Способ выделения дрожжей Советский патент 1985 года по МПК C12N1/02 

I .Изобретение относится к микроби логической промьшшенности, а imeHHo к способу вьщеле}1ия дрожжей из куль туральной жидкости, полученной при культивировании дрожжей с использованием этанола в качестве источника углерода. Известны способы вьщеления микроорганизмов, предусматривающие добавление вспомогательных веществ ij Известен способ вьщеления дрожжей из культуральной жидкости, предусматривающий добавление в качестве вспомогательного вещества полиакриламида 2j . Известен также способ вьщеления дрожжей из культуральной жидкости, полученной при культивировании дро жей с использованием этанола в качестве источника углерода, предусматривающий добавление высокомолекулярного реагента в концентрации 0,001-0,01% к объему культуральной жидкости с последуклцим отделением осадка. В качестве высокомолекулярного реагента используйт фталоилжелатину. Процесс ведут при рН 34 га-. Недостатками известного способа являются недостаточно высокая скорость процесса и невысокая степень сгущення биомассы. Цель изобретения - ускорение процесса и увеличение степени сгущ ния биомассы дрожжей. Указанная цель достигается тем, что согласно способу вьщеления дрожжей из культзгральной жидкости, полученной при культивировании дрожжей с использованием этанола в качестве источника углерода, предусматривакяцему добавление высокомолекулярного реагента в концентрации 0,001-0,01% к объему кул туральной жидкости, в качестве высокомолекулярного реагента используют поли-1-э тил-2-метш1-5-винилпиридинийбромид, при этом процесс ведут при рН 6,5-9,0. Способ осуществляют следующим образом. Поли-1-этил-2-метил-5-винилпири д{1нийбромид (ПЭМВПБ)-твердое порошкообразное вещество белого цвета, получают его радикальной полимеризацией 1-этил-2 метил-5-винш1пиридинийбромида в растворе этило02вого спирта, причем инициатором служит перекись бензола, взятая в количестве 1% от содержания мономера. Мол. м. 3,. В дрожжевую суспензию, получен ную при выращивании дрожжей на питательной среде, содержащей в качестве источника углерода этанол, при перемешивании добавляют ПЭМВПБ в концентрации 0,00.1-0,01% к объеМУ суспензии. Затем раствором аммиака доводят рН до 6,5-9,0. Смесь быстро разделяется на два слоя. Время разделения 3-9 мин.. Сокращение времени разделения суспензии особенно важно, если отделение биомассы ведут непрерывно в проточных реакторах. Степень сгущения суспензии определяют по плотности осадка. Для определения плотности осадка йспользуют визуальный метод фрон.тальных границ. 15 мл дрожжевой суспензии с ПЭМВПБ при рН 3,8 заливают в специальный мерный цилиндр емкостью 25 мл. При разделении суспензии происходит образование четкой границь раздела между надосадочной жидкостью и осадком. По высоте межфазной границы судят о плотности осадка, вычисляя отношение высоты осадков. Высоту осадка в контроле (без добавления вспомогательного вещества) принимают за 1. После разделения суспензии биомассу дрожжей отделяют известным способом, например декантацией, сепарацией и т.п. Пример 1. Используют культуральную жидкость дрожжей Candida lambica, вьфащенных на синтетической питательной среде, содержащей 1% этанола. Содержание дрожжей в суспензии 20 г/л, рН 3,8. В культуральную жидкость добавляют при перемешивании водный раствор ПЭМВПБ, доводя его концентрацию до 0,01% к объему культуральной жидкости. Перемешивают в течение 2 мин и с помощью 25%-ного раствора аммиака устанавливают рН 9. Смесь разделяется на два слоя, степень вьщеления дрожжей 99%. Время разделения 3 мин. Плотность осадка относительно контроля 4. Время разделения суспензии с рН 9 в контроле 19 мин. Плотность осадка, полученного с добавлением

31

той же концентрации фталоилжелатины при огЛимальном для ее действия значения рН 2,1, время разделения при этом 8 мин.

Пример 2. Осуществляют по примеру 1 , но концентрация ПЭМВПБ составляет 0,001% к объему культуральной жидкости. Степень вьщеления дрожжей 99%. Время разделения суспензии 6 мин. Плотность осадка относительно контроля 4. Плотность осадка. Полученного с добавлением той же концентрации фталоилжелатины при олтимальном для ее действия

904

значении рН 2, время разделения при этом 9 мин.

Пример 3. Осуществляют ifp примеру 1, но процесс проводят при рН 6,5. Степень вьщеления дрожжей 99%. Время разделения суспензии 7 «ин. Плотность осадка относительно контроля 3,8. Время разделения суспензии в контроле 28 мин.

Таким образом, предлагаемый способ вьщеления дрожжей позволяет ускорить процесс вьщеления, а также увеличить степень сгущения суспензии, что упрощает и удешевляет

последующую сушку биомассы.

СПОСОБ БЬЩЕЛЕНИЯ ДРОЖЖЕЙ из культуральной жидкости, полученной при культивировании дрожжей с использованием этанола в качестве источника углерода, предусматривающий добавление высокомолекулярного реагента в.концентрации 0,001-0,01% к объему культуральной жидкости, отличающийся тем, что, с целью ускорения процесса и увеличения степени сгущения биомассы дрожжей, в качестве высокомолекулярного реагента используют поли-1-зтил-2-метил-5-винилпиридинийбромид, при этом процесс ведут при рН 6,59,0. (Л