ТРИПЕПТИД, ОБЛАДАЮЩИЙ НЕЙРОПСИХОТРОПНОЙ АКТИВНОСТЬЮ Российский патент 2024 года по МПК C07K5/08 C07K5/87 A61K38/06 

Описание патента на изобретение RU2823022C1

Изобретение относится к химии и медицине, а именно к новому биологически активному трипептиду формулы: H-L-Phe-L-Trp-L-Leu-NH2. Новое соединение - амид L-фенилаланил-L-триптофанил-L-лейцина, представляет собой лиганд 18 кДа митохондриального транслокаторного протеина (TSPO) трипептидной природы и обладает анксиолитической, антидепрессивной и нейропротекторной активностями.

Эпидемиологические данные свидетельствуют, что состояния тревоги, включающие по МКБ-10 генерализованные тревожные, фобические, панические и обсессивно-компульсивные расстройства, встречаются у 6-10% населения. Вследствие этого актуальным является создание лекарственного препарата, направленного на регуляцию механизмов цитопротекции, сочетающего свойства быстродействующего анксиолитика и антидепрессанта. Перспективным подходом к созданию новых препаратов, обладающих широким спектром нейропсихотропной активности, в том числе анксиолитической, антидепрессивной, и ноотропной, является получение новых лигандов транслокаторного белка TSPO. Так как TSPO играет важнейшую роль в регуляции синтеза нейростероидов, лиганды этого рецептора могут являться эффективными нейропсихотропными препаратами, например, антидепрессантами, анксиолитиками, ноотропами, или препаратами комплексного действия. Оригинальные лиганды TSPO предполагается создать на базе замещенных ароматических трипептидов.

Впервые рецептор TSPO был описан в литературе в 1977 году в качестве альтернативного сайта связывания диазепама в почках крысы [Braestrup С, Squires RF. Proceedings of the National Academy of Sciences. 1977; 74(9): 3805-9], и вследствие этой способности получил название периферический бензодиазепиновый рецептор (ПБР, PBR). Ранее для диазепама уже был известен основной сайт связывания в головном мозге - центральный бензодиазепиновый рецептор (ЦБР, CBR). Долгое время ПБР считался подклассом ЦБР, и только в 2006 г. в свете понимания его уникального строения и функции получил свое текущее название -транслокаторный белок TSPO [Papadopoulos V, et al. Trends in pharmacological sciences. 2006; 27(8): 402-9].

Локализуется TSPO на внешней митохондриальной мембране в основном в клетках стероидпродуцирующих тканей, а также в глиальных клетках головного мозга [Beurdeley-Thomas A, Miccoli L, Oudard S, et al. J. Neurooncol. 2000; 46(1): 45-56]. Высокое содержание TSPO было обнаружено в некоторых типах нейрональных клеток, таких как нейроны обонятельной луковицы млекопитающих [Anholt RR, Murphy KM, Mack GE, Snyder SH. J. Neurosci. 1984; 4: 593-603].

В качестве эндогенных лигандов TSPO идентифицированы холестерин, порфирины и некоторые нейропептиды, названные эндозепинами.

Холестерин является ключевым эндогенным лигандом TSPO, так как именно он является исходным веществом для дальнейшего биосинтеза нейростероидов после проникновения через мембрану митохондрии. Холестерин обладает наномолярным сродством к TSPO (Kd <10 нМ). Связываясь с TSPO, холестерин переносится с внешней мембраны митохондрий на внутреннюю мембрану, где под действием ферментов цитохрома P450scc, 3-β гидроксистероиддегидрогеназы (3β-HSD), 5α-редуктазы, 3-α гидроксистероиддегидрогеназы(3α -HSD) происходит каскад превращений и образование нейростероидов, которые выполняют модуляторную функцию ГАМКA. По силе воздействия они или равны или превосходят бензодиазепины и барбитураты.

Ряд порфиринов также рассматривается в качестве эндогенных лигандов TSPO. Наибольшим аффинитетом обладают следующие производные порфиринов: протопорфирин IX (Ki 14.5±10.7 нМ), дейтеропорфирин IX (Ki=31.36±2 нМ) и гемин (Ki=40.6±13.7 нМ). Несмотря на то, что многие порфирины обладают высокой аффинностью по отношению к TSPO, эти соединения практически не изучались на наличие биологических эффектов.

В процессе поиска эндогенных пептидных лигандов TSPO был выявлен ингибитор связывания диазепама (DBI). DBI представляет собой полипептид массой 9 кДа, который был открыт в 1983 году в мозге крысы при изучении белков, ингибирующих бензодиазепиновое связывание с ГАМКA-рецептором. Также было показано, что основные посттрансляционные продукты DBI - октадеканейропептид DBI33-50 (octadecaneuropeptide, ODN) и триаконтатетронейропептид DBI17-50 (triakontatetraneuropeptide, TTN), также обладают сродством к TSPO.

В настоящее время получено большое число синтетических лигандов TSPO, относящихся к различным химическим классам.

Первыми синтетическими лигандами TSPO считаются производные бензодиазепинов, в частности диазепама, однако сам диазепам связывается как с TSPO (IC50 40 нМ), так и с ЦБР (IC50 3 нМ,) [Braestrup С, Squires R.F., 1977]. Классическим представителем этой группы является 4-хлордиазепам (соединение Ro5-4864), широко используемый для изучения биологических функций TSPO [Gavioli ЕС, Duarte FS, Bressan E, et al. Eur J Pharmacol. 2003; 471: 21-6; Barron AM, Garcia-Segura LM, Caruso D, et al. J of Neurosci. 2013; 33(20): 8891-97; Mills C, Makwana M, Wallace A, et al. Eur J Neurosci. 2008; 27: 937-46; Leonelli E, Yague JG, Ballabio M, et al. Mechanisms of Ageing and Development. 2005; 126: 1159-63]

Производное изохинолина РКП 195, открытое в 1983 году, явилось первым соединением, не относящимся к классу бензодиазепинов, способным связываться с TSPO с наномолярной аффинностью (Ki=9.3 нМ) [Le Fur G, Perrier ML, Vaucher N, et al. Life Sci. 1983; 18; 32(16): 1839-47]. Показало что при одновременном введении PK-11195 и Ro5-4864 эффект последнего на нейростероидогенез снижается [Tiihonen J, et al. Molecular psychiatry. 1996; 2(6): 463-71]. Исходя из того, что Ro5-4864 является агонистом, был сделан вывод, что РК-11195 является антагонистом TSPO.

В компании Dainippon Sumitomo Pharma (Япония) была описана группа высокоаффинных и селективных лигандов TSPO, относящихся к классу бензоксазолонов. Дизайн нового класса осуществлялся путем структурного преобразования бензодиазепинового лиганда Ro5-4864, при этом диазепиновый цикл был разомкнут, иминный фрагмент заменен на оксазолоновый гетероцикл, а заместители в образовавшемся остове были широко проварьированы [Fukaya Т, Kodo Т, Ishiyama Т, et al. Bioorg. & Med Chem. 2012; 20: 5568-82].

