СПОСОБ ЛЕЧЕНИЯ РАКА ШЕЙКИ МАТКИ Российский патент 2025 года по МПК A61K39/12 

Область техники, к которой относится изобретение

Настоящее изобретение относится к фармацевтической композиции, содержащей (а) вакцину против вируса папилломы человека (ВПЧ) и (b) ингибитор контрольной точки для профилактики или лечения рака, индуцированного вирусом папилломы человека (ВПЧ); для лечения рака шейки матки, вызванного инфекцией вирусом папилломы человека (ВПЧ).

Предшествующий уровень техники

Персистирующая вирусная инфекция часто вызывает функциональную инактивацию вирус-специфических CD8 Т-клеток, нарушая их способность к пролиферации, выработке иммуностимулирующих цитокинов и лизису инфицированных вирусом клеток. Рак шейки матки является одной из ведущих причин смерти от рака у женщин во всем мире, и примерно 75% его случаев вызваны персистирующей инфекцией наиболее распространенными типами вируса папилломы человека (ВПЧ) высокого риска, а именно ВПЧ16 и ВПЧ18. Персистенция ВПЧ обычно связана с отсутствием выраженного Т-клеточного иммунитета к ВПЧ, а вирус-специфические Т-клетки, обнаруживаемые у предраковых и раковых пациенток, как правило, являются дисфункциональными, а иногда даже супрессивными. Эти данные свидетельствуют о том, что функциональное нарушение вирус-специфических Т-клеток может быть связано с возникновением рака шейки матки, индуцированного ВПЧ.

Рак шейки матки возникает в результате инфекции ВПЧ высокого риска, персистенции вируса, клональной экспансии и дифференцировки персистентно инфицированных клеток в предраковое поражение, и их постепенной трансформации в инвазивный рак.

По данным Всемирной организации здравоохранения (ВОЗ), рак шейки матки является четвертым по частоте онкологическим заболеванием у женщин: по оценкам, в 2018 году было зарегистрировано 570 000 новых случаев, что составляет 7,5% всех смертей от рака среди женщин. Предраковая цервикальная интраэпителиальная неоплазия 2 и 3 (CIN2 и 3), в частности, ВПЧ16-позитивная, считается поражением высокой степени, вероятность перехода которой в инвазивный рак составляет примерно 30%. Таким образом, существует острая необходимость в эффективной терапевтической вакцине, которая позволит предотвратить тяжелые осложнения персистирующей ВПЧ-инфекции и ликвидировать неоплазию, связанную с ВПЧ.

Белки Е6 и Е7 ВПЧ действуют как вирусные онкопротеины, связывая и способствуя деградации белков-супрессоров опухолей, p53 и ретинобластомы (pRb), соответственно. Эти вирусные онкопротеины являются идеальным набором мишеней для терапевтической вакцины против CIN2/3 и рака шейки матки не только потому, что эти белки индуцируют онкогенез, но и потому, что они также конститутивно экспрессируются в предраковых и раковых клетках, инфицированных ВПЧ. Поскольку регрессия поражений шейки матки связана с наличием клеточного, а не гуморального иммунного ответа, настоятельно необходима терапевтическая вакцина, способная избирательно индуцировать сильный E6/E7-специфический Т-клеточный иммунитет.

В качестве одного из текущих усилий по обеспечению эффективной профилактики/лечения рака шейки матки, вызванного ВПЧ, гибридный белок, содержащий три или более аминокислотных последовательностей, выбранных из: (1) N-концевой части белка Е6 ВПЧ16; (2) С-концевой части белка Е6 ВПЧ16; (3) N-концевой части белка Е7 ВПЧ16; (4) С-концевой части белка Е7 ВПЧ16; (5) N-концевой части белка Е6 ВПЧ18; (6) С-концевой части белка Е6 ВПЧ18; (7) N-концевой части белка Е7 ВПЧ18 и (8) С-концевой части белка Е7 ВПЧ18, где гибридный белок не связывается с p53 или не образует димер с белком E6 ВПЧ16 или ВПЧ18, и где гибридный белок не связывается с pRb или не образует димер с белком E7 ВПЧ16, или ВПЧ18, был описан в одновременно находящейся на рассмотрении заявке №15/503,997. Содержание совместно рассматриваемой заявки №15/503,997 включено в настоящую заявку посредством ссылки во всей полноте.

Гибридный белок, включающий гибридный полипептид, сконструированный для трансформации трехмерной структуры Е6 и Е7, полученной из ВПЧ типов 16 и 18, и пептид, усиливающий иммунитет, и полинуклеотид, кодирующий гибридный белок, раскрыты в одновременно находящейся на рассмотрении заявке США №13/816,716. Гибридный белок согласно одному иллюстративному варианту осуществления из одновременно находящейся на рассмотрении заявки США №13/816,716 может включать гибридный полипептид, рекомбинированный для трансформации трехмерной структуры Е6 и Е7, полученных из ВПЧ типов 16 и 18. Более конкретно, гибридный полипептид представляет собой гибридный полипептид, в котором с 1-й по 85-ю аминокислоты белка Е6 получены из ВПЧ типа 16, с 1-й по 65-ю аминокислоты белка Е7, с 71-й по 158-ю аминокислоты белка Е6 и с 51-й по 98-ю аминокислоты белка Е7, с 1-й по 85-ю аминокислоты белка Е6 получены из ВПЧ типа 18, с 1-й по 65-ю аминокислоты белка Е7, с 71-й по 158-ю аминокислоты белка Е6 и с 51-й по 105-ю аминокислоты белка Е7 связаны в последовательности. В одном варианте осуществления совместно рассматриваемая заявка США №13/816,716 относится к молекуле нуклеиновой кислоты, кодирующей гибридный полипептид и пептид, усиливающий иммунитет.Типичный пептид, усиливающий иммунитет, включает лиганд CD40, лиганд Flt3, флагеллин и/или OX40. Вариант осуществления полинуклеотида, кодирующего гибридный белок, оптимизированную сигнальную последовательность (например, tPa) и пептид, усиливающий иммунитет (например, лиганд Flt3), может быть получен в соответствии с Примером 1 из одновременно рассматриваемой заявки №13/816,716. Содержание одновременно рассматриваемой заявки США №13/816,716 включено в настоящую заявку посредством ссылки во всей полноте.

Иммунотерапия, которая укрепляет собственную иммунную систему организма, позволяя организму усилить иммунный ответ против раковых клеток, может усилить или изменить работу иммунной системы, чтобы она могла находить и атаковать раковые клетки.

Исследования с антителами-ингибиторами контрольных точек для лечения рака показали беспрецедентную частоту ответа при раке, который ранее считался устойчивым к лечению рака. Терапия антагонистическими антителами, блокирующими контрольные точки, против CTLA-4, PD-1 и PD-L1 является одним из наиболее многообещающих новых направлений иммунотерапии рака и других заболеваний. В отличие от большинства противоопухолевых агентов, ингибиторы контрольных точек не воздействуют непосредственно на опухолевые клетки, а скорее нацелены на рецепторы лимфоцитов или их лиганды, чтобы усилить эндогенную противоопухолевую активность иммунной системы. Поскольку антитела к иммунным контрольным точкам действуют главным образом путем регуляции иммунного ответа на больные клетки, ткани или патогены, их можно использовать в сочетании с другими терапевтическими методами, такими как конъюгаты антитело-лекарственное средство, для усиления противоопухолевого действия конъюгатов антитело-лекарственное средство.

Белок программируемой гибели клеток 1 (PD-1, также известный как CD279) кодирует белок мембраны клеточной поверхности суперсемейства иммуноглобулинов, который экспрессируется в В-клетках и NK-клетках. Антитела против PD1 использовались для лечения меланомы, немелкоклеточного рака легкого, рака мочевого пузыря, рака предстательной железы, колоректального рака, рака головы и шеи, трижды негативного рака молочной железы, лейкоза, лимфомы и почечно-клеточного рака. Примеры антител против PD1 включают пембролизумаб (KEYTRUDA®, MERCK), ниволумаб (BMS-936558, BRISTOL-MYERS SQUIBB), цемиплимаб (LIBTAYO®) и пидилизумаб (CT-011, CURETECH LTD).

Лиганд 1 программируемой гибели клеток 1 (PD-L1, также известный как CD274) представляет собой лиганд для PD-1, обнаруживаемый на активированных Т-клетках, В-клетках, миелоидных клетках и макрофагах. Комплекс PD-1 и PD-L1 ингибирует пролиферацию CD8+Т-клеток и снижает иммунный ответ.Антитела против PD-L1 использовались для лечения немелкоклеточного рака легкого, меланомы, колоректального рака, почечно-клеточного рака, рака поджелудочной железы, рака желудка, рака яичников, рака молочной железы и гемобластозов. Примеры антител против PD-L1 включают MDX-1105 (MEDAREX), дурвалумаб (MEDI4736, MEDIMMUNE), авелумаб (BAVENCIO®), атезолизумаб (TECENTRIQ®, MPDL3280A, GENENTECH) и BMS-936559 (BRISTOL-MYERS SQUIBB).

Антиген 4 цитотоксических Т-лимфоцитов (CTLA-4, также известный как CD152) также является членом суперсемейства иммуноглобулинов, который экспрессируется исключительно на Т-клетках. CTLA-4 ингибирует активацию Т-клеток и, как сообщается, ингибирует активность хелперных Т-клеток и усиливает иммуносупрессивную активность регуляторных Т-клеток. Примеры антител против CTLA4 включают ипилимумаб (Bristol-Myers Squibb) и тремелимумаб (PFIZER).

