СРЕДСТВО, ОБЛАДАЮЩЕЕ ПРОТИВОВОСПАЛИТЕЛЬНЫМ И ПРОТИВОМИКРОБНЫМ ДЕЙСТВИЕМ, ДЛЯ ПРОФИЛАКТИКИ И ЛЕЧЕНИЯ СТОМАТОЛОГИЧЕСКИХ ЗАБОЛЕВАНИЙ ПОЛОСТИ РТА Российский патент 2024 года по МПК A61K6/00 A61K36/73 A61K47/10 A61K47/38 A61K9/70 A61P1/02 

Изобретение относится к фармацевтике и медицине, в частности к стоматологии, и может быть использовано для лечения и профилактики стоматологических заболеваний слизистой оболочки полости рта различного генеза.

Одной из актуальных проблем медицинской науки и практического здравоохранения является профилактика и лечение воспалительных заболеваний слизистой оболочки полости рта. Для данного заболевания характерны все признаки воспалительного процесса: покраснение, боль, припухлость, повышение местной и общей температуры тела. Воспалительный процесс может возникать на слизистой любого участка ротовой полости: на десне, языке, слизистой неба, в преддверии полости рта и ретромолярной ямке, на слизистой щек и губ. Заболевание может проявляться в самых различных формах: это может быть покраснение слизистой на определенном участке или возникновение язвочек в полости рта [1].

Значимость этой проблемы обусловлена частотой возникновения и широким распространением заболевания [2]. Проблема воспалительных заболеваний слизистых оболочек полости рта является одной из актуальных в стоматологии. Воспаление сопровождает многие заболевания слизистой оболочки полости рта, развивается при любом травматическом воздействии на слизистую оболочку. В связи с этим, поиск и разработка новых эффективных и безопасных лекарственных средств и субстанций из растительного сырья, воздействующих на воспаление и активизацию регенераторных процессов при терапии заболеваний слизистой оболочки полости рта и обладающих малой токсичностью, являются актуальной задачей при амбулаторном стоматологическом лечении взрослых и детей.

Выбор лекарственных препаратов при заболеваниях полости рта зависит от степени выраженности воспалительного процесса, отечности, кровоточивости, наличия дефектов эпителия, стадии процесса и деструктивных нарушений. Воспалительный процесс в полости рта начинается с колонизации ее разнообразными микроорганизмами. Снижая барьерную функцию покровных тканей, микробы способствуют проникновению и распространению токсичных продуктов, литических ферментов [3]. В современной профилактической стоматологии большое значение придается созданию баланса между микрофлорой и естественными защитными системами полости рта. С целью коррекции состава микробной флоры предложены антисептики широкого спектра действия, чаще всего хлоргексидин, триклозан, гексетидин, которые вводятся в состав многих гигиенических средств - ополаскивателей, гелей, бальзамов, зубных паст. Такие средства доминируют и широко рекламируются как эффективные в устранении воспаления и регуляции состава микрофлоры. Однако, несмотря на коррекцию микробного состава в результате воздействия антисептика, данная группа препаратов оказывает неблагоприятное влияние на ткани полости рта и состав ротовой жидкости. Длительное их использование приводит к нарушению резистентной флоры, развитию дисбиоза расстройству вкусовой чувствительности и иногда к аллергическим реакциям, окрашиванию тканей.

Для нормального функционирования механизмов защиты полости рта с давних времен используют препараты на основе лекарственного растительного сырья. В стоматологии накоплен опыт применения лекарственных растений для лечения различных видов патологии, т.к. фитотерапия является высокоэффективной, безвредной, редко вызывает побочные эффекты и аллергические реакции. Поскольку в состав растений входят биологически активные вещества, такие как витамины, фитогормоны, фитонциды, хлорофиллы, микроэлементы, эфирные и жирные масла, они оказывают влияние на обменные процессы, повышают защитные свойства, нормализуют гомеостаз. Препараты лекарственных растений оказывают противовоспалительное, анальгетическое, иммуномодулирующее, кровоостанавливающее и ранозаживляющее действие. При этом по эффективности противомикробного и дезодорирующего воздействия некоторые из них не уступают синтетическим средствам [3]. При наличии патологии (гингивит, пародонтит, пародонтоз) растительные препараты являются прекрасным дополнением к другим лечебным средствам и часто используются как составляющие комплексной терапии. С лечебной и профилактической целью применяют жидкие средства гигиены. К их числу относятся водные извлечения из лекарственного сырья (настои, отвары), а также настойки и экстракты в составе зубных эликсиров, ополаскивателей, бальзамов, освежителей полости рта. Для полоскания рта могут быть использованы многие препараты, но наиболее эффективными признаны полоскания настойками эвкалипта, шалфея, зверобоя, мяты перечной, тысячелистника [4]. Перечисленные средства растительного происхождения пригодны не только для полоскания рта, но и для аппликаций, инстилляций, ротовых ванночек. Эти средства целесообразно принять за прототипы вследствие наличия общих фармакологических характеристик.