Компанией Dainippon Sumitomo Pharma (Япония) совместно с компанией Novartis Pharmaceuticals (Швейцария) был создан лиганд TSPO, соединение АС-5216 (XBD173, Emapunil), производное оксопурина, проявившее анксиолитический и антидепрессивный эффект в тестах Фогеля и темно-светлая камера [Kita A, Kohayakawa Н, Kinoshita Т, et al. Br J Pharmacol. 2004; 142: 1059-72]. Соединение АС-5216 доведено компанией Novartis до II фазы клинических исследований в качестве средства для лечения генерализованных тревожных расстройств (ClinicalTrials.gov identifier: NCT00108836). В этом исследовании АС-5216 не показал различий с плацебо в лечении тревожных расстройств. Отсутствие активности во II стадии, возможно, связано с выбором неподходящей модели.

Известны бензоксазепиновые лиганды TSPO, способные конкурентно вытеснять РК-11195, среди которых самым селективным в отношении TSPO рецептора является соединение OXA-17f [Campiani G, Nacci V, Fiorini I, et al. J Med Chem. 1996; 39: 3435-50].

В 1990 году был предложен новый класс лигандов TSPO - бензотиазепинов [Nacci V, Fiorini I, Garofalo A, et al. A Farmaco, 1990; 45: 545-57]. Некоторые соединения этого ряда, такие как THIA-66 и THIA-67, имели высокое сродство и селективность по отношению к TSPO [Fiorini I, Nacci V, Ciani SM, et al. J Med Chem. 1994; №37: 4100-08].

Известны производные арилиндолацетамида, являющиеся агонистами TSPO [Romeo Е, Auta J, Kozikowski АР, et al. J Pharmacol Exp Ther. 1992; 262: 971-8]. Арилиндолацетамид под шифром SSR180575 имел высокое сродство к TSPO (IC50 2,5 нМ) [Ferzaz В, Brault Е, Bourliaud G, et al. J Pharmacol Exp Ther. 2002; 301(3): 1067-78]. SSR180575 находится на второй стадии клинических испытаний, которые проводит фирма Sanofi-Aventis (Франция), (ClinicalTrials.gov identifier: NCT00502515), в качестве средства лечения диабетической нейропатии.

Фирмой Synthelabo (сейчас Sanofi-Aventis) в ходе широкого скрининга производных имидазо[1,2-а]пиридинов, в котором оценивались анксиолитические, гипнотические, снотворные и противосудорожные свойства этих веществ на грызунах [Kaplan J-P, George P. US Patent 4382938А, 1983] было отобрано соединение, получившее название Алпидем. Было установлено, что Алпидем обладает аффинными свойствами к TSPO [Langer SZ, Arbilla S, Benavides J, et al.. Adv Biochem Psychopharmacol. 1990; 46: 61-72]. В 1997 на основе производных имидазопиридина было разработано соединение СВ-34, которое обладало высоким сродством, избирательностью к TSPO и способностью стимулировать стероидогенез в периферических тканях [Trapani G, Franco М, Ricciardi L, et al. J Med Chem. 1997; 40: 3109-18].

Известны производные феноксифенилацетамида, N - (4-хлор-2-феноксифенил) - N - (2-изопропоксибензил) - ацетамид, DAA1097 и N- (2,5-диметоксибензил)-1 ч[-(5-фтор-2-феноксифенил) ацетамид, DAA1106 как лиганды TSPO [Chaki S, Funakoshi T, Yoshikawa R, et al. Eur J Pharmacol. 1999; №371: 197-204], проявившие мощное анксиолитическое действие в экспериментах in vivo.

Раскрыт ряд производных пирроло[1,2-α]пиразина, лигандов TSPO (патент РФ №2572076), среди которых соединения ГМЛ-1 и ГМЛ-3, которые обладают анксиолитической и антидепрессивной активностью in vivo.

Известны дипептидные лиганды TSPO общей формулы R1-C(O)-X-Trp-Y-Leu-R2 (патент РФ №2756772), среди которых соединение амид N-фенилпропионил-L-триптофанил-L-лейцина, которое in vivo обладает анксиолитической и антидепрессивной активностями в дозах 0,01-0,05 мг/кг.

Соединения, указанные в вышеприведенных ссылках не открывают и не предполагают структуру патентуемого соединения.

Задачей настоящей работы было создание лекарственного препарата комплексного действия, направленного на регуляцию механизмов цитопротекции, сочетающего свойства быстродействующего анксиолитика и антидепрессанта. Данная задача была достигнута созданием на базе замещенных ароматических трипептидов нового пептидного лиганда TSPO соединения Н-L-Phe-L-Trp-L-Leu-NH2 (амид L-фенилаланил-L-триптофанил-L-лейцина, шифр ГД-186), обладающего анксиолитической, антидепрессивной и нейропротекторной активностями:

Техническим результатом является расширение арсенала лекарственных средств комплексного действия, обладающих широким спектром нейропсихотропной активности, в том числе свойствами быстродействующего анксиолитика, антидепрессанта и нейропротектора, пригодных для лечения тревоги, тревожных состояний и тревожно-депрессивных расстройств.

Получение трипептидного лиганда TSPO амида L-фенилаланил-L-триптофанил-L-лейцина ГД-186.

Обычный процесс получения рассмотренного соединения состоит в смешивании и конденсации требуемых аминокислот, как правило, в гомогенной фазе.

Конденсация в гомогенной фазе может быть выполнена следующим образом:

а) конденсация аминокислоты, имеющей свободную карбоксильную группу и защищенную другую реакционноспособную группу, с аминокислотой, которая имеет свободную аминогруппу и защищенные другие реакционноспособные группы, в присутствии конденсирующего агента, такого как карбодиимид;

б) конденсация аминокислоты, имеющей активированную карбоксильную группу и защищенную другую реакционноспособную группу, с аминокислотой, которая имеет свободную аминогруппу и защищенные другие реакционноспособные группы;

в) конденсация аминокислоты, имеющей свободную карбоксильную группу и защищенную другую реакционноспособную группу, с аминокислотой, имеющей активированную аминогруппу и защищенные другие реакционноспособные группы.

Карбоксильная группа может быть активирована превращением ее в хлорагидридную, азидную, ангидридную группы или активированный эфир, такой как N-оксисукцинимидный, N-оксибензотриазольный, пентахлофениловый или паранитрофениловый эфиры. Аминогруппа может быть активирована превращением ее в фосфитамид или «фосфоразным» методом.

Предпочтительным методом конденсации является метод активированных эфиров, который проводят преимущественно с применением сукцинимидных эфиров, защищенных по аминогруппе аминокислот. Лучшими растворителями являются смесь этилацетата с дихлорметаном, чистый этилацетат и тетрагидрофуран.

Реакционноспособные группы, которые не должны участвовать в конденсации, могут быть защищены группами, которые легко удаляются, например, гидролизом или восстановлением. Так, карбоксильная группа может быть защищена этерификацией метанолом, этанолом, трет-бутанолом, бензиловым спиртом.

Аминогруппу обычно эффективно защищают кислотными группами, например остатками алифатических, ароматических, гетероциклических карбоновых кислот, такими как ацетил, бензоил, пиридинкарбоксил, кислотными группами, производными угольной кислоты, такими как этоксикарбонил, бензилоксикарбонил, трет-бутилоксикарбонил; или кислотными группами, производными сульфокислоты, такой как пара-толуосульфониловая.

Защитные группы удаляли в соответствии с природой этих групп. Карбобензокси-группу удаляли каталитическим гидрогенолизом в токе водорода в метаноле с добавкой 10%-ного палладия на активированном угле; трет-бутилоксикарбонильную группу удаляли в присутствии безводной трифторуксусной кислоты в дихлорметане.

