением эмоциональной сферы (в 2,8 раза), с помощью дополнительного введения препарата цитофлавин.

Технический результат достигается способом снижения нейротоксичности, вызванной комплексом противотуберкулезных препаратов, состоящий из моксифлоксацина, линезолида, циклосерина и протионамида, заключающийся в том, что животным вводят цитофлавин, при этом цитофлавин вводят внутрижелудочно в 0,1% крахмальном геле в дозе 55 мг/кг. Цитофлавин вводят за 10-15 минут до введения комплекса противотуберкулезных препаратов.

Осуществление изобретения

Снижение нейротоксичности при применении цитофлавина проявляется улучшением двигательной активности крыс, что характеризуется отсутствием достоверной разницы между показателями числа пересеченных квадратов через 14 дней введения базового противотуберкулезного комплекса + цитофлавин по сравнению с исходным уровнем до назначения всех препаратов (20,3±5,72 и 24,5±3,47, соответственно, p>0,05). Под влиянием цитофлавина значительно повысилась исследовательская активность (на 20%), что существенно отличается от показателя у крыс контрольной группы, получавших только противотуберкулезные препараты, у которых наблюдалась отрицательная динамика - снижение на 81%. Угнетение эмоционального статуса, характерного для крыс контрольной группы (на 64,7% снижение показателя груминга), не наблюдалось у животных, получавших дополнительно цитофлавин, у которых отмечалось повышение груминга на 30%.

Эффективность снижения нейротоксичности комбинации противотуберкулезных препаратов, включая линезолид, с помощью цитофлавина доказывает сравнительный анализ применения препарата цитиколин. На фоне применения цитиколина сохранялись характерные признаки нейротоксичности: снижение показателя горизонтальной двигательной активности (в 1,75 раз), исследовательской активности (в 3,4 раза) и эмоционального статуса (на 33%) по сравнению с исходными данными.

Для экспериментальных исследований использовали разработанную модель нейротоксичности (Патент RU2795524), созданную у крыс путем внутрижелудочного введения комбинации моксифлоксацин +линезолид + циклосерин+ протионамид (Mxf+ Lzd+ Cs+ Pto) в дозах, соответствующих терапевтическим дозам для человека. Доза линезолида для крыс соответствовала дозе 600 мг для человека. Нейротоксическое проявление данной комбинации препаратов характеризуется снижением горизонтальной двигательной активности, резким снижением исследовательской активности и эмоциональным угнетением по сравнению с результатами действия комбинации препаратов без включения линезолида (моксифлоксацин+ бедаквилин + циклосерин + пиразинамид), при котором не было нарушения двигательной активности.

Проявление нейротоксичности у крыс при введении им одного комплекса (Mxf+ Lzd+ Cs+ Pto) или с предварительным введением нейротропных препаратов исследовали в тесте «Открытое поле», который является интегральным показателем изменения поведенческих реакций. Оценивались двигательная активность животного, которая может служить объективным показателем возбудимости ЦНС; исследовательская активность, груминг и вегетативные функции (дефекация, уринизация), по которым можно судить о чувстве страха и тревожности.

Для доказательства эффективности цитофлавина в качестве нейропротектора при использовании комплекса ПТП с включением линезолида провели сравнение с препаратом цитиколин, который является источником холина и относится к нейропротекторам, обладающим мембраностабилизирующими, нейротрофическими и нейромодулирующими эффектами (Торшин И.Ю, Громова О.А, Стаховская Л.В., Семенов В.А., Щукин И.А. Хемотранскриптомный анализ указывает на нейротрофические и нейромодулирующие эффекты молекулы цитиколина//Неврология, нейропсихиатрия, психосоматика. 2020;12(4):91-99), ингибирует эксайтотоксичность глутамата, апоптоза и окислительного стресса (Mallah K, Couch C, Borucki DM, Toutonji A, Alshareef M and Tomlinson S Anti-inflammatory and Neuroprotective Agents in Clinical Trials for CNS Disease and Injury: Where Do We Go From Here? Front. Immunol. 2020.- 11:2021.)