Прототипы (настои, отвары, настойки) имеют следующие недостатки:

- отсутствие точного дозирования;

- проявление кратковременной фармакологической активности (только во время полоскания);

- неудобство применения на слизистых оболочках ротовой полости ввиду отсутствия у настоя адгезивных свойств и, как следствие, невозможность обеспечить пролонгированное воздействие активного компонента на зону патологического очага из-за регулярного омывания слюной;

- ограниченный срок хранения водных извлечений (2 суток).

Эффективными средствами местной антимикробной и противовоспалительной терапии являются пленки или саморассасывающиеся пластины. Основа саморассасывающихся пластин «КП-Пласт» «КП-Пласт-фито», «КП-Пласт-вита», «КП-Пласт-антимикробный», «Пластины ЦМ-1» представлена природными полисахаридами. Кроме этого, используются стоматологические самоклеящиеся пленки «Диплен Дента» и коллагеновые пластины «Фармадонт». Накладываются они непосредственно на пораженный участок слизистой, выделение лекарственных компонентов пролонгированное, для разных составов длится от 2 до 12 часов. Преимуществами пленок считаются точность дозировки, постоянная концентрация биологически активных веществ в течение времени экспозиции, прочная фиксация к влажным и твердым тканям, достаточная газопроницаемость для нормального протекания репаративных процессов, удобство применения, что дает возможность самостоятельного использования пациентами. Хорошую адгезию пленок и пластин обеспечивает входящий в их состав полимер (натрий карбоксиметилцеллюлоза, метилцеллюлоза, желатин, коллаген, поливиниловый спирт). Пластины, соприкасаясь с влажной десной, впитывают слюну и постепенно превращаются в гель, фиксируясь на поверхности десны. Однако ассортимент таких лекарственных средств очень ограничен.

Целью настоящего изобретения является разработка состава пленок с экстрактом земляники садовой листьев сухим и установление противовоспалительного и противомикробного действия у нового лекарственного препарата на основе растительного сырья.

Технический результат заявленного изобретения заключается в достижении повышения эффективности лечения воспалительных заболеваний слизистой оболочки полости рта путем разработки состава пленок с экстрактом земляники садовой листьев сухим и установление противовоспалительного и противомикробного действия у нового лекарственного препарата на основе растительного сырья, имеющего достаточную сырьевую базу.

В качестве источника сырья используют земляники садовой листья - Fragaria ananassa L., из которых получают на ОАО «Биохиммаш», г. Москва сухой водный экстракт [5], выступающий субстанцией для разработки способа получения новой лекарственной формы - пленки. Сухой экстракт земляники садовой листьев представляет собой порошок от желто-зеленого до коричневато-зеленого цвета со слабым запахом и горьковатым, слегка вяжущим вкусом. Содержание флавоноидов - 5,12 ± 0,17%, окисляемых веществ - 82,3 ± 8,5%, аскорбиновой кислоты - 1,1 ± 0,12%, влажность - 3,5 ± 0,3% [6].

