Способ моделирования язвы желудка, индуцированной Helicobacter suis Российский патент 2024 года по МПК A61K39/02 A61K31/7004 A61K33/14 A61P43/00 G09B23/28 

Изобретение относится к медицине, в частности к экспериментальной и ветеринарной медицине, а именно к способу моделирования язвы желудка индуцированной Helicobacter suis.

Заявленный способ состоит из 4 этапов, отличительной чертой является максимальная приближенность к естественным условиям заражения штаммом Helicobacter suis. В имеющихся источниках заражение осуществляют штаммом Helicobacter pylori при предварительном введении дексаметазона для иммуносупрессии (патент RU 2690943C1, опубликован 07.06.2019 Бюл. № 16; патент RU 2746590C1, опубликован 16.04.2021 Бюл. № 11). Для лучшей адгезии бактерий к слизистой оболочке некоторые исследователи используют ингибитор протонной помпы, чтобы снизить образование соляной кислоты, а также многократное введение (однократно в течение 10 суток) Helicobacter pylori (патент RU 2690943C1, опубликован 07.06.2019 Бюл. № 16). В связи с этим недостатком выше описанных методов является создание специальных условий для заражения животных, что в природе встречается редко. Поэтому можно утверждать, что заявляемое средство соответствует первому из установленных законодательством РФ критериальных признаков изобретения - новизна.

Технический результат заявляемого способа заключается в образовании язвы желудка индуцированной Helicobacter suis путем перорального ведения суспензии состоящей из культуры бактерий Helicobacter suis и питательного раствора. Время появления первых признаков гастропатии является 21 сутки, что соответствует второму критериальному признаку - промышленная применимость. Использование в составе заявленного нами способа селективной среды, транспортного раствора и штамма Helicobacter suis дает нам все основания утверждать, что заявляемый способ явным образом не следует из известного в данной отрасли техники уровня и, следовательно, соответствует третьему критериальному признаку изобретения - изобретательский уровень.

Способ моделирования язвы желудка индуцированной Helicobacter suis выполняют следующим образом.

1 этап выделение бактерий штамма Helicobacter suis.

Для выделения штамма Helicobacter suis получают биоптаты антрального отдела желудка откормочных свиней с деструктивных участков слизистой оболочки желудка. Для культивирования Helicobacter suis используют селективную питательную среду - кровяной мясопептонный агар (5 % крови барана), с добавлением антибиотиков: ванкомицина в концентрации 10 мг/л, полимиксина В - 2500 МЕ/л, амфотерицина 5 мг/л. Культивирование проводят при 37 °С в течение 78 часов в микроаэрофильных условиях (двуокись углерода (CO₂) - 10 %, кислород (O₂) - 5 %, азот (N₂) - 85 %), используя анаэростат и газогенераторные пакеты. Через 120 часов выделенные на питательной среде микроорганизмы следует идентифицировать микроскопическими, биохимическими и молекулярно-генетическими методами.

2 этап приготовление транспортного раствора.

Транспортный раствор представляет собой 40% раствор глюкозы и изотонический раствор хлорида натрия смешанных в равных частях.

3 этап изготовление суспензии с бактериями Helicobacter suis.

Суспензию изготавливают следующим образом: бактерии Helicobacter suis культивированные на чашках Петри смывают с помощью транспортного раствора в стерильные флаконы, затем этим же питательным раствором во флаконах доводят концентрацию бактерий Helicobacter suis до 10⁸ КОЕ.

4 этап моделирование язвы желудка.

Суспензию вводят интрагастрально посредством атравматического зонда белым мышам однократно в дозе 0,5 мл. Через 21 сутки у белых мышей при вскрытии на слизистой оболочке появляются признаки язвы желудка. Индуцирование язвы желудка бактериями Helicobacter suis подтверждается лабораторными методами.

Изобретение относится к медицине, а именно к экспериментальной гастроэнтерологии. Однократно, интрагастрально с помощью атравматического зонда вводят 0,5 мл суспензии бактерий штамма Helicobacter suis в количестве 10⁸ в 1 мл транспортного раствора. Транспортный раствор состоит из 40% раствора глюкозы, смешанного с изотоническим раствором натрия хлорида в равных частях. Способ обеспечивает максимально приближенные к естественным условия заражения штаммом Helicobacter suis, что в свою очередь позволяет смоделировать язву желудка с проявлением первых признаков на 21 сутки.

Способ моделирования язвы желудка, индуцированной Helicobacter suis, отличающийся тем, что однократно интрагастрально с помощью атравматического зонда вводят 0,5 мл суспензии бактерий штамма Helicobacter suis в количестве 10⁸ в 1 мл транспортного раствора, состоящего из 40% раствора глюкозы, смешанного с изотоническим раствором натрия хлорида в равных частях.