Способ получения тилозиновых производных Советский патент 1986 года по МПК C07H17/08 

I .

Изобретение относится к способу получения новых тилозиновых произ:- водных общей формулы

-сно о

-NiGH H

.о Л 2CH;iCO О

щ

О

где

i,«гатом водорода или гидрок- сильная группа;

N - (R, - низгруппа (Кз)г

ший алкил или две Rj группы могут быть объединены между собой с образованием алкиленовой группы -(CHj)- с числом углеродных атомов П 3-6) или 2-меркаптопиридинов ая группа

обладающих высокоэффективным противогрибковым действием.

Цель изобретения - получение новых тилозиновых производных - высокоэффективных антибиотиков, облада- кицих большей противогрибковой активностью, чем природный аналог тилозии. 1

Пример 1. 23-0-Пирролидиноацетилмикаминозилтилонолид.

а) В 34 мл безводного пиридина

ft

растворяют 3,4 г 2 ,4 -ди-0-ацетил- микаминозилтилонолиддиэтилацеталя,

после охлаждения раствора до -20 С и постепенного добавления в.него 1,08 г хлорацетилхлорида смесь перемешивают в течение, 3 ч, за гем реакциониую смесь выливают в 100 мл насыщенного водного раствора бикарбоната натрия и подвергают двукратной экстракционной обработке с использованием по 100 мл бензола, .Экстракт промьшают 100 мл воды, а затем 100 мл насьш енного водного раст вора бикарбоната натрия,высушивают н безводным сульфатом магния и под понижениьм давлением отгоняют бензол. Полученный таким, образом масло подобный коричнево-черный продукт очищают хроматографической обработкой в колонке с использованием . 400 мл силикагеля и элюента, которы включает бензол и ацетон в соотношении 2:1, в результате чего полу12326.2

чают 3,0 г желто-коричневого аморфного порошка 23-0-хлорацетил-2 -4 - ди-о-ацетйлмикамино эт.илтилоно лидди- этилацеталя.

5 б) 400 мг вьшеуказанного продукта растворяют в 10 мл ацетонитрила и после добавления в раствор 69,6 мг пирр Олидина смесь перемешивают в течение 3 ч при комнатной температуO ре. Под пониженным давлением отгоняют ацетонитрип, бстаток растворяют в 50 мл бензола, промьшают 20 мл насыщенного водного раствора бикарбоната натрия, 20 мл воды, а

s затем 20 мл Насыщенного водного раствора хлористого натрия, высушивают над безводным сульфатом магния и под пониженным давлением отгоияют бензол. Полученный таким образом

0 остаток растворяют в 15 мл метанола после чего раствор оставляют стоять в течение 20 ч при комнатной температуре. Затем под пониженным давлением отгоняют метанол, остаток

5 растворяют в смеси 7 мл ацетонитри- ла с 14 мл 0,1 и. соляной кисло-: ты, а после выдержки ра створа в спокойном состоянии в течение 2 ч при комнатной температуре раствор подQ щелачивают добавлением в него бикарбоната натрия и подвергают дву- кратиой экстракционной обработке с использованием по 20 мл хлороформа. Хлорофорйовые экстракты рбъедин яют между собой, промывают 20 мл воды,

а затем 20 мл насыщенного водного раствора хлористого натрия, высушивают над безводным сульфатом магния и под пониженным давлением отгоияют хлороформ, в результате чего получают черно-коричневую карамелепо- добную массу. Полученный продукт очищают хроматографической обработкой в колонке с использоваиием 50 мл силикагеля и элюента, который включает хлороформ, метанол и концентрированный водный раствор аммиака в соотношении 15:1:0,1, в результате чего в виде желтоватого аморфного порошка получают

0 103,8 мг 23-0-пирроилидииоацетилми- каминозилтилонолида.

ЯМР (CDCf,), mg: 1,82 (ЗН, s, ), 2,51 (ЗН, s, Шег), 3,36 (2К, s, .-OCOCH N), 4,10-4,40

5 (ЗН, m, Н„, -CH.jOCOCH2N), 4,94

(IH, m, H,y), 5,80 (IH, d, Н„), , 6,30 UK, d, H,o), 7,32 (IH, d. Ну ), 9,71 (IK, s, -CHO).

0

3

ИК (бромисть й калий) (): 3 430, 2 950, 2 У10, 2 860, 1 715, 1 670, 1 620, 1 585.

