Способ получения производных циклофосфатиазенового ряда Советский патент 1983 года по МПК C07F9/65 

Изобретение относится к способу получения новых производных циклофосфатиазеновогр ряда, которые обладают противопухолевыми свойствами и могут быть использованы в- фармакологических препаратах.

Известно,что азиридин (этиленамин) и его производные проявляют широкий спектр биологического воздействия на живой организм и его эффект весьма напоминает действие проникают щей радиации, в связи с чем эти вещества получили название радиометрических соединений.

Биологический эффект азиридиновых производных широко используется в различных облас.тях. Азиридин очень ядовит (смертельная доза 15 мг/кг), он оказывает воздействие на половую функцию, вызывает мутацию и проявляет цитостатическую (противоопухолевую) активность. Учитывая высокую токсичность азиридина исследовательские работы ведут в области синтеза веществ, .содержащих азиридиновый заместитель, но имеющих сниженную токсичность. -i л,1 -i. А, СГАзЦФ Известны представители 3J цик фосфатиазенового ряда, например пентахлорциклофосфатиазен следующей структуры: p/cii X ei Y который проявляет противоопухоле активность.. Цель изобретения - разработка нового способа получения новых з мещенных циклофосфатиазенового р проявляющих противоопухолевую аК ность. Поставленная цель достигается новым способом получения производ циклофосфатиазенового ряда общей формулы 1:. в-А.-Аз-В кЛу А5Получение азиридиновых производных ведут с учетом характера свойств азиридинового кольца, который не стабилен при нагревании и в присутствии сильных кислот. Ацилирование ведут в среде органического растворителя в присутствии акцептора сильной кислоты, выделяющейся в ходе реакции, при пониженной температуре И .

Среди азиридиновых замещенных известны соединения 2 циклофосфазе-. | нового ряда: гексазиридиноциклотрифосфазен (ГАзЦФ), октазиридиноцикло5 тетрафосфазен (ОАзЦФ), октапирролидиноциклотетрафосфазен (ОПрЦФ), которые проявляют противоопухолевую активность в отношении лейкомии Р 388, лейкомии 1210 и опухоли меланомы В 16. Их токсичность несколько ниже самого азиридина

