Способ получения бициклических соединений или их гидрохлоридов Советский патент 1986 года по МПК C07D471/04 

Изобретение относится к способу получения бициклических соединений общей формулы

Ъ1

(ОС1%) S(0)

(О

где п - о,1 или 2;

m - 1 или 2,

Или их гидрохлоридов, обладающих по- пожительной инотропной актив.н.остыо.

Целью изобретения является создание на основе известных методов способа получения новых соединений, обладающих ценными фармакологическими свойствами,

Получение исходных соединений,

а) 2-(2,4-Диметоксифенйл)-1Н-ими- дазо(4,5-с)пиридин,

Смесь 2,5 г 2,4-диметоксибензой- ной кислоты и ,5 г 3,4-диаминопири- дина измельчают в тонкий«порошок и добавляют по частям к 50 мл хлорокис фосфора при перемешивании. Реакционную смесь перемешивают и кицятят с обратным холодильником в течение 2,5 ч, после чего избыток хлорокиси фосфора удаляют в вакууме. Остаток охлаждают, добавляют к-нему 20 мл воды и доводят рН до значения, равного 7, посредством гидрата окиси аммония, получая в результате свет-- ло-желтый твердый остаток, который собирают, промывают водой и сушат. Указанный твердый продукт дважды пе рекристаллизовывают из водного раствора этанола, получая кристалличес кде веществе кремового цвета, имеющее температуру плавления 195-198 С

Рассчитано, %: С 65,88; Н 5,09; N 16,47.

Найдено, %:- С 65,70; Н 5,15; N 16,05.

Структура продукта подтверждается данными ЯМ и масс-спектра,

Аналогично способу получения соединения а), получают

б)дигидрохлорид 2-(2-метокси-4- метилтиофенил)-IН-имидазо(4,5-с)пиридин, т.пл. 205-206 С.

в)дигидрохлорид 2-(2,5-диметокси- фенил)- Н-имидазо-(4,5-с)пиридин.

2,5-Диметоксибензальдеги,ц, морфо- лин и серу нагревают в течение 3 ч при 120°С, Твердую смесь при этом расплавляют, получая жидкость. Реакционную смесь охлаждают и растворяют .в горячем метаноле. Метанольный рас

419932

твор охлаждают, отфильтровывают обра- з тащийся твердый остаток (тиоморфо- лид) и сушат его. Указанный тиомор- фолид нагревают с обратным холодиль5 НИКОМ в течение примерно 2 ч в ацетоне с йодистым метилом (1,2 эквивалента). Затем ацетон удаляют в вакууме, получа-я вязкое коричневое масло (тио- морфолидметиодид), которое смешивают

10 с 3,4-диаминопиридином в этиленглико- ле и нагреварот полученную смесь при 120 С 3 течение 2 ч. Затем реакционную смесь разбавляют водой и отфильтровывают полученный твердый продукт,

К) суспендируют его в воде и подщелачивают с помощью 0,88 аммиака. Твердый продукт отфильтровывают, сушат и переводят в указаннзто в заголовке соль (дигидрохлорид), имеющую, температуру

30 плавления 188--190®С (с разложением).

г)Гидрошорид 2-(254-диметокси- -3-метилтиофепил)-Ш-имидазо(4,5-с) пиридина.

Указанное в заголовке соединение 25 получают аналогично соединению в). Продукт имеет температуру плавления 205-207°С.

д)Дигидрох:аорид 2-( 3-метилтио- фенил)-iН-имидазо(4,5-с)пиридина,

30 . .123,5-12.5 С, получают в соответствии со следующей методикой.