При синтезе заявляемого соединения пептидную цепь наращивали, используя активированные сукцинимидные эфиры защищенных по аминогруппе фенилаланила, триптофана и лейцина.

Амиды дипептидов могут быть получены введением амидной группы в соответствующий дипептид каким-либо подходящим способом, например обработкой дипептида аммиаком в присутствии конденсирующего агента.

Далее используются следующие сокращения:

Вос - трет-бутилоксикарбонил

DCC - дициклогексилкарбодиимид

DMAPA - диметиламинопропилендиамин

DMSO - диметилсульфоксид

Me - метальный радикал

OSu - оксисукцинил

TFA - трифторуксусная кислота

THF - тетрагидрофуран

Pd/C - наночастицы палладия на поверхности активированного угля

Z - бензилоксикарбонил

ДИПЭА - диизопропилэтиламин

ДМФА - диметилформамид

ТСХ - тонкослойная хроматография

ЯМР - ядерный магнитный резонанс.

Для определения физико-химических характеристик веществ использована следующая аппаратура:

температуру плавления определяли на приборе Optimelt МРА100 (Stanford Research Systems, Англия) в открытых капиллярах без корректировки;

удельное оптическое вращение регистрировали на автоматическом поляриметре ADP 440 Polarimeter (Bellingham+Stanley Ltd., Англия);

спектры 1H-регистрировали по шкале 8, м. д. на спектрометре Bruker Fourier 300 МГц в растворах ДМСО-d6, внутренний стандарт тетраметилсилан (0 м.д.). Отнесение сигналов сделано на основании анализа одномерных и двумерных гомоядерных спектров 1Н -1Н COSY. Для обозначения резонансных сигналов использовали следующие сокращения: с - синглет, д - дублет, дд - дублет дублетов, т - триплет, м - мультиплет.

Тонкослойную хроматографию (ТСХ) выполняли на силикагелевых пластинах DC Kieselgel 60 G/F254 (Merck, Германия) в системах растворителей: хлороформ-метанол, 9:1 (А). Аминосодержащие соединения обнаруживали нингидрином, соединения с амидными группами - хлор-толидиновой пробой, содержащие ароматические группы - в УФ-лучах.

Очистка растворителей:

Диметшформамид (1 л) выдерживали 24 часа над смесью 50 г нингидрина и 50 г гидрида кальция, получая розовый раствор. Перегоняли в вакууме. Чистый диметилформамид имеет нейтральную реакцию и не обладает цветом и запахом. После перегонки в вакууме диметилформамид хранят в атмосфере инертного газа в темноте над молекулярными ситами 4 А. Непрореагировавший гидрид кальция разлагают 70%-ным этанолом (оставляют на несколько часов, затем добавляют несколько капель воды и убеждаются, что при этом не происходит выделение газа). Диэтшовый эфир использовали без дополнительной очистки, однако хранили над твердым NaOH. Этилацетат, хлористый метилен, гексан, метанол и этанол (все х.ч.) использовали без дополнительной очистки.

ПРИМЕР 1.

Получение амида L- фенилаланил-L-триптофанил-L-лейцина, (ГД-186).

а) Получение N-третбутилоксикарбонил-L-лейцина, N-Boc-L-Leu-OH.

Растворяли 8.00 г (60.98 ммоль) L-лейцина в смеси 50 мл IN NaOH, 100 мл воды, 200 мл изопропилового спирта. После полного растворения прибавляли 15.97 г (73.17 ммоль, 20% избыток) ди-трет-бутилпирокарбоната. Смесь перемешивали 2 ч при комнатной температуре, поддерживая рН 9-10 постепенным прикапыванием раствора IN NaOH. Контроль за ходом реакции вели методом ТСХ в системе А. По окончании реакции реакционную массу упаривали в вакууме роторного испарителя до одной трети объема, при этом удалялся преимущественно изопропиловый спирт. Избыток ди-трет-бутилпирокарбоната экстрагировали гексаном (2x100 мл). Водный раствор подкисляли 7% раствором H2SO4 до рН 4, продукт выпадал в виде белого «творожистого» осадка. Осадку давали выстоять в течение 12 ч, затем отфильтровывали, промывали дистиллированной водой до нейтральной реакции, сушили на воздухе в фарфоровой чашке до постоянной массы. Получали 11.14 г (79%) продукта в виде белого порошка с т.пл. 82-83° и [α]D20 -23° (с=1, уксусная кислота), (лит. данные 83°C[α]D20 -24° (с=1, уксусная кислота).

Спектр 1Н-ЯМР (DMSO-d6) δ, м.д.: 0,82-0,85 (6 Н, 2 д д, СδН3 Leu), 1,08-1,22 (1 Н, м, СγН2 Leu), 1.36 (9 Н, с, -ОС(СН3)3), 1,45 (2 Н, м, СβН Leu), 3,86-3,88 (1 Н, д.д., CαH Leu), 6,72 (1 Н, д, NH Leu)

б) Получение сукцинимидного эфира N-трет-бутилоксикарбонил-L-лейцина, N-Boc-L-Leu-OSu.

К раствору 8.00 г (34.63 ммоль) Boc-L-лейцина в 150 мл THF добавляли 4.73 г (39.88 ммоль, 15% избыток) N-гидроксисукцинимида, раствор охлаждали до +5°С на водяной бане со льдом, затем прибавляли 8.26 г (39.88 ммоль, 15% избыток) дицилогексилкарбодиимида. Реакционную массу перемешивали 30 мин при +5°С и 5 ч при комнатной температуре. Контроль за ходом реакции вели методом ТСХ в системе А, по окончании реакции осадок дициклогексилмочевины отфильтровывали, фильтрат упаривали. Полученное вязкое масло растворяли в 50 мл дихлорметана. Если при этом повторно образовывался осадок дициклогексилмочевины, то фильтровали, фильтрат промывали 5% NaHCO3 (2x100 мл), 3% H2SO4 (2x100 мл) и 100 мл дистиллированной воды (однократно). Сушили над Na2SO4, осушитель отфильтровывали, фильтрат упаривали, получали густое белое масло, которое закристаллизовывали растиранием в гексане. Полученные кристаллы выдерживали в гексане 12 ч в холодильнике при +8°С, отфильтровывали, получили продукт в количестве 8.31 г (73%) в виде стеклообразных кристаллов с т.пл. 110-112°С, [α]D26=-40° (с=2, диоксан)). (Лит. данные: т.пл. 116°С (крист. из диизопропилового эфира), [α]D25 -41.8° (с=2, диоксан)).

1Н-ЯМР (DMSO-d6) δ, м.д.: 0,82-0,88 (6 Н, 2 д д, 2СδН3 Leu), 1,39 (9 Н, с, -ОС(СН3)3), 1,45 (2 Н, т, СβН Leu), 1,56-1,73 (1 Н, м, CγH2 Leu), 2,82 (4 Н, м, OSu), 3,86-3,88 (1 Н, м., CαH Leu), 7,93 (1 Н, д, NH Leu).

в) Получение амида N-третбутилоксикарбонил-L-лейцина, N-Boc-L-Leu-NH2.

