Способ прогнозирования риска развития ишемической болезни сердца у мужчин с сахарным диабетом 2 типа на основе генотипирования полиморфизма rs16931366 гена ITPR2 Российский патент 2024 года по МПК G01N33/58 C12Q1/6806 C12Q1/6827 C12Q1/686 C12Q1/6876 C12Q1/6883 G16H50/30 

Изобретение относится к области медицинской диагностики, может быть использовано для прогнозирования риска развития ишемической болезни сердца у мужчин Центральной России с сахарным диабетом 2 типа.

Ишемическая болезнь сердца (ИБС) представляет собой острую или хроническую дисфункцию миокарда вследствие относительного или абсолютного уменьшения снабжения миокарда артериальной кровью, чаще всего связанную с патологическим процессом в системе коронарных артерий, и занимает лидирующие позиции в структуре смертности взрослого населения во всем мире [Shao C, Wang J, Tian J, Tang YD. Coronary Artery Disease: From Mechanism to Clinical Practice. Adv Exp Med Biol. 2020;1177:1-36. doi: 10.1007/978-981-15-2517-9_1]. На фоне сахарного диабета 2 типа ИБС, как правило, раньше манифестирует и быстрее прогрессирует [Naito R, Kasai T. Coronary artery disease in type 2 diabetes mellitus: Recent treatment strategies and future perspectives. World J Cardiol. 2015 Mar 26;7(3):119-24. doi: 10.4330/wjc.v7.i3.119]. При этом оба заболевания, и сахарный диабет 2 типа, и ИБС являются мультифакториальными полигенными заболеваниями, развивающимися в результате сложных взаимодействий различных групп генов и средовых факторов риска [Goodarzi MO, Rotter JI. Genetics Insights in the Relationship Between Type 2 Diabetes and Coronary Heart Disease. Circ Res. 2020 May 22;126(11):1526-1548. doi: 10.1161/CIRCRESAHA.119.316065]. Ген ITPR2 кодирует рецептор 2 типа инозитол-1,4,5-трисфосфата и по данным полногеномного ассоциативного исследования связан с содержанием атерогенных липопротеидов низкой плотности в плазме крови [Richardson TG, Sanderson E, Palmer TM, Ala-Korpela M, Ference BA, Davey Smith G, Holmes MV. Evaluating the relationship between circulating lipoprotein lipids and apolipoproteins with risk of coronary heart disease: A multivariable Mendelian randomisation analysis. PLoS Med. 2020 Mar 23;17(3):e1003062. doi: 10.1371/journal.pmed.1003062]. По данным биоинформатического ресурса VannoPortal [http://www.mulinlab.org/] полиморфный вариант rs16931366 (A>C) ITPR2 является патогенным вариантом с регуляторным эпигенетическим потенциалом в ткани миокарда и может рассматриваться как генетический маркер ИБС.

Известен способ прогнозирования риска развития ишемической болезни сердца (патент № RU 2007117477 A), включающий определение наличия факторов риска, таких как психоэмоциональный стресс, артериальная гипертония, возраст (старше 50 лет), дислипидемия (повышение показателей холестерина, триглицеридов и бета-липопротеидов), поведенческий тип А в анамнезе, присутствие каждого из признаков оценивается как 1 балл, а отсутствие как 0 баллов, и показатель риска (А) рассчитывают по формуле: А=0,043 + 0,631⋅стресс + 0,129·АГ + 0,154⋅возраст (старше 50 лет) + 0,077⋅дислипидемия + 0,234⋅повед. тип А. Если показатель составляет 0,043-0,451 усл.ед., расценивается как низкий риск развития ишемической болезни сердца, от 0,452 до 0,859 – средний, от 0,860 до 1,268 – высокий.

Однако данный способ не учитывает пол пациентов и наличие у них сахарного диабета 2 типа.

