Питательная среда для определения биологической активности гелиомицина Советский патент 1984 года по МПК C12Q1/04 

. Изобретение относится к фармацевтической промшипенности и касается определения активности антибиотиков Известна питательная среда- для определения биологической активности гелиомицина, содержащая источник азота - перевар Хоттингера, минераль ные соли NaCe и , агар-агар и дистиллированную воду 1 . Однако известная среда не обеспечивает высокой точности определения Цель изобретения - повышение точности определения. Поставленная цель достигается тем, что питательная среда для опре деления биологической активности гелиомицина, содержащая источник . азота, минеральные соли, агар-агар и дистиллированную воду, дополнительно содержит глюкозу, в качестве источника азота она содержитмочеви ну, в качестве минеральных солей аммоний хлористый и натрий фосфорно кислый двузамещенный при следующем количественном соотношении ингредиентов, г/л : Мимевина1,5-2,5 А;-1моний хлористый 1,5-2,5 Натрий фосфорнокислый двузамещенный 10 -20 Глюкоза5-10 Агар-агар15-20 Дистиллировання вода Остальное Пример 1, Для определения биологической активности гелиомицина готовят питательную среду следующего состава, г/л: аммоний хлористый 2; мочевина 2; натрий фосфорнокислый двузамещенный 15; глюкоза 5; агар-агар 18f вода дистиллированная до 1 л (рН после стерилизации 7,88,0), расплавляют на водяной бане, охлаждают до 70°С и вносят 10®спор B9.cillus subtilis АТСС 6633 на 1 мл среды. Засеянную питательную среду, разливают по 10 мл (один слой) в сте рильные чашки Петри. После застывани .итательной среды делают лунки и под

Определение биологической активности гелиомицина на двух питательных средах сушивают чашки со средой при комнатной температуре 15-20 мин. Далее лунки заполняют растворами контрольной среды (4 мкг/мл) и испытуемой концентрации гелиомицина в 0,1 н. NaOH. Затем чашки помещают в термостат при З7с. После 18-20 ч инкубации замеряют диаметры зон задержки роста тест-микроба и расчитывают активность испытуемого образца по предварительно построенной стандартной кривой с использованием концентраций гелиомицина 2,4; 3,0; 4,0; 5,0; 6,0 мкг/мл в 0,1 н.растворе NaOH. П р и м е р 2. Для определения биологической активности гелиомицина используют питательную среду следующего состава г/л: аммоний хлористый 1,5: мочевина 2,5; натрий фосфорнокислый двузамещенный 10; глюкоза 7,5; агар-агар 15; вода дистиллированная до 1 л (рН после стерилизации 7,8-8,0). Условия проведения анализа аналогичны примеру 1. Примерз. Для определения биологической активности гелиомицина используют питательную среду следующего с(5става, г/л: аммоний хлористый 2,5; мочевина 1,5; натрий фосфорнокислый двузамещенный 20; глюкоза 10; агар-агар 20; вода дистиллированная до 1 л .(рН после стерилизации 7,8-8-, О). Условия проведения анализа аналогичны примеру 1. Пример4. Для сравнения воспроизводимости результатов определения биологической активности гелиомицина были многократно проанализированы несколько предлагаемой и известной партий гелиомицина на питательных средах. Полученные результаты вместе с их стандартными отклонениями приведены в таблице. Результаты определения на сравниваемых питательных средах совпадают (с учетом погрешностей определения), а воспроизводимость результатов на предлагаемой среде выше.

ПИТАТЕЛЬНАЯ СРЕДА ДЛЯ ОПРЕДЕЛЕНИЯ БИОЛОГИЧЕСКОЙ АКТИВНОСТИ ГЕЛИОМИЦИНА, содержащая источник азота, минеральные соли, arap-arap и дистиллированную воду, отличающаяся тем, что, с повышения точности определения, она дополнительно содержит глюкозу, в качестве источника азота она содержит мочевину, в качестве минеральных солей - аммоний хлористый и натрий фосфорнокислый двузамещенный при следующем количественном соотношении ингредиентов, г/л: Мочевина1,5-2,5 Аммоний хлористый 1,5-2,5 Натрий фосфорнокислый двузамещенный 10-20 I Глюкоза5-10 Arap-arap15-20 (Л С Дистиллированная водаОстальное

10 10 10

10

10

18,7

993

5,2 10,3

10 10 10 2,9 997,5

10,8 989,7

6,3 14,9 996,8

3,1

Примечание. AJ- средняя арифметическая биологической активности гелиомици на п - число вариант; Sy- среднеквадратичное отклонение среднего арифметического.

Использование синтетической пита- диффузионных свойств среды и снижения тельной среды позволяет повысить точ- вариабельности результатов определеность определения путем улучшения ния,а также снизить себестоимость среды.

Продолжение таблицы