Указанный технический результат достигается тем, что для профилактики и лечения стоматологических заболеваний полости рта предложено средство в виде пленок, получаемых путем введения земляники садовой листьев экстракта сухой в пленкообразующую основу с последующим высушиванием пленочной массы до образования пленки. При введении земляники садовой листьев экстракта сухой в поливочный раствор учитывается коэффициент «усушки» пленок, который составил 16. На основании этого концентрация земляники садовой листьев экстракта сухого в поливочном растворе составила 0,13-0,31%, что позволяет в готовой пленке иметь концентрацию земляники садовой листьев экстракта сухой в пределах 2-5%. Данная концентрация земляники садовой листьев экстракта сухого была введена нами в раствор натрий карбоксиметилцеллюлозы, из которого были получены пленки с земляники садовой листьев экстракта сухим методом полива при следующем соотношении компонентов в мас.%:

Земляники садовой листьев экстракта сухого 0,13-0,31

Натрий карбоксиметилцеллюлозы - 4,0

Глицерина - 2,0

Воды очищенной до 100,0

Примеры конкретных составов.

Пример 1

Земляники садовой листьев экстракта сухого 0,13

Натрий карбоксиметилцеллюлозы - 4,0

Глицерина - 2,0

Воды очищенной до 100,0

Пример 2

Земляники садовой листьев экстракта сухого 0,22

Натрий карбоксиметилцеллюлозы - 4,0

Глицерина - 2,0

Воды очищенной до 100,0

Пример 3

Земляники садовой листьев экстракта сухого 0,31

Натрий карбоксиметилцеллюлозы - 4,0

Глицерина - 2,0

Воды очищенной до 100,0

Во всех вышеописанных примерах пленки получают следующим образом:

93,70 - 93,87 мл воды очищенной нагревают до температуры 60°С. Параллельно отвешивают 4,0 г натрий карбоксиметилцеллюлозы. Воду переносят в емкость для изготовления полимерного раствора с мешалкой якорного типа (cкopocть 90-100 oб/мин). Затем при перемешивании на поверхность насыпают небольшими порциями натрий карбоксиметилцеллюлозу. Полученный раствор гомогенизируют до исчезновения комочков, после чего вводят в полимерную основу 0,13-0,31 г земляники садовой листьев экстракта сухого, тщательно гомогенизируя 10 минут. Последним вводят 2,0 г глицерина, гомогенизируют еще 10-20 минут. Проводят деаэрацию полимерного раствора путем отстаивания смеси в течение 30-40 мин при комнатной температуре. Полимерный раствор равномерно разливают на предварительно взвешенные подложки. Подложки заполняют полимерным раствором массой 28 г. Высота поливочного слоя 5-7 мм. Сушку проводят в сушильном шкафу с калорифером и принудительной вентиляцией воздуха при температуре 40-45°С в течение 16 часов. Экспериментально определен коэффициент усушки, равный 16.

Исследование противомикробной активности осуществляли в отношении эталонных штаммов E. coli АТСС 25922, S. aureus АТСС 6538Р, C. albicans 885-653 NCTC методом диффузии в агар согласно принципам ГФ ХIV ОФС 1.2.4.0010.18 [7].

Для определения антибактериальной активности использовали питательный агар (ФБУН ГНЦ ПМБ, г. Оболенск), для определения противогрибковой активности - агар Сабуро (ФБУН ГНЦ ПМБ, г. Оболенск). Для приготовления взвеси дрожжевой культуры применяли двухсуточные культуры, выращенные на агаре Сабуро. Для определения антибактериальной активности использовали типовые суточные культуры, выращенные на питательном агаре. Для приготовления рабочей взвеси микроорганизмов производили смыв выросшей культуры изотоническим раствором натрия хлорида и устанавливали оптическую плотность микробной взвеси 0,5 МсF. Осуществляли посев данной взвеси на соответствующие питательные среды газоном. Стерильные цилиндры единого размера и массы высотой (10±1) мм, и внутренним диаметром (6,0±0,1) мм из нержавеющей стали или алюминия расставили на поверхности засеянной среды на равном расстоянии друг от друга и от края чашки.

В лунки каждой чашки внесли испытуемые образцы пленок лекарственных c экстрактом земляники садовой листьев сухим площадью около 1 кв. см, смоченные изотоническим раствором натрия хлорида. Чашки поместили в термостат при температуре 36±1°С на 18-20 часов. О наличии противомикробной активности судили по измерению диаметра средней зоны задержки роста в миллиметрах. Результаты приведены в таблице 1.