К раствору 8.00 г (24.36 ммоль) Boc-L-Leu-OSu в 15 мл ДМФА приливали 100 мл разбавленного водного раствора аммиака при перемешивании, сразу выпадал белый творожистый осадок. Полученную суспензию перемешивали 30 мин до полного прохождения реакции. Осадку давали выстоять 3 ч в прохладном месте, затем сформировавшийся осадок отфильтровывали на стеклянном фильтре, промывали дистиллированной водой до нейтральной реакции промывных вод, сушили в сушильном шкафу при 100°С до постоянной массы. Получали 3.37 г (60%) Boc-L-Leu-NH2 в виде белого порошка с т.пл. 148-149°С, [α]D26 -11.0° (с=1, ДМФА). (Лит.данные: т.пл. 150-152°С, [α]D24 -11.9° (с=Т, метанол)).

Спектр 1Н-ЯМР (DMSO-d6) δ, м.д.: 0,82-0,85 (6 Н, 2 д д, 2СδН3 Leu), 1,08-1,22 (1 Н, м, СγН2 Leu), 1.36 (9 Н, с, -ОС(СН3)3), 1,45 (2 Н, м, СβН Leu), 3,86-3,88 (1 Н, д.д., CαH Leu), 6,72 (1 Н, д, NH Leu), 6,89 и 7,19 (2 Н, два с, NH2 амид).

г) Получение трифторацетата амида L-лейцина, TFA*[L-Leu-NH2].

К суспензии 12.00 г (52.10 ммоль) Boc-L-Leu-NH2 в 30 мл дихлорметана приливали 60 мл TFA (150% избыток) при перемешивании на магнитной мешалке, перемешивали 2 ч. Раствор переупаривали с 50 мл диэтилового эфира до кристаллизации продукта, получали белый порошок, эфир над ним декантировали, остаток высушивали на воздухе под тягой. Получали 11.88 г (99%) TFA*H-Leu-NH2 в виде белого порошка с т.пл. 118-119°С, [α]D25 -18° (с=1, ДМФА).

Спектр 1Н-ЯМР (DMSO-d6) δ, м.д.: 0,83-0,89(6 Н, 2 д д, 2СδН3 Leu), 1,08-1,22 (1 Н, м, СγН2 Leu), 1.36 (9 Н, с, -ОС(СН3)3), 1,45 (2 Н, м, СβН Leu), 3,69 (1 Н, д д, CαH Leu), 7,52 и 7,93 (2 Н, два с, NH2 амид), 8,12 (3 Н, уш. с, N+H3 Leu).

д) Получение сукцинимидного эфира N-карбобензокси-L-триптофана, Z-L-Trp-OSu.

К раствору 10,00 г (29.6 ммоль) Z-L-TrpOH в 300 мл этилацетата добавляли 3.98 г (34.6 ммоль, 17% избыток) N-гидроксисукцинимида, раствор охлаждали до +5°С и затем прибавляли 7.25 (35.2 ммоль, 19% избыток) дицилогексилкарбодиимида, следя за тем, чтобы температура не превышала +5°С. Реакционную массу перемешивали 30 мин при температуре +5 -+7°С и затем 12 ч при комнатной температуре. Осадок дициклогексилмочевины отфильтровывали, фильтрат упаривали. Полученное вязкое масло растворяли в 200 мл этилацетата. Раствор выдерживали 24 ч в холодильнике при+5°С, повторно образовавшийся осадок дициклогексилмочевины отфильтровывали, фильтрат упаривали. Полученное масло промывали гексаном, гексан декантировали, масло упаривали досуха. Получали продукт в количестве 11.84 г (92%) в виде белой пены, которую измельчали до состояния порошка с т.пл. 137-140°С [α]25D -60.0° (с 1, ДМФА).

Спектр 1Н-ЯМР (DMSO-d6) δ, м.д.: 2.78 (4 Н, м, OSu), 3.01 и 3.25 (2 Н, два д.д., СβН Trp), 3.98 (1 Н, м, СαН Trp), 4.97 (2 Н, с, -ОСН2С6Н5), 6.73-7.62 (10 Н, м, -ОСН2С6Н5, индол), 8.56 (1 Н, д, NH Trp), 10.78 (1 Н, с, NH индол).

е) Получение амида N-карбобензокси-L-триптофанил-L-лейцина, Z-L-Trp-L-Leu-NH2.

Растворяли 3.30 г (13.52 ммоль) TFA*L-LeuNH2 в 30 мл ДМФА с добавлением 2.35 мл (13.52 ммоль) ДИПЭА. Реакционную массу перемешивали с амином в течение получаса. Затем при перемешивании прибавляли раствор 7.06 г (16.22 ммоль 20% избыток) Z-L-Trp-OSu в 30 мл ДМФА. Перемешивали 12 ч при комнатной температуре. По окончании реакции (ТСХ контроль в системе А) раствор упаривали до состояния подвижного масла, растворяли в 200 мл этилацетата, экстрагировали 3% H2SO4 (1x100 мл), затем 5% раствором NaHCO3 (2x100 мл) и дистиллированной водой (1x100 мл), органическую фазу сушили над Na2SO4, осушитель отфильтровывали, фильтрат упаривали. Полученное масло растворяли в минимальном количестве ДМФА, разбавляли 200 мл дистиллированной воды, получали белый осадок. Осадку давали выстоять 12 ч в холодильнике при +5°С, отфильтровывали, промывали дистиллированной водой, затем гексаном. Сушили в вакуумном эксикаторе над CaCl2 и парафином. Выход составил 5.78 г (98%) продукта с т.пл. 166-169°С, [α]D26=-31°(с=1, ДМФА).

Спектр 1Н-ЯМР (DMSO-d6) δ, м.д.: 0,82-0,88 (6 Н, 2 дд, 2СδН3 Leu), 1,08-1,22 (1 Н, м, CγH2 Leu), 1,45 (2 Н, м, СβН Leu), 2,90 и 3,09 (2 Н, два д.д., СβН Trp), 4,28-4,31 (2 Н, м., CαH Leu и СαН Trp), 4,93 (2 Н, м, СН2СО), 6,99-7,30 (10 Н, м, Ar) 7,25 и 7,33 (2 Н, два с, NH2 амид), 7,62 (1 Н, д, NH Leu), 7,97 (1 Н, д, NH Trp), 10,81 (1 Н, с, NH индол).

ж) Получение метилового эфира N-карбобензокси-L-фенилаланина, Z-L-Phe-OMe.

Растворяли 5.00 г (23.18 ммоль) HCl*L-Phe-OMe в 35 мл ДМФА с 4.83 мл (27.82 ммоль, 20% избыток) ДИПЭА, перемешивали полчаса, затем этот раствор прилили при перемешивании к раствору 6.94 г (27.82 ммоль, 20% избыток) Z-OSu в 35 мл ДМФА. Реакцию вели 12 часов при комнатной температуре (ТСХ-конроль в системе A, Rf 0.85). Затем прикапывали 0.6 мл DMAPA для нейтрализации избытка сукцинимидного эфира, перемешивали еще 2 часа. Реакционную массу упаривали до состояния подвижного масла, разбавляли 200 мл этилацетата, раствор экстрагировали 3% раствором H2SO4 (2x200 мл) затем 5% раствором NaHCO3 (2x200 мл) и дистиллированной водой (1x200 мл). Органическую фракцию отделяли, высушивали над безводным Na2SO4 в течение получаса, осушитель отфильтровывали, раствор упаривали, остаток растирали с диэтиловым эфиром, получали светло-желтое масло. Эфир декантировали, остаток сушили при комнатной температуре на воздухе. Получали 7.30 г (98%) вещества без четкой температуры плавления, [α]D26=-21.8° (с=1, ДМФА).

