Способ выделения свободного гистамина Советский патент 1985 года по МПК G01N33/48 

4

00

СП

О)

Изобретение относится к области биохимиии и медицины, в частности судебной медицины, и может быть использовано в сцециализированных лабораториях для определения свободного гистамина как в неповрежденной, так и в травмированной ткани для научно-исследовательских целей.

Целью изобретения является повышение точности и ускорение способа.

Способ осуществляют следующим образом.

Пример 1. Исследуемую ткань (0,5г кожи помещают в термостат для высушивания при +60°С. Для извлечения свободного гистамина из ткани в водную среду навеску высушенной кожи 125 мг разрезают скальпелем на большие кусочки (но не гомогенизируют и переносят в сухие химические пробирки, приливают 5 мл раствора солевой смеси, состоящей из

102 мл 0,154 М раствора NaCl, 3 мл, 0154 М раствора КС1,1 мл 0,154 М раствора MgSO и 20 мл 0,11 М натрийфосфатного буфера рН 7,6. Пробирку закрывают пробкой и помещают в термостат при -ЬбО° С на два

часа. Затем определяют количество гистамина в экстракте известным флюориметрическим методом и расчет на сухой вес ткани (например, в нмоль/г). Результат определения: 61,6 нмоль/г сухой ткани.

СПОСОБ ВЫДЕЛЕНИЯ СВОБОДНОГО ГИСТАМИНА путем экстракции пробы ткани физиологическим раствором, отличающийся тем, что, с целью повышения точности и ускорения способа, пробу предварительно высушивают в течение 18-20ч при 60-70°С,а экстракцию ведут солевой буферной смесью рН 7,6 при 60-70°С.