Известен способ прогнозирования риска наличия ишемической болезни сердца (ИБС) (патент № RU 2747254 C1 от 29.04.2021), характеризующийся тем, что пациентам выполняют ультразвуковое исследование сонных артерий, определяют количество атеросклеротических бляшек (АСБ) на шести участках бассейна сонных артерий: на протяжении обеих общих сонных артерий, обеих бифуркаций и обеих внутренних сонных артерий, после чего число АСБ суммируют и на основании количества АСБ, учитывая пол и возраст, прогнозируют высокий риск наличия ИБС: у мужчин возрастной группы 30-49 лет при диагностике 3-х и более АСБ в сонных артериях, у мужчин возрастных групп 50-59 лет и 60-75 лет при диагностике у них не более 2-х АСБ, у женщин возрастной группы 50-59 лет при диагностике 3-х и более АСБ и у женщин возрастной группы 60-75 лет при диагностике у них не более 2-х АСБ; а очень высокий риск наличия ИБС у мужчин возрастной группы 50-59 лет и 60-75 лет и у женщин возрастной группы 60-75 лет при диагностике 3-х или более АСБ.

Данный метод не учитывает индивидуальных генетических особенностей пациентов, а также факт наличия у них сахарного диабета 2 типа, что может иметь значение для развития ИБС.

