СПОСОБ ПРОФИЛАКТИКИ ОСЛОЖНЕНИЙ, ИНДУЦИРОВАННЫХ ИЗОНИАЗИДОМ Российский патент 2016 года по МПК A61K36/21 A61P31/06 A61K31/4409 

Изобретение относится к медицине и фармакологии и может быть использовано для профилактики нейро-, кардио- и гепатотоксических реакций, индуцированных изониазидом.

Химиотерапия в настоящее время остается одним из ведущих методов комплексного лечения больных туберкулезом (Мишин В.Ю. Побочное действие противотуберкулезных препаратов при стандартных и индивидуализированных режимах химиотерапии. - М., 2004. - 208 с.).

Основным препаратом во многих схемах лечения больных туберкулезом является изониазид - как наиболее эффективный противотуберкулезный препарат. Курс лечения длителен, и продолжительность приема изониазида составляет не менее 6 месяцев, что сопряжено с его малой молекулярной массой и быстрой элиминацией из организма, а также с необходимостью ежедневного приема этого препарата для постоянного поддержания терапевтической концентрации. Все это приводит к необходимости применять большие дозы изониазида, что повышает риск развития токсических осложнений со стороны различных органов и систем, обусловленных как самим препаратом, так и продуктами его метаболизма (Суханов Д.С., Иванов А.К. Гепатопротекторная терапия лекарственных поражений печени при туберкулезе органов дыхания / Информационно-методическое письмо. - Санкт-Петербург. - 2009. - 50 с.).

Наибольшую нагрузку при химиотерапии туберкулеза испытывает печень, так как является основным органом детоксикации. Нарушения функции печени у больных туберкулезом обусловлены различными факторами, среди которых важное значение имеет гипоксия и связанные с ней нарушения перекисного окисления липидов и системы антиоксидантной защиты, сопутствующие поражения печени, туберкулез печени.

На ряду с этим, нарушая обмен витаминов группы В, глютаминовой кислоты, проникая через гематоэнцефалический барьер, изониазид оказывает выраженное нейротоксическое действие, которое проявляется симптомами поражения центральной и периферической нервной системы: периферические невропатии, токсические энцефалопатии, интоксикационный психоз, мышечные подергивания и генерализованные судороги, неврит зрительных нервов. Также применение изониазида предрасполагает к миастении.

Кроме того, введение повышенных доз изониазида приводит к кардиотоксическим побочным реакциям, в том числе поражениям проводящей системы сердца. При передозировке пероральными лекарственными формами возникает нарушение функции желудочно-кишечного тракта, метаболический ацидоз. Стимуляция коры надпочечников приводит к гинекомастии, дисменорее, увеличению содержания сахара в крови, подъему системного и легочного артериального давления, усилению ишемии миокарда у пожилых пациентов.

С целью оптимизации лечения и снижения выраженности проявлений побочных реакций у больных туберкулезом органов дыхания применяют различные методы, в том числе и патогенетические: плазмаферез, гемосорбция, сукцинатсодержащие растворы, глюкокортикоиды, иммунокорректоры.

Известен способ, который заключается в отмене приема противотуберкулезных препаратов и пероральном введении урсосана в дозе 20 мг/кг однократно и энтеросгеля в дозе 10-15 г в течение 3 дней, с последующим снижением дозы урсосана до 12-15 мг/кг в сутки в 2-3 приема и энтеросгеля в возрастных дозировках на фоне возобновления приема противотуберкулезных препаратов и проводят терапию урсосаном до значения аланинаминотрансферазы (АлАТ), не превышающего значения верхней границы нормы (RU 2473346, А61К 31/695, 2013).

Известно использование при токсических поражениях печени в качестве гепатопротектора сукцинат 2-этил-6-метил-3-гидроксипиридина, называемого мексидол (RU 2189817, А61К 31/4412, 2002).

Значительную роль в комплексной терапии токсических поражений печени отводят препаратам, улучшающим микроциркуляцию тканей печени (солкосерил, актовегин, пентоксифиллин) и назначению иммуносупрессивных фармакологических препаратов (преднизолон, делигил, азатиоприн).

Однако эффективность перечисленных выше способов лечения токсических поражений печени недостаточно доказана в многоцентровых клинических исследованиях. Кроме того, использование данных способов коррекции не устраняет осложнения со стороны центральной нервной системы, желудочно-кишечного тракта и сердечно-сосудистой системы.