Пембролизумаб (KEYTRUDA®, Merck and Co. Inc.) был недавно одобрен для лечения пациентов с рецидивирующим или метастатическим раком шейки матки с прогрессированием заболевания, во время или после химиотерапии, у которых опухоли экспрессируют PD-L1 (CPS≥1) при определении посредством анализа, одобренного FDA. Основными показателями эффективности были частота объективного ответа (ORR) в соответствии с RECIST 1.1, при независимой централизованной оценке в слепом режиме, и продолжительность ответа. При медиане наблюдения 11,7 месяцев ORR у 77 пациентов составила 14,3% (95% ДИ: 7,4; 24,1), включая 2,6% полного ответа и 11,7% частичного ответа. Предполагаемая средняя продолжительность ответа, основанная на 11 пациентках с ответом при независимой оценке, не была достигнута (диапазон 4,1; 18,6+месяцев); 91% имели продолжительность ответа 6 месяцев или более. Никаких ответов не наблюдалось у пациенток, опухоли которых не экспрессировали PD-L1 (CPS 1). Наиболее частыми нежелательными явлениями по меньшей мере у 10% пациенток с раком шейки матки, включенных в клиническое исследование (KEYNOTE-158), были утомляемость, боль, лихорадка, периферические отеки, мышечно-скелетная боль, диарея/колит, боль в животе, тошнота, рвота, запор, снижение аппетита, кровотечения, инфекции мочевыводящих путей (ИМП), инфекции, сыпь, гипотиреоз, головная боль и одышка. Применение пембролизумаба было прекращено из-за побочных реакций у 8% пациенток. Серьезные нежелательные явления возникали у 39% пациенток. Наиболее частые серьезные нежелательные явления, о которых сообщалось, включали анемию (7%), свищ (4,1%), кровотечение (4,1%) и инфекции (кроме ИМП) (4,1%).

Тем не менее, по-прежнему существует потребность в эффективном лечении и/или улучшении лечения рака шейки матки, из которого примерно 70% вызвано инфекцией ВПЧ 16 и/или 18, и/или рака шейки матки у PD-L1-негативных пациенток.

Подробное описание изобретения

Техническая проблема, решаемая изобретением

Один из аспектов настоящего изобретения включает комбинированное применение вакцины против ВПЧ и терапии ингибирующими антителами против PD1 контрольной точки в течение общего периода времени, которое, как было обнаружено после обширных экспериментов, увеличивает ингибирующий эффект в отношении роста рака шейки матки, в частности, распространенного, метастатического, рецидивирующего рака шейки матки, по сравнению с терапией анти-PD1 антителами, ингибирующими контрольные точки. Настоящее комбинированное лечение демонстрирует повышение эффективности лечения у PD-1-позитивных пациенток, ВПЧ-16-позитивных пациенток и/или ВПЧ-17-позитивных пациенток по сравнению с монотерапией вакциной против ВПЧ или монотерапией анти-PD1 антителом, ингибирующим контрольную точку. Неожиданно настоящая комбинированная терапия дополнительно демонстрирует эффективность лечения у PD-1-негативных пациенток, которые вообще не реагируют на монотерапию анти-PD1 антителом.

Объект настоящего изобретения включает фармацевтическую композицию, содержащую вакцину против вируса папилломы человека (ВПЧ) и агент-ингибитор контрольной точки для профилактики или лечения рака, индуцированного вирусом папилломы человека (ВПЧ).

Другой объект настоящего изобретения включает применение фармацевтической композиции, содержащей вакцину против вируса папилломы человека (ВПЧ) и агент-ингибитор контрольной точки, в производстве лекарственного средства для профилактики или лечения рака, вызванного вирусом папилломы человека (ВПЧ).

Другой объект настоящего изобретения включает способ лечения рака, вызванного вирусом папилломы человека (ВПЧ), у субъекта, нуждающегося в этом, включающий введение субъекту вакцины против ВПЧ и агента-ингибитора контрольной точки в течение обычного периода времени для обеспечения терапевтического эффекта, превышающего эффект вакцины против ВПЧ или ингибитора контрольной точки по отдельности при использовании в качестве монотерапии.

Техническое решение

Настоящее изобретение направлено на комбинированное лечение рака шейки матки, включающее введение субъекту с раком шейки матки гибридного белка или ДНК-вакцины, как описано в настоящей заявке, и соединения-иммуномодулятора одновременно или последовательно. В одном варианте осуществления рак шейки матки вызван инфекцией ВПЧ.

Настоящее изобретение направлено на комбинированное лечение рака, включающее введение эффективного количества вакцины против ВПЧ и агента-ингибитора контрольной точки в комбинации для лечения или улучшения лечения рака шейки матки у субъекта, нуждающегося в этом. В одном варианте осуществления рак шейки матки вызван инфекцией ВПЧ.

Настоящее изобретение направлено на применение вакцины против ВПЧ и агента-ингибитора контрольной точки в комбинации в способе лечения или улучшения лечения рака шейки матки у субъекта, нуждающегося в этом, где способ включает введение эффективного количества вакцины против ВПЧ и эффективного количества агента-ингибитора контрольной точки индивидууму, нуждающемуся в усилении лечения или лечении рака шейки матки. В одном варианте осуществления рак шейки матки вызван инфекцией ВПЧ. В одном варианте осуществления индивидуум является PD-L1-позитивным или негативным. В еще одном варианте осуществления индивидуум является PD-L1-негативным. В другом варианте осуществления индивидуум является PD-L1-позитивным и инфицированным ВПЧ 16. В одном варианте осуществления рак шейки матки является прогрессирующим, рецидивирующим или метастатическим раком шейки матки. В одном варианте осуществления рак шейки матки представляет собой плоскоклеточную карциному или аденокарциному. В одном варианте осуществления индивидуум может быть PL-L1-позитивным и инфицированным ВПЧ 16 и страдать от плоскоклеточной карциномы.

Настоящее изобретение относится к комбинированной терапевтической композиции для лечения или улучшения лечения рака шейки матки, где комбинированная терапевтическая композиция содержит эффективное количество вакцины против ВПЧ и эффективное количество агента-ингибитора контрольной точки, при этом вакцина против ВПЧ и ингибитор контрольной точки вводят одновременно, раздельно или последовательно нуждающемуся в этом индивидууму. В одном варианте осуществления рак шейки матки вызван инфекцией ВПЧ. В одном варианте осуществления индивидуум является PD-L1-позитивным или негативным. В еще одном варианте осуществления индивидуум является PD-L1-негативным. В другом варианте осуществления индивидуум является PD-L1-позитивным и инфицированным ВПЧ 16. В одном варианте осуществления рак шейки матки является прогрессирующим, рецидивирующим или метастатическим раком шейки матки. В одном варианте осуществления рак шейки матки представляет собой плоскоклеточную карциному или аденокарциному. В одном варианте осуществления индивидуум может быть PL-L1-позитивным и инфицированным ВПЧ 16 и страдать от плоскоклеточной карциномы.

Настоящее изобретение относится к комбинированной терапевтической композиции для лечения или улучшения лечения рака шейки матки, где комбинированная терапевтическая композиция состоит по существу из эффективного количества вакцины против ВПЧ и эффективного количества агента-ингибитора контрольной точки, при этом вакцину против ВПЧ и ингибитор контрольной точки вводят одновременно, раздельно или последовательно нуждающемуся в этом индивидууму. В одном варианте осуществления рак шейки матки вызван инфекцией ВПЧ. В одном варианте осуществления индивидуум является PD-L1-позитивным или негативным. В еще одном варианте осуществления индивидуум является PD-L1-негативным. В другом варианте осуществления индивидуум является PD-L1-позитивным и инфицированным ВПЧ 16. В одном варианте осуществления рак шейки матки представляет собой прогрессирующий, рецидивирующий или метастатический рак шейки матки. В одном варианте осуществления рак шейки матки представляет собой плоскоклеточную карциному или аденокарциному. В одном варианте осуществления индивидуум может быть PL-L1-позитивным и инфицированным ВПЧ 16 и страдать от плоскоклеточной карциномы.

Настоящее изобретение относится к фармацевтической композиции, включающей (а) вакцину против вируса папилломы человека (ВПЧ); и (b) ингибитор контрольной точки для профилактики или лечения рака, вызванного вирусом папилломы человека (ВПЧ), где (а) терапевтический компонент вакцины против ВПЧ адаптирован для введения субъекту, включая дополнительные бустерные вакцины против ВПЧ, и (b) терапевтический компонент ингибитор контрольной точки, адаптированный для введения субъекту, включает дополнительные дозы терапии ингибитором контрольной точки, где при терапевтически эффективных количествах каждого из указанных компонентов (а) и (b) комбинированные введения обладают способностью усиливать иммунный ответ субъекта для лечения рака, вызванного ВПЧ, по сравнению с любым усилением иммунного ответа индивидуума при введении одного из компонентов (а) или (b). В одном варианте осуществления субъект является PD-L1-позитивным или негативным. В еще одном варианте осуществления индивидуум является PD-L1-негативным. В другом варианте осуществления индивидуум является PD-L1-позитивным и инфицированным ВПЧ 16. В одном варианте осуществления рак шейки матки является прогрессирующим, рецидивирующим или метастатическим раком шейки матки. В одном варианте осуществления рак шейки матки представляет собой плоскоклеточную карциному или аденокарциному. В одном варианте осуществления индивидуум может быть PL-L1-позитивным и инфицированным ВПЧ 16, и страдать от плоскоклеточной карциномы.

Настоящее изобретение относится к фармацевтической композиции для лечения рака, вызванного вирусом папилломы человека (ВПЧ), у субъекта, нуждающегося в этом, состоящей по существу из (а) терапевтического компонента вакцины против ВПЧ, адаптированного для введения субъекту, включая дополнительные бустерные вакцины против ВПЧ, и (b) терапевтического компонента ингибитора контрольной точки, адаптированного для введения субъекту, включая дополнительные бустеры терапии ингибитором контрольной точки, где при терапевтически эффективных количествах каждого из указанных компонентов (a) и (b) комбинированные введения имеют способность повышать иммунный ответ субъекта для лечения рака, индуцированного ВПЧ, по сравнению с любым усилением иммунного ответа субъекта при введении любого из компонентов (а) или (b) по отдельности. В одном варианте осуществления субъект является PD-L1-позитивным или негативным. В еще одном варианте осуществления индивидуум является PD-L1-негативным. В другом варианте осуществления индивидуум является PD-L1-позитивным и инфицированным ВПЧ 16. В одном варианте осуществления рак шейки матки является прогрессирующим, рецидивирующим или метастатическим раком шейки матки. В одном варианте осуществления рак шейки матки представляет собой плоскоклеточную карциному или аденокарциному. В одном варианте осуществления индивидуум может быть PL-L1-позитивным и инфицированным ВПЧ 16 и страдать от плоскоклеточной карциномы.

