Настоящее изобретение относится к улучшенному способу получения (метил-3Н2) тимидина, который находит применение в молекулярной биологии и экспериментальной медицине.
Известен способ получения (метил-3Н2) тимидина, заключающийся в том, что 5-формилурацил обрабатывают тритием при атмосферном давлении в уксусной кислоте в присутствии палладия на угле при 30оС с последующим энзиматическим превращением полученного меченого тимина в целевой продукт .
Недостатком способа является сложность, связанная с его двухстадийностью и необходимостью выделения ферментной фракции.
Наиболее близким к способу настоящего изобретения является способ получения (метил-3Н2) тимидина путем обработки растворов 5-формилурацила тритием в кислоте в присутствии палладия на сульфате бария при атмосферном давлении при комнатной температуре с последующим энзиматическим превращением полученного меченого тимина в целевой продукт при действии фермента транс-дезоксирибозилазы. Выход целевого продукта 84% , удельная активность 58 Ки. ммоль, радиохимическая чистота 98% .
Недостатком способа является сложность, связанная с его двухстадийностью и необходимостью выделения ферментной фракции.
Цель изобретения - упрощение способа получения (метил-3Н2)тимидина.
Поставленная цель достигается способом получения (метил-3Н2)тимидина, заключающимся в том, что 5-оксиметил-2'-дезоксиуридин, предварительно нанесенный на палладий на сульфате бария, обрабатывают тритием при 140-160оС.
Предпочтительно нанесение 5-оксиметил-2'-дезоксиуридина путем упаривания суспензии катализатора в водном растворе 5-оксиметил-2'-дезоксиуридина.
Пример. В реакционную ампулу из стекла, объемом 7,5 мл помещают 120 мг катализатора 10% Pd/BaSO4 с нанесенным на него 5-оксиметил-2'-дезоксиуридином (5,2 мг). Нанесение проводят упариванием суспензии катализатора в растворе 5,2 мг 5-оксиметил-2'-дезоксиуридина, подкисленном соляной кислотой на ротационном вакуумном испарителе досуха. Ампулу откачивают до остаточного давления 10-3 торр. Затем на ампулу надевают трубчатый электронагреватель, разогретый до 140оС, и проводят реакцию при 140оС в течение 90 мин. Удаляют избыток непрореагировавшего трития, вещество смывают с катализатора водой. Затем удаляют лабильный тритий отгонкой с водой. Тимидин выделяют известными способами, например, используя вначале метод бумажной хроматографии на Ватмане N 3ММ в системе растворителей бутанол-уксусная кислота-вода (2: 1: 1), а затем колоночную хроматографию на Дауэкс 1 х 8, НСОО- при элюации 0,1 М раствором формиата аммония рН 9,0. После проведения всех описанных операций получают 6,7 ГБК тимидина, меченного тритием, с молярной активностью 2,04 ТБК/ммоль и радиохимической чистотой более 96% .
В таблице приведены примеры, которые иллюстрируют способ проведения процесса при других температурах.
Предлагаемый способ позволяет получать (метил-3Н2)тимидин в одну стадию без снижения выхода и чистоты целевого продукта.
(56) Chang Hsueh - Chi et al. "Preparation of 3H-labeled thymine and thymiidine". - Nucl. Tech. 1981 (1), 59.
Авторское свидетельство СССР N 694042, кл. С 07 Н 19/06, 1978.