При парестезиях и других нейротоксических реакциях вызванных применением противотуберкулезных средств, и в частности изониазида используют пиридоксин и его коферментную форму - пиридоксальфосфат (Мишин В.Ю. Побочное действие противотуберкулезных препаратов при стандартных и индивидуализированных режимах химиотерапии. - М., 2004. - 208 с.).

Известен способ лечения побочных нейротоксических реакций, развивающихся на фоне химиотерапии туберкулеза, путем увеличения дозы пиридоксина до максимальной суточной дозы (200 мг), лечения трициклическими антидепрессантами, такими как амитриптилин по 25-75 мг на ночь. Необходимо также снижение дозы препарата, вызвавшего побочные реакции или полная его отмена. При отсутствии улучшения назначается габапентин в дозе 300 мг. Возможно применение карбамазепина по 200 мг 2 раза в день. (Руководство по лечению туберкулеза с множественной лекарственной устойчивостью. Под ред. А. Пасечникова, М.Р. Рич - Partners in Health, 2003. - 173 с.).

Недостатками данного способа является необходимость постоянного наблюдения психиатра, проявление холинолитического эффекта при применении трициклических антидепрессантов, что ограничивает возможность его использования, необходимость отмены противотуберкулезных препаратов.

Известен способ лечения побочных нейротоксических реакций, развивающихся на фоне химиотерапии туберкулеза путем применения глицина и лимонтара, которые относятся к метаболитам широкого спектра действия. Глицин назначают в таблетках по 0,1 г сублингвально 4 раза в сутки и лимонтар - перорально по 1 таблетке (0,25 г) в сутки в течение интенсивной фазы химиотерапии. (Богадельникова И.В., Перельман М.И. Антибактериальная терапия туберкулеза легких. // Учебное пособие. - М. - ММА им. И.М. Сеченова. - 1997. - 80 с.).

Недостатками данного способа является невысокая эффективность его использования, так как применение глицина и лимонтара позволяет купировать развившиеся побочные эффекты в 54% случаев и снизить их клинические проявления в 35%, в 11% случаев эффекта от использования препаратов не отмечается.

Известен способ лечения побочных нейротоксических реакций, вызванных противотуберкулезными препаратами, заключающийся в использовании кортексина по 10 мг на физиологическом растворе внутримышечно на курс 10 инъекций (RU 2312667, А61К 35/30, 2007).

Другой способ лечения лекарственных полинейропатий, вызванных противотуберкулезными препаратами, заключается в том, что наряду с противотуберкулезной терапией внутримышечно вводят мексидол по 200 мг (4 мл) ежедневно в течение 10 дней, с последующим переходом на таблетированную форму по 0,125 г три раза в сутки в течение 14 дней (RU 2353360, А61К 31/4409, 2009; RU 2362558, А61К 31/4412, 2009).

Для коррекции нарушений со стороны сердечно-сосудистой системы проводят патогенетическую терапию (кордиамин, валокордин и др.).

Известен способ коррекции кардиотоксических реакций у больных туберкулезом, заключающийся в назначении антигипоксанта гипоксен в дозе 0,25 г 2 раза в день в течение 15 дней или цитопротектора милдронат внутривенно по 5 мл 10% раствора в течение 10 дней, затем внутрь по 0,25 г 2 раза в день в течение 15 дней (Мордык А.В. Патогенез и обоснование способов коррекции кардиотоксического действия противотуберкулезных препаратов: автореф. дис. … д.м.н. - Омск. - 43 с.).

Для коррекции психовегетативных дисфункций и профилактики нейро- и кардиотоксических реакций полихимиотерапии у больных туберкулезом известен способ заключающийся в использовании афобазола по 10 мг три раза в сутки ежедневно в течение 30 дней (RU 2354371, А61К 31/415, 2009).

Недостатком перечисленных способов является необходимость одновременного и длительного приема нескольких препаратов, что увеличивает нагрузку на основной орган детоксикации - печень.

Задачей изобретения является профилактика нейро-, кардио- и гепатотоксических реакций на изониазид и, тем самым, повышение эффективности лечения больных туберкулезом.

Технический результат заключается в снижении тяжести метаболических и морфологических нарушений печени при остром поражении, индуцированном изониазидом, уменьшении выраженности патологических изменений со стороны сердечно-сосудистой системы и ЦНС.