ГАзЦФ LDo 40 мг/кг

ОАзЦФ LDo 75 мг/кг

ОПрЦФ LDo 20 мг/кг

Их структура следующая: . /Лр Пр JJP-I % X ЛР1 Лр ОЛрЦф где R - фтор, хлор, фенил, бутокси-, фенокси-, морфолино-, пиперидиногруппа или азиридинил;А-} - азиридинил, RI - водород или метил, заключающийся в том, что циклофосфатиазеновое производное общей формулы 1 1 : irAw мгде R - хлор, фтор., фенил, подвергают взаимодействию с азиридином или метилазиридином, взятым в 8 - 20-кратном мольном избытке, на соединение формулы II, в среде диэтилового эфира при (-75)-(+20)с с последующим выделением или превращением соединения формулы II, в кЬтором R - хлор, в соответствующее бутокси-, фенокси-, морфолино- или пиперидино-производное взаимодействием с бутанолом, фенолом морфолином или пиперидином при (-20)С. Предлагаемые соединения могут быть использованы для обработки твердых и мягких опухолей, например сарком, карцином, а также других подобных опухолей. Дозы зависят от типа опухоли и вида введения: для инъекций или мазей, или суппозиториев, предпочтительно составы могут содержать, от 1 до 20 вес.% активного вещества. Растворимость этих соединений, на ходится в пределах 20 г/л. Пример 1. Раствор 48,0 ммо свежеперегнанного азипиридина в 40 мл сухого диэтилового эфира прибавляют по каплям в течение 1ч к эфирному раствору 3 ммоль соедине ния формулы 11, где R представляет собой фтор,- охлажденному до смесью ацетона и жидкого азота. Процесс ведут при интенсивном перемешивании, а после окончания добавления реагентов смесь медленно нагревается до комнатной температур и при этой температуре и перемешива НИИ реакционную смесь выдерживают 17 ч. . .. ,, Раствор декантируют и остаток, состоящий преимущественней из поли-мерных продуктов, экстрагируют трем порциями по 20 мл сухого диэтиловог эфира. Затем маточный раствор и экс ракты объединяют и отгоняют раство ритель в вакууме. Полученный неочи щенный продукт снова Экстрагируют: тремя/ порциями по 80 мл сухого диэт лового эфира. После пере кристалл изации, т.е. частичной отгонки растворителя и охлаждения раствора, по лучают кристаллический продукт с Тщ И1-И2°С и выходом 62%. Элементный анализ. Найдено,%: С 28,20; 28,16; Н 4,72; N 28,75; 28,68; S 9,49; 9,68 . CgHieN P2SOF Вычислено,%: С 28,32; Н 4,75; N 28,90., S 9,45 . ИК-спектр (см) в области 4001400 см (в нуйолё): 1320 сильный, 1273 очень сильный, . 1234 очень сильный, 1167 плечо, 1122 средний, 1096 средний (960; 942) очень сильный, 881 средний/ 848 средний, 811 ср,рдний, 708 сильный, 669 сильный, 690 очень сильный 525 средний. Масс-спектр: м/с 339 13%, 297 M-Atl 100%. ЯМР - Р (в растворе CDO%) : Р 5 35,7 р.р.т. (по отношению к 85%-ной ) (Р-Р) 3,7 ГЦ. . При использовании монометилазири дина вместо азиридина получают со.единение формулы I, где R - метил. Пример 2. Процесс ведут аналогично примеру 1, но, используют 90 ммоль азиридина в 40 мл сухого эфира и 4,5 ммоль соединения формулы II, где R представляет собой хлор, в 40 мл сухого эфира. После перекристаллизации получают с выходом 57% и 86-87с продукт, имеющий следующий элементный анализ. Найдено,: С 33,02; 33,13; Н 5,64; 5,68; N 30,53; 30,49; S 8,71 C H,.2SO . Вычислено,%: с 33,15; Н 5,56; N 30,93; S 8,85 ИК-спектр/см (таблетка КВч в области 400-1400 см ): 1265 сильный, 1222 очень сильный, 1182 средний, 1151 средний, 1116 средний, 1083 средний, 937 очень сильный, 914 средний, 875 сильный, 842 средний, 811 средний, 770 сильный, 646 сильный, 577 средний. Масс-спектр: м/с 362 , 320 .. ЯМР - Р (в растворе ССС€з): Р 35,4 р.р.т. (по отношению к 85%ной ). В этом случае происходит образование продукта с температурой плавления , для которого результаты элементного анализа и масс-спектра, а также ЯМР-Р совпадают с продуктом с Тпд. В6-87°С. Однако данные ИК-спектра (таблетка КВч в области 400-1400 ) несколько отличаются: 1265 сильный, 1226 очень сильный, 1170 плечо, 1153 сильный, 1084 сильный, 942 сильный и широкий, 912 средний, 882 средний, 867 средний, 766 средний, 711 сильный, 646 и 638 очень сильный, 542 средний,, т.е. полученный второй продукт предс.тавляет собой другую кристаллическую форму и обладает одинаковой активностью по отношению к опухолевым заболеваниям. Приме р 3. Процесс ведут аналогично примеру 1, но используют 144 ммоль свежеперегнанного азиридина в 40 мл сухого диэтилового эфира и 9 ммоль соединения формулы II, где R представляет собой фенил. Экстракцию ведут тремя порциями по 120 мл сухого эфира, а после перекристаллизации получают продукт с выходом 50% и Т,д 108-109-С. Элементный анализ. Найдено,%: С 42,74; 42,48; Н 5,34; 5,45; N 24,72; 24,56: S 8,16 CiijH NTPjSO Вычислено,%: С 42,32; Н 5,33; N 24,67, S 8,07 ИК-спектр/см в области 4001400 см (в нуйолё): 1267 сильный, 1247 очень сильный, 1210 очень сильный, широкий, 1150 очень сильный, 1085 сильный, 939 очень сильный, широкий, 878 средний, 842 средний, 777 средний, 711 и 702 сильный, 648сильный, 579 сильный, 534 средний. Масс-спектр: м/с 597 м 100%. ЯМР - Р в растворе CDCE, : р 34,1 р.р.т. (по отношению к 85%-но НзР04). Пример 4. Процесс ведут к в примере 1, но используют 80 ммол свежеперегнанного азиридина в раст воре сухого эфира 40 мл и раствор соединения 11, в котором R предста ляет собой хлор, 10,0 ммоль в 40 мл сухого эфира. Реакционную смесь фильтруют при (-20)-с, а оставшийс раствор вводят в реакцию с 20 ммол пипиридина в эфирном растворе при (-20) С. Полученный пиперидиноэаме щенный продукт идентифицируют по его масс-спектру. Предлагаемым способом синтезируют, исходя из морфолина, бутанол и фенола соответствующие замещенны продукты. Активность свойств определяют следующим образом. Для приготовления физиологическ приемлемых препаратов используют, мг: Соединение, описанное в примере 250 Солевой физиологический растворДо 10 Полученный раствор помещают в а пулы. На одну капсулу используют, мг: Соединение, описанное в примере 2200 Лактоза50 Картофельный крахмал 50

Т

Количество инъекций.