Настоящее изобретение также относится к фармацевтической композиции для лечения пациента с раком, вызванным вирусом папилломы человека (ВПЧ), включающей два отдельных терапевтических компонента, в том числе (а) несколько терапевтических компонентов вакцины против ВПЧ, содержащих полинуклеотид SEQ ID NO: 9, которые можно вводить на втором уровне дозы, и (b) несколько терапевтических компонентов ингибитора контрольной точки, которые следует вводить на одном уровне дозы, при этом терапевтический компонент вакцины против ВПЧ (а) следует вводить в комбинации с терапевтическим компонентом ингибитора контрольной точки (b), при этом каждый из компонентов (a) и (b), соответственно, подобран в эффективном количестве при первом и втором уровнях дозы для усиления иммунного ответа пациента за счет повышения активности терапевтического компонента ингибитора контрольной точки (b), чтобы обеспечить преимущество усиленного иммунного ответа по сравнению с каждым из компонентов (а) и (b), вводимых отдельно в качестве монотерапии.

Настоящее изобретение направлено на применение фармацевтической композиции, содержащей (а) вакцину против вируса папилломы человека (ВПЧ); и (b) агент-ингибитор контрольной точки при производстве лекарственного средства для профилактики или лечения рака, вызванного вирусом папилломы человека (ВПЧ).

Настоящее изобретение направлено на применение фармацевтической комбинации в способе лечения рака, вызванного вирусом папилломы человека (ВПЧ), причем указанный способ включает введение вакцины против ВПЧ и агента-ингибитора контрольной точки субъекту, нуждающемуся в этом, в течение общего периода времени, для получения терапевтического эффекта, превышающего эффект вакцины против ВПЧ или ингибитора контрольной точки по отдельности при использовании в качестве монотерапии.

В одном аспекте вышеописанных способов, комбинированного лечения, применений, композиций и фармацевтических композиций вакцина против ВПЧ может представлять собой ДНК-вакцину. В одном варианте осуществления ингибитор контрольной точки может представлять собой моноклональное антитело. Типичные варианты осуществления моноклонального антитела могут представлять собой антитело к PD1, антитело к PD-L1 или антитело к PD1/PD-L1 или их комбинацию. В одном варианте осуществления ингибитором контрольной точки может быть пембролизумаб. В одном варианте осуществления вакцина против ВПЧ представляет собой ДНК-вакцину, содержащую полинуклеотид SEQ ID NO: 15 или его вариант, имеющий идентичность последовательности примерно 85% или более, примерно 86% или более, примерно 87% или более, примерно 88% или более, примерно 89% или более, примерно 90% или более, примерно 91% или более, примерно 92% или более, примерно 93% или более, примерно 94% или более, примерно 95% или более, примерно 96% или более, примерно 97% или более, примерно 98% или более, примерно 99% или более, или примерно 100% с SEQ ID NO: 15.

В одном аспекте вышеописанных способов, комбинированного лечения, применений, композиций и фармацевтических композиций у субъекта, индивидуума или пациентки может быть прогрессирующий, неоперабельный или метастатический рак шейки матки. Рак может быть рецидивирующим. В одном варианте осуществления рак представляет собой плоскоклеточную карциному или аденокарциному. В одном варианте осуществления рак представляет собой плоскоклеточную карциному.

В одном аспекте вышеописанных способов, комбинированного лечения, применений, композиций и фармацевтических композиций субъект, индивидуум или пациентка являются ВПЧ 16 и/или ВПЧ 18 позитивными. В другом варианте осуществления индивидуум является PD-L1-позитивным и инфицированным ВПЧ 16. В одном варианте осуществления индивидуум может быть PL-L1-позитивным и инфицированным ВПЧ 16 и страдать от плоскоклеточной карциномы.

В одном аспекте вышеописанных способов, комбинированного лечения, применений, композиций и фармацевтических композиций субъект, индивидуум или пациентка подвергались или подвергаются противораковому лечению. Противораковое лечение может быть одним из известных методов лечения. В одном варианте осуществления субъект, индивидуум или пациентка могли получать или получают по меньшей мере одну химиотерапию.

В одном аспекте вышеописанных способов, комбинированного лечения, применений, композиций и фармацевтических композиций субъект, индивидуум или пациентка могут быть PD-L1-позитивными или PD-L1-негативными. В другом варианте осуществления субъект, индивидуум или пациентка могут быть позитивными по ВПЧ 16. В еще одном варианте осуществления субъект может быть PD-L1-позитивным и ВПЧ 16-позитивным, а рак шейки матки представляет собой плоскоклеточную карциному.

В одном аспекте вышеописанных способов, комбинированного лечения, применений, композиций и фармацевтических композиций вакцина против ВПЧ может представлять собой GX-188 или вариант GX-188. GX-188E представляет собой конструкцию дезоксирибонуклеиновой кислоты, содержащую последовательность SEQ ID NO: 15, которая содержит последовательность, кодирующую гибридный белок E6/E7 ВПЧ 16 и 18 (SEQ ID NO: 9), связанный с tPA и Flt3L (см. фиг. 1). В одном варианте осуществления примерно 2 мг GX-188E можно вводить внутримышечно на 1, 2, 4, 7, 13, 19 неделе и необязательную дозу на 46 неделе.

В одном аспекте описанных выше способов, комбинированного лечения, применений, композиций и фармацевтических композиций агент-ингибитор контрольной точки может представлять собой пембролизумаб, и доза агента-ингибитора контрольной точки может составлять примерно 200 мг каждые три недели. В одном варианте осуществления пембролизумаб можно вводить внутривенно.

В соответствии с одним вариантом осуществления раскрыт способ лечения рака, вызванного ВПЧ, у субъекта путем объединения двух различных видов лечения для введения субъекту в течение общего периода времени, составляющего по меньшей мере 13 недель, причем способ включает терапию вакциной против ВПЧ и терапию антителами-ингибиторами контрольных точек, при которой антитело-ингибитор контрольных точек вводят многократно в первой фиксированной дозе, а вакцину вводят многократно во второй фиксированной дозе; и при этом первое введение вакцины против ВПЧ и первое введение ингибитора контрольной точки осуществляют в день по меньшей мере 13-недельного периода, а последующие введения вакцины против ВПЧ и последующее введение ингибитора контрольной точки осуществляют в течение общего периода времени.

В одном аспекте комбинированного лечения первая фиксированная доза агента-ингибитора контрольной точки составляет от 50 до 500 мг, а вторая фиксированная доза вакцины против ВПЧ составляет от 0,5 до 5 мг. Согласно настоящему способу, вакцину против ВПЧ вводят внутримышечно, а ингибитор контрольной точки вводят внутривенно. В одном варианте осуществления ингибитор контрольной точки представляет собой антитело к PD1 или антитело к PD-L1, и при этом вакцина против ВПЧ содержит конструкцию нуклеиновой кислоты SEQ ID NO: 15 или функциональный вариант с идентичностью последовательности 85% или более с SEQ ID NO: 15. В еще одном варианте осуществления рак, индуцированный ВПЧ, представляет собой метастатический, рецидивирующий или распространенный рак шейки матки, и субъект подвергался или подвергается противораковому лечению; ВПЧ представляет собой ВПЧ 16, ВПЧ 18 или их комбинацию; и субъект является PD-L1-позитивным или PD-L1-негативным. В другом варианте осуществления индивидуум является PD-L1-позитивным и инфицированным ВПЧ 16. В еще одном варианте осуществления индивидуум может быть PL-L1-позитивным и инфицированным ВПЧ 16 и страдать от плоскоклеточной карциномы.

Краткое описание чертежей

Фиг. 1 представляет собой схематическую иллюстрацию структуры вектора, несущего GX-188.

Фиг. 2А иллюстрирует график применения тестируемых препаратов и оценку противоопухолевых эффектов на животных моделях рака шейки матки с использованием мышей C57BL/6. D0, D7, D14, D21, D28, D35, D42 и D49 указывают количество дней от начала (D0). Тестируемые препараты включают анти-mPD1 моноклональные антитела (mAb), GX-188E и GX-188E+анти-mPD1 антитело. TC-1/Luc, представляющий собой линию эпителиальных клеток легких мышей C57BL/6, трансформированных для экспрессии Е7 ВПЧ типа 16, используют для индукции опухоли у мышей C57BL/6, как описано в Эксперименте 1.

Фиг. 2B-2E демонстрируют противоопухолевую эффективность контроля (фиг. 2B), моноклонального анти-mPD1 антитела по отдельности (фиг. 2C), GX-188E по отдельности (фиг. 2D), и комбинации анти-mPD1 моноклонального антитела+GX-188E (фиг. 2Е). Группа с применением только GX-188E показала отчетливое увеличение среднего периода выживания из-за замедления роста опухолевых клеток, в то время как окончательная выживаемость составила 17% (1/6). Группа комбинации GX-188E+анти-mPD-1 mAb показала отчетливое усиление замедления роста опухолевых клеток и периода выживания, при этом показатель выживаемости также увеличился до 50% (3/6).

Фиг. 3 показывает критерии включения пациенток в исследование, а также основные и второстепенные цели. В исследование было включено 54 пациентки, 15 пациенток продолжают лечение. Для анализа безопасности были включены 54 пациентки, получивших хотя бы одну дозу либо GX-188E, либо анти-mPD1 антитела (пембролизумаб). Для анализа эффективности 48 пациенток, получавших по меньшей мере 45 дней лечения, считались подходящими для оценки ответа на GX-188E по протоколу. Этот промежуточный анализ был выполнен после получения по меньшей мере одних данных оценки опухоли после исходного уровня.

Фиг. 4 показывает исходные характеристики комбинированной терапии GX-188E плюс mAb против PD1 (пембролизумаб) по сравнению с монотерапией mAb против PD1 (пембролизумаб).