Таблица 1
Противомикробная активность пленок лекарственных с экстрактом земляники садовой листьев сухого Зона задержки роста микроорганизмов, мм Контроль (мазь Календула) Пленки с концентрацией экстракта 1% Пленки с концентрацией экстракта 2% Пленки с концентрацией экстракта 5% E. coli АТСС 25922 10,3 + 0,6* 10,3 + 0,6* 10,3 + 0,6* 10,3 + 0,6* S. aureus АТСС 6538Р 10,3 + 0,6* 16,6 + 2,8* 18,0 + 2,0* 17,3 + 1,1* C. albicans 885-653 NCTC 10,3 + 0,6* 10,3 + 0,6* 10,3 + 0,6* 10,3 + 0,6* * - стандартное отклонение

Результаты исследования противомикробной активности показали, что наиболее выражен данный эффект у пленок лекарственных с концентрацией экстракта земляники садовой листьев сухого 2%. Степень антимикробной активности наиболее выражена в отношении изученного штамма S. aureus. Противомикробная активность Пленок с экстрактом земляники садовой листьев сухим достоверно выше активности мази «Календула» (р < 0,02).

Определение противовоспалительной активности основано на оценке прироста объема воспаленной, путем введения флогогенного агента, стопы крыс.

Исследование проводили на нелинейных крысах обоего пола, половозрелых массой 200-250 г., обоего пола (группа включала 6 животных) на модели острого воспалительного отека, вызванного субплантарным введением в заднюю лапу крысы 0,1 мл 1% водного раствора каррагенина. Увеличение объема стопы, свидетельствующее о развитии отека, оценивали онкометрически [8] до введения и через 3 часа после введения каррагенина. Исследуемые объекты в количестве 0,3 г наносили на кожу стопы за 0,5 часа до введения флогогенного агента. Контролем служили животные, не получавшие препарата. Статистическую обработку проводили по методу Стъюдента. На основе полученных результатов определяли эффект торможения воспаления в процентах к контрольному уровню. О наличии противовоспалительного действия судили по выраженности торможения воспалительной реакции. Если этот показатель был больше 30%, результат учитывался как положительный. Результаты исследования представлены в таблице 2.

Таблица 2
Противовоспалительная активность пленок с экстрактом земляники садовой листьев сухим Препарат Прирост объема стопы
через 3 часа, % Торможение реакции
через 3 часа, % Пленки с экстрактом земляники (Гель - невысушенная основа) 38,2 ± 10,6 *
р < 0,01
р' > 0,05 50,1 Мазь «Календула» 35,8 ± 4,4 *
р < 0,001 35,8 Мазь «Индометацин» 13,7 ± 1,7
р < 0,001 82,1 Контроль 76,6 ± 7,2 р - уровень статистической значимости различий в сравнении с контролем;
р' - уровень статистической значимости различий в сравнении с мазью «Календула»;
* - уровень статистической значимости различий в сравнении с мазью «Индометацин»

Исследованная лекарственная форма проявила противовоспалительную активность на модели каррагенинового воспаления. По сравнению с контрольными результатами выраженность воспалительного отека при применении пленок лекарственных уменьшается и является статистически значимой. Противовоспалительная активность Пленок с экстрактом земляники садовой листьев сухим достоверно не отличается от активности мази «Календула». При этом, мазь «Индометацин» действует активнее всех исследованных объектов.

Таким образом, пленки с 2% содержанием экстракта земляники садовой листьев сухого обладают противовоспалительной активностью. Противовоспалительная активность пленок с экстрактом земляники садовой листьев сухим сопоставима с таковой у мази «Календула».

Как следует из приведенных данных, пленки с экстрактом земляники садовой сухим обладают самостоятельным противомикробным и противовоспалительным действием.

Предлагаемый способ получения пленок по сравнению с известными прототипами позволяет получить препарат постоянного состава с противомикробным и противовоспалительным эффектом для применения на слизистых оболочках ротовой полости, обеспечить пролонгированное воздействие активного компонента на зону патологического очага; позволяет контролировать технологические стадии получения и стандартизовать целевой продукт; позволяет получить препарат, удобный для хранения и транспортировки.