Масс-спектр (т/z): 708 (), 639 (М-69), 564 ()., 534 (м -174 , 518 ().

Пример 2. 23-0-Гексамети-, лениминоацетиламинозилтилонолид.

В соответствии с примером 16 с использованием 400 мг 23-0-хлорацетил-2 4 -ди-0-ацетилмикаминозилтилонолидди этилацеталя и 97 мг гексаметиленимина в виде желтоватого аморфного порошка получают 96,9 мг 23-и-гексаме- -тилениминоацетиламинозилтилонолида.

ЯМР (CDCl,)S, мо: 1,84 (ЗН, s, ,-), 2,52 (6Н, S, Шег), 3,43

Ш, S, COCH2 N 4,10-4,40 (ЗН,

Ш

1

CH20COCH2N)4,98 аи

т, Н,5), 5,82 (IH, d, Н,,), 6,32 tlH, d, Н,о), 7,33 (IH, d, Н„ ), 9,73 (IH, s, -СНО).

ИК (бромистый калий) (): 3 420, 2 950, 2 910, 2 860, 1 715, 1 670, 1 620 и 1 585.

Масс-спектр (.m/z): 736 (.М), 718 (), 639 (), 592 (м -144), 562 (), 546 ().

Пример 3. 23-0-(11иридин- 2-тионил)-ацетилмикаминозилтилонолид

В 10 мл ацетонитрила растворяют 65,3 мг 2-меркаптопиридина, а затем в приготовленный раствор добавляют 28,3 мг 50%-ного гидрида натрия. Когда прекращается выделение водорода, в смесь при комнатной темпера- туре добавляют 400 мг 23-0-хлораце- тил-2 ,4 -ди-0-ацетилмикаминозил- тилонолиддиэтилацеталя и конечную смесь перемешивают в течение 1ч. Далее под пониженным давлением отгоняют ацетонитрил, остаток растворяют в 50 мл бензола, приготовленный , таким образом раствор промьшают 20 мл насыщенного водного раствора бикарбоната натрия, 20 мл воды, а затем 20 мл насьпценного водного раствора хлористого натрия, высушивают над безводньм сульфатом магния и под пониженным давлением отгоняют бензол. Полученный остаток растворяют в 15 мл метанола и после выдержки в спокойном состоянии в те чение 20 ч при Комнатной температуре под пониженном давлением из раствора

J23264

отгоняют метанол. Остаток растворяют в смеси 7 мл ацетонитрила с 14 мл 0,1 н. соляной кислоты и раствор оставляют стоять в течение 22 ч при

5 комнатной температуре, подщелачивают добавлением в него бикарбоната натрия и подвергают двукратной экстракционной обработке с использованием по 20 мл хлороформа. Полу- 0 ченный экстракт промьшагат 20 мл воды, а затем 20 мл насыщенного водного раствора хлористого натрия, сушат над безводным сульфатом магния с последующей отгонкой под .пониженным

J5 давлением хлороформа, в результате чего получают черно-коричневую кара- мелеподобную массу. Этот продукт очищают хроматографической обработкой в колонке с использованием

мл силикагеля и элюента, который включает хлороформ, метанол и концентрированный водный раствор аммиака в соотношении 15:1:0,1, в результате чего получают желтова-

25 тый аморфный порошок 23-0- пиридин- 2-тионил)-ацетилмикаминозилтилоно- лида.

ЯМР (CDCJ,), мд: 1,79 (ЗН, s,H,,), 2,52 (6Н, S, Шег), 4,00 (2Н, s,

30 OCOCHjS-), 4,10-4,40 (ЗН, m, Н„ - CHjOCO-), 4,93 (IH, m, Н,), 5,66 (IH, d, Н„), 6,28 (IH. d, H,o), 7,20 (IH, d, Н„ ), 6,90-7,40 (2H,s,

H

.хН.I

I J )7,40-7,70(1Н,ш,

С . :

n I, ««.

73 UH, s.

8,50 UH

CHO).

ИК (бромистый калий) () : 3 420, 2 950, 2 910, 2 860, 1 715, 1 670, 1 620, 1 585 и 1 575. Масс-спектр (m/z): 748 (М),

637 ), 597 (), 558 ().

Пример 4. 23-0-Диметилами- ноацетил-4 -деоксимикаминозилтило- нолид.