Фиг. 5 показывает профиль безопасности комбинированного лечения GX-188E+mAb против PD1 (пембролизумаб), любой степени (31,5) и степени 3-4 (5,6%), сопоставимый с монотерапией mAb против PD1 (пембролизумаб) с использованием Keynote-158 монотерапии с любой степенью (65,3%) и степенью 3-4 (12,2%). У одной из 3 пациенток с нежелательными явлениями, связанными с лечением (TRAE) 3-й степени, также была 4-я степень. Смертельных исходов, связанных с приемом лекарств, не было. В целом лечение GX-188E в сочетании с mAb против PD1 (пембролизумаб) было безопасным и переносимым.

Фиг. 6A и 6B показывают наилучшую общую частоту ответов (BOR), оцененную с помощью RECIST. Подтверждено шесть полных ответов (CR), и все случаи CR наблюдаются у PD-L1-позитивных, ВПЧ 16+пациенток с плоскоклеточным раком. Клинический ответ наблюдается у PD-L1-негативных, ВПЧ 18+или страдающих аденокарциномой пациенток.

Фиг. 7 показывает продольное изменение целевого поражения по сравнению с исходным уровнем опухолевой массы. В настоящее время медиана наблюдения составила 6,1 месяца (диапазон: 1,7-24,2 месяца). CR: полный ответ; PR: Частичный ответ; SD: стабильное заболевание; PD: прогрессирующее заболевание.

Фиг. 8 показывает продолжительность ответа у пациенток, у которых лучшим общим ответом был CR и PR (N=16), и восемь из 16 ответов сохранялись. Медиана PFS составила 2,7 месяца (диапазон 1,3-24,2), а медиана OS не была достигнута.

Фиг. 9A-9D показывают Т-сканирование целевого поражения в исходном состоянии и после лечения GX-188E с пембролизумабом на 10-й и 19-й неделе у пациентки с CR (фиг. 9A и 9B) и у пациентки с PR (фиг. 9C и 9D). На фиг. 9A, 63-летняя пациентка с раком шейки матки с ВПЧ 16, PD-L1-позитивной плоскоклеточной карциномой, которая ранее получила две линии химиотерапии и имела метастазы в правый внутригрудной лимфатический узел. Осевая КТ легких показала метастатическую лимфаденопатию (стрелка). Фиг. 9 В показывает уровень двух онкомаркеров (СЕА и ТА4) после комбинированного лечения; пунктирные линии указывают критерии отсечки для нормального уровня онкомаркеров. На фиг. 9C, 41-летняя больная раком шейки матки с ВПЧ 18, PD-L1-позитивной аденокарциномой, получившая две линии химиотерапии. КТ малого таза выявила яйцеклетки, метастатическое образование низкой плотности (стрелка) в полости малого таза. Фиг. 9D показывает уровень двух онкомаркеров (СЕА и ТА4) после комбинированного лечения; пунктирные линии указывают критерии отсечки для нормального уровня онкомаркеров.

Фиг. 10 представляет собой график, показывающий максимальные изменения по сравнению с исходным уровнем в сумме размеров целевого поражения. Максимальные изменения целевого поражения по сравнению с исходным уровнем оценивали с помощью RECIST v1.1 у пациенток с одним или несколькими оцениваемыми изображениями после исходного уровня (n=45). Каждая полоса представляет одну пациентку, а пунктирные линии обозначают критерии RECIST v1.1 для PD (+20%) или PR (-30%). Среди 48 пациенток 3 пациентки (ID пациентки 1607, 1608, 1802) не были включены в этот график, поскольку целевое поражение было оценено как не поддающееся независимой централизованной оценке в слепом режиме (BICR).

Наилучший способ осуществления изобретения

Значение терминов

Если не указано иное или не подразумевается из контекста, следующие термины и фразы включают значения, указанные ниже. Если прямо не указано иное или не следует из контекста, приведенные ниже термины и фразы не исключают того значения, которое термин или фраза приобрели в области техники, к которой они относятся. Определения приведены для помощи в описании конкретных вариантов осуществления и не предназначены для ограничения аспектов, обеспеченных в настоящей заявке, потому что объем аспектов, представленных здесь, ограничен только формулой изобретения. Если не указано иное, все технические и научные термины, используемые в настоящей заявке, имеют то же значение, которое обычно понимается специалистом в области техники, к которой относятся представленные здесь аспекты.

Термин «вариант GX-188», «аналог GX-188», «конструкция варианта GX-188», «конструкция аналога GX-188» или любые аналогичные термины, используемые в настоящей заявке, указывают на то, что конструкция после введения по меньшей мере одной дозы конструкции индуцирует клеточный иммунный ответ in vivo, аналогичный клеточному иммунному ответу, индуцированному после введения GX-188 (фиг.1 или SEQ ID NO: 9). Клеточный иммунный ответ может быть сходным, если вариантная конструкция может индуцировать клеточный иммунный ответ, такой же или более сильный, чем клеточный иммунный ответ, индуцированный GX-188. В других вариантах осуществления клеточный иммунный ответ может быть сходным, если вариант конструкции индуцирует клеточный иммунный ответ по меньшей мере примерно в 0,9 раза (например, 90%), примерно в 0,8 раза, примерно в 0,7 раза, примерно в 0,6 раза, примерно в 0,5 раза или примерно в 0,4 раза выше, чем иммунный ответ, индуцированный GX-188. В одном варианте осуществления клеточный иммунный ответ представляет собой CD8 Т-клеточный ответ, CD4 Т-клеточный ответ, секрецию цитокинов или любую их комбинацию. В другом варианте осуществления клеточный иммунный ответ включает повышенное количество полифункциональных Т-клеток. В некоторых вариантах осуществления полифункциональные Т-клетки имеют по меньшей мере три, по меньшей мере четыре или по меньшей мере пять маркеров, выбранных из группы, состоящей из IFN-γ, IL-2, TNF-α, MIP-α, CD107a/b и любой их комбинации при измерении с помощью проточной цитометрии. Примером варианта GX-188 может быть GX-188E (SEQ ID NO: 15).

Используемый в настоящей заявке термин «GX-188E» представляет собой конструкцию нуклеиновой кислоты, имеющую нуклеотидную последовательность SEQ ID NO: 15 или ее вариант, имеющий идентичность последовательности по меньшей мере примерно 80% или более, примерно 81% или более, примерно 82% или более, примерно 84% или более, примерно 85% или более, примерно 86% или более, примерно 87% или более, примерно 88% или более, примерно 89% или более, примерно 90% или более, примерно 91% или более, примерно 92% или более, примерно 93% или более, примерно 94% или более, примерно 95% или более, примерно 96% или более, примерно 97% или более, примерно 98% или более, примерно 99% или более, или примерно 100% с SEQ ID NO: 15.

Термин «идентичность последовательностей» между двумя полипептидами определяется путем сравнения аминокислотной последовательности одного полипептида с последовательностью второго полипептида. При обсуждении в настоящей заявке, имеет ли какой-либо конкретный полипептид по меньшей мере примерно 50%, примерно 60%, примерно 70%, примерно 75%, примерно 80%, примерно 85%, примерно 86%, примерно 87%, примерно 88%, примерно 89%, примерно на 90%, примерно 91%, примерно 92%, примерно 93%, примерно 94%, примерно 95%, примерно 96%, примерно 97%, примерно 98%, примерно 99% или 100% идентичности другому полипептиду. определяют с использованием способов и компьютерных программ/программного обеспечения, известных в данной области техники, таких как, без ограничения указанными, программа BESTFIT (пакет анализа последовательности штата Висконсин, версия 8 для Unix, Genetics Computer Group, University Research Park, 575 Science Drive, Madison, Wis. 53711). BESTFIT использует алгоритм локальной гомологии Смита и Уотермана, Advances in Applied Mathematics 2:482-489 (1981), чтобы найти наилучший сегмент гомологии между двумя последовательностями. При использовании BESTFIT или любой другой программы выравнивания последовательностей для определения того, является ли конкретная последовательность, например, на 95% идентичной эталонной последовательности в соответствии с настоящим изобретением, параметры устанавливаются, конечно, так, что процент идентичности рассчитывается по полноразмерной последовательности эталонного полипептида, и допускаются пробелы в гомологии до 5% от общего числа аминокислот в эталонной последовательности.

Термин «примерно» используется в настоящей заявке как означающий «около» «приблизительно» или «в области». Когда термин «примерно» используется в сочетании с числовым диапазоном, он модифицирует этот диапазон, расширяя границы выше и ниже установленных числовых значений. Как правило, термин «примерно» используется здесь для изменения числового значения выше и ниже указанного значения с отклонением в 10 процентов вверх или вниз (более или менее).

Термин «значимый» или «значительно» относится к статистической значимости и обычно означает разницу в два стандартных отклонения (2SD) или более.

Используемый в настоящей заявке термин «содержащий» или «содержит» используется в отношении композиций, способов и их соответствующего компонента (компонентов), которые являются существенными для способа или композиции, но допускают включение не указанных элементов, существенных или нет.

Термин «состоящий из» относится к композициям, способам и их соответствующим компонентам, как описано в настоящей заявке, которые исключают любой элемент, не упомянутый в этом описании варианта осуществления.

Используемый в настоящей заявке термин «состоящий по существу из» относится к тем элементам, которые необходимы для данного варианта осуществления. Термин допускает наличие элементов, которые существенно не влияют на основную и новую или функциональную характеристику (характеристики) этого варианта осуществления.

Термины в единственном числе включают ссылки во множественном числе, если контекст явно не указывает на иное. Точно так же термин «или» включает «и», если в контексте явно не указано иное. Хотя способы и материалы, аналогичные или эквивалентные тем, что описаны в настоящей заявке, могут быть использованы при практическом применении или тестировании настоящего изобретения, подходящие способы и материалы описаны ниже. Аббревиатура «e.g.» происходит от латинского слова «exempli gratia» и используется здесь для обозначения неограничивающего примера. Таким образом, аббревиатура «e.g.» является синонимом термина «например».