Спектр 1Н-ЯМР (ДМСО-d6) δ, м.д.: 2.89-2.94 и 3.04-3.10 (2 Н, 2 м CH2βPhe), 3.63 (3Н, с, ОСН3), 4.27-4.35 (2 Н, м, CHαPhe), 5.00 (2 Н, м, СН2СО), 7.21-7.41 (10 Н, м, Aryl), 7.84 (1 Н, д, NH Phe).

з) Получение N-карбобензокси-L-фенилаланина, Z-L-Phe-OH

Растворяли 7.00 г (22.3 ммоль) Z-L-Phe-OMe в 50 мл этилового спирта, при перемешивании прибавляли раствор 1.50 г (37 ммоль, 60% избыток) NaOH в 30 мл воды. Реакцию вели 8 ч при комнатной температуре и перемешивании. Упаривали до половины объема, затем прибавляли 400 мл воды и при перемешивании подкисляли 7% раствором H2SO4, до рН 3-4 (по шкале индикаторной бумаги), при этом выпадал белый хлопьевидный осадок. Осадку давали выстоять 1 ч при комнатной температуре, затем отфильтровывали, промывали дистиллированной водой, высушивали на чашке Петри при комнатной температуре на воздухе. Получали 4.55 г (69%) белого порошка с т.пл. 175°С, [α]D26=-16.8° (с=1, ДМФА).

Спектр 1Н-ЯМР (ДМСО-d6) δ, м.д.: 2.80-2.88 и 3.07-3.12 (2 Н, 2 м CH2βPhe), 4.16-4.17 (2 Н, м, CHαPhe), 4.97 (2 Н, м, СН2СО), 7.20-7.34 (10 Н, м, Aryl), 7.49 (1 Н, д, NH Phe), 7.20 (1H, ушир.с, под ароматикой, ОН Phe).

и) Получение сукцинимидного эфира N-карбобензокси-фенилаланина, Z-L-Phe-OSu.

К раствору 4.00 г (13.4 ммоль) Z-L-Phe-OH в 200 мл этилацетата добавляли 1.81 г (15.6 ммоль, 17% избыток) N-гидроксисукцинимида, раствор охлаждали до +10°С на водяной бане со льдом, и затем прибавляли 3.22 (15.6 ммоль, 17% избыток) дицилогексилкарбодиимида. Реакционную массу перемешивали 30 мин при температуре +10°С и затем 12 ч при комнатной температуре. Осадок дициклогексилмочевины отфильтровывали, фильтрат упаривали. Полученное вязкое масло растворяли в 200 мл хлористого метилена. Раствор выдерживали 24 ч в холодильнике при +8°С, затем повторно образовавшийся осадок дициклогексилмочевины отфильтровывали, фильтрат упаривали. Полученное масло растирали с гексаном, гексан декантировали, затем повторно растирали с диэтиловым эфиром до кристаллизации масла. Эфир декантировали, высушивали при комнатной температуре на воздухе. Получали продукт в количестве 5.22 г (98%) в виде кремового порошка с т.пл. 137-140°С [α]25D -17.4° (с 1, ДМФА).

Спектр 1Н-ЯМР (ДМСО-d6) δ, м.д.: 2,82 (4 Н, м, OSu), 2.99-3.02 и 3.18-3.20 (2 Н, 2 м CH2βPhe), 4.87-4.88 (2 Н, м, CHαPhe), 5.01 (2 Н, м, CH2CO), 7.31-7.41 (10 Н, м, Aryl), 7.64 (1 Н, д, NH Phe).

к) Получение амида триптофанил-лейцина, H-L-Trp-L-Leu-NH2, гидрогенолиз.

В колбу помещали 6.78 г (0.015 моль) Z-L-Trp-L-Leu-NH2, 50 мл метанола и суспензию 0,500 г 10% Pd/C в 10 мл метанола с 3 каплями воды. При интенсивном перемешивании на магнитной мешалке из реакционной смеси откачивали воздух при помощи водоструйного насоса и заполняли водородом из газометра, процедуру повторяли трижды, затем перемешивали реакционную смесь в течение 3 часов. По окончании реакции катализатор отфильтровывали через мелкопористый стеклянный фильтр, подложив на дно фильтра бумагу маркировки «черная лента», промывали 30 мл метанола, фильтрат упарили. Получали продукт в количестве 4.71 г (99%) в виде серой пены без четкой температуры плавления, [α]D26=-25.0° (с=1, ДМФА).

Спектр 1Н-ЯМР (DMSO-d6) δ, м.д.: 0,82-0,88 (6 Н, 2 д д, 2СδН3 Leu), 1,09-1,26 (1 Н, м, СγН2 Leu), 1,45 (2 Н, м, СβН Leu), 2,90 и 3,08 (2 Н, два д.д., СβН Trp), 3,50 (1 Н, м, СαН Trp), 4,14 (1 Н, д.д., СαН Leu), 6,94-7,55 (5 Н, м, Ar),7,05 и 7,41 (2 Н, 2 д, NH2 амид), 7,60 (1 Н, д, NH Leu), 8,05 (1 Н, д, NH Trp), 10,85 (1 Н, уш. с, N индол).

л) Получение амида N-карбобензокси-фенилаланил-триптофанил-лейцина, Z-L-Phe-L-Trp-L-Leu-NH2.

Растворяли 1.52 г (5 ммоль) H-L-Trp-L-Leu-NH2 в 30 мл ДМФА, к этому раствору при перемешивании прибавляли раствор 1,97 г (5.1 ммоль, 20% избыток) Z-L-Phe-OSu в 30 мл ДМФА, реакцию вели 12 ч. Затем добавили 0.32 мл ДМАПА для нейтрализации избытка сукцинимидного эфира, перемешивали еще 1 час, затем растворитель упаривали. Полученное густое светло-кремовое масло сильно разбавляли 350 мл насыщенного водного раствора NaCl, этот раствор с осадком выдерживали 12 ч в холодильнике при +5 - +8°С. Хорошо сформировавшийся осадок отфильтровывали, промывали гексаном, затем диэтиловым эфиром, высушивали в вакуумированном эксикаторе над Na2SO4 и парафином. Получали продукт в виде желтоватого порошка массой 1.695 г (57%), с т.пл.205-209, [α]D23=-23.2° (с=1, ДМФА).

Спектр 1Н-ЯМР (DMSO-d6) δ, м.д.: 0,85-0,88 (6 Н, 2 дд, 2СδН3 Leu), 1,06-1,23 (1 Н, м, СγН2 Leu), 1,47-1.61 (2 Н, м, СβН Leu), 2,91 и 3,09 (2 Н, два д.д., СβН Trp), 4.27-4.60 (3 Н, 3 м, CαH Leu и СαН Trp СαН Phe), 4,90 (2 Н, м, CH2CO), 6,99-7,25 (15 Н, м, Ar) 7,25 и 7,33 (2 Н, два с, NH2 амид), 7,62 (1 Н, д, NH Leu), 7,95 (1 Н, д, NH Trp), 8.19 (1 Н, д, NH Phe), 10,82 (1 Н, с, NH индол), м) Получение амида фенилаланил-триптофанил-лейцина, H-L-Phe-L-Trp-L-Leu-NH2 (ГД-186), гидрогенолиз.

