Способ определения биологической неэквивалентности химически идентичных лекарственных средств Советский патент 1985 года по МПК G01N33/15 

(О DO

сд х

С

Изобретение относится к биофармации, а именно к определению биологической неэквивалентности химически идентичных лекарственньгх средст и может найти широкое применение при контроле качества лекарственных средств в химико-фармацевтической промьтшенности.

Цель изобретения - повьшение чувствительности способа

Предварительно изолируют сердце лягушки. Опыт начинают с контрольного периода, во время которого записывают на кимографе работу желудочка сердца лягушки при нахождении в н,ем раствора Рингера, а затем заменяют его раствором Рингера, в котором растворен испытуемый образец лекарственного вещества. По кимограмме с учетом концентрации испытуемого вещества рассчитывают изме 1ение амплитуды и числа сердечных сокращений в минуту. При этом концентрации подбирают в различных диапазонах.

Определение биологической неэквивалентности образцов кофеина.

Испытуемый образец кофеина получают путем перекристаллизации кофеина, из насыщенного раствора ацетона.

Испытуемьш и стандартный образцы кофеина высушены при 80 С до постоянного веса. Оба образца кофеина соответствуют всем требованиям ст.172 ГФ X изд.,1968 г. и имеют чистоту 99,3 %.

Точные навески испытуемого и стандартного образцов кофеина в количестве 0,1000 г (каждая) помещают в мерные колбы вместимостью 50 мл и растворяют в воде..Объемы растворов доводят водой до метки, растворы, тщательно перемешивают.

Из исходных водных растворов испытуемого и стандартного образцов кофеина готовят их разведения раствором Рингера в 10, 100, 1000, 10 000 раз, получая концентрации ., 1 10-, 1 10, 1 10, 1 10 г/мл. Для этого берут по 1 мл вод|ных растворов испытуемого и стандартного образцов кофеина (концентра ция 2 10 г/мл), прибавляют по 1 мп раствора Рингера и получают растворы с концентрацией 1 - г/мл к 1 мл

раствора с концентрацией 1 10 г/мл прибавляют 9 мл раствора-Рингера и полу,чают раствор с концентрадаей 1 Ч б г/мп; к 1 мл- раствора с концентрацией 1 10 г/мл прибавляют 9 мп раствора Рингера и получают рас,твор с концентрацией 1 IOV/мл: к 1 мл раствора с концентрацией V 10 г/МП прибавляют 9 мл раствора Рингера

и получают раствор с концентрацией 1« 10 г/мл к 1 мй раствора с концентрацией 1 «10 г/мл прибавляют 9 мл раствора Рингера и получают раствор с концентраци2й 1 10 г/мл.

Определяют пороговые концентра1р1И растворов стандартного и испытуемого образцов кофеина, а также концентрации, вызываюш е изменение функциональной активности изолированного сердца лягушки.

Результаты определения биологической неэквивалентности образцов кофеина (среднестатистические из 5 определений) представлены в таблиЦе.

Из данных,представленных в таблице, следует, что пороговая концентрация испытуемого образца кофе|Ина составляет 1 10 г/мл, в то

время как у стандартнЬго образца кофеина эта величина равна 1 10 г/мл, т.е. смещение в 10 раз по сравнению со стандартным образцом кофеина; также смещена в 10 раз по сравнению со стандартным образцом кофеина

величина концентрации, вызывающей изменение функциональной активности сердца лягушки (1 - 10 I г/мл по сравнению с 1 10 г/мл).

Кроме того, испытуемьй образец кофеина вызьюает увеличение инотроп ного эффекта на 39,2 % по сравнению с контролем, а стандартный образец кофеина - только на 11,2 %.

Таким образом, согласно предлага.емому способу изменение функциональной активности изолированного сердца лягушки под влиянием испытуемого об разца кофеина относительно стандартного образца кофеина характеризует его биологическую неэквивалент- ность.

Пороговая

концентрация,

г/мл

Наличие

Инотропный

, эффект или отв %, относутствиебионеэксительновивалентконтроляности

СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ БИОЛОГИЧЕСКОЙ НЕЭКВИВАЛЕНТНОСТИ ХИМИЧЕСКИ ИДЕНТИЧНЫХ ЛЕКАРСТВЕННЫХ СРЕДСТВ с помощью биологического объекта, отличающийся тем, что, с целью повьшения чувствительности способа, в качестве биологического объекта используют изолированное сердце лягушки, на которое воздействуют исследуемым лекарственным средством в минимальной концентрации, вызывающей изменение функциональной активности изолированного сердца лягушки и различие данной активности в сравнении со стандартом свидетельствует о наличии биологической неэквивалентности . с S

Стандартный , образец 1 10

Испытуемый

f

1 10 образец

10

11,2+1,0

-е 39,2+1,0

10

есть