В одном варианте осуществления «иммуномодулирующее соединение» включает, без ограничения указанными, цитокины, такие как интерфероны, моноклональные антитела, такие как ингибитор пути PD-1/PD-L1 (ингибитор PD-1/PD-L1), анти-CTLA4 антитела, циклофосфамид, талидомид, левамизол, леналидомид или их комбинацию. В одном варианте осуществления иммуномодулирующее соединение представляет собой антитело к PD1, антитело к PD-L1, антитело к CTLA4, комбинацию антител к PD1 и антитела к CTLA4, комбинацию антител к PD-L1 и антитела к CTLA. Термин «ингибитор пути PD-1/PD-L1» представляет собой соединение, которое ингибирует или блокирует связывание PD-L1 с PD-1 и может включать антитело к PD-1, антитело к PD-L1 и антитело к PD-1/PD-L1.

Иммуномодулирующие соединения могут быть выбраны из антитела к PD1 или антитела к PD-L1, таких как пембролизумаб или MDX-1106 (Merck), ниволумаб, цемиплимаб, атезолизумаб, авелумаб, дурвалумаб; THALOMID((талидомида), циклофосфамида, левамизола, леналидомида, CC-4047 (помалидомида), CC-11006 (Celgene) и CC-10015 (Celgene) и иммуномодулирующего соединения, описанного в любой из WO 2007028047, WO 2002059106 и WO 2002094180. Иммуномодулирующее соединение может представлять собой антитело против PD1. В одном варианте осуществления антитело к PD1 представляет собой пембролизумаб.

Термины «рак» и «раковый» относятся или описывают физиологическое состояние у млекопитающих, при котором популяция клеток характеризуется нерегулируемым ростом клеток. Примеры рака включают, без ограничения указанными, карциному, лимфому, бластому, саркому и лейкоз. Более конкретные примеры таких видов рака включают плоскоклеточный рак, мелкоклеточный рак легкого, немелкоклеточный рак легкого, аденокарциному легкого, плоскоклеточный рак легкого, рак брюшины, гепатоцеллюлярный рак, рак желудочно-кишечного тракта, рак поджелудочной железы, глиобластому, рак шейки матки, рак яичников, рак печени, рак мочевого пузыря, гепатому, рак молочной железы, рак толстой кишки, колоректальный рак, рак эндометрия или матки, рак слюнных желез, рак почки, рак печени, рак предстательной железы, рак вульвы, рак щитовидной железы, рак печени и различные виды рака головы и шеи.

Термины «опухоль» и «новообразование» относятся к любой массе ткани, которая возникает в результате избыточного роста или пролиферации клеток, доброкачественной (нераковой) или злокачественной (раковой), включая предраковые поражения. Опухоль может быть опухолью шейки матки. В конкретных вариантах осуществления опухоль шейки матки представляет собой доброкачественную опухоль или злокачественную опухоль. В некоторых вариантах осуществления опухоль шейки матки представляет собой плоскоклеточную карциному (SCC), аденокарциному, аденоплоскоклеточную карциному, мелкоклеточную карциному, нейроэндокринную опухоль (NET), стекловидноклеточную карциному, виллогландулярную аденокарциному (VGA), некарциномные злокачественные новообразования, меланому, лимфому или цервикальную интраэпителиальную неоплазию (CIN). В некоторых вариантах осуществления опухоль шейки матки представляет собой CIN1, CIN2, CIN3 или рак шейки матки.

Термины «раковая клетка», «опухолевая клетка» и грамматические эквиваленты относятся к общей популяции клеток, происходящих из опухоли или предракового поражения, включая как неканцерогенные клетки, которые составляют основную часть популяции опухолевых клеток, так и онкогенные стволовые клетки (раковые стволовые клетки).

«Эффективное количество» полинуклеотида, кодирующего гибридный белок, как раскрыто в настоящей заявке, представляет собой количество, достаточное для достижения конкретно заявленной цели. «Эффективное количество» может быть определено эмпирически и обычным образом в зависимости от заявленной цели.

Используемый в настоящей заявке термин «терапевтически эффективное количество» относится к количеству, эффективному в дозах и в течение периодов времени, необходимых для достижения необходимого терапевтического результата. Терапевтический результат может представлять собой, например, уменьшение симптомов, увеличение продолжительности жизни, уменьшение размера и/или объема опухоли, ингибирование роста опухоли и т.п.Терапевтический результат не обязательно должен быть «излечением».

Такие термины, как «лечение» или «лечить», или «облегчать», или «улучшать» относятся к терапевтическим мерам, которые излечивают, замедляют, уменьшают симптомы, останавливают прогрессирование диагностированного патологического состояния или расстройства, уменьшают размер или объем опухолевой ткани и/или останавливают рост опухоли. Таким образом, субъекты, нуждающиеся в лечении, включают тех, у кого уже диагностировано или подозревается наличие расстройства.

Под «субъектом», или «индивидуумом», или «животным», или «пациентом», или «млекопитающим» подразумевается любой субъект, в частности субъект-млекопитающее, для которого необходим диагноз, прогноз или терапия. Субъекты-млекопитающие включают, без ограничения указанными, людей, домашних животных, сельскохозяйственных животных, животных зоопарка, спортивных животных, домашних животных, таких как собаки, кошки, морские свинки, кролики, крысы, мыши, лошади, крупный рогатый скот, коровы; приматов, таких как человекообразные обезьяны, мартышки, орангутанги и шимпанзе; псовых, таких как собаки и волки; кошачьих, таких как кошки, львы и тигры; непарнокопытных, таких как лошади, ослы и зебры; медведей, пищевых животных, таких как коровы, свиньи и овцы; копытных, такие как олени и жирафы; грызунов, таких как мыши, крысы, хомяки и морские свинки; и так далее. В некоторых вариантах осуществления млекопитающим является человек.

Термин «комбинированное лечение/терапия», «комбинированное лечение», «комбинаторный» или «в комбинации» означает по меньшей мере лечение вакциной и ингибитором контрольной точки в одно и то же время и/или в разное время в течение установленного периода времени по меньшей мере с двумя упомянутыми различными терапевтическими агентами.

Термин «ингибитор контрольной точки» и/или «антитело» означает любое одно или несколько коммерческих лекарственных средств и/или некоммерческих лекарственных средств, разработанных, независимо от того, коммерциализированы они или нет, и/или проданы для введения человеку (или животному) для разблокирования контрольных точек в организме, которые могут частично или полностью предотвратить атаку иммунной системы на рак с использованием Т-клеток организма и независимо от того, как их вводят.

Термин «PD-1» означает один пример антитела-ингибитора контрольной точки.

Термин «исходный уровень» означает объем опухоли (TV) в День 1 экспериментов.

Термин «вектор» представляет собой структуру, которая содержит единицу транскрипции (также известную как «вектор экспрессии»), и в данном контексте относится к вирусному и/или невирусному вектору экспрессии, который при введении in vivo может проникать в клетки-мишени и экспрессировать кодируемый белок. Вирусные векторы, подходящие для доставки in vivo и экспрессии экзогенного белка, хорошо известны и включают аденовирусные векторы, аденоассоциированные вирусные векторы, ретровирусные векторы, векторы коровьей оспы, векторы оспы, векторы вируса простого герпеса и т.п.Вирусные векторы предпочтительно готовят дефектными по репликации в нормальных клетках. Например, см. патенты США №№6,669,942; 6,566,128; 6,794,188; 6,110,744 и 5,133,029. Вектор можно вводить парентерально, например, внутривенно, внутриартериально, внутримышечно, подкожно и т.п. Введение также может быть пероральным, назальным, ректальным, трансдермальным введением или аэрозольной ингаляцией. Векторы можно вводить в виде болюса или медленной инфузии. Вектор в настоящей заявке предпочтительно вводят подкожно.

Композиция и лечение

Композицию GX-188 можно вводить парентерально, путем инъекции, например, подкожно, внутрикожно, интрадермально, подкожно или внутримышечно. Термины «композиция GX-188», «состав GX-188», «препарат GX-188» и «препарат, содержащий GX-188», используемые в настоящей заявке, относятся к композиции или препарату, включающему полинуклеотидную конструкцию, содержащую последовательность SEQ ID NO: 9 или 15 или ее вариант с идентичностью последовательности примерно 85% или более, примерно 86% или более, примерно 87% или более, примерно 88% или более, примерно 89% или более, примерно 89% или более, примерно 90% или более, примерно 91% или более, примерно 92% или более, примерно 93% или более, примерно 94% или более, примерно 95% или более, примерно 96% или более, примерно 97% или более, примерно 98% или более, или примерно 99% или более с SEQ ID NO: 9 или SEQ ID NO: 15.

Дополнительные препараты, подходящие для других способов введения, включают суппозитории и, в некоторых случаях, препараты для перорального, назального, трансбуккального, сублингвального, интраперитонеального, интравагинального, анального, эпидурального, спинального и интракраниального введения. Для суппозиториев традиционные связующие вещества и носители могут включать, например, полиалкаленгликоли или триглицериды; такие суппозитории могут быть изготовлены из смесей, содержащих активный ингредиент в диапазоне от 0,5% до 10% (масс./масс.), предпочтительно от 1% до 2% (масс./масс.). Пероральные составы включают такие обычно используемые вспомогательные вещества, как, например, фармацевтические сорта маннитола, лактозы, крахмала, стеарата магния, сахарина натрия, целлюлозы, карбоната магния и т.п.Эти композиции имеют форму растворов, суспензий, таблеток, пилюль, капсул, составов с замедленным высвобождением или порошков, и могут содержать от 10% до 95% (масс./масс.) активного ингредиента, предпочтительно от 25% до 70% (масс./масс.).