В колбу помещали 1.65 г (2.7 моль) Z-L-Trp-L-Leu-NH2, 50 мл метанола и суспензию 0,25 г 10% Pd/C в 10 мл метанола с 3 каплями воды. При интенсивном перемешивании на магнитной мешалке из реакционной смеси откачивали воздух при помощи водоструйного насоса и заполняли водородом из газометра, процедуру повторяли трижды, затем перемешивали реакционную смесь в течение 5 часов. По окончании реакции катализатор отфильтровывали через мелкопористый стеклянный фильтр, подложив на дно фильтра бумагу маркировки «черная лента», промывали 30 мл метанола, фильтрат упарили. Получали продукт в количестве 1.59 г (99%) в виде серой пены. Данную субстанцию очищали на колонке. Для этого 15 г силикагеля отдельно взвешивали в круглодонную колбу, смачивали хлористым метиленом, откачивали воздух с помощью крана на водоструйном насосе до прекращения вспенивания. Набивали дегазированным силикагелем колонку длиной 7 см со стеклянным пористым дном диаметром 3 см. Прогоняли следующие системы:

30 мл хлористого метилена

30 мл хлористый метилен:метанол 95:5

30 мл хлористый метилен:метанол 93:7

30 мл хлористый метилен:метанол 90:10

30 мл хлористый метилен-.метанол 85:15

Собирали фракции по 7 мл. По результатам ТСХ-контроля объединяли фракции содержащие целевое соединение (Rf=0,26 в системе А), упаривали.

Выход чистого продукта составил 0.70 г в виде белого порошка с т.пл. 192-194°С, [α]D26=-26.1°(c=1, ДМФА).

Спектр 1Н-ЯМР (DMSO-d6) δ, м.д.: 0.85-0.88 (6 Н, 2 дд, 2СδН3 Leu), 1.06-1.23 (1 Н, м, СγН2 Leu), 1.45-1.62 (2 Н, м, СβН Leu), 2.79-2.87 и 3.01-3.08 (2 Н, два д.д., СβН Trp), 3.64-4.06 (2Н, ушир.с, NH2-Phe), 4.27, 4.48 и 4.59 (3 Н, 3 м, CαH Leu, СαН Trp, СαН Phe), 6.96-7.90 (12 Н, м, Ar, NH2 амид), 7.62 (1 Н, д, NH Leu), 8.03 (1 Н, д, NH Trp), 8.13 (1 Н, д, NH Phe), 10.89 (1 Н, с, NH индол).

ПРИМЕР 2. Доказательство лигандных свойств заявляемого соединения методом молекулярного докинга.

Для подтверждения лигандных свойств по отношению к TSPO для соединения ГД-186 осуществлен молекулярный докинг в активный центр TSPO. Молекулярный докинг проводился с использованием структуры TSPO в комплексе с селективным лигандом РК-11195 Белок подготавливали с помощью Schrodinger Protein Preparation Wizard с использованием стандартного протокола [Schrodinger Release 2015-2: LigPrep, Schrodinger, LLC, New York, NY, 2015]. Конформации лигандов рассчитывали в модуле LigPrep.Координаты сетки (х 5.65; у 4.66; z 5.91; были отцентрированы по лиганду. Стыковку выполняли в Glide v9.1. с использованием ХР протокола. Позы были визуализированы в Maestro 12.8.

ГД-186 локируется в активный центр TSPO, показывая при этом характерную для всех лигандов TSPO высокую липофильность и энергию связывания по оценочной функции Docking Score (далее DS), сопоставимую с таковой для селективного лиганда РК-11195 и известного дипептидного лиганда ГД-102 (см табл.1). Для ГД-186 и лигандов сравнения показано наличие π -π стэкинга между фенильным фрагментом лиганда и Trp-143 рецептора (см фиг. 1).

ПРИМЕР 3. Анксиолитическая активность трипептида ГД-186.

Влияние соединения ГД-186 на поведение мышей в тесте «Приподнятый крестообразный лабиринт» (далее ПКЛ).

Тест ПКЛ основан на врожденном предпочтении грызунами закрытых пространств открытым и на конфликте исследовательского поведения и страха в условиях незнакомой обстановки, что способствует подавлению их активности на открытых рукавах установки. Использовали базовую конфигурацию установки для ПКЛ (НПК Открытая Наука, Россия), состоящую из 2 закрытых и 2 открытых перекрещивающихся рукавов (30 см в длину, 5 см в ширину; высота стенок закрытых рукавов составляла 15 см) и центральной площадки (площадью 5x5 см). ПКЛ был приподнят над полом на 40 см. Пол и стенки каждого из рукавов выполнены из серого, непрозрачного ПВХ. Тест проводили при слабой освещенности (11-15 люкс в открытых рукавах и около 2-5 люкс в закрытых).

В эксперименте использовались мыши-самцы линии BALB/c массой 20-25 г, полученных из питомника «Андреевка». ГД-186 вводили в дозах 1; 5 и 10 мг/кг внутрибрюшинно (далее в/б), предварительно растирали с Tween-80 и растворяли в дистиллированной воде из расчета 10 мл/кг. Контрольные животные получали 1% раствор Tween 80. В эксперименте участвовало 4 группы животных:

1. «Контроль» (n=10)

2. «ГД-186,1 мг/кг» (n=9)

3. «ГД-186, 5 мг/кг» (n=9)

4. «ГД-186, 10 мг/кг» (n=10)

Вещества животным вводили внутрибрюшинно за 30 мин до теста.

При выполнении теста животных аккуратно помещали в центр ПКЛ в произвольном направлении по отношению к открытым и закрытым рукавам. В ходе теста регистрировали число заходов в открытые и закрытые рукава и время пребывания в них. Показатели «время в открытых рукавах» и «число заходов в открытые рукава», сравнивали, помимо абсолютных значений, в относительных единицах (в %), которые рассчитывали по формуле:

относительное время в открытых рукавах, %=(время в открытых рукавах в с/300 с)* 100%;

относительное число заходов в открытые рукава, %=(число заходов в открытые рукава/общее число заходов в открытые и закрытые рукава)* 100%. Время регистрации составляло 4 минуты.

Полученные данные проверяли на нормальность с помощью W-критерия Шапиро-Уилка. Поскольку распределение отличалось от нормального, для выявления статистических различий между экспериментальными группами был применен непараметрический тест Краскела-Уоллиса с последующими попарными межгрупповыми сравнениями с помощью критерия Данна. Различия считали статистически значимыми при р<0,05.

Соединение ГД-186 в дозе 10 мг/кг статистически значимо увеличило процент выходов мышей на открытые рукава ПКЛ и в виде тенденции вызывало увеличение продолжительности нахождения на открытых рукавах лабиринта (%). Два этих параметра рассматриваются как основные показатели анксиолитического действия соединений в данном тесте [File SE. Behav Brain Res. 2001; 125(1-2): 151-7]. Также ГД-186 в дозе 10 мг/кг вызывал тенденцию к увеличению абсолютного времени, проведенного мышами на открытых рукава ПКЛ, что также свидетельствует об его анксиолитическом действии. В дозах 1 и 5 мг/кг ГД-186 был неактивен.