Технический результат достигается тем, что способ профилактики осложнений, индуцированных изониазидом, включает наряду с введением изониазида использование масла семян амаранта, полученного холодным прессованием зародышей и оболочек семян амаранта в дозе 600 мг 1 раз в день за 1 час до еды в первой половине дня ежедневно курсом 3-4 недели. При продолжении противотуберкулезной терапии используется в качестве постоянного сопровождения с перерывом между курсами 1 месяц.

Выделенное холодным прессованием из зародышей и оболочек семян амаранта масло (RU 94044961, С11В 1/10, А23К 1/14, 1996) содержит фосфолипиды, токоферол (витамин Е), ненасыщенные жирные кислоты, сквален, фитостерины, и эфиры стеринов и каротиноиды.

Масло семян амаранта обладает широким спектром фармакологической активности. Известны антитоксическая и гепатопротекторная активность масла семян амаранта (Музалевская Е.Н. Первичная оценка антитоксической и гепатопротекторной активности масла семян амаранта хвостатого / Е.Н. Музалевская, В.А. Николаевский // Проблемы разработки новых лекарственных средств: материалы Первой Всероссийской научно-практической конференции молодых ученых (3-5 июня, 2013). - М., 2013. - С. 74), гиполипидемическое и гипохолестеринемическое действие (Коренская И.М. Амарантовое масло снижает содержание общего холестерина в крови / И.М. Коренская, А.П. Салей, A.M. Макеев // Пути и формы совершенствования фармацевтического образования: мат-лы Межрегион. науч. - мет. конференции «Фармобразование - 2003» (21-23 апр. 2003). - Воронеж, 2003. - С. 178-180; Коренская И.М. Сравнительный фармакологический анализ влияния амарантового и льняного масел на динамику липидного обмена крыс в условиях холестериновой нагрузки / И.М. Коренская, В.Ю. Сулин, Е.Ф. Сафонова, А.Н. Постыка // Вестник Воронежского государственного университета: серия химия, биология, фармация. - №1. - 2006. - С. 204-208), антиоксидантное действие (Близнецова Г.Н. Роль процессов свободнорадикального окисления в механизме гепатопротекторного действия масла семян амаранта / Г.Н. Близнецова, М.И. Рецкий, Н.Д. Полякова-Семенова, И.М. Коренская // Биомедицина. - 2006. - №2. - С. 105-112), антибактериальная активность (Коренская И.М. Изучение антибактериальной активности амарантового масла / И.М. Коренская, И.Е. Измалкова // Проблемы здоровьесбережения школьников и студентов. Новые науч. тенд. в медицине и фармации: мат-лы Междун. конф. (6-7 февраля 2008). - Воронеж, 2008, - С. 226-227), противоожоговое действие (Коренская И.М. Амарантовое масло как противоожоговое средство / И.М. Коренская, Т.А. Горохова, С.Н. Соленникова и др. // Actualni vymozenosti vedy - 2012, Materialy VIII Mexinorodni vedecko-practika conference. 27.06.2012-05.07.2012 Dil. 17. Biologicke vedy Chemie a chemicka technologiei - Praha: Publishing House "Education and Science" s.r.o. 2012 - S. 5-6), кардиопротекторное действие (Yelisyeyeva O.P, Semen K.O, Ostrovska G.V, Kaminskyy D.V, Sirota T.V, Zarkovic N, Mazur D, Lutsyk O.D, Rybalchenko K, Bast A. / The effect of Amaranth oil on monolayers of artificial lipids and hepatocyte plasma membranes with adrenalin-induced stress. // Food Chemistry, Vol. 147, №15, 2014, p. 152-159). Предложено средство для профилактики и лечения хронических заболеваний печени (RU 2526172, А61К 36/21, 2012).

Однако нами не обнаружен источник, в котором изложено использование масла семян амаранта для профилактики осложнений, индуцированных изониазидом.

Предлагаемый способ был изучен в эксперименте на белых аутбредных крысах самцах, половозрелых продуктивного возраста (3 мес.), содержащихся в стандартных условиях вивария при естественном освещении, синхронизированных по питанию при свободном доступе к воде. Работу с животными проводят в соответствии с Приказом МЗ РФ №267 от 19.06.2003 г. «Об утверждении правил лабораторной практики».