Композицию, содержащую GX-188, можно вводить способом, совместимым с дозированным составом, и в таком количестве, которое будет терапевтически эффективным и иммуногенным. Вводимое количество зависит от субъекта, которого лечат, включая, например, способность иммунной системы индивидуума вызывать иммунный ответ и необходимую степень иммунитета. Подходящие диапазоны доз составляют порядка нескольких сотен микрограммов активного ингредиента на вакцинацию с предпочтительным диапазоном примерно от 1 мкг до 20 мг, например, в диапазоне примерно от 5 мкг до 10 мг. В одном варианте осуществления доза может находиться в диапазоне примерно от 0,5 мкг до 1000 мкг, от 1 мкг до 1000 мкг или в диапазоне от 1 мкг до 500 мкг, и особенно в диапазоне примерно от 10 мкг до 100 мкг. В другом аспекте доза может находиться в диапазоне от 0,1 мг до 20 мг.В другом аспекте доза может находиться в диапазоне от 0,5 мг до 10 мг. В еще одном аспекте доза может находиться в диапазоне от 1 мг до 5 мг.В еще одном аспекте доза может находиться в диапазоне от 0,5 мг до 20 мг, от 1 мг до 20 мг, от 0,5 мг до 5 мг, от 1,5 мг до 10 мг, от 2 мг до 5 мг, от 2,5 мг до 5 мг, от 3 мг до 5 мг или от 2 до 10 мг.В других вариантах осуществления доза GX-188 может составлять примерно 0,5 мг, примерно 0,6 мг, примерно 0,7 мг, примерно 0,8 мг, примерно 0,9 мг, примерно 1 мг, примерно 1,1 мг, примерно 1,2 мг, примерно 1,3 мг, примерно 1,3 мг, примерно 1,4 мг, примерно 1,5 мг, примерно 1,6 мг, примерно 1,7 мг, примерно 1,8 мг, примерно 1,9 мг, примерно 2 мг, примерно 2,1 мг, примерно 1,2 мг, примерно 1,3 мг, примерно 1,4 мг, примерно 1,5 мг, примерно 1,6 мг, примерно 1,7 мг, примерно 1,8 мг, примерно 1,9 мг, примерно 2 мг, примерно 2,1 мг, примерно 2,2 мг, примерно 2,3 мг, примерно 2,4 мг, примерно 2,5 мг, примерно 2,6 мг, примерно 2,7 мг, примерно 2,8 мг, примерно 2,9 мг, примерно 3 мг, примерно 3,1 мг, примерно 3,2 мг, примерно 3,3 мг, примерно 3,4 мг, примерно 3,5 мг, примерно 3,6 мг, примерно 3,7 мг, примерно 3,8 мг, примерно 3,9 мг, примерно 4 мг, примерно 4,1 мг, примерно 4,2 мг, примерно 4,3 мг, примерно 4,4 мг, примерно 4,5 мг, примерно 4,6 мг, примерно 4,7 мг, примерно 4,8 мг, примерно 4,9 мг или примерно 5 мг, вводимых с интервалами примерно каждую неделю, раз в две недели, раз в три недели, раз в четыре недели. Композицию GX-188 можно вводить с интервалом в 5 дней, 10 дней, 15 дней, 20 дней, или 30 дней, или 40 дней.

В соответствии с одним аспектом подходящие схемы для начального введения и повторных инъекций также варьируют, но типичными являются начальное введение, за которым следуют последующие инокуляции или другие введения. Например, в одном варианте осуществления GX-188 можно вводить в фиксированной дозе примерно 2 мг на 1-й, 2-й, 4-й, 7-й, 13-й и 19-й неделе и, при необходимости, далее на 46-й неделе. введение можно осуществлять внутримышечным путем. В другом варианте осуществления GX-188 можно вводить в фиксированной дозе примерно 2 мг на 1-й, 2-й, 4-й, 8-й, 14-й и 20-й неделе и, при необходимости, далее на 46-й неделе. В других вариантах осуществления дозировка может варьировать при каждом применении.

Иммуномодулирующий агент можно вводить в виде отдельной лекарственной формы. В одном варианте осуществления антитело к PD1 можно вводить внутривенно одновременно с введением GX-188 или в другое время. Антитело против PD1 можно вводить в дозе примерно от 1 до 1000 мг. В одном варианте осуществления доза антитела против PD1 может находиться в диапазоне примерно от 10 мг до 500 мг, примерно от 50 мг до 500 мг, примерно от 100 мг до 500 мг, примерно от 100 мг до 300 мг, примерно от 150 мг до 300 мг, примерно от 180 мг до 250 мг, примерно от 190 мг до 250 мг, примерно от 185 мг до 225 мг, примерно от 185 мг до 220 мг, примерно от 195 мг до 250 мг, примерно от 195 мг до 225 мг, примерно от 190 мг до 230 мг, примерно от 200 мг до 400 мг, примерно от 200 мг до 300 мг, примерно от 250 мг до 300 мг, примерно от 280 мг до 350 мг, примерно от 300 мг до 500 мг, примерно от 300 мг до 400 мг, примерно от 300 мг до 1000 мг, примерно от 300 до 900 мг, примерно от 300 до 800 мг, примерно от 300 до 700 мг или примерно от 300 до 600 мг. Антитело против PD1 можно вводить с интервалами один раз в неделю, два раза в неделю, три раза в неделю, четыре раза в неделю, каждую неделю, каждые 10 дней, один раз в две недели, каждые 20 дней, каждые три недели, каждые четыре недели, один раз в месяц, один раз в два месяца или один раз в три месяца и т.д. В одном варианте осуществления антитело против PD1 представляет собой пембролизумаб, и его можно вводить в дозе 200 мг внутривенно три раза в неделю, начиная до, одновременно или после первого введения GX-188 в течение 5 недель, 6 недель, 7 недель, 8 недель, 9 недель, 10 недель, 11 недель, 12 недель, 13 недель, 14 недель, 15 недель, 16 недель, 17 недель, 18 недель, 19 недель, 20 недель, 21 недель, 22 недель, 23 недель, 24 недель, 25 недель и более. Продолжительность можно измерять календарными месяцами, например, 1 месяц, 2 месяца, 3 месяца, 4 месяца, 5 месяцев, 6 месяцев, 7 месяцев или дольше. Или схема лечения может включать количество введений, такое как 10 доз, 11 доз, 12 доз, 13 доз, 14 доз, 15 доз, 16 доз, 17 доз, 18 доз, 19 доз, 20 доз, 21 доза, 22 дозы, 23 дозы, 24 дозы, 25 доз, 26 доз, 27 доз, 28 доз, 29 доз, 30 доз, 31 доза, 32 дозы, 33 дозы, 34 дозы, 35 доз или более в фиксированной дозе, например, примерно 200 мг.

Гибридный белок, содержащий последовательность SEQ ID NO: 10 или ее функциональный вариант, может быть включен в состав вакцины в виде нейтральной или солевой формы. Фармацевтически приемлемые соли включают кислотно-аддитивные соли (образованные со свободными аминогруппами пептида) и которые образуются с неорганическими кислотами, такими как, например, соляная или фосфорная кислоты, или такими органическими кислотами, как уксусная, щавелевая, винная, миндальная и т.п. Соли, образованные со свободными карбоксильными группами, также могут быть получены из неорганических оснований, таких как, например, гидроксиды натрия, калия, аммония, кальция или железа, и органических оснований, таких как изопропиламин, триметиламин, 2-этиламиноэтанол, гистидин, прокаин и т.п.Функциональный вариант гибридного белка, содержащий последовательность SEQ ID NO: 10, может представлять собой полипептид с идентичностью последовательности примерно 85% или более, примерно 86% или более, примерно 87% или более, примерно 88% или более, примерно 89% или более, примерно 90% или более, примерно 91% или более, примерно 92% или более, примерно 93% или более, примерно 94% или более, примерно 95% или более, примерно 96% или более, примерно 97% или более, примерно 98% или более, или примерно 99% или более с SEQ ID NO: 10.

В соответствии с одним вариантом осуществления введение GX-188 и антитела к PD1 пациентке с распространенным, неоперабельным или метастатическим раком шейки матки демонстрирует значительные лечебные эффекты, такие как уменьшение размера и/или объема опухоли и улучшение противоракового иммунного ответа, измеряемого по ответу Т-клеток, уровням PD-L1, CEA и/или TA4. Например, введение варианта GX-188 и антитела против PD1 эффективно индуцировало ВПЧ-специфические Т-клеточные ответы. В то время как монотерапия пембролизумабом не оказывает влияния на PD-1-негативных пациенток, комбинированная терапия GX-188 и пембраолизумабом эффективна при лечении или улучшении лечения пациенток с раком шейки матки, негативных по PD1.

Способ осуществления изобретения

Далее настоящее изобретение будет описано более подробно со ссылкой на примеры. Специалистам в данной области техники будет очевидно, что следующие примеры являются просто иллюстрацией настоящего изобретения и что объем настоящего изобретения не ограничивается этими примерами.

Пример 1. Доклиническое исследование

Противоопухолевую эффективность комбинированной терапии с использованием GX-188E и анти-PD1-антитела при раке шейки матки оценивали на животной модели. Клетки TC-1, которые представляют собой клеточную линию эпителиальных клеток легкого мыши C57BL/6, трансформированных для экспрессии Е7 ВПЧ типа 16, были выбраны в качестве клеточной линии для получения модели на животных для оценки эффективности GX-188E.

После образования опухоли путем подкожной трансплантации 1×10⁵ опухолевых клеток ТС-1 (предоставлено профессором Jaetae Lee, госпиталь Национального университета Кенпук) мышам C57BL/6 животным внутримышечно вводили 4 мкг GX-188E или составляющего буфера (PBS) с помощью электропорации (Orbijector™, Elimtek Co., Ltd) на 1, 2 и 4 неделе. Для комбинированной терапии и монотерапии антителами против мышиного PD-1 (анти-mPD-1 mAb) 250 мкг антител против mPD1 (BioXcell, клон RMP1-14) вводили интраперитонеально пять раз с интервалом в 1 неделю, начиная через 2 недели после трансплантации клеток ТС-1. После инокуляции опухолевых клеток измеряли размер опухоли и дважды в неделю проверяли выживаемость (фиг.2А).

Все животные в контрольной (PBS) группе умерли, что подтвердило, что использованные условия инокуляции опухоли были подходящими. При введении только анти-mPD-1-антитела у некоторых животных наблюдался слабый эффект, т.е. замедление роста опухолевых клеток, по сравнению с таковым в контрольной группе. Однако, поскольку все животные в конце концов погибли, антитело против mPD-1 не вызывало каких-либо изменений в выживаемости. Когда вводили только GX-188E, наблюдалось отчетливое увеличение среднего периода выживания из-за замедления роста опухолевых клеток, в то время как окончательная выживаемость составляла 17% (1/6). С другой стороны, при введении комбинации GX-188E и антитела против mPD-1 наблюдалось отчетливое увеличение замедления роста опухолевых клеток и периода выживания, при этом показатель выживаемости также увеличивался до 50% (3/6) (фиг. 2В-2Е).