Выше указанные преимущества в сочетании с предложенной схемой получения способствуют рациональному способу использования лекарственного растительного сырья, расширению ассортимента растительных лекарственных средств с противомикробной и противовоспалительной активностью и открывают перспективу внедрения данного способа в фармацевтическую промышленность.

Список литературы.

1. Новиков О. О., Жилякова, Е. Т., Цимбалистов, А. В., Трифонов, Б. В., Малютина, А. Ю., Писарев, Д. И. Новый взгляд на проблему профилактики и лечения заболеваний пародонта // Научные результаты биомедицинских исследований. - 2016. - Т. 2. - №. 3. - С. 64-69.

2. Суеркулов Э. С., Юлдашев, И. М., Мамыралиев, А. Б., Токтосунова, С. А., Цепелева, А. С., Сооронбаев, А. А. Распространенность и структура заболеваемости стоматитами у детей // Бюллетень науки и практики. - 2018. - Т. 4. - №. 11. - С. 91-96.

3. Е. И. Гончарова Растительные средства в профилактике и лечении заболеваний пародонта // РОССИЙСКИЙ СТОМАТОЛОГИЧЕСКИЙ ЖУРНАЛ, №3, 2012.- С. 48-52.

4. Государственный реестр лекарственных средств: сайт «Справочник лекарств РЛС®» [Электронный ресурс] - режим доступа https://grls.rosminzdrav.ru/grls.aspx.

5. Олешко Г.И., Петухова О.В., Юшков В.В., Блинова О.А., Марченко С.Д. Способ получения средства, обладающего диуретической и противовоспалительной активностью // Патент РФ № 2342945. Патентообладатель ГОУ ВПО ПГФА Росздрава. 2009. Бюл. № 1.

6. Яборова О.В., Соснина С.А., Турышев А.Ю. Выбор оптимальной технологии получения экстракта листьев земляники садовой / ФГБОУ ВО «Пермская государственная фармацевтическая академия» Минздрава России, г. Пермь, Российская Федерация // Медико-фармацевтический журнал «Пульс» - 2021 г.

7. Государственная Фармакопея Российской Федерации [Электронный ресурс]. - 14-е изд. - Москва, 2018. - Том 1, 2, 3, 4. - Режим доступа: http://www.femb.ru/feml

8. Руководство по проведению доклинических исследований лекарственных средств / под ред. Миронова А.Н. - М.: Гриф и К, 2012. - 944 с.

Изобретение относится к фармацевтике и медицине, в частности к стоматологии, и может быть использовано для лечения и профилактики стоматологических заболеваний слизистой оболочки полости рта различного генеза. Предлагается средство, обладающее противовоспалительным и противомикробным действием, в виде пленки, полученной путем растворения 4,0 г натрий карбоксиметилцеллюлозы в 93,69-93,87 мл воды очищенной, нагретой до температуры 60°С, с последующим добавлением от 0,13 до 0,31 г сухого водного экстракта листьев земляники садовой и 2,0 г глицерина в пленкообразующую основу, тщательной гомогенизации в течение 10 минут, равномерного розлива по 28,0 г с учетом высоты поливочного слоя 5-7 мм на предварительно взвешенные подложки и высушивания в сушильном шкафу с калорифером и принудительной вентиляцией воздуха при температуре 40-45°С в течение 16 часов. Средство обладает самостоятельным противомикробным и противовоспалительным действием, что обеспечивает его эффективность в лечении стоматологических заболеваний слизистой оболочки полости рта. 2 табл., 3 пр.

Средство для лечения и профилактики стоматологических заболеваний слизистой оболочки полости рта, обладающее противовоспалительным и противомикробным действием, в виде пленки, полученной путем растворения 4,0 натрий карбоксиметилцеллюлозы в 93,7-93,87 мл воды очищенной, нагретой до температуры 60°С, с последующим добавлением от 0,13 до 0,31 г сухого водного экстракта листьев земляники садовой и 2,0 г глицерина в пленкообразующую основу, тщательно гомогенизируемую в течение 10 минут, равномерно разлитую по 28,0 г с учетом высоты поливочного слоя 5-7 мм на предварительно взвешенные подложки и высушенную в сушильном шкафу с калорифером и принудительной вентиляцией воздуха при температуре 40-45°С в течение 16 часов.