Возможность реализации заявляемого изобретения показана, но не ограничена, в примерах конкретного выполнения.

Все используемые реагенты являются коммерчески доступными, все процедуры, если не оговорено особо, осуществляли при комнатной температуре или температуре окружающей среды, то есть в диапазоне от 18 до 25°C.

Использовали 24 крысы массой 330-350 г в возрасте 10-12 мес, нелинейных самок. Животные были поровну распределены на 3 группы случайным образом без подбора по типу возбудимости. Все крысы получали базовую комбинацию препаратов (Mxf+ Lzd+ Cs+ Pto) внутрижелудочно в 1% крахмальной взвеси одномоментно ежедневно в течение 14 дней. Дозы препаратов (моксифлоксацин-36 мг/кг; линезолид - 54 мг/кг; циклосерин - 90 мг/кг; протионамид -90 мг/кг) соответствовали терапевтическим дозам для человека. Крысам 2 группы дополнительно перед введением базового комплекса препаратов вводили цитофлавин в дозе 55 мг/кг, а крысам 3 группы - цитиколин в дозе 50 мг/кг. Дозы цитофлавина и цитиколина соответствуют рекомендуемым дозам для человека.

Комплексы препаратов готовили ex tempore следующим образом: таблетку каждого препарата тщательно растирали в фарфоровых ступках и добавляли необходимый объем 0,1% крахмального геля с тем, чтобы нужное количество препарата содержалось в 0,5 мл крахмальной взвеси. Непосредственно перед введением все препараты набирали в один шприц и одномоментно в общем объеме 2 мл вводили в желудок крысе. Аналогичным образом готовили цитофлавин и цитиколин в виде крахмальной взвеси и вводили крысам 2 или 3 группы за 10-15 мин до введения базового комплекса. Через 14дней всех крыс выводили из эксперимента, предварительно проведя исследование в «открытом поле».

Критериями оценки нейротоксичности являлись: клиническая картина интоксикации, динамика массы тела, результаты исследования поведенческих реакций. Поведенческие реакции оценивали в тесте «Открытое поле» в установке для больших крыс с видеонаблюдением (модификация А.Л. Маркеля). В течение 3 мин фиксировали количество пересеченных квадратов и стоек, что характеризует горизонтальную и вертикальную активность, заглядываний в норки (исследовательская активность), количество грумингов (умываний, почесываний), физиологические отправления (количество дефекаций и уринизаций). Сравнивали показатели до введения препаратов в каждой группе и через 14 дней после окончания введений. Статистическую значимость различий оценивали с помощью дисперсионного анализа Крускала-Уоллиса. Различия считали достоверными при p<0,05.

Результаты исследования.

Животные всех групп в течение всего периода исследования удовлетворительно переносили манипуляции, отрицательного влияния на динамику массы тела не наблюдали.

Результаты проведения тестов в «открытом поле» крысам контрольной группы (1), получавших только базовую комбинацию, и опытных, получавших дополнительно к базовой комбинации цитофлавин (2) или цитиколин (3), представлены в таблице 1.

Таблица 1 - Показатели поведенческих реакций у крыс контрольной и опытных групп до (исходные) и после окончания введения комбинаций препаратов (через 14 суток). Группа/ Показатели Квадраты Стойки Норки Груминг Дефекации Уринизации 1 исходные 42,6±5,6 8,1±1,71 5,2±1,24 1,7±0,35 1,0±0,67 0,7±0,21 через 14 суток 28,1±3,0* 6,5±1,13 1,0±0,26* 0,6±0,22* 1,2±0,6 0,8±0,21 2 исходные 24,5±3,47 7,8±1,42 0,83±0,48 2,17±0,70 0,5±0,5 3,2±1,22 через 14 суток 20,3±5,72 6,3±1,02 1,0±0,26 2,83±0,91 1,17±0,98 4,17±1,45 3 исходные 34,5±4,92 7,5±2,1 2,7±0,7 5,5±0,9 1,8±0,8 2,8±1,2 через 14 суток 19,7±3,0* 6,3±2,7 0,8±0,3* 3,7±0,8 1,7±0, 7 2,9±0,9