Таким образом, соединение ГД-186 при однократном в/б введении в дозе 10 мг/кг проявляло анксиолитическую активность в тесте приподнятого крестообразного лабиринта на мышах.

ПРИМЕР 4. Антидепрессантподобная активность трипептида ГД-186.

Тест вынужденного плавания на мышах [Porsolt RD, Bertin A, Jalfre М. Arch Int Pharmacodyn Ther. 1977; 229(2): 327-36] проводили по модифицированной методике с двумя сессиями плавания [Angoa-Perez М, Kane MJ, Briggs DI, et al. ACS Chem Neurosci. 2014; 5(10): 908-19]. Установка для проведения теста (ООО «НПК Открытая наука», Москва, Россия) представляла собой 5 цилиндров из прозрачного пластика диаметром 10 см и высотой 30 см. Цилиндры заполняли водой температурой 22-23°С на 2/3 высоты - уровень, при котором животные не имеют возможности опираться на дно цилиндра лапами или хвостом. Животных помещали в цилиндры с водой на 10 мин. Через 24 ч проводили тестовую посадку - животных повторно помещали в те же условия на 5 мин. Поведение животных регистрировали при помощи видеокамеры. Обработку видеоданных осуществляли с помощью программы RealTimer (ООО «НПК Открытая наука», Москва, Россия). Регистрировали суммарное время сохранения животными позы иммобильности. Снижение суммарного времени иммобильности рассматривалось как показатель антидепрессантоподобной активности. В эксперименте использовались мыши-самцы линии BALB/c массой 21-26 г.

ГД-186 растирали с Tween-80, суспензировали в дистиллированной воде и вводили мышам в дозах 10 и 30 мг/кг в/б. В качестве препарата сравнения использовали Амитриптилин (10 мг/кг в/б). Контрольные животные получали 1% раствор Tween 80. Объем в/б введения составлял 10 мл на 1 кг массы тела мышей.

Мыши были случайным образом разделены на 4 группы:

1. «ГД-186 10 мг/кг» (n=9)

2. «ГД-186 30 мг/кг» (n=10)

3. «Амитриптилин 10 мг/кг» (n=9)

4. «Контроль» (n=11)

Соединение ГД-186 вводили мышам за 30 минут, а Амитриптилин - за 1 час до тестовой посадки в цилиндры с водой. Животным из контрольной группы вводили 1% раствор Tween 80 за 1 час до тестовой посадки.

Данные проверяли на нормальность с помощью W-критерия Шапиро-Уилка. Поскольку не во всех экспериментальных группах распределение данных соответствовало нормальному, для выявления межгрупповых различий был применен непараметрический тест Краскела-Уоллиса с последующими попарными межгрупповыми сравнениями с помощью критерия Данна. Различия считали статистически значимыми при р<0,05.

Установлено, что в изученных дозах 10 и 30 мг/кг ГД-186 статистически значимо снижал время иммобильности мышей по сравнению с контрольной группой соответственно на 26% (р=0,019) и 32% (р=0,002) (Табл. 3). Амитриптилин снижал время иммобильности на 51% по сравнению с контрольной группой (р<0,0001).

Таким образом, соединение ГД-186 в дозах 10 и 30 мг/кг при однократном в/б введении проявляет антидепрессантоподобную активность в тесте вынужденного плавания на мышах.

ПРИМЕР 5. Нейропротекторная активность трипептида ГД-186. Культивирование и рассеивание клеток

Исследование проводили с использованием иммортализованных клеток гиппокаппа мыши линии НТ-22. Для эксперимента клетки рассеивали на 96-луночный культуральные планшеты, обработанные поли-Dлизином (Corning, США) с плотностью 3,5 тыс. на лунку и инкубировали в среде DMEM (HyClone, США), содержащей 2 мМ L-глутамина (MP Bioscience, США) и 5% эмбриональной телячьей сыворотки (FBS, ThermoFisher, США) при температуре 37°С в атмосфере, содержащей 5% CO2 до образования монослоя.

Модель окислительного стресса

Модель окислительного стресса в культуре гиппокампальных нейронов линии НТ-22 [Jackson GR, Werrbach-Perez К, Ezell EL, et al. Brain Res. 1992; 592(1): 239-48] воспроизводили путем добавления в культуральную среду H2O2 (ООО ПФК «Обновление», Россия) в конечной концентрации 1,5 мМ в течение 30 мин при 37°С. Далее культуральную среду, содержащую H2O2, заменяли на нормальную и через 4 ч определяли жизнеспособность клеток с помощью МТТ-теста.

МТТ-тест

По окончании эксперимента среду культивирования заменяли раствором МТТ (0,5 мг/мл) (Applechem, Германия) и инкубировали 30 мин при температуре 37°С [Ueda Y, Walsh Е, Nakanishi Н, Yoshida К. Neurosci Lett. 1994; 165: 203-7]. Затем отбирали раствор МТТ из лунок и добавляли для растворения формазана DMSO (диметилсульфооксид). Через 15 мин измеряли светопоглощение на спектрофотометре "Multiscan" (Thermo) при длине волны 600 нм.

ГД-186 растворяли в ДМСО. Далее готовили серию последовательных разведений в деионизированной воде. В контроль добавляли 2% раствор ДМСО. ГД-186 вносили за 24 ч и сразу после повреждения клеток в конечных концентрациях от 10-5 до 10-8М.

Статистическую обработку данных производили с использованием однофакторного дисперсионного анализа ANOVA и критерия Краскела-Уоллиса с последующим тестом по Данну.

Внесение перекиси водорода (1,5 мМ) вызывает статистически достоверную гибель гиппокампальных нейронов линии НТ-22. ГД-186 при внесении за 24 ч до Н2О2 оказывал нейропротекторное действие в концентрациях 10-5-10-7М. В концентрации 10-8М защитное действие ГД-186 отсутствовало (см. фиг. 2). В качестве положительного контроля был использован NT-3 (100 нг/мл) NT-3 защищал клетки от гибели при внесении за 24 ч до H2O2.

Наличие нейропротекторного действия ГД-186 за 24 ч до повреждения может быть связано с его влиянием на синтез de novo белков эндогенной системы защиты клеток, для которого требуется интервал времени от 12 до 24 ч [Castagné, Clarke. Neuroscience. 1998; 86(3): 895-902; Klettner A, Baumgrass R, Zhang Y, et al. Molecular brain research. 2001; 97(1): 21-31].

Таким образом, трипептидный лиганд TSPO ГД-186 обладает нейропротекторной активностью в интервале концентраций 10-5 - 10-7 М. Активность имеет куполообразную зависимость.

Описание чертежей

Фиг. 1. Схема положения ГД-186 в активном сайте связывания TSPO.

Фиг. 2. Нейропротективный эффект трипептида ГД-186 на культуре клеток линии НТ-22 в условиях окислительного стресса за 24 часа до внесения перекиси водорода.