Наиболее близок по результату исследования способ прогнозирования риска развития ищемической болезни сердца на основании данных генетического тестирования (патент № RU 2762958 C1 от 24.12.2021), характеризующийся тем, что проводят генетическую диагностику пациентов методом секвенирования следующего поколения (NGS), на основании которого выявляют факт наличия редких, с частотой минорного аллея в популяции менее 1%, и низкочастотных, с частотой минорного аллея в популяции от 1% до 5%, вариантов нуклеотидной последовательности (ВНП) в генах LDLR, АРОВ, PCSK9, АРОС2, АРОА5, LPL, ANGPTL3, АРОСЗ, ANGPTL4 и 59 частых, с частотой минорного аллея в популяции более 5%, ВНП: rs2479409, rs629301, rs12027135, rs2642442, rs514230, rs2131925, rs12748152, rs267733, rs1367117, rs4299376, rs2710642, rs10490626, rs2030746, rs1250229, rs11563251, rs7640978, rs17404153, rs6831256, rs12916, rs6882076, rs4530754, rs3757354, rs1800562, rs1564348, rs3177928, rs9488822, rs12670798, rs2072183, rs4722551, rs9987289, rs11136341, rs2081687, rs2954029, rs10102164, rs3780181, rs2255141, rs11220462, rs174546, rs964184, rs11065987, rs1169288, rs4942486, rs8017377, rs3764261, rs2000999, rs7206971, rs1801689, rs314253, rs6511720, rs4420638, rs10401969, rs6029526, rs2902940, rs364585, rs2328223, rs5763662, rs4253772, rs429358, rs7412, далее из всех выявленных в результате генетической диагностики редких и низкочастотных ВНП в генах LDLR, АРОВ, PCSK9, АРОС2, АРОА5, LPL, ANGPTL3, АРОСЗ и ANGPTL4 отбирают ВНП, которые удовлетворяют следующим двум общим критериям: частота минорного аллеля ВНП менее 5% или отсутствие в базе Genome Aggregation Database, и тип ВНП как делеция, инсерция или несинонимичная замена в протеин-кодирующей части гена или преждевременный стоп-кодон или мутация в сайтах сплайсинга, а также по крайней мере одному дополнительному критерию редких и низкочастотных ВНП: тип ВНП по классификации American College of Medical Genetics and Genomics (ACMG) 2015 года как «патогенный» или «вероятно-патогенный», или ВНП, аннотированные в базе данных ClinVar как «патогенный» или «вероятно-патогенный», или ВНП rs11591147 гена PCSK9, или ВНП rs72658867 гена LDLR, затем на основании отобранных по критериям редких и низкочастотных ВНП в генах LDLR, АРОВ, PCSK9, АРОС2, АРОА5, LPL, ANGPTL3, АРОСЗ и ANGPTL4 осуществляют разделение пациентов на две группы: ВНП с повышенным риском ИБС и ВНП со сниженным риском ИБС, и каждый ВНП получает соответствующий риску балл, при этом к группе редких и низкочастотных ВНП с повышенным риском ИБС относят: редкие и низкочастотные ВНП гена LDLR за исключением ВНП rs72658867, и признак оценивают в 4 балла на каждую минорную аллель ВНП гена LDLR, редкие и низкочастотные ВНП гена LPL, АРОС2 и АРОА5, и признак оценивают в 2 балла на каждую минорную аллель ВНП генов LPL, АРОС2 и АРОА5, редкие и низкочастотные ВНП генов АРОВ и PCSK9, связанные с развитием семейной гиперхолестеринемии, и признак оценивают в 2 балла на каждую минорную аллель отобранных ВНП генов АРОВ и PCSK9, а к группе редких и низкочастотных ВНП со сниженным риском ИБС относят: редкие и низкочастотные ВНП генов ANGPTL3 и ANGPTL4, и признак оценивают в (-1) балл на каждую минорную аллель ВНП генов ANGPTL3 и ANGPTL4, редкие и низкочастотные ВНП генов АРОВ, PCSK9 и АРОСЗ, приводящие к развитию семейной гипобеталипопротеинемии, и признак оценивают в (-1) балл на каждую минорную аллель отобранных ВНП, редкие и низкочастотные ВНП rs11591147 гена PCSK9 и rs72658867 гена LDLR, и признак оценивают в (-0,5) балла на каждую минорную аллель отобранных ВНП, далее проводят суммирование полученных баллов для каждой минорной аллели каждого редкого и низкочастотного ВНП генов LDLR, АРОВ, PCSK9, АРОС2, АРОА5, LPL, ANGPTL3, АРОСЗ, ANGPTL4, при этом значения числа минорных аллелей у пациента могут иметь значения 0, 1 или 2, которые определяются на основании данных генетической диагностики и могут соответствовать значениям: 0 - при отсутствии у пациента минорной аллели в определяемом ВНП, 1 - гетерозигота, при наличии у пациента одной минорной аллели в определяемом ВНП или 2 - гомозигота, при наличии у пациента двух минорных аллелей в определяемом ВНП, затем на основании полученного суммарного балла за редкие и низкочастотные ВНП пациентов делят на 3 основные группы: со значением балла за редкие и низкочастотные ВНП 2 балла и более - с очень высоким генетическим риском развития ишемической болезни сердца (ИБС); со значением балла за редкие и низкочастотные ВНП (-0,5) балла или менее - с минимальным относительным генетическим риском развития ИБС, а при значении балла за редкие и низкочастотные ВНП от 0 до 1,5, дополнительно на основании генетического анализа генотипов 59 частых ВНП рассчитывают значение балла шкалы генетического риска для 59 частых ВНП (ШГР59) по формуле: ШГР59=(-(b-коэффициент для ВНП rs2479409*число аллелей риска для ВНП rs2479409 + b-коэффициент для ВНП rs629301*число аллелей риска для ВНП rs629301 + b-коэффициент для ВНП rs12027135*число аллелей риска для ВНП rs12027135 + b-коэффициент для ВНП rs2642442*число аллелей риска для ВНП rs2642442 + b-коэффициент для ВНП rs514230*число аллелей риска для ВНП rs514230 + b-коэффициент для ВНП rs2131925*число аллелей риска для ВНП rs2131925 + b-коэффициент для ВНП rs12748152*число аллелей риска для ВНП rs12748152 + b-коэффициент для ВНП rs267733*число аллелей риска для ВНП rs267733 + b-коэффициент