соединение Доза,

1инъекцияD+1, SOF

3инъекцииQ 3D

1инъекцияD+1; SOF

3инъекцииQ 4D

1210

1 инъекция D+1, SO AJ

3 инъекции Q 3D

1 инъекция D+1; SO Aj

Р 388

иле, %

мг/кг/сут

27 40 48

24

20 44

98 51 118 28

48 22

46 35 Кристаллическая целлюлоза109Стеараг магния1 Состав на 1000 гранул, мг: Соедин-ение, описанное в примере 3 100 Лактоза 550Кукурузный крахмал 330 Гидроксипропилцеллюлоза 20 Состав для суппозиториев - вес 1 гр, мг: Соединение, описанное в примере 2500 Витепсол, изготовлен фирмой Динамит Hoбель Ко500 Состав мази, г: Соединение, описанное в примере 12 Белый вазелин 23 Стеариловый спирт . 22 Пропиленгликоль 12 Лаурилсульфат натрия 1,5 Этил-п-гидроксибензоат 0,025 Очищенная вода До 100 Противоопухолевую ак-гивность исдуют на мышах швейцарской породы /2 для следующих видов опухолей: комии Р 388 и лейкомии Л 1210, и мышах породы BEack С57 для опуховида меланома В 16. Испытайия проводят либо при одиных инъекциях при различных дов день (D+1) в зависимости от а прививки опухоли, или же при гократных инъекциях (О-представт собой день, в который проводиь прививка опухоли). Полученные результаты представлев таблице.

Продолжение таблицы

СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ПРОИЗВОДНЫХ ЦИКЛОФОСФАТИАЗЕНОВОГО РЯДА Общей формулыB-Avvx -b . где R - фтор, хлор, фенил, бутокси-, фенокси-,морфолино-,пипери t диногруппа или азури.цинил; R - водород или метил; АЗ - азиридинил, отличающийся тем, что циклофосфатиазеновое производное общей формулы a.Ji N Ay j( ii i СП где R - фтор, хлор, фенил; подвергают взаимодействию с азиридином или метилазир дином, взятым в 8-20-кратном мольном избытке на соединение формулы II, в среде диэтилового эфира при (-75). с последующим выделением или превращением соединения формулы Г1, в котором R - хлор,в соответствующее бутокси-, фенокси-,морфолино- или пиперидиносо производное взаимодействием с бута(Г нолом, фенолом, морфолином или пиперидином при (-2Q)°C, ИЙ N( ел

иле представляет собой результат, JQ ычисленный по формуле:

т - с иле, % ( t

де Т (в сутках) представляет собой. .

средний период жизни мышей, 35 прошедших обработку; С (в сутках) представляет собой средний период жизни мышей в

, контрольном эксперименте;

QD - (в суткахУ представляет собой п количество суток П , приходящихся на 1 инъекцию, начиная с D +1 таким образом, что 3 инъекции Q 4D обозначают 1 инъекцию в D+1, 1 инъекцию . в Б +5 и 1 инъекциюв D +9; и

50F - соединение, описанное в примере 1,L DO 50 мг/кг;

ооединение, полученное в примере 2, 210 мг/кг;

SOPti- соединение, полученное в примере 3,1 Do 250 мг/кг; Соединение :5ОАз вылечивает лейкомию при однократной инъекции. Значение иле (196%) , полученное для случая введения трех инъекций 04D при ЗЧОО мг/кг, в три раза превышает значение (73%), полученное при однократной инъекции в 100 мг/кг, произведённой в D-f 1, позволяет сделать предположение, что это соединение обладает активностью не только по отношению к лейкомии Р 388 на ранней стадии, но и к лейкомии Р 388 на поздней схадии.

На чертеже показан график воздействия на раковые заболевания. Как видно из характера кривой значение иле (от дозы введения для лейкомии Р 388 экспотенциально увеличивается, стремясь с пределу - 200 мг/кг.