На основании полученных данных авторы изобретения определили, что антиген-специфический клеточный иммунный ответ, индуцированный GX-188E, способен эффективно удалять уже образовавшиеся опухолевые клетки, что приводит к задержке роста опухолевых клеток и увеличению периода выживания. Более того, группа, получавшая комбинацию иммуномодулирующего соединения и терапевтической вакцины GX-188E, показала такие же уровни замедления роста опухолевых клеток и пролонгированной выживаемости, что и группа, получавшая только GX-188E, что также привело к увеличению выживаемости в долгосрочной перспективе.

Основываясь на механизме действия данного ингибитора контрольной точки, результаты этого исследования были аналогичны результатам предыдущих исследований, которые указывали, что антитело против PD1 продлевает активность Т-клеток против опухоли. Соответственно, результаты показывают, что ингибитор контрольной точки является подходящим синергетическим партнером для повышения эффективности иммунотерапевтической вакцины против ВПЧ, включая GX-188E.

Результаты этого исследования показали, что комбинация антитела против PD1 с иммунотерапевтической вакциной GX-188E повышает эффективность GX-188E, что позволяет предположить, что ингибитор контрольной точки может быть подходящим кандидатом для использования в комбинированной терапии с иммунотерапевтической вакциной.

Пример 2. Клиническое исследование

GX-188E (SEQ ID NO: 15) представляет собой терапевтическую ДНК-вакцину против ВПЧ, кодирующую ВПЧ 16/18 Е6/Е7. Двенадцать (12) пациенток с предраковым состоянием были иммунизированы GX-188E, у семи из девяти пациенток в фазе I и 35 из 52 пациенток в фазе II отмечен регресс поражения шейки матки в течение 36 недель после вакцинации. Клинические преимущества были связаны с усиленными ВПЧ-специфичными ответами IFN-(при вакцинации GX-188E. Учитывая клиническое подтверждение концепции у пациенток с предраковым состоянием, изобретатели предположили, что у пациенток с раком шейки матки вакцинация GX-188E увеличивает долю клинических ответов на ингибитор контрольной точки за счет увеличения частоты ВПЧ-специфических Т-клеток.

В фазе II клинических испытаний авторы изобретения оценивали безопасность и эффективность GX-188E в комбинации с пембролизумабом у пациенток с ВПЧ 16 и/или 18-позитивным рецидивирующим/распространенным раком шейки матки, у которых первая или последующие линии химиотерапии оказались неэффективными.

A. План исследования и участники

Исследование было перспективным открытым исследованием фазы II. Протокол был одобрен институциональным наблюдательным советом или комитетом по этике в каждом исследовательском центре, и от каждой пациентки было получено письменное информированное согласие. Исследование проводили в соответствии с Хельсинкской декларацией и всеми применимыми законами.

Было включено 54 пациентки, которых лечили исследуемой комбинацией. Критерии включения включали пациенток женского пола в возрасте (18 лет, подписавших информированное согласие; тех, у кого был статус 0-1 Восточной кооперативной онкологической группы и гистологически подтвержденный рецидивирующий/распространенный ВПЧ-позитивный (ВПЧ 16 и/или ВПЧ 18) рак шейки матки; те, у кого было прогрессирование заболевания после лечения доступными методами терапии рецидивирующего/распространенного рака. Пациенток исключали из исследования, если у них в анамнезе были активные метастазы в ЦНС или активное аутоиммунное заболевание, аллогенная трансплантация паренхиматозных органов или костного мозга, или диагноз иммунодефицита. Все пациентки представили либо архивный, либо свежий образец биопсии своей опухоли для молекулярного и гистологического анализа при скрининге/исходном уровне. Образцы периферической крови брали у пациенток при скрининге и на 1, 4, 7, 10, 16, 22 и 49 неделе для анализа IFN-(посредством ELISpot.

В. Процедуры

GX-188E вводили внутримышечно по 2 мг либо в дельтовидную, либо в латеральную мышцу, после чего сразу же проводили совместную электропорацию (TriGrid Delivery System, Ichor medical systems, Inc.) на 1, 2, 4, 7, 13 и 19 неделях с одной необязательной дозой на 46-й неделе. Пембролизумаб вводили с помощью внутривенной инфузии в 1-й день каждого 3-недельного цикла лечения после завершения всех процедур и оценок на основе стандартной клинической и институциональной практики.

Для исследования клеточного иммунного ответа, индуцированного GX-188E, были проанализированы ответы Т-клеток, специфичные для ВПЧ 16/18 E6/E7, в указанное время в разделе «Дизайн исследования и участники». Для анализа IFN-(ELISpot (BD Bioscience, Калифорния, США) криоконсервированные и размороженные мононуклеарные клетки периферической крови (PBMC) были адаптированы и дополнительно обработаны, как описано ранее в Kim TJ, Jin H-T, Hur S-Y, et al. Clearance of persistent HPV infection and cervical lesion by therapeutic DNA vaccine in CIN3 patients. Nature communications 2014; 5(1): 1-14. Т-клеточные ответы на ВПЧ E6/E7 измеряли путем сравнения сигналов с исходными уровнями и считали положительными, когда ответ после вакцинации был в пять раз выше исходного.

С. Итоги

Рентгенологически оценивали ответ пациенток (по RECIST v1.1 и iRECIST) примерно каждые 9 недель. Безопасность исследуемого продукта оценивали путем регистрации, отчетности и анализа результатов лабораторных тестов и результатов физического осмотра, в которых учитывалось основное заболевание пациентки, побочные реакции и показатели жизнедеятельности. Были всесторонне оценены нежелательные явления (НЯ), с которыми сталкивались пациентки, такие как лекарственная токсичность. Исследователи оценивали тяжесть НЯ на основе Общих терминологических критериев нежелательных явлений (CTCAE v4.03) Национального института рака.

D. Статистический анализ

Все пациентки, получившие хотя бы одну дозу исследуемого препарата, были включены в группу безопасности и проанализированы на предмет профиля безопасности. НЯ были закодированы в соответствии со словарем нежелательных явлений MedDRA. Результаты были сведены в таблицу для изучения их частоты, систем органов, которые они затрагивали, и их связи с исследуемым лечением. Результаты эффективности, включая лучший общий показатель ответа, были проанализированы с использованием описательной статистики. Объективные ответы оценивали в соответствии как с RECIST v1·1, так и с критериями оценки ответа при солидных опухолях для иммунотерапии (iRECIST). Подтверждающие сканы были получены для всех определений объективного ответа (PR или CR), стабильного заболевания (SD) и прогрессирования заболевания (PD).

Е. Результаты

Было включено 54 пациентки, и безопасность была оценена у 48 пациенток (фиг.3). Три пациентки, не получавшие лечения в течение 45 дней, были сочтены неподходящими для оценки ответа на вакцинацию GX-188E по протоколу. Таким образом, эффективность лечения была оценена у 48 пациенток. Исходные характеристики пациенток, получавших комбинацию GX-188E и пембролизумаба, показаны на фиг. 4, и были аналогичны пациенткам, получавшим ранее описанную монотерапию пембролизумабом, за исключением гистологии и типов ВПЧ.

Пятьдесят четыре (54) пациентки прошли лечение и были оценены на безопасность, показывая 31,5% TRAE (нежелательных явлений, связанных с лечением) любой степени и 5,6 TRAE степени 3-4 (фиг.5). Наиболее распространенными TRAE, классифицированными по классу системных органов, были желудочно-кишечные расстройства (9,3%) и заболевания кожи и подкожной ткани (7,4%). У трех пациенток (5,6%) наблюдались TRAE 3-й степени, включая одну пациентку с повышением уровня аспартат-аминотрансферазы (АСТ) 3-й степени, связанным с повышением уровня аланин-аминотрансферазы (АЛТ) 4-й степени. Эта пациентка прекратила лечение из-за TRAE, которые были оценены как нежелательные явления, связанные с иммунной системой (irAE). В целом вакцинация GX-188E в сочетании с введением антитела против PD1 (пембролизумаб) считалась безопасной и переносимой. Фиг. 6A и 6B показывают сводку противоопухолевых ответов, оцененных радиологами в местах исследования.

На фиг. 5, 6А и 6 В аббревиатуры означают следующее:

TRAE: нежелательное явление, связанное с лечением;

BOR: лучший общий ответ;

DOR: продолжительность ответа;

CR: полный ответ;

PR: частичный ответ;

SD: стабильное заболевание;

PD: прогрессирующее заболевание;

NE: не поддается оценке;

DCR: уровень контроля заболеваний;

PD-L1: лиганд запрограммированной гибели 1;

SCC: плоскоклеточная карцинома; и

АС: аденокарцинома.

Как видно на фиг. 6А, значение BORR составило 33,3% (16/48), а DCR 50% (24/48). Среди 16 пациенток с BORR у шести пациенток был подтвержден CR, который был длительным и устойчивым, с продолжительностью ответа от 1,3 до 24,2 месяцев на момент отсечки; все пациентки с CR были PD-L1-позитивными, имели ВПЧ 16 и плоскоклеточную карциному. Ответы наблюдались как у ВПЧ-16-, так и/или -18-позитивных пациенток, хотя у ВПЧ 16-позитивных наблюдался благоприятный ответ (35,3% против 28,6%). Неожиданно ответ наблюдался не только в PD-L1-позитивной опухоли, но и в PD-L1-негативной опухоли: BORR и DCR составили 41,7% (15/36) и 61,1% (22/36) у пациенток с PD-L1-позитивной опухолью и 8,3% (1/12) и 16,7% (2/12) с PD-L1-негативной опухолью, соответственно.

Как показано на фиг. 7 и 8, у пациенток, у которых на 10-й неделе наблюдалось уменьшение опухоли, реакция со временем улучшалась. Медиана наблюдения составляет 6,1 месяца (диапазон от 1,7 до 24,2 месяца на дату отсечки), к этому времени у 24 пациенток (50,0%) развилось прогрессирующее заболевание (PD).