Примечание: *- достоверные различия по сравнению с исходным уровнем

В 1 группе крыс, получивших только базовую комбинацию (Mxf+ Lzd+ Cs+ Pto), наблюдали уменьшение двигательной активности по сравнению с исходным уровнем: горизонтальной на 34% по числу пересеченных квадратов (р=0,04), вертикальной - на 19,7% (p=0,45) по числу стоек. Определялось 5-ти кратное снижение исследовательской активности по количеству заглядываний в норки (р=0,009) и значительное эмоциональное угнетение по уменьшению количества грумингов (в 2,8 раз, р=0,03) по сравнению с исходными показателями перед началом введений. Не изменялось количество дефекаций и уринизаций, что свидетельствует об отсутствии чувства страха у животных.

У крыс 2 группы, которые получали цитофлавин, на фоне нейротоксичной комбинации Mxf+ Lzd+ Cs+ Pto, не наблюдалось отрицательных изменений поведенческих реакций по сравнению с исходными уровнями. Двигательная активность крыс была незначительно ниже по числу пересеченных квадратов (на 17%, p>0,05) и вертикальных стоек (19,2%, p>0,05). Показатели эмоциональной сферы улучшились: на 20% повысилась исследовательская активность и на 30% увеличился груминг по сравнению с исходными показателями.

У крыс 3 группы, получивших вместе с базовым комплексом цитиколин, была значительно снижена горизонтальная двигательная активность (в 1,7 раза, р=0,03) и на 13% (p>0,05) - вертикальная активность по сравнению с исходными показателями. Наблюдалось значительное снижение исследовательской активности в 3,4 раза (р=0,03) по сравнению с исходным уровнем. Груминг снизился в 1,5 раза, но недостоверно по сравнению с исходным показателем (p=0,16). Количество физиологических отправлений практически не изменилось, что свидетельствует об отсутствии чувства страха у крыс.

Таким образом, проведенные сравнительные исследования на экспериментальной модели нейротоксичности, в основе которой лежит комплексное сочетание нейротоксических потенциалов противотуберкулезных препаратов разного механизма действия, включая линезолид, вызывающий митохондриальную дисфункцию, позволили доказать эффективность использования цитофлавина для снижения проявления нейротоксичности. У крыс, получавших дополнительно цитофлавин к базовому комплексу ПТП, наблюдалось:

- улучшение горизонтальной двигательной активности крыс по сравнению с показателями контрольной группы (снижение на 34%) и группы с применением цитиколина (снижение на 43%);

- повышение исследовательской активности (на 20%) по сравнению с показателем крыс контрольной группы (снижение на 81%) и группы с применением цитиколина (снижение на 70%);

- повышение эмоционального статуса (на 30%) по сравнению с показателем крыс контрольной группы (снижение на 64,7%) и группы с применением цитиколина (снижение на 33%).

Изобретение относится к медицине, а именно к фтизиатрии, и может быть использовано для снижения нейротоксичности, возникающей у больных туберкулезом на применение комплекса современных противотуберкулезных средств. За 10-15 минут до введения комплекса противотуберкулезных препаратов животным вводят внутрижелудочно цитофлавин в 0,1% крахмальном геле в дозе 0,5 мг/кг. При этом комплекс противотуберкулезных препаратов состоит из моксифлоксацина, линезолида, циклосерина и протионамида. Способ позволяет снизить проявление нейротоксических реакций у экспериментальных животных, вызванных комплексом противотуберкулезных препаратов, что в свою очередь улучшает горизонтальную двигательную активность, повышает эмоциональный статус и исследовательскую активность животных. 1 табл., 1 пр.

Способ снижения нейротоксичности, вызванной комплексом противотуберкулезных препаратов, состоящим из моксифлоксацина, линезолида, циклосерина и протионамида, заключающийся в том, что животным вводят внутрижелудочно цитофлавин в 0,1% крахмальном геле в дозе 55 мг/кг за 10-15 минут до введения комплекса противотуберкулезных препаратов.