Моделирование интоксикации осуществляли внутрижелудочным введением животным после пищевой депривации изониазида в виде 1% крахмальной слизи в дозе 542 мг/кг массы тела один раз в сутки в течение 6 суток (контрольная группа). Масло семян амаранта вводили с профилактической целью внутрижелудочно в дозе 50 мг/кг (в пересчете на фосфолипиды) за 1 час до введения изониазида 1 раз в сутки в течение 6 суток (опытная группа). Введение перечисленных веществ осуществляли с помощью металлического атравматичного желудочного зонда.

Статистическую обработку полученных данных проводили с использованием пакета лицензионных прикладных программ «Statistica 5.0» на персональном компьютере Pentium Dual Core. При помощи общепринятых в биологии и медицине методов математической статистики определяли средние значения по вариационному ряду, ошибку среднего. Достоверность различий между соответствующими показателями в интактных, контрольных и опытных группах оценивали с использованием t-критерия Стьюдента.

На фиг. 1 представлена Таблица 1, включающая данные о влиянии введения масла семян амаранта на изменение эмоционально-поведенческих и двигательных реакций крыс при интоксикации, вызванной изониазидом (AM - масло семян амаранта; ^* - р<0,05; ^** - р<0,01 - достоверность различий при сравнении с исходным; ⁺ - р<0,05; ⁺⁺ - р<0,01 - достоверность различий при сравнении с контролем; ВНР - время нахождения решения задачи; ВВР - время выполнения решения задачи; ВРЗ - вероятность решения задачи, %; ИПД - индекс психоэмоционального воздействия; ИДД - индекс моторно-двигательного воздействия; на фиг. 2 - Таблица 2, содержащая данные о изменение биохимических показателей сыворотки крови на фоне интоксикации, индуцированной изониазидом (AM - масло семян амаранта; ^* - р<0,05; ^** - р<0,01 - достоверность различий при сравнении с интактом; ⁺ - р<0,05; ⁺⁺ - р<0,01 - достоверность различий при сравнении с контролем); на фиг. 3 - гистологическая картина печени крыс при введении масла семян амаранта на фоне интоксикации, индуцированной изониазидом, окраска - гематоксилин-эозин, ув. ×100 (А, Б - контроль; В, Г - масло семян амаранта); на фиг. 4 - гистологическая картина печени крыс при введении масла семян амаранта на фоне интоксикации, индуцированной изониазидом, окраска - Red О, ув. ×100 (А, Б - контроль; В, Г - масло семян амаранта); на фиг. 5 - Таблица 3, содержащие данные о влиянии введения масла семян амаранта на показатели электрокардиограммы крыс при интоксикации, вызванной изониазидом (AM - масло семян амаранта; ^** - р<0,01 - достоверность различий при сравнении с исходным; ⁺ - р<0,05; ⁺⁺ - р<0,01 - достоверность различий при сравнении с контролем).

Изобретение иллюстрируется следующими примерами.

Пример 1. Уменьшение выраженности эмоционально-поведенческих и двигательных нарушений у крыс на фоне введения масла семян амаранта при интоксикации изониазидом.

Исследование выполнено на 14 белых аутбредных крысах самцах массой 210,0±8,10 г, которые были разделены случайным образом на 2 группы по 7 в каждой - контрольная и опытная.

Психоэмоциональное состояние экспериментальных животных оценивали путем построения эвристической модели поиска животными решения задачи по спасению из эмоционально-физической экстремальной ситуации на фоне интоксикации (RU 2506649, G09B 23/28, 2012). Данная модель предполагает оценку влияния на критические звенья патогенеза различных заболеваний, что позволяет выявить важные, в том числе нежелательные фармакологические эффекты тестируемых соединений. Моделирование стрессовой ситуации достигают помещением животных в цилиндр с холодной водой Т=11°C. Регистрировали время нахождения решения (ВНР) и время выполнения (ВВР) задачи покинуть цилиндр при помощи предлагаемых средств спасения (рейки и веревки). Согласно методике рассчитывают: процентную вероятность решения задачи (ВРЗ), Индекс психоэмоционального воздействия (ИПД), Индекс моторно-двигательного воздействия (ИДД).