Изображения опухоли 63-летней пациентки показаны на фиг. 9А. У пациентки был ВПЧ 16- и PD-L1-позитивный плоскоклеточный рак, ранее она получила две линии химиотерапии и имела метастазы в лимфатических узлах. После лечения у пациентки наблюдался CR и значительное снижение до нормального уровня онкомаркера ТА4. На фиг. 9C показаны изображения опухоли у 41-летней пациентки с ВПЧ 18- и PD-L1-позитивной аденокарциномой, которая ранее получила две линии химиотерапии и имела образование в области таза и метастазы в лимфатические узлы. После лечения пациентка показала PR и значительное снижение другого онкомаркера CEA с течением времени. Фиг. 9B и 9D показывают уровень двух онкомаркеров (СЕА и ТА4) после комбинированного лечения; пунктирные линии указывают критерии отсечки для нормального уровня онкомаркеров.

На фиг. 10, максимальные изменения по сравнению с исходным уровнем (показанным на фиг. 7) размера целевого поражения суммированы на каскадном графике со статусом экспрессии PD-L1. PD-L1-позитивные пациентки лучше реагировали на комбинированную терапию GX-188E плюс пембролизумаб, чем PD-L1-негативные пациентки с точки зрения BORR (15/36 против 1/12) (фиг.6A).

Важно отметить, что уменьшение размера мишени более чем на 30% наблюдалось у одной PD-L1-негативной пациентки, тогда как в предыдущем исследовании только пембролизумаба не наблюдалось ответа у PD-L1-негативных пациенток. Что касается ответов антиген-специфических Т-клеток, результаты анализа IFN-(ELISpot были выражены как кратность изменения по сравнению с исходным уровнем (не показано). У восемнадцати из 23 пациенток, поддающихся оценке ответа (78,3%), были обнаружены Т-клеточные ответы, индуцированные ДНК-вакциной, что указывает на то, что GX-188E в комбинации с пембролизумабом эффективно индуцировал Т-клеточные ответы, специфичные для ВПЧ E6/E7, даже у пациенток с раком, ранее подвергнутых интенсивному лечению.

А. Обсуждение

Результаты клинических исследований показывают, что вакцинация против ВПЧ в сочетании с пембролизумабом индуцирует эффективный противоопухолевый ответ у пациенток с рецидивирующим/распространенным, неоперабельным или метастатическим раком шейки матки. Клиническая польза была многообещающей (33,3% BORR у всех пациенток и 41,7% BORR у PD-L1-позитивных пациенток). Насколько нам известно, это первый отчет о комбинированной терапии противораковой вакциной и ингибитором контрольной точки для пациенток с рецидивирующим/распространенным раком шейки матки. Как только опухолевые антиген-специфические Т-клетки индуцируются противораковой вакциной, они мигрируют в опухолевые ткани и проникают в них, превращая «холодную» опухоль в «горячую». Опухоль-инфильтрирующие лимфоциты (TIL) секретируют IFN-γ, который, в свою очередь, индуцирует экспрессию PD-L1 опухолевыми клетками в качестве механизма адаптивной резистентности против иммунной атаки. Поскольку ингибитор контрольной точки индуцирует противоопухолевый ответ путем восстановления опухолевой цитолитической функции истощенного TIL, присутствие опухолеспецифического TIL является необходимым условием для противоопухолевого ответа на ингибитор контрольной точки. Как свидетельствует корреляция отсутствия TIL и PD-L1-негативности с относительно плохим клиническим ответом на ингибитор контрольной точки, предполагается, что неиммуногенные «холодные» опухоли с PD-L1-негативностью требуют дополнительных стратегий для повышения экспрессии TIL и PD-L1.

Противораковые вакцины считаются наиболее эффективным методом индукции опухоль-специфического Т-клеточного ответа. Вакцинация GX-188E эффективно индуцировала антиген-специфические Т-клеточные ответы у пациентов с предраковым состоянием ВПЧ. Вполне вероятно, что вакцинация GX188E увеличивает частоту TIL с последующим усилением экспрессии PD-L1 в опухоли. Это возможное объяснение того, как вакцинация GX188E повышает клиническую эффективность в сочетании с антителом против PD1.

Результаты показывают, что по сравнению с инфекцией ВПЧ 16, PD-L1-позитивной и плоскоклеточной карциномой, рецидивирующий/распространенный рак шейки матки с инфекцией ВПЧ 18, PD-L1-негативностью и аденокарциномой имеет тенденцию приводить к плохим клиническим ответам.

Таким образом, комбинированное лечение GX-188E и агентом-ингибитором контрольной точки (ингибитор пути PD-1/PD-L1, включая пембролизумаб) у пациенток с рецидивирующим/распространенным раком шейки матки, получавших ранее интенсивное лечение, было безопасным и переносимым, показывая профиль безопасности, аналогичный ранее сообщалось о монотерапии пембролизумабом. Этот результат показал, что вакцинация GX-188E не добавляла каких-либо значительных побочных эффектов, в то время как она эффективно индуцировала ВПЧ-специфические Т-клеточные ответы у пациенток с раком шейки матки, предварительно подвергнутых интенсивному лечению. Настоящая комбинированная терапия показала высокий уровень ответа, приблизительно 41,7 у PD-L1-позитивных пациенток, 35,3% у ВПЧ-16 позитивных пациенток и 33,3% у пациенток с плоскоклеточной карциномой. И настоящее комбинированное лечение было эффективным у PD-L1-негативных пациенток, в отличие от монотерапии пембролизумабом. Кроме того, настоящее комбинированное лечение продемонстрировало клинические ответы также при ВПЧ 18 и аденокарциноме.

Следовательно, настоящее комбинированное лечение с использованием GX-188E в сочетании с антителом против PD1 было безопасным и эффективным для лечения пациенток с ВПЧ 16-/18-позитивным рецидивирующим или распространенным раком шейки матки, у которых были неэффективными доступные в настоящее время стандартные методы лечения, и может стать новым стандартом терапии рака, связанного с ВПЧ 16/18, такого как рак ротоглотки и аногенитальный рак, а также рак шейки матки.

Изобретение относится к биотехнологии. Описаны комбинация для профилактики или лечения рака, вызванного вирусом папилломы человека (ВПЧ), и способ применения комбинации. Данная комбинация содержит вакцину против вируса папилломы человека (ВПЧ) и агент-ингибитор контрольной точки для профилактики или лечения рака, вызванного вирусом папилломы человека (ВПЧ), где вакцина против ВПЧ представляет собой вакцину против ВПЧ, содержащую конструкцию нуклеиновой кислоты SEQ ID NO: 15 или функциональный вариант с 85% или более идентичностью последовательности с SEQ ID NO: 15, и доза вакцины против ВПЧ составляет от 0,5 мг до 5 мг, и где агент-ингибитор контрольной точки представляет собой анти-PD-1 антитело, и доза анти-PD-1 антитела составляет от 50 до 500 мг. 2 н. и 14 з.п. ф-лы, 18 ил., 2 пр.

1. Комбинация для профилактики или лечения рака, вызванного вирусом папилломы человека (ВПЧ), содержащая вакцину против вируса папилломы человека (ВПЧ) и агент-ингибитор контрольной точки для профилактики или лечения рака, вызванного вирусом папилломы человека (ВПЧ),

где вакцина против ВПЧ представляет собой вакцину против ВПЧ, содержащую конструкцию нуклеиновой кислоты SEQ ID NO: 15 или функциональный вариант с 85% или более идентичностью последовательности с SEQ ID NO: 15, и доза вакцины против ВПЧ составляет от 0,5 мг до 5 мг, и

где агент-ингибитор контрольной точки представляет собой анти-PD-1 антитело, и доза анти-PD-1 антитела составляет от 50 до 500 мг.

2. Комбинация по п.1, где вакцина против ВПЧ предназначена для внутримышечной инъекции.

3. Комбинация по п.1, где анти-PD-1 антитело представляет собой пембролизумаб.

4. Комбинация по п.1, где анти-PD-1 антитело предназначено для внутривенной инъекции.

5. Комбинация по п.1, где вакцину против ВПЧ и анти-PD-1 антитело вводят многократно.

6. Комбинация по п.1, где вакцину против ВПЧ и анти-PD-1 антитело вводят одновременно, раздельно или последовательно.

7. Комбинация по п.1, где вакцину против ВПЧ вводят на 1, 2, 4, 7, 13 и 19 неделе и дополнительно, при необходимости, на 46 неделе.

8. Комбинация по п.1, где анти-PD-1 антитело вводят с интервалом в три недели.

9. Комбинация по п.1, где рак, вызванный ВПЧ, представляет собой рак шейки матки.

10. Комбинация по п.9, где рак шейки матки представляет собой плоскоклеточную карциному или аденокарциному.

11. Комбинация по п.1, где рак, вызванный ВПЧ, представляет собой метастатический, рецидивирующий или распространенный рак, а субъект получал или получает противораковое лечение.

12. Комбинация по п.1, где ВПЧ представляет собой ВПЧ 16, ВПЧ 18 или их комбинацию.

13. Комбинация по п.1, где субъект для профилактики или лечения рака, индуцированного ВПЧ, является PD-L1-позитивным или PD-L1-негативным.

14. Комбинация по п.1, где ВПЧ представляет собой ВПЧ 16, а субъект для профилактики или лечения рака, индуцированного ВПЧ, является PD-L1-позитивным.

15. Комбинация по п.1, где рак, вызванный ВПЧ, представляет собой рак шейки матки, представляющий собой плоскоклеточную карциному, ВПЧ представляет собой ВПЧ 16, и/или субъект для профилактики или лечения рака, индуцированного ВПЧ, является PD-L1-позитивным.

16. Применение комбинации, содержащей (а) вакцину против вируса папилломы человека (ВПЧ) и (b) агент-ингибитор контрольной точки в производстве лекарственного средства для профилактики или лечения рака, вызванного вирусом папилломы человека (ВПЧ), при этом вакцина против ВПЧ представляет собой вакцину против ВПЧ, содержащую конструкцию нуклеиновой кислоты SEQ ID NO: 15 или функциональный вариант с последовательностью, идентичной SEQ ID NO: 15 на 85% или более, и агент-ингибитор контрольной точки представляет собой анти-PD-1 антитело.