для ВНП rs1367117*число аллелей риска для ВНП rs1367117 + b-коэффициент для ВНП rs4299376*число аллелей риска для ВНП rs4299376 + b-коэффициент для ВНП rs 2710642*число аллелей риска для ВНП rs2710642 + b-коэффициент для ВНП rs10490626*число аллелей риска для ВНП rs10490626 + b-коэффициент для ВНП rs2030746* число аллелей риска для ВНП rs2030746 + b-коэффициент для ВНП rs1250229*число аллелей риска для ВНП rs1250229 + b-коэффициент для ВНП rs11563251*число аллелей риска для ВНП rs11563251 + b-коэффициент для ВНП rs7640978*число аллелей риска для ВНП rs7640978 + b-коэффициент для ВНП rs17404153*число аллелей риска для ВНП rs17404153 + b-коэффициент для ВНП rs6831256*число аллелей риска для ВНП rs6831256 + b-коэффициент для ВНП rs12916*число аллелей риска для ВНП rs12916 + b-коэффициент для ВНП rs6882076*число аллелей риска для ВНП rs6882076 + b-коэффициент для ВНП rs4530754*число аллелей риска для ВНП rs4530754 + b-коэффициент для ВНП rs3757354*число аллелей риска для ВНП rs3757354 + b-коэффициент для ВНП rs1800562*число аллелей риска для ВНП rs1800562 + b-коэффициент для ВНП rs1564348*число аллелей риска для ВНП rs1564348 + b-коэффициент для ВНП rs3177928*число аллелей риска для ВНП rs3177928 + b-коэффициент для ВНП rs9488822*число аллелей риска для ВНП rs9488822 + b-коэффициент для ВНП rs12670798*число аллелей риска для ВНП rs12670798 + b-коэффициент для ВНП rs2072183*число аллелей риска для ВНП rs2072183 + b-коэффициент для ВНП rs4722551*число аллелей риска для ВНП rs4722551 + b-коэффициент для ВНП rs9987289*число аллелей риска для ВНП rs9987289 + b-коэффициент для ВНП rs11136341*число аллелей риска для ВНП rs11136341 + b-коэффициент для ВНП rs2081687*число аллелей риска для ВНП rs2081687 + b-коэффициент для ВНП rs2954029*число аллелей риска для ВНП rs2954029 + b-коэффициент для ВНП rs10102164*число аллелей риска для ВНП rs10102164 + b-коэффициент для ВНП rs3780181*число аллелей риска для ВНП rs3780181 + b-коэффициент для ВНП rs2255141*число аллелей риска для ВНП rs2255141 + b-коэффициент для ВНП rs11220462*число аллелей риска для ВНП rs11220462 + b-коэффициент для ВНП rs174546*число аллелей риска для ВНП rs174546 + b-коэффициент для ВНП rs964184*число аллелей риска для ВНП rs964184 + b-коэффициент для ВНП rs11065987*число аллелей риска для ВНП rs11065987 + b-коэффициент для ВНП rs169288*число аллелей риска для ВНП rs1169288 + b-коэффициент для ВНП rs4942486*число аллелей риска для ВНП rs4942486 + b-коэффициент для ВНП rs8017377*число аллелей риска для ВНП rs8017377 + b-коэффициент для ВНП rs3764261*число аллелей риска для ВНП rs3764261 + b-коэффициент для ВНП rs2000999*число аллелей риска для ВНП rs2000999 + b-коэффициент для ВНП rs7206971*число аллелей риска для ВНП rs7206971 + b-коэффициент для ВНП rs1801689*число аллелей риска для ВНП rs1801689 + b-коэффициент для ВНП rs314253*число аллелей риска для ВНП rs314253 + b-коэффициент для ВНП rs6511720*число аллелей риска для ВНП rs6511720 + b-коэффициент для ВНП rs4420638*число аллелей риска для ВНП rs4420638 + b-коэффициент для ВНП rs10401969*число аллелей риска для ВНП rs10401969 + b-коэффициент для ВНП rs6029526*число аллелей риска для ВНП rs6029526 + b-коэффициент для ВНП rs2902940*число аллелей риска для ВНП rs2902940 + b-коэффициент для ВНП rs364585*число аллелей риска для ВНП rs364585 + b-коэффициент для ВНП rs2328223*число аллелей риска для ВНП rs2328223 + b-коэффициент для ВНП rs5763662*число аллелей риска для ВНП rs5763662 + b-коэффициент для ВНП rs4253772*число аллелей риска для ВНП rs4253772)) + значение b-коэффициента для гаплотипа АРОЕ, рассчитанного на основании комбинаций аллелей ВНП rs429358 и ВНП rs7412 у данного пациента, где: значение b-коэффициента для каждого отдельного ВНП определяют в соответствии с таблицей 1, а значение b-коэффициента для гаплотипа АРОЕ - в соответствии с таблицей 2, число аллелей риска определяют на основании данных генетической диагностики, оно имеет значение 0 - при отсутствии у пациента аллелей риска в определяемом ВНП, 1 - гетерозигота, при наличии у пациента одной аллели риска в определяемом ВНП, или 2 - гомозигота, при наличии у пациента двух аллелей риска в определяемом ВНП, после определения значения балла ШГР59, рассчитанного на основании генетического анализа генотипов 59 частых ВНП, всех пациентов со значением балла за редкие и низкочастотные ВНП от 0 до 1,5 дополнительно делят еще на 2 группы: с высоким генетическим риском развития ИБС, при значении ШГР59 более (-3,186) балла, с минимально повышенным генетическим риском развития ИБС, при значении ШГР59 (-3,186) баллов или менее, далее на основании полученных результатов делают вывод об очень высоком риске развития ИБС у лиц из группы с очень высоким генетическим риском развития ИБС, высоком риске развития ИБС у лиц из группы с высоким генетическим риском развития ИБС и об относительно низком риске развития ИБС у лиц из групп с минимально повышенным генетическим риском развития ИБС и с минимальным относительным генетическим риском развития ИБС, при этом при очень высоком или высоком риске развития ИБС пациента направляют к терапевту или кардиологу для проведения диагностики ИБС, постановки на диспансерный учет и раннего начала профилактических и лечебных мероприятий, при относительном низком риске развития ИБС пациенту рекомендуют проводить оценку сердечно-сосудистого риска на основании действующих клинических рекомендаций.