в 20 мл безводного пиридина растворяют 2 г 2 -0-ацетш1-4 -деокси- микаминозилтилонолиддиэтнпацеталя, после охлаждения раствора до С и постепенного добавления в него

648,5 г хлорацетилхлорида смесь перемешивают в течение 2 ч при указанной температуре. Далее реакционную смесь добавляют в 100 мл

насыщенного водного раствора бикарбоната натрия и подвергают двукрат ной экстракционной обработке с использованием по 100 мл бензола. Экстракт промывшот 10 мл воды, а затем 100 мл насыщенного водного раствора хлористого натрия, высушивают над безводньм сульфатом магни а затем под пониженным давлением отгоняют бензол.

Полученный таким образом черно- коричневый маслоподобный продукт подвевгают хроматографической очистке в колонке с использованием 300 мл силикагеля и элюента, который включает бензол и ацетон в соотношении 2:1, в результате чего получают 1,56 г желто-коричневого аморфного порошка 23-0-хлорацетил- 2 -0-ацетил-4 -деоксимикаминозил и6 лиддиэтилацеталя.

В 40 мг ацетонитрила растворяют 1,5 г вышеуказанного продукта и после добавления в раствор 349 мг диметиламина смесь перемешивают в течение 2 ч при комнатной температуре. Ацетонитрил отгоняют под пониженным давлением, остаток растворяют в 200 мл бензола и приготовленный раствор промьшают 100 мл насыщенного водного раствора бикар- боцата натрия, 100 мл воды, затем 100 мл насыщенного водного раствора хлористого натрия, высушивают над безводным сульфатом магния, после чего под пониженным давлением отгоняют бензол. Полученный таким образом остаток очищают хроматогра- фической обработкой в колонке с использованием 200 мл силикагеля и алюента, который включает б ензол и ацетон в соотношении З:, в результате чего получают 900 м желто-коричневого аморфного порошка. В 30 мл метанола растворяют 850 мг полученного таким образом порошка, а после вьщержки раствора в течение ночи при комнат ной температуре в спокойном состоянии под пониженным давлением из нег отгоняют метанол. Полученный остаток растворяют в смеси 32 мл 0,1 н. соляной кислоты с 16 мл ацетонитри - ла и раствор оставляют стоять в течение 2 ч при комнатной температуре, подщелачивают добавлением в нег бикарбоната натрия, а затем подвергают трехкратной экстракционной об20 2,24

15

(6Н, .).

работке с использованием по 50 мл хлорофо1 4а. Хлороформовые экстракты объединяют между собой, промывают 50 мл воды, а затем 50 мл насыщенно- 5 го водного раствора хлористого натрия и высушивают над безводньм суль- фатом магния. Далее хлороформ отгоняют под пониженным давлением и полученный остаток очищают хромато- 10 графической обработкой с использованием 150 мл силикагеля и элюента, который включает в себя хлороформ, метанол и концентрированный водный раствор аммиака в соотношении 15:1: 0,1, в результате чего в форме желтоватого аморфного порошка получают 620 мг 23-0-диметиламиноацетш1-4 - цеоксимикаминозилтилонолида,

ЯМР(СВСГ,)8, мд: 1,77 (ЗН, s,H.j)

(6Н, S, OeOCHjNMe J, 2,32 S, -NMej), 3,16 (2К, s, -ОСОСН 4,08-4,30 (ЗН, т, Н п-СНгОСОСН) 4,90 (1Н, га, К,), 5,77 (IH, d; Н Ь 6,28 СШ, d, Н,о), 7,29 (IH, d, Н„),

25 9,68 (IH, S, -СНОЬ

ИК (бромистый калий) ( : 3 440, 2 950, 2 920, 2 860, J 720, 1 670, 1 620 и 1 585.

Масс-спектр (m/z) : 666 (.М ), 633

0 (), 538 (), 492 (). Пример 5. 23-0-Пирролидино- ацетил-4 -деоксимикаминозилтилонолид.