В результате исследования установлено, что интоксикация, вызванная внутрижелудочным введением изониазида в дозе 542 мг/кг в течение 6 суток, сопровождалась на 7 сутки наблюдения снижением вероятности решения задачи на 43%, увеличением времени нахождения (ВНР) и времени выполнения решения (ВВР) соответственно в 2,3 раза (р<0,01) и 5,4 раза (р<0,05), что свидетельствует о снижении психомоторной активности и нарушении функции скелетных мышц вследствие повреждающего действия изониазида на ЦНС и периферическую иннервацию. При этом общее время выполнения задания (ВНР+ВВР) составляло в среднем 30,17±5,65 секунд, что в 3 раза превышало показатель первичного тестирования здоровых животных (р<0,05) (таблица на фиг. 1).

На 10 сутки исследования при 100-процентном выполнении задания зафиксировано достоверное относительно данных первичного тестирования увеличение времени выполнения задания в 4,4 раза (р<0,05). Общее время выполнения задания (ВНР+ВВР) в 2 раза превышало показателя первичного тестирования здоровых животных (р<0,05).

Профилактическое введение масла семян амаранта на 7 сутки наблюдения обеспечило повышение вероятности решения задачи в 1,5 раза, достоверное снижение времени нахождения и времени выполнения решения в 1,7 раза и 1,9 раза (р<0,01) (таблица на фиг. 1). Согласно расчетам ИПД составил 0,99, ИДД - 0,59, что в целом свидетельствует о нормализации психомоторной и двигательной активности животных, а также их общего клинического состояния под влиянием масла семян амаранта.

На 10 сутки исследования общее время выполнения задачи по спасению было достоверно ниже показателя контроля в 3,7 раза (р<0,01). Указанные изменения выражались в значительном уменьшении значений индекса психомоторного воздействия (составил 0,54) и индекса моторно-двигательного воздействия (составил 0,44) при 100-процентном выполнении задачи.

Таким образом, введение масла семян амаранта с профилактической целью на фоне интоксикации изониазидом в отличие от животных контрольной группы уменьшало выраженность побочных явлений со стороны ЦНС, что сопровождалось нормализацией психомоторной и двигательной активности и улучшением общего клинического состояния животных.

Пример 2. Уменьшение тяжести метаболических и морфологических нарушений печени на фоне введения масла семян амаранта при интоксикации изониазидом.

Исследование выполнено на 72 белых аутбредных половозрелых крысах самцах массой 205,0±9,2 г, которые были разделены случайным образом на 12 групп по 6 в каждой: 6 контрольных и 6 опытных групп.

Критериями оценки эффективности служили: выживаемость, показатели биохимического анализа крови: маркеры печеночного цитолиза - аланинаминотрансфераза (АлАТ), аспартатаминотрансфераза (АсАТ); концентрация малонового диальдегида (МДА); протромбиновое время, патолого-морфологическое исследование печени.

Забор крови осуществляли из бедренной артерии наркотизированных животных. Активность АлАТ и АсАТ в сыворотке крови (Е/л) определяли на биохимическом анализаторе открытого типа Furuno 270 кинетическим методом (УФ-тест в соответствии с методом IFCC) с использованием диагностических наборов «Fluitest GPT»; концентрацию малонового диальдегида в сыворотке крови - спектрофотометрически по реакции с 2-тиобарбитуровой кислотой в кислой среде.

Определение протромбинового времени осуществляли с использованием диагностического набора «Диагем-П».

Рассчитывали весовой коэффициент печени (отношение массы органа к массе животного). Для гистологических исследований фрагменты печени фиксировали в 10% растворе формалина, после чего по общепринятой методике заливали в парафин, из парафиновых блоков готовили серийные срезы толщиной 3-4 мкм. Окраску препаратов для изучения общей морфологической структуры проводили гематоксилином с эозином.

Для гистохимических исследований фрагменты печени фиксировали в 10% растворе формалина с добавлением кальция хлорида, после чего по общепринятой методике на замораживающем микротоме готовили серийные срезы толщиной 3-4 мкм. Окраску препаратов для выявления липидов проводили красителем Red О.

Анализ гистологических гистохимических препаратов проводили при помощи микроскопа светового биологического Levenhuk (Россия). Съемку выполнялась с помощью фиксированной USB-камеры для микроскопа Levenhuk 8 Mpixels, соединенной с персональным компьютером.

В результате проведенного исследования установлено, что в контрольной группе животных через 50 минут после однократного внутрижелудочного введения изониазида в дозе 542 мг/кг у 100% животных зафиксированы клонико-тонические судороги различной продолжительности (от 40 минут до 2,5 часов), при этом летальность составила 33%. В опытных группах судороги и гибель животных не зафиксированы.