Однако данный метод требует наличия дорогостоящего оборудования и наборов реагентов для секвенирования следующего поколения NGS. Кроме того, метод достаточно трудоемкий и времязатратный, а отнесение пациента к определенной группе риска предусматривает непростой способ расчета.

Технический результат заключается в получении критериев оценки риска формирования ишемической болезни сердца у мужчин Центральной России с сахарным диабетом 2 типа по данным о генетическом полиморфизме rs16931366 (A>C) гена ITPR2.

Технический результат достигается тем, что после экстракции ДНК проводят анализ полиморфного варианта rs16931366 (A>C) гена ITPR2 и прогнозируют повышенный риск формирования ишемической болезни сердца у мужчин Центральной России с сахарным диабетом 2 типа в случае выявления генотипа rs16931366-С/С, а при обнаружении генотипа rs16931366-А/А или rs16931366-А/С – низкий риск развития ишемической болезни сердца у мужчин Центральной России с сахарным диабетом 2 типа.

Способ осуществляют следующим образом.

1. Выделение ДНК из периферической венозной крови. На первом этапе к 0,5 мл крови добавляли 0,5 мл PBS и центрифугировали 10 мин при 12 тыс. об/мин. Надосадочную жидкость сливали, добавляли 1 мл PBS и вновь центрифугировали при тех же условиях. Надосадочную жидкость сливали, добавляли 200 мкл ТЕ-буфера, пипетировали до растворения осадка и затем последовательно добавляли 10 мкл 1% раствора додецилсульфата натрия SDS и 5 мкл протеиназы К. Пробирки инкубировали в термостате при t=37°C 12 ч. В ходе второго этапа проводили четыре последовательных центрифугирования с фенолом и хлороформом согласно протоколу методики (10 мин, 8 тыс. об/мин), после чего ДНК осаждали ледяным раствором 95% этилового спирта и центрифугировали 10 мин при 14,3 тыс. об/мин. По испарении спирта ДНК растворяли в 100 мкл деионизированной дистиллированной воды. Получаемый раствор ДНК в воде имел чистоту в диапазоне А260/280=1,5-2,0 и среднюю концентрацию около 180-200 нг/мкл. Экстрагированные из крови образцы ДНК хранились в морозильниках Thermo Fisher Scientific (США) при -20°С.

2. Подготовка образцов ДНК к генотипированию. Качество выделенной ДНК оценивали по степени чистоты и концентрации раствора на спектрофотометре NanoDrop (Thermo Fisher Scientific, США). Все анализируемые образцы ДНК были разведены деионизированной водой до концентрации 10 нг/мкл при А260/280=1,5-2,0.

