Способ иммунологического исследования сыворотки крови животных Советский патент 1983 года по МПК G01N33/54 

СО

ел ел IND Изобретение относится к биологии н может быть использовано при изучении вопросов иммунитет-а животных. Новестно, что дм иммунологических исследований сыворотки крови животных в реакции ррештит ции необхошпио иметь водорастворимые б(пки - антигены и антисыворотки против них, получаемые при иммунизаюш живот; Язтх и птиц. Известен способ по которому после многократных введений подопытным животШ.1М или птицам водорастворимых антигенов (т.е. после вы1 олнения намеченной схемы иммунизации) спустя 7-6 дн они обескровливаются. Мз собранной крови выделяют антисыворотки, помещают в заранее приготовленные центральные лунки в агаровом геле, а в )дорастворимые аиргигены в лунки, ра шоложенные вокруг. Таким образом приготовленная реагирую шая система ставится во влажную камеру и ежедневно до 7 ;ут проверяется реакция прештитащш. При положительных реакциях образуются .видимые невооруженным глазом линии прецип;1тации,расположенные I между лунками с антигеном и антителом 11. Недостатки указанного способа - необ-ч ходимость готовить дорогостоящие сыворотки и Heyi0mepcaibHOcTb, так как каждому виду животных 1еобходимо готовить специфические анти :ыворотки. Цель изобретет - упрощение способа иммунологических 1:сспедоваш1Й сьгеоротки .крови животных. Цель достигается тем, что согласно способу иммунологического исследования .. сыворотки крови жт:вотнь1Х путем постановки реакции преципитации с белковым антигеном в качестве белкового антигена используют гемолимфу гусеницы или экстрак ты ее тела или пищеварительного тракта, П р и м е р . Е центральные лунки места для антителе содержащих сывороток, помещается гемолИЛфа, экстракт тела или экстракт пишеварш ельного тракта гусениц большой пчелиной сгневки, а в лунки, распомещаются сыворотпояоже1шые вокруг ки крови млекошгге ючщхсяживотных, человека и птиц (кур , д(Ж1ашних и диких ). Готовые пластинки уток, фазанов и др. ставятся в термостат с а1:аровымгелем К ежедневно в течево влажную камеру ние 7 дней провер59|ется реакция. Гемолимфа с сыворотками 1фови птш образует одну лтиппо преципит шш, экстракт тела гусениц - по одной-дзе линии прешптогашш, а экстракт пшцева итепьного тракта по две линии преципитации. Экстракт тела гусениц выявляет в сыворотке крови различных видов млекошггаюших (кроликов, лошадей, крупного рогатого скота, овец, свиней) и человека от двух до трех главных антигенов сывороточных белков, что выражается в образовании соответствуклцёго числа прецишггации. Гемолимфа образует меньшее число линий преципитации с вы-, шеупсмянутыми сыворотками и тем самым выявляет меньшее количество антигенов. Экстракт пищеварительного тракта гусениц выявляет в сыворотке крови до трех антигенов, а в сыворотке крупного рогатого скота, овец, свиней и человека - не менее двух антигенов. Образующиеся линии преципитации экстракта тела гусениц, гемолимфы и экстракта пищеварительного тракта с сыворотками различных видов млекопитающих и пттщ характерны (по месту расположения, фор времени появления и растворения) для каждого вида исследованных животных, Предлагаемый способ простой и нетрудоемкий. Вместо иммунных сывороток по предлагаемому способу применяются нативные гемолимфа, экстракт тела и экстракт пищеварительного тракта гусениц насекомых, в результате чего отпадает необходимость иммунизации животных для получения антителосодержащих иммунных сывороток. Способ может быть использован в сельском хозяйстве (ветеринарии, энтомологии) при иммунохимических исследованиях антигенов сыворотки крови теплокров ных, а также в утилитарных целях - для продемонстрирования положительной реакции преципитации в агаровый гель вместо дорогостоящих антителосодержащих сыво- роток, применяя нативную гемолимфу, нагивные экстракт тела и экстракт пищеварительного тракта гусениц большой пчелиной огневки 1 Ga {1 ег i а те 11 one Па) старших возрастов. Поскольку белки гусениц насе комых способны образовать линии преципитации, характерные каждому виду теплокровных животных и пткц, предлагаемый способ может быть использован в судебной медицине для определения, к какому виду млекопитающих и птиц относится сы-, воротка крови. Способ является экономичным. Пример предварительного расчета: стоимость кролика ci 9,84 , руб. Сыворотки крови из кролика получается cil50-2OO мл. Для получения антит.елосодержашей сыворотки кролик должен быть иммунизирован, его необходимо кормтггь и содержать не только во время иммунизации, но еше 7-8 дн

31О355204

после ее завершения, и только тогда обес-ны стоит 4-6 руб. На нем можно вырос- кровитБ. Продолжительность этого процес-тигь ЗООО гусешщ большой пчспиной огса может колебаться от нескольких не-невки до старших возрастов, и полудепь до нескольких месяцев или даже года,чить 5il8O мл гемолик1фы, р; 15ОО мл Самый короткий цикл иммунизации длится 5.экстаркта тела и 50О. мл экстракта пине менее месяца. Содержание кролика вщеварительного тракта гусениц. Из приметечение месяца обходится 5 руб. Какра в1одно, что для получения аналогичного правило, иммунизируют не менее трех кро-количества иммунологически активного великсда в группе, что составит в обшейщества из гусе1пш большой пчелиной ог- сложности :i45 руб расходов. В то время, 10невки, по сравнению с таким же количесткак уход за гусеницами в процессе ихвом от кролика, экономится до 39 руб на роста простой и нетрудоемкий. 1 кг вощи-одно животное.

СПОСОБ ИММУНОЛОГИЧЕС-. КОГО ИССЛЕДСВАНИЯ СЫВОРОТКИ КРОВИ ЖИВОТНЫ X путем постаноки реeaaasa преципитации с белковым антигеном, отличающийся тем, что, с цепью упрощения способа, в качестве бепкового антигена используют г&лопимфу гусеницы или экстракты ее тепа или пишеваритепьнего тракта.