В 20 мл ацетонитрила растворяют 773,5 мг 23-0-хлорацетил-Й -0-ацетил5 4 -деокснмикаминозилтилонолщщиэтил- ацеталя, полученного по примеру 4 в качестве промежуточного продукта, и после добавления в этот раствор 284 мг пирррлидина при комнатной

0 температуре смесь перемешивают в течение 3ч. Ацетонитрил отгоняют под пониженным давлением, полученный остаток растворяют в 70 мл хлороформа, приготовленный раствор про5 мывают 30 мл насыщенного водного

раствора бикарбоната натрия, а затем 20 мл высушивают над безводным сульфатом магния, после чего под пониженным давлением отгоняют

Q хлороформ. Полученный остаток раство ряют в 36 мл метанола и после выдержки раствора в течение 20 ч при комнатной температуре в спокойном состоянии под пониженньм давлением отгоняют метанол. Остаток растворя5 ют в смеси 30 мл 0,1 н. соляной

кислоты с I5 мл ацетонитрила, раствору дают постоять в течение 2 ч при комнатной температуре, подщелачивают добавлением бикарбоната натрия и подвергают трехкратной экст-- .ракционной обработке с использовани ем по 20 мл хлороформа. Экстракты объединяют между собой, промывают 20 мл воды, а затем 20 мл насыщенного водного раствора хлористого натрия и высушивают над безводным сульфатом магния. Под пониженньм давлением отгоняют хлороформ и полученный остаток очи1цают хроматогра- фической обработкой в колонке с использованием 150 мл силикагеля и элюента, который .включает хлоро- форм, метанол и концентрированный водный раствор аммиака в соотношении 14:1:0,1, в результате чего в виде желтоватого аморфного порошка получают 220 мг 23-0-пирролидиноацетш1- 4 - деоксимикаминозилтилонолида

ЯМР (CDC1,)5, мо: 1,80 (ЗН, s, Н„), 2,27 (е)Н, S, -Шег), 3,6 (2Н,

О- .. 25 ,4,10-4,40 (2Н, т, 7,70 (IH, т.

(H,,-CHj . 4,94 (IH,

in, , 5,83 (IH, d. И,,), 6,33- (IH, d, H,o), 7,33 CIH, d, Н„ ), У,74 (IH, s, CHO).

ИК (бромистый калий) ():. 3 430, 2 950, 2 920, 2,860, 1 720, 1 670, 1 620 и I 585.

Масс-спектр (m/z): 692 (М) , 622 (), 563 (), 533 (), ().

П р.и м е р 6. 23-0-(ПириДин- 2-тионил)-ацетил-4 -дезоксимикамиНОЗШ1ТИЛОНОЛИД.

В соответствии с примером 3 с ис- пользованием 1 г 23-0-хлорацетил- 2 -О-ацетил-4 деоксимикаминозил- тилонолиддизтилацеталя, полученного в качестве .промежуточного продукта согласно примеру 5, и 174 мг 2-меркаптопиридина в виде лимонно- желтого аморфного порошка получают 311,8 мг 23-0-(пиридин-2-тионил)- ацетш1-4 -дезоксимикаминозилтилоно- лида.

ЯМР (CDCfj), мд: 1,74 (ЗН, s.

2г), 2,28 (6Н, S, -NMej), 3,97

Н

(2Н, S, -OCOCHjS-), 4,10-4,30

(ЗН, т, Н

„-CH OCOCHjS-), 4,93

ан, т, Н,,), 5,66 (IH, d, Н„), 6,26 (IH, d, Нд,), 7,20 (1Н, d, ,

7,90-7,30 (2Н, m,;H-s,,4030

(IH, m

.)9

73 (IH, s, -CHO).,

ИК (бромистый калий) () : 3430 2 950, 2 920, 2 860, 1 720, I 670, 1,585 и 1 575.

Масс-спектр (m/z): 732 (М), 714 (), 621 (), 558 ().

Антимикробная активность(М1С г/мл) тилозиновьрс производных, полученных по предлагаемому способу, приведена в таблице.

B.Subtilis АТСС 6633 B.cereus

Staph. aureus АТСС 6538Р

КС-11

0,20,781,56 0,390,78

iO,20,39I,56 0,20,78

О,ЗУ0,780,78 0391,56

0,390,7а0,78 0,391,56

Мик pooprанизм

ii

226

Staph.epiderm. RD 866 0,2 0,39 0,,2

Составитель Ю.Белоусов Редактор И.Рибченко Техред Л.МЙкеш Корректор Е.Сирохман

653/62

Тираж 343 Подписное ВНИИПИ Государственного комитета СССР

по делам изобретений и открытий 113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д.А/5

Филиал 1ШП Патент, г.Ужгород, ул.Проектная,4

121232610

Продолжение таблицы

Производное тилозина Тилозин по примеру

:iii

0,39 0,78 0,78 0,39

0,2 0,39 0,,2

1,56 1,56