3. Анализ полиморфизма rs16931366 (A>C) гена ITPR2 - генотипирование методом полимеразно-цепной реакции в режиме реального времени. Использовали следующие последовательности праймеров: прямой F: 5'-CGAAAGGTGCCATGGATATCA-3', обратный R: 5'-CTTGGGTGGTGGAGGACTTC-3', ITPR2-А-аллель-специфичный флуоресцентно-меченый зонд 5′-FAM-CCCAAGTACAACTCTTAAA-RTQ1-3′, ITPR2-С-аллель-специфичный флуоресцентно-меченый зонд 5′-ROX-CCCAAGTACAACTCTTAAC-BHQ-3′. Праймеры и зонды были синтезированы компанией «Синтол» (г. Москва). Реакцию амплификации проводили в 13,25 мкл смеси ПЦР, содержащей 9,4 мкл ddH2O, 1,3 мкл раствора MgCl2 (массовая концентрация 2,5%), 1,3 мкл ПЦР-буфера, 0,2 мкл смеси дНТФ (концентрация 2 ммоль/л), 0,05 мкл раствора прямого и обратного праймера (концентрация 100 пкмоль/мкл), 0,025 мкл раствора каждого TaqMan-зонда (концентрация 100 пкмоль/мкл) и 0,11 мкл Taq ДНК-полимеразы (концентрация 5 Ед/мкл), 1 мкл образца ДНК (минимальная концентрация 10 нг/мкл). ПЦР проводили с помощью прибора CFX96 Real-Time System (Bio-Rad) при следующем режиме: денатурация 10 мин при 95°С, амплификация 38 циклов, состоящая из денатурации 15 сек при 95°С, отжига 30 сек при t=56°С и элонгации 60 сек при 62°С. Детекция флуоресценции проводилась на стадии элонгации по каналам FAM и ROX. Анализ результатов генотипирования проводили с помощью программного обеспечения для амплификатора CFX96 Real-Time System (Bio-Rad) версии Bio-Rad CFX Manager 2.1. Статистические расчеты проводили с помощью программы SNPStats (Solé, X., Guinó, E., Valls, J., Iniesta, R., & Moreno, V. (2006). SNPStats: a web tool for the analysis of association studies. Bioinformatics, 22(15), 1928-1929).

4. Прогнозирование повышенного риска развития ишемической болезни сердца у мужчин Центральной России с сахарным диабетом 2 типа в случае выявления генотипа rs16931366-С/С и пониженного риска развития ишемической болезни сердца у мужчин Центральной России с сахарным диабетом 2 типа при выявлении генотипа rs16931366-А/А или rs16931366-А/С.

Возможность использования предложенного способа для определения риска развития ишемической болезни сердца у мужчин подтверждает анализ результатов наблюдений 439 пациентов с СД2, у 133 из которых установлена ИБС. В исследование включались лица славянской национальности Центральной России. Диагноз СД2 и ИБС был установлен врачами ОБУЗ ГК БСМП на основе клинического и лабораторно-инструментального обследования. Установлено, что генотип rs16931366-С/С в 3,3 раза чаще встречался у мужчин с ИБС (8,3%) по сравнению с больными СД2 без ИБС (2,5%). Носительство генотипа rs16931366-С/С ITPR2 ассоциировалось с повышенным риском развития ИБС: OR=2,82, 95% CI 1,03-7,76, P=0,043 (таблица 1).

Таблица 1. Ассоциация полиморфного варианта rs16931366 гена ITPR2 с ишемической болезнью сердца у мужчин с сахарным диабетом 2 типа

Ген
SNP ID Генотип, аллель Больные с СД2,
n (%) Р¹ OR (95% CI)² Без ИБС
(n=325) С ИБС
(n=133) ITPR2
rs16931366 (A>C) А/А-А/С 317 (97,5%) 122 (91,7%) 0,043 1,00 С/С 8 (2,5%) 11 (8,3%) 2,82 (1,03-7,76) С 18,5% 25,2% 0,028 1,49 (1,06-2,09) ¹Уровень значимости ассоциации с поправками на ковариаты – возраст и индекс массы тела;
²Отношения шансов и 95% доверительный интервал с поправками на ковариаты – возраст и индекс массы тела.
СД2 – сахарный диабет 2 типа; ИБС – ишемическая болезнь сердца.

В качестве примеров конкретного применения разработанного способа приведено генетическое обследование русских пациентов, уроженцев Центральной России и не являющихся родственниками между собой: проведено генетическое обследование по локусу rs16931366 (A>C) гена ITPR2.

Пациент Г., мужчина 56 лет, находился на стационарном лечении в ОБУЗ КГКБ СМП г. Курска с 28.11.2017 г. по 11.12.2017 г. Диагноз: сахарный диабет, 2 тип, впервые выявленный, стадия декомпенсации от 28.11.2017 г., стадия компенсации от 11.12.2017 г. Кетонурия от 28.11.2017. Индивидуальный целевой уровень HbA1c<7,0%. Целевой уровень гликемии плазмы натощак <7,0 ммоль/л, через 2 ч после еды <9,0 ммоль/л. У пациента была взята венозная кровь, при генотипировании полиморфного локуса rs16931366 (A>C) был выявлен генотип rs16931366-А/А ITPR2, что позволило отнести пациента в группу больных с низким риском развития ишемической болезни сердца. Электрокардиографическое исследование сердца не выявило наличие у мужчины ИБС. Регулярные обследования кардиолога не выявили ИБС по настоящее время.

