Способ диагностики хронического панкреатита Советский патент 1985 года по МПК A61B10/00 G01N33/48 

ел

QD М

... . -.. . -

Изобретение относится к медицине а именно к диагностике заболеваний поджелудочной железы.

Цель изобретения - повьшение точности способа диагностики хрони,ческого панкреатита.

Способ осуществляют следующим образом.

Для исследования берут 2 мл гепаризированной крови, которую центрифугируют при 1500 q в течение 15 мин. Надосадочную жидкость разбавляют 40%-ным раствором сахарозы в соотношении 1:1и наносят по 0,08 мл на колонки с 5,5%-ным полиакриламидным гелем. Электрофорез проводят в т рис -глициновом буфере рН 8,3 при 4°С, напряжении 400 В, силе тока 2,5 мА на каждую трубку. Длительность электрофореза 6090 мин. .

Для идентификации изоферментов готовят инкубационную смесь следующего состава: 0,1 М трис -НС1 буфер (рН 8,0) .19,8мл; 0,1 М NaCl 2 мл; НАД 12 мг; 0,1 М раствор фрукт.озо-1,6-дифосфат 0,2 мл; фосфоргли-церальдегяддегидрогеназа 0,24 мл (кристаллическая суспензия, содержащая 1600 мкг кристаллического белка); нитросиний тетразолий 1 мг/мл 5 мл; феназинметасульфат 1 мг/мл 0,5 мл. Время инкубации 90 мин при 37 С. После инкубации гели промыва.ют и помещают в денситометр для регстрации изоэнзимот раммы.

Для определения содержания диоксйацетонфосфата берут 1 мл плазмы, осаждают белки добавлением 0,1 мл 90%-ного раствора трихлоруксусной кислоты и центрифугируют при 1500 q в течение 10 мин. Надосадочную жидкость нейтрализуют. Определение содержания диоксиацетонфосфата проводят в 3 мл инкубационной среды состоящей из, мл: триэтаноламиновый буфер рН 7,6 (содержащий.1 мМ этиледиаминтетраацетата) 2,4; безбелковый нейтрализованный экстракт 0,5; ,.10 М , НАД 0,1 глицерофосфатдегидрогеназа (содержащей 1,5 мг белка в 1,0 мл) 0,01, Оптическую плотность измеряют на сйектрофотометрё прИ 340 нм в течение 1 ч. Расчет проводят с учетом микромолярной экстинкции для НАДН Определяют изоферментный состав фруктозодифосфатальдолазы и концентрации диокси-

95979

ацётонфосфата и при содержании .первой .анодной фракции фермента менее 0,15% и второй 40-66%, и при уменьшении концентрации диоксиацетон5 фосфата на 25-50% от нормы диагности. руют хронический панкреатит.

пример. Больной М.В.Г., 64 г., поступил в клинику .с жалобами на пристуцообразные .боли в верхней части живота с иррадиацией в спину, тошноту, вздутие живота, кашицеобразный зловонный кал на фоне запоров и общую слабость. При поступлении кожные покровы

15 с землистым оттенком, склеры субиктеричны, язык сухой, обложен-белесоватым налет01М. Живот мягкий, пальпация существенно болезненна на проекции поджелодочной железы, болевые зоны и точки Шоффара - Риве,

Губергрица - Скульского, Мейо - Роб.сона, Дежардена положительны,-пальпация по Гротту положительна,, особенно справа.

25 Результа.ты лабораторно - инстру- ментальных исследований, проведенных в динамике при поступлении и в процессе .лечения: СОЭ 33 - 36 мм/ч; лейкоциты 12,800; сероамилаза 112 30. 84 - 22 мг/ч мл, уроамилаза 752 240-32 мг./ч мл; щелочная фосфатаза - 1,7 - 1,13 мкмоль/ч.мл, АлАТ 4,2 0,41, АсАТ 2,9 - 0,35 мкмоль/ч«мл, ГТП 4,9. Билирубин общий.24 21.ммоль/л, прямой 6-4, а непрямой 18 - 17 ммЬль./л; комбинированное интрадуоденальное определение амилолитической и протеолитической активности - понижение амилолиза и протеолиза; ЭРХПГ - фатеров сосок конусчовиднрй формы, размерами до 0,4 см в диаметре с .точечным устьем. Слизистая БДС гиперемированд, бархатистая с ворсинками,, канюляция легкая, при введении 76%-нЬго раствора верографина (5 мл) контрастируется главный панкреатический проток, протоки второго и третьего порядка. Отмечается резкая деформация и расширение главного протока до

0,8-0,9 см в области тела - до 0,6 см, в области хвоста до 0,3 см. Отмечается также резкая деформация и расширение протоков второго и .третьего порядка. Эвакуация контрастного вещества протоков железы резко замедлена. Заключение: картина хронического паниллита, хронического панкреатита., 3 Сканирование поджелудочной железы селен-метирнином:слабое контрастирование, размытость контуров, замедление накопления. В клинике поставлен диагноз: хронический панкреатит в стадии .обострения.. 1195979 Определение изоферментного спект ра фруктозодифосфальдолазы пока- зало, что процентное содержание первой фракции составляет 10,8 (против j 20,,0% в контрольной группе), второй фракции - 64,8 (против 29,33+ 1,9 в контрольной группе). .

СПОСОБ ДИАГНОСТИКИ ХРОНИЧЕСКОГО ПАНКРЕАТИТА путем биохимического исследования крови, отличающийся тем, что, с целью повышения точности способа, в плазме крови с помощью диск-электрофораза .в полиакриламидном геле при рН 8,3 определяют иэоферменты фруктозодифосфатапьдолазы, определяют процентное содержание первой и второй анодных фракций, а также концентрацию диоксиацетонфосфата и при содержании первой анодной фракции менее 15% и второй - 40-66% и уменьшении концентрации диоксиацетонфосфата на 25-50% по сравнению с нормой диагностируют хронический р панкреатит.Э