Клиническая картина интоксикации у контрольных животных характеризовалась гиподинамией, заторможенностью, взъерошенностью шерсти, выраженным снижением потребления корма и увеличением потребления воды. При визуальном осмотре крыс на 3 и 7 сутки исследования живот животных значительно увеличен в размере и вздут. На 7 сутки исследования животные неподвижны, шерстяной покров неопрятный, сильно взъерошен, дефекации отсутствовали.

Состояние животных в опытных группах в отличие от контрольных на протяжении всего периода наблюдения характеризовалось менее выраженными симптомами интоксикации. При визуальном осмотре крыс в отличие от контроля на 3 сутки наблюдения животные активны, живот незначительно увеличен в размере у 1/3 животных; на 7 сутки живот незначительно увеличен в размере.

Биохимическое исследование сыворотки крови в контрольной группе животных через 1 час после однократного введения изониазида в дозе ЛД₁₅ выявило 2-кратное повышение активности АлАТ (р<0,05) относительно показателей животных интактной группы (таблица на фиг. 2). Через 24 часа в данном исследовании наблюдалось уменьшение активности АлАТ (р<0,05) на 57,7% и АсАТ на 56,5% (р<0,05), которая прогрессивно снижалась в течение 10 суток наблюдения. Вместе с тем, гистохимически выявлена диффузная жировая дистрофия печени. Начиная с первых суток исследования и на протяжении всего периода наблюдения было зафиксировано повышение в сыворотке крови концентрации малонового диальдегида от 13% до 20% (р<0,05). Обнаружено достоверное удлинение протромбинового времени на 38,3% (р<0,05).

После шестикратного введения изониазида в дозе 542 мг/кг на 7 сутки исследования наблюдалось снижение в сыворотке крови активности АлАТ и АсАТ соответственно на 70,2% и 64,9% (р<0,05). Вместе с тем, концентрация малонового диальдегида превышала показатель интакта на 19,8% (р<0,05). Кроме того, наблюдалось увеличение на 107,7% (р<0,01) показателя протромбинового времени. На 10 сутки наблюдения сохранялась низкая активность аминотрансфераз.

На 14 сутки исследования в сыворотке крови наблюдалось повышение активности АлАТ на 132,4% (р<0,05) по отношению к 10 суткам исследования, однако ее уровень был ниже интакта на 22,6% (р<0,05). При этом активность АсАТ превышала показатель интакта на 39,64% (р<0,01). Протромбиновое время было выше показателя интакта на 57,5% (р<0,05) (табл. 2).

В опытной группе животных, получавших с профилактической целью масло семян амаранта, через 1 час после однократного введения изониазида установлено достоверное относительно показателей контроля снижение активности АлАТ на 33,1% (р<0,05). Через 24 часа выявленные различия активности аминотрансфераз интактной и опытной групп были статистически не достоверны (таблица на фиг. 2). Показатель протромбинового времени был выше интакта на 27,5% (р<0,05) и ниже относительно времени контроля на 7,8% (р<0,05).

На 7 сутки исследования профилактическое введение масла семян амаранта сопровождалось повышением относительно контроля активности АсАТ на 77,6% (р<0,05), однако активность аминотрансферазы была ниже уровня интактных животных на 37,6% (р<0,05). Протромбиновое время было достоверно ниже контроля на 34,2% (р<0,05).

На 10 сутки исследования, в отличие от группы контроля, наблюдалась нормализация активности АсАТ (таблица на фиг. 2). Активности АлАТ возвращалась к норме к 14 суткам исследования.

Масса печени животных контрольной группы была достоверно увеличена на 7 сутки наблюдения - на 31,7% на 10 сутки - на 21,7% (р<0,01). Желудок увеличен в размере и переполнен не переваренными пищевыми массами.

На 14 сутки исследования масса печени достоверно ниже интакта на 13,0% (р<0,01). Желудок нормального размера.

В опытных группах животных, получавших масло семян амаранта с профилактической целью в отличие от контрольной группы на 7 и 10 сутки наблюдения желудок соответствовал физиологической норме, выявленные изменения массы печени были статистически не значимы.