Похожие патенты RU2823022C1

название год авторы номер документа
Дипептидные лиганды TSPO, обладающие нейропсихотропной активностью 2018
  • Середенин Сергей Борисович
  • Деева Ольга Алексеевна
  • Гудашева Татьяна Александровна
  • Яркова Милада Альнордовна
  • Поварнина Полина Юрьевна
  • Дурнев Андрей Дмитриевич
RU2756772C2
Лейцилтриптофановые лиганды TSPO, обладающие анксиолитической активностью 2020
  • Середенин Сергей Борисович
  • Деева Ольга Алексеевна
  • Яркова Милада Альнордовна
  • Гудашева Татьяна Александровна
RU2757476C2
ЗАМЕЩЕННЫЕ ДИПЕПТИДЫ С НЕЙРОПСИХОТРОПНОЙ АКТИВНОСТЬЮ 2014
  • Середенин Сергей Борисович
  • Гудашева Татьяна Александровна
  • Деева Ольга Алексеевна
  • Мокров Григорий Владимирович
  • Ярков Станислав Алексеевич
  • Яркова Милада Альнордовна
  • Жердев Владимир Павлович
  • Дурнев Андрей Дмитриевич
  • Алексеев Константин Викторович
  • Незнамов Григорий Георгиевич
RU2573823C2
Новые глипролины с ноотропной, антигипоксической, нейропротективной и анксиолитической активностью 2016
  • Середенин Сергей Борисович
  • Гудашева Татьяна Александровна
  • Колясникова Ксения Николаевна
  • Кузнецова Елена Александровна
  • Воронина Татьяна Александровна
  • Яркова Милада Альнордовна
  • Антипова Татьяна Алексеевна
  • Литвинова Светлана Александровна
  • Золотов Николай Николаевич
RU2646604C2
Пирроло[1,2-a]пиразин-содержащие лиганды транслокаторного белка 18 кДа, обладающие анксиолитической активностью 2022
  • Середенин Сергей Борисович
  • Мокров Григорий Владимирович
  • Яркова Милада Альнордовна
  • Пантилеев Андрей Сергеевич
  • Гудашева Татьяна Александровна
  • Вахитова Юлия Венеровна
RU2812083C2
ДИМЕРНЫЕ ДИПЕПТИДНЫЕ МИМЕТИКИ НЕЙРОТРОФИНА-3 2022
  • Середенин Сергей Борисович
  • Гудашева Татьяна Александровна
  • Вахитова Юлия Венеровна
  • Поварнина Полина Юрьевна
  • Антипова Татьяна Алексеевна
  • Колик Лариса Геннадьевна
  • Сазонова Нелля Михайловна
  • Тарасюк Андрей Валерьевич
  • Никифоров Дмитрий Михайлович
  • Зайнуллина Лиана Фанзилевна
  • Константинопольский Марк Анатольевич
  • Ягубова Светлана Сергеевна
  • Островская Рита Ушеровна
  • Николаев Сергей Владимирович
  • Логвинов Илья Олегович
RU2800369C1
1-АРИЛПИРРОЛО[1,2-A]ПИРАЗИН-3-КАРБОКСАМИДЫ С НЕЙРОПСИХОТРОПНОЙ АКТИВНОСТЬЮ 2014
  • Середенин Сергей Борисович
  • Мокров Григорий Владимирович
  • Гудашева Татьяна Александровна
  • Деева Ольга Алексеевна
  • Ярков Станислав Алексеевич
  • Яркова Милада Альнордовна
  • Жердев Владимир Павлович
  • Алексеев Константин Викторович
  • Дурнев Андрей Дмитриевич
  • Незнамов Григорий Георгиевич
RU2572076C2
Дифенилпирроло[1,2-а]пиразин-3-карбоксамиды - соединения, обладающие нейропсихотропной активностью, способы их получения 2018
  • Середенин Сергей Борисович
  • Мокров Григорий Владимирович
  • Яркова Милада Альнордовна
  • Пантилеев Андрей Сергеевич
  • Гудашева Татьяна Александровна
  • Дурнев Андрей Дмитриевич
RU2734240C2
СИНТЕТИЧЕСКИЕ ПЕПТИДНЫЕ АМИДЫ И ИХ ДИМЕРЫ 2007
  • Счтеингарт Клаудио Д.
  • Мензагхи Фредерике
  • Джанг Гуангченг
  • Александер Роберта Вецца
  • Суеирас-Диаз Джавиер
  • Спенсер Роберт Н.
  • Чалмерс Дерек Т.
  • Луо Жийонг
RU2510399C2
ЛИГАНДЫ МЕЛАНОКОРТИНОВЫХ РЕЦЕПТОРОВ, МОДИФИЦИРОВАННЫЕ ГИДАНТОИНОМ 2008
  • Донг Чжен Ксин
  • Деоливейра Дэниел Б.
  • Комсток Джинн Мэри
RU2450017C2

Иллюстрации к изобретению RU 2 823 022 C1

Реферат патента 2024 года ТРИПЕПТИД, ОБЛАДАЮЩИЙ НЕЙРОПСИХОТРОПНОЙ АКТИВНОСТЬЮ

Настоящее изобретение относится к области биотехнологии, в частности к новому биологически активному пептиду формулы: H-(L-Phe)-(L-Trp)-(L-Leu)-NH2 (амид L-фенилаланил-L-триптофанил-L-лейцина). Изобретение раскрывает трипептидный лиганд митохондриального транслокаторного протеина (TSPO), обладающий нейропсихотропными свойствами: анксиолитической, антидепрессивной и нейропротекторной активностями. Изобретение может быть применимо в медицине в качестве быстродействующего анксиолитика, антидепрессанта и нейропротектора для лечения тревоги, тревожных состояний и тревожно-депрессивных расстройств. 2 ил., 3 табл., 5 пр.

Формула изобретения RU 2 823 022 C1

Соединение амид L-фенилаланил-L-триптофанил-L-лейцина

обладающее анксиолитической, антидепрессивной и нейропротекторной активностью.

Документы, цитированные в отчете о поиске Патент 2024 года RU2823022C1

Дипептидные лиганды TSPO, обладающие нейропсихотропной активностью 2018
  • Середенин Сергей Борисович
  • Деева Ольга Алексеевна
  • Гудашева Татьяна Александровна
  • Яркова Милада Альнордовна
  • Поварнина Полина Юрьевна
  • Дурнев Андрей Дмитриевич
RU2756772C2
Лиганды транслокаторного белка TSPO, обладающие антидепрессивной и ноотропной активностью 2015
  • Середенин Сергей Борисович
  • Яркова Милада Альнордовна
  • Поварнина Полина Юрьевна
  • Мокров Григорий Владимирович
  • Гудашева Татьяна Александровна
RU2699568C2
МОКРОВ Г.В
Способ использования делительного аппарата ровничных (чесальных) машин, предназначенных для мериносовой шерсти, с целью переработки на них грубых шерстей 1921
  • Меньщиков В.Е.
SU18A1
Очаг для массовой варки пищи, выпечки хлеба и кипячения воды 1921
  • Богач Б.И.
SU4A1
GUDASHEVA T.A
et al.: "The New Dipeptide TSPO Ligands: Design, Synthesis and Structure-Anxiolytic

RU 2 823 022 C1

Авторы

Деева Ольга Алексеевна

Мокров Григорий Владимирович

Пантилеев Андрей Сергеевич

Поварнина Полина Юрьевна

Антипова Татьяна Алексеевна

Гудашева Татьяна Александровна

Дорофеев Владимир Львович

Даты

2024-07-17Публикация

2023-12-04Подача