Способ диагностики анаэробной стоматогенной инфекции Советский патент 1985 года по МПК A61K39/00 

t

00 О)

Изобретение относится к медицине, в частности, к стоматологии и клинической иммунологии.

Известен способ диагностики анаэробной стоматогенной инфекции путем выявления антител в сыворотке крови больных 1.

Однако известный способ недостаточно точен.

Цель изобретения - повышение точности диагностики.

Указанная цель достигается тем, что согласно способу диагностики анаэробной стоматогенной инфекции путем выявления антител в сыворотке крови больных, антитела в сыворотке больных выявляют с помощью реакции агглютинации с формалинизированными эритроцитами, сенсибилизированными Bacteriae Peptostreptococcus и при титре выше 1:60 диагностируют анаэробную стоматогенную инфекцию.

Способ осуществляется следующим образом.

Для диагностики анаэробной стоматогенной инфекции у больных, обратившихся по поводу лечения периодонтита, периостита, пародонтоза, берут 0,5-5 мл крови, готовят сыворотку, которую инактивируют при 56°С в течение 30 мин и разводят в лунках полистироловых пластин в нескольких рядах физиологическим раствором (рН 7,2) 1:10-1:640 в объеме 0,,5 мл. К каждому разведению сыворотки добавляют 0,050,1 мл 1--З -ного эритроцитарного диагностикума, который готовят заранее и хранят в виде 20%-ной взвеси до 1,5 г. при 4-5°С. Сенсибилизацию формализированных эритроцитов осуществляют экстрактом, полученным из анаэробных Микроорганизмов (на пример, Bacteriae Peptostreptococcus) по методу Лансфильд путем экстракции соляной кислотой в течение 15 мин при 90-95°С. Фиксацию молекул экстракта на поверхности эритроцитов осуществляют с помощью бифункциональных химически автивных соединений (например, глютаральдегида).

Для оценки специфичности и чувствительности способа используют следующие контроли.

Контроли сывороток: а) сыворотки кроликов, иммунизированных указанными выше антигенами анаэробных микроорганизмов (те же экстракты, которые применялись для сенсибилизации формалинизированных эритроцитов); б) сыворотки крови здоровых людей без признаков стоматогенной инфекции (доноры).

Контроли антигенов: а) с указанными выше сыворотками ставят реакцию пассивной гемаглютинации с несенсибилизированными формалинизированными эритроцитами; б) с этими же сыворотками ставят РПГА с формалинизированными эритроцитами, сенсибилизированные гетерологическими

антигенами (например, анаэробным стрептококком).

Пластинки осторожно встряхивают и оставляют при комнатной температуре На 3-4 ч после чего производят учет результатов. Реакцию оценивают по четырех крестовой системе {+ + + +, + + +, ++,+; ;). За титр антител принимают максимальное разведение испытуемой сыворотки, дающей четкую агглютинацию на + + + .

Для подтверждения иммунологических тестов у больных проводят -микробиологические исследования, направленные на диагностику анаэробной стоматогенной инфекции путем выделения чистых культур.

Указанными способами обследовано 69 больных периоститами, периодонтитами, пародонтозом. У 7б,25ё-обследованных обнаружены как к анаэробам, так и чистые культуры этих микроорганизмов. Причем, высокие-титры антител (1:60-1:320) наиболее часто выявлены к антигену анаэробного стрептококка.

При постановке РОГА с иммунной кроличьей сывороткой и формалинизированными эритроцитами, сенсибилизированными антигенами анаэробных микроорганизмов, титX ры составили в среднем 1:640-1:2400; с сывороткой здоровых людей (доноров и формалинизированными эритроцитами, сенсибилизированными антигенами анаэробных микроорганизмов, титры составили в среднем 1:10-1:20. С сывороткой крови больных периоститом, периодонтитом, пародонтозом и использовании несенсибилизированных фармалинизированных эритроцитов положительную - РПГА (феномен «зонтика) наблюдали в разведении сыворотки в среднем 1:5-1:30 в случаях использования формалинизированных эритроцитов, сенсибилизированных антигенами аэробных стрептококков положительные реакции выявлялись в титрах до 1:60.

Сравнительный анализ результатов постановки РПГА в опытных и контрольных группах позволил считать диагностическим титром агглютинацию эритроцитов, сенсибилизированных антигенами патогенных анаэробов, в разведении сывороток более 1:60.

Пример 1. Больная В обратилась по поводу лечения хронического периодонтита 2 зуба и дистрофически-воспалительной формы пародонтоза II степени в стадии обостроения Взято 2 мл крови, готовят сыворотку, которую анактивируют при 56°С в течение 30 мин. В трех рядах лунок полистироловых пластинок сыворотку крови разводят физиологическим раствором при рН 7,2 в объеме 0,2 мл 1:10-1:640. К каждому разведению добавляют 0,1 мл формалинизированных эритроцитов, обработанных глютаральдегидом, сенсибилизированных -солянокислым экстрактом анаэробных микро

СПОСОБ ДИАГНОСТИКИ АНАЭРОБНОЙ СТОМАТОГЕННОЙ ИНФЕКЦИИ путем выявления антител в сыворотке крови больных, отличающийся тем, что, с целью повышения точности диагностики, антитела в сыворотке больных выявляют с помощью реакции агглютинации с формалинизированными эритроцитами, сенсибилизированными Bacteriae Peptostreptococcus, и при титре выше 1:60 диагностируют анаэробную стоматогенную инфекцию.