Изобретение относится к получению меченных радионуклидами биологически активных соединений - аминокислот. Эти соединения используются в исследованиях по молекулярной биологии, молекулярной генетике, экспериментальной медицине.
Известен β -аланин, меченный радионуклидом, который имеет молярную активность 900-1850 ТБК/моль [1] . Однако способ получения указанного продукта в литературе отсутствует.
Известен способ получения меченных тритием DL- α -аминокислот, который заключается в проведении реакции каталитического восстановления оксиминокислот, предварительно нанесенных на катализатор гидрирования, газообразным тритием в твердой фазе при температуре 20-120оС [2] . Молярная активность полученного DL- α -аланина составляет 888 ТБК/моль.
Целью изобретения является разработка нового способа получения β -аланина, меченного радионуклидом с высокой молярной активностью.
Поставленная цель достигается описываемым способом, заключающимся в том, что урацил, нанесенный на катализатор-палладий на сульфате бария, обрабатывают газообразным тритием при температуре 170-190оС и полученный промежуточный продукт подвергают щелочному и кислотному гидролизу.
Молярная активность продукта 3330-3700 ТБк/моль (90-100 кКи/моль).
П р и м е р. В реакционную ампулу из стекла, объемом 7 см3помещают 1,34 мг урацила (12 мкмоль), нанесенного на 60 мг палладиевого катализатора 7% Pd/BaSO4. Нанесение проводят упариванием досуха на ротационном вакуумном испарителе суспензии катализатора в водном растворе урацила, подкисленного соляной кислотой. Ампулу откачивают до остаточного давления 10-3 торр, напускают 95-98% -ный газообразный тритий (260 ТБк, 7 Ки). На ампулу надевают трубчатый электрический нагреватель, разогретый до 170оС. Реакцию проводят при 170оС в течение 90 мин. После охлаждения, удаляют непрореагировавший тритий, продукты реакции смывают с катализатора водой, для удаления лабильного трития проводят отгонку с водой на ротационном вакуумном испарителе. Получают 38,9 ГБк (1050 мКи) дигидроурацила (10,6 мкмоль, химический выход 88% , радиохимический выход 31% ) с молярной активностью 3660 ТБк/моль (99 кКи/моль). Полученный продукт растворяют в 1,5 мл 25% -ного аммиака и ставят на гидролиз при 100оС в течение 5 ч. Раствор затем упаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе, сухой остаток растворяют в 1,5 мл 1 н. HCl и ставят гидролиз при 100оС в течение 5 ч. Раствор после кислотного гидролиза упаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе, сухой остаток растворяют в 50 мл 20% -ного этанола. Анализ полученного продукта методом тонкослойной хроматографии на целлюлозе - F(Merer) в системе растворителей трет-бутанол-метилэтилкетон-муравьиная кислота-вода (40: 30: 15: 15) и на "силуфоле" (ЧССР) в системе растворителей изопропанол-ацетон-аммиак (15: 9: 9) показал, что в реакционной смеси присутствует β -аланин с выходом по радиоактивности около 80% (величины Rf меченого β -аланина на целлюлозе - F и на "силуфоле" были равны соответственно 0,58 и 0,14, а немеченого β -аланина-свидетеля 0,59 и 0,15 соответственно).
Полученный β -аланин, меченный тритием выделяли из реакционной смеси на "силуфоле" в системе растворителей изопропанол-ацетон-аммиак (15: 9: 9). Радиохимическая чистота препарата более 96% . Молярная активность полученного [3H] β -аланина 3515 ТБк/моль (95 кКи/моль).
В таблице приведены примеры, которые иллюстрируют способ при других температурах проведения реакции.
Описываемый способ позволяет получить меченный радионуклидом β -аланин, который имеет молярную активность, значительно превышающую активность α-аланина и β -аланина, о котором имеются сведения лишь как о коммерческом препарате.
(56) Каталог фирмы RCC Amessham: Rescarch products 1982. The Radiochemical Centre Amessham, р. 37.
Авторское свидетельство СССР N 611412, кл. С 07 В 23/00, 1976.
СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ β -АЛАНИНА, МЕЧЕННОГО РАДИОНУКЛИДОМ, отличающийся тем, что урацил, нанесенный на катализатор - палладий на сульфате бария, обрабатывают газообразным тритием при 170 - 190oС и полученный промежуточный продукт подвергают щелочному и кислотному гидролизу.