При микроскопическом исследовании гистологических срезов печени через 24 часа после однократного введения изониазида в дозе 542 мг/кг в контрольной группе животных наблюдались деструктивные изменения, характеризующиеся уплотнением балочной структуры долек и появлением клеток с приближенным к некробиозу состоянием. Отмечено разрыхление стенок сосудов, наличие форменных элементов крови в центральной вене (фиг. 3А). На срезах, окрашенных Red О, цитоплазма гепатоцитов заполнена мелкими и крупными каплями жира, что свидетельствует о диффузной жировой дистрофии печени и коррелирует с данными биохимических и патолого-морфологических исследований (фиг. 4А).

На 10 сутки исследования выявлены дискомплексаторные и дистрофические нарушения. Мелкокапельная жировая дистрофия и тотальные очаги некробиоза расположены на большей части печеночной дольки (фиг. 3Б). На срезах, окрашенных Red О, цитоплазма гепатоцитов заполнена мелкими и крупными каплями жира, жировая дистрофия носит диффузный характер (фиг. 4Б).

На 14 сутки исследования балочная структура печени была выражена слабо. На срезах, окрашенных Red О, отмечено наличие остаточных явлений жировой дистрофии.

В опытной группе животных, получавших с профилактической целью масло семян амаранта, через 24 часа после однократного введения изониазида в дозе 542 мг/кг наблюдалось сохранение архитектоники и балочной структуры печеночных долек в пределах нормы. Гепатоциты средних размеров с хорошо структурированным округлым ядром (фиг. 3В). На срезах, окрашенных Red О, степень и распространенность жировой дистрофии менее выражена, чем в контроле, жировые капли преимущественно расположены на периферии печеночных балок (фиг. 4В). На 14 сутки исследования отмечено улучшение архитектоники печени с остаточными явлениями дистрофии (фиг. 3Г; фиг. 4Г).

Таким образом, предлагаемый способ позволяет эффективно снижать тяжесть метаболических и морфологических нарушений печени при остром поражении печени, индуцированном изониазидом.

Пример 3. Исследование влияния масла семян амаранта на функциональную активность сердца на фоне интоксикации, индуцированной изониазидом (по данным электрокардиограммы).

Запись электрокардиограмм животных выполняли на электрокардиографе ЭК1Т-04 АКСИОН (Россия) при усилении 20 mv и скорости движения ленты 50 мм/сек во втором стандартном отведении. Исследование выполнено на 72 белых аутбредных половозрелых крысах самцах массой 205,0±9,2 г, которые были разделены случайным образом на 12 групп по 6 в каждой: 6 контрольных и 6 опытных групп.

В результате исследования на электрокардиограммах крыс через 1 час и 24 часа после однократного введения изониазида в дозе 542 мг/кг выявлено достоверное уменьшение длительности интервала QT (р<0,01). При введении изониазида в течение 6 суток однонаправленное действие наблюдалось на 14 сутки наблюдения (таблица на фиг. 5).

В опытных группах животных, получавших масло семян амаранта с профилактической целью, статистически значимых изменений на электрокардиограмме не выявлено.

Таким образом, введение масла семян амаранта с профилактической целью предотвращает развитие изменений на электрокардиограмме после однократного и многократного введения изониазида.

Изобретение относится к медицине, а именно терапии, и может быть использовано для профилактики осложнений, индуцированных изониазидом. Для этого, наряду с введением изониазида, используют масла семян амаранта, полученного холодным прессованием зародышей и оболочек семян амаранта в дозе 600 мг 1 раз в день за 1 час до еды в первой половине дня ежедневно курсом 3-4 недели, при продолжении противотуберкулезной терапии используют в качестве постоянного сопровождения с перерывом между курсами 1 месяц. Изобретение обеспечивает снижение тяжести метаболических и морфологических нарушений печени при остром поражении, индуцированном изониазидом, уменьшении выраженности патологических изменений со стороны сердечно-сосудистой системы и ЦНС. 2 ил., 3 табл., 3 пр.

Способ профилактики осложнений, индуцированных изониазидом, включает, наряду с введением изониазида, использование масла семян амаранта, полученного холодным прессованием зародышей и оболочек семян амаранта в дозе 600 мг 1 раз в день за 1 час до еды в первой половине дня ежедневно курсом 3-4 недели, при продолжении противотуберкулезной терапии используется в качестве постоянного сопровождения с перерывом между курсами 1 месяц.