Питательная основа для культивирования патогенных микроорганизмов Советский патент 1985 года по МПК C12N1/20 

219 М М

Изобретение относится к микробиологии.

Известны питательные основы для выращивания микроорганизмов, содержащие фермент 1тивный гидролизат крови животных - аминопептиды и кислот ный гидролизат крови животных - гидролизины OJ .

Однако эти основы сложны в исполнении, технологический процесс изготовления очень трудоемок и используются дорогостоящие реагенты.

Известно применение кислотного гидролизата сгустков крови крупного рогатого скота для получения гистидина и лизина 2 . Целью изобретения является использование отходов производства, охрана окружающей среды, снижение стоимости питательной основы и экономия ценного пищевого белка.

Поставленнаяцель достигается тем, что в качестве питательной основы для культивирования патогенных микроорганизмов применяют кислотньш гидролизат сгустков крови крупного рогатого скота, являющегося отходом производства гистидина и лизина.

Для получения питательной основы для вьфащивания микроорганизмов, например стафилококков, кищечной,синегнойной палочек и клебсиел сгустки крови крупного рогатого скота гидролизуют технический концентрированной соляной кислотой в соотношениях 1:1 при 110°С в течение трех суток. К концу гидролиза часть кислоты до 50%-ного загруженного количества отгоняют с водяным паром. Затем гидролизат нейтрализуют на анионите ЭДП-10п, доводя его до рН 5, осветляют активированным углем и фильтруют на катионите КУ-2 в аммонийной форме. При фильтрации на катионите сорбируются лишь аминокислоты основного характера - гистидин, лизин и аргинин, все остальные аминокислоты крови переходят в раствор гидролизата, кроме этого, выделяется хлористый аммоний пропорционально количеству сорбированных основных аминокислот.

Остаток гидролизата после сорбции на катионите гистидина и лизина имеет рН 6,3, сухой остаток 4,2%, содержит около 720 мг % общего и 580 мг % аминного азота, из этого на долю всех аминокислот, входящих

51577I

в состав крови, кроме основных,приходится 70 и ЗОД хлористого аммония, образовавшегося при NHij-катионитной обработке гидролизата. Аминокислоты 5 являются питательным веществом для микроорганизмов, а хлористый аммоний является необходимым дополнительным источником азота. Такой удачный состав позволяет использовать данный 0 гидролизат в качестве питательной основы.

Для культивирования патогенных микроорганизмов гидролизат подщелачивают 10%-ным раствором щелочи 5 до рН 7,4, разливают в бутылки и стерилизуют текучим паром 30 мин.

Питательная основа содержит 3,6-4,5% питательных веществ при следующем соотношении ингредиентов, Q вес.%:

Аспарагиновая

кислота0,438-0,514

Треонин0,196-0,236

Серин0,117-0,192

5 Глютаминовая

кислота0,224-0,263

Глицин0,217-0,299

Аланин0,373-0,416

Валин0,235-0,372

Метионин0,065-0,095

Лейцин0,394-0,431

Пролин0,050-0,090

Изолейцин 0,022-0,028 Тирозин0,043-0,070

Фенилаланин 0,130-0,147 Аммоний хлористьй 1)095-1,351

Для получения сравнительных данных ростовых свойств полученной питательной основы и применяемой в

микробиологической практике для выращивания патогенных микрооргани.змов аминопептида - панкреатического гидролизата сгустков крови, приготовлен панкреатический перевар Хоттингера из сгустков крови крупного рогатого скота. Из 200 г сгустков крови крупного рогатого скота получают 1,5 л питательного бульона, в котором устанавливают рН 7,4, разливают в бутылки и стерилизуют текучим паром 30 мин. В панкреатическом гидролизате сгустков крови крупного рогатого скота содержится 254 мг % общего азота и 153 мг % аминного

азота.

Для получения сравнительных данных выхода микробных тел проводят 18-часовое инкубирование микроорганизмов на кислотном гидролнзате сгустков крови крупного рогатого скота после выделения гистидина и лизина и панкреатического гидролизата сгустков крови крупного скота (перевар Хоттингера, см. таблицу). Из данных бактериологических исследований следует, что 1 л питательной основы - кислотного гидроли зата сгустков крови крупного рогатого скота, являющегося отходом про изводства гистидина и лизина, может заменить 3 л аминопептида - панкреа тического гидролизата (перевар Хоттингера) из сгустков крови крупного 774 рогатого скота тфи культигирспичнии патогенных.микроорганизмов. Из 300 кг сгустков крори крупного рогатого скота получают 400 л гидролизата, в котором, исходя из сухого остатка 4,2%, находится 1,68 кг сухого продукта, .причем 70% - 1,18 кг составляют аминокислоты крови, и 30% 0,5 кг - это минеральная часть, в основном хлористьпЧ аммоний. Использование предлагаемой основы позволяет расширить арсенал питательных основ из отходов производства, что, в свою очередь, снижает стоимость питательной основы и уменьшает загоязнение окружающей среды.

Применение кислотного гидролизата сгустков крови крупного рогатого скота, являющегося отходом производства гистидина и лизина, в каче стве питательной основы для культивирования патогенных микроорганизмов. (Л