Способ определения концентрации гемоглобина Советский патент 1984 года по МПК G01N33/48 

:О

СО СП Изобретение относится к области медицины и криобиохимии и может найти применение при изучении процессов замораживания - оттаивания, консерва ции клеток крови, в трансфузиологии пищевой и мясной промышленности. Известен способ определения концентрации гемоглобина путем инкубации исследуемого раствора с красителем с последующим спектрофотометрированием tl. Недостатком этого способа является то, что он не позволяет определят гемоглобин непосредственно в замороженных растворах, трудоемок, не позволяет определять концентрацию гемоглобина ниже 2 мг %. Кроме этого, в данном способе используются дефицитные реактивы и сильно ядовитые вещества. Цель изобретения - определение концентрации гемоглобина в замороженных растворах. Поставленная цель достигается согласно способу определения концентраци гемоглобина путем инкубации исследуемого раствора с красителем с последующим спектрофотометрированием, причем в качестве красителя используют акридиновый желтый в конечной концентрации 10-t и 10 М. Способ осуществляют следующим образом. В исследуемый раствор вводят краситель акридиновый желтый в конечной концентрации 10 - М, затем инкубируют при комнатной температуре в течение 2-.3 мин, после чего замораживают и определяют интен сивность флуоресценсйи акридинового желтого при длине волны возбуждения Ag 447tl нм и максимуме длины волны флуоресценции Лф 510+1 нм. Интенсивность флуоресценсйи акридино вого желтого находится в обратной зависимости от количества гемоглобина., Пример. К 30 МП водного раствора Гемоглобина добавляют акри диновый желтый в конечной концентрации 5-10. М. Пробу инкубируют 2 мин при комнатной температуре. После этого раствор замораживают в парах лсидкого азота до температуры Интенсивность флуоресценции измеряют при длине волны возбуждения нм и максимуме длины волны флуоресценции |1ф 51 Онм и по калибровочному графику определяют количество гемоглобина .в замороженном образце. Полученные данные приведены в таблице. Вода гемоглобин -30 1,0 Вода + акридиновый желтый .-30 43,7 Вода + акридиновый желтый + гемоглобин 15.МГ %-30 29,1 Вода + акридиновый желтый + гемоглобин 30 мг %-30 24,0 Вода + акридиновый желтый + гемоглобин 60 мг %-30 10.0 Из приведенных данных видно, что применение красителя акридинового желтого позволяет определять количество гемоглобина в замороженном растворе. Кроме этого способ прост в исполнении и не требует дорогостоящих реактивов

СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ КОНЦЕНТРАЦИИ ГЕМОГЛОБИНА путем инкубации исследуемого раствора с красителем с последующим спектрофотометрированием, отличающийся тем, что, с целью определения концентрации гемоглобина в замороженных растворах, в качестве красителя используют акридиновый желтый в конечной концентрации 10 - М.