Пациент П., мужчина 55 лет, находился на стационарном лечении в ОБУЗ КГКБ СМП г. Курска с 22.03.2016 г. по 05.04.2016 г. Диагноз: сахарный диабет, 2 тип, стадия декомпенсации от 22.03.2016 г., фаза компенсации от 05.04.2016 г. Индивидуальный целевой уровень HbA1c<7,5%. Целевой уровень гликемии плазмы натощак <7,5 ммоль/л, через 2 ч после еды <10,0 ммоль/л. У пациента была взята венозная кровь, при генотипировании полиморфного локуса rs16931366 (A>C) был выявлен генотип rs16931366-А/С ITPR2, что позволило отнести пациента в группу больных с низким риском развития ишемической болезни сердца. Электрокардиографическое исследование сердца не выявило наличие у мужчины ИБС. Регулярные обследования кардиолога не выявили ИБС по настоящее время.

Пациент Т., мужчина 54 лет, находился на стационарном лечении в ОБУЗ КГКБ СМП г. Курска с 20.06.2016 г. по 01.07.2016 г. Диагноз: сахарный диабет, 2 тип, стадия декомпенсации от 20.06.2016 г., фаза компенсации от 01.07.2016 г. Индивидуальный целевой уровень HbA1c<7,5%. Целевой уровень гликемии плазмы натощак <7,5 ммоль/л, через 2 ч после еды <10,0 ммоль/л. У пациента была взята венозная кровь, при генотипировании полиморфного локуса локуса rs16931366 (A>C) был выявлен генотип rs16931366-С/С ITPR2, что позволило отнести пациента в группу больных с высоким риском развития ишемической болезни сердца. Электрокардиографическое исследование сердца выявило наличие у мужчины ИБС (бессимптомной ишемии миокарда).

Применение данного способа позволит на доклиническом этапе формировать среди мужчин группы риска и своевременно реализовывать в этих группах необходимые лечебно-профилактические мероприятия по предупреждению развития ишемической болезни сердца у мужчин Центральной России с сахарным диабетом 2 типа.

Резюме

Таким образом, полученные данные свидетельствуют о том, что генотип rs16931366-С/С ITPR2 является генетическим фактором риска развития ишемической болезни сердца у мужчин с сахарным диабетом 2 типа (OR=2,82).

Использование предложенного способа позволит прогнозировать развитие ишемической болезни сердца у мужчин с сахарным диабетом 2 типа, что даст возможность осуществлять мероприятия по профилактике данного осложнения – диспансерное наблюдение, регулярный осмотр кардиолога, контроль уровня глюкозы и холестерина в крови, регулярные физические упражнения.

Изобретение относится к медицине, а именно к медицинской диагностике, и может быть использовано для прогнозирования риска развития ишемической болезни сердца у мужчин с сахарным диабетом 2 типа. Осуществляют забор образца периферической венозной крови и экстракцию ДНК. Проводят анализ полиморфного варианта rs16931366 (A>C) гена ITPR2. В случае выявления генотипа rs16931366-С/С прогнозируют повышенный риск формирования ишемической болезни сердца у мужчин Центральной России с сахарным диабетом 2 типа. При обнаружении генотипа rs16931366-А/А или rs16931366-А/С прогнозируют низкий риск. Способ обеспечивает получение новых критериев оценки риска формирования ишемической болезни сердца у мужчин Центральной России с сахарным диабетом 2 типа по данным о генетическом полиморфизме rs16931366 (A>C) гена ITPR2. 1 табл., 3 пр.

Способ прогнозирования риска развития ишемической болезни сердца у мужчин с сахарным диабетом 2 типа, включающий забор образца периферической венозной крови, отличающийся тем, что после экстракции ДНК проводят анализ полиморфного варианта rs16931366 (A>C) гена ITPR2 и прогнозируют повышенный риск формирования ишемической болезни сердца у мужчин Центральной России с сахарным диабетом 2 типа в случае выявления генотипа rs16931366-С/С, а при обнаружении генотипа rs16931366-А/А или rs16931366-А/С – низкий риск развития ишемической болезни сердца у мужчин Центральной России с сахарным диабетом 2 типа.