Диаминопиридин диспергируют с соответствующей замещенной бензойной кислотой и смесь по частям добавляют

2 к полифосфорной кислоте. Получаю - щуюся реакционную смесь нагревают при 1-80 С в течение приблизительно 3 ч, Охлажденн:рэ реакционную смесь выливают на лед и выпавшее в осадок

д|-| твердое вещество отфильтровывают, суспендируют в воде и нейтрализуют О ,,88 аммиаком. Полученное таким образом твердое вещество отфильтровывают, сушат и превращают в хлористо4-5 водородную соль,

е)Дигидрохлорид 2-(З-метилтио-4- метоксифенил)1Н-имидазо(4,5-с)пиридина ,

З-Метрштио-4-метоксибензойную кис- оту (полученную диазотированием 3- амино 4-метоксибензойной кислоты с последующей обработкой метилмеркап- тарюм) суспендзяруют в сухом толуоле и тионилхлорид (1,1 эквивалента) мед- ленно добавляют к суспензии. Смесь кипятят с обратным холодильником в течение 3,5 ч. Тонкослойная хроматография показывает, что реакция завер3

шеиа. Растворитель удаляют в вакууме и получают темно-коричневый остаток

Полученный вьше хлора нгидрид кислоты суспендируют в минимальном коли честве сухого эфира и по частям до- бавляют к суспензии 3,4-диаминопи- ридина (1 эквивалент, экв.) в сухом пиридине и триэтиламйне. Получающуюс смесь кипятят с обратным холодильником в течение 5 ч. Тонкослойная хро- матография показывает, что реакция завершена.

Получение цел ё вых продуктов.

Пример 1. 2-(2-Метокси-4-ме- тилсульфонилфенил)-1Н-имидазо (4,5- -с)пиридин.

К смеси 20 мл уксусной кислоты, 6 мл воды и 2,5 экв 30% перекиси .водорода при перемешивании при комнатной температуре добавляют по час- тям 1,5 г соединения, полученного согласно соединению б). Реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 2 и оставляют на ночь при 4 С. Данные тонкослойной хроматографии указывают на то, что реакция закончена. Полученную реакционную смесь выливают в 25 мл воды подщелачивают 0,88 аммиаком и экстрагируют хлороформом. Органический эк- стракт сушат, обесцвечивают и упаривают в вакууме, получая пену, которую кристаллизуют из смеси этилацета та и ацетона, выделяя в результате указанное в заголовке соединение, -имеющее температуру плавления 202ZOA C.

в альтернативном варианте указанное в заголовке соединение получают следующим способом.

К перемешиваемой охлаткденной суспензии соединения б) (18 г) и 1 экв ацетата.натрия в ледяной уксусной кислоте добавляют 3,2 мл брома с такой скоростью, чтобы температура поддерживалась на уровне ниже 5 С. Реакционную смесь выливают в 100 г колотого льда и доводят рН до 9 посред- . ством 0,88 аммиака. Полученный раствор (содержащий некоторое количество коричневого твердого продукта) насыщают хлористым натрием и экстрагируют 4 порциями по 300 мл хлороформа . Объединенные экстракты в хлороформе сушат, обесцвечивают животным углем и упаривают в вакууме, получая пену, из которой после растирания с эфиром эыделяют указанный в заголовке продукт.

- . Q

5

20 25 ,Q

5

0

0

5

9934

Пример 2. Гидрохлорид 2-(2- метилсульфинил-4-метоксифенил)-1Н- имидазо(4,5-с)пиридина.

Используя способ, аналогичный примеру I, и исходя из 2-(2-метилтио-4- метоксифенил)-1Н-имидазо(4,5-с)пиридина, получают аналогичным образом указанное в заголовке соединение.

П р и м е р 3. Гидрохлорид 2-(2- метокси-4-метилсульфинилфенил) имидазо(4,5-с)пиридина.

Соединение, аналогично примеру 1, суспендируют в эфире и пропускают через полученную суспензию сухой газообразный хлористьш водород в течение 2 мин. Нерастворимое твердое вещество отфильтровывают и сушат, получая в результате указанное в заголовке соединение в виде белого твердого продукта, имеющего температуру плавления 153-155 С.

П р и м е р 4. 2-(2,4-Диметокси- -3-метилсульфинилфенил)-1Н-имидазо ( 4 , 5-с ) пиридин .

Вьш1еуказанное соединение получают из соединения а) по способу, аналогичному примеру 1.

П р и м е р 5. 2-(2-Метокси-4-ме- тилсульфонилфенил)-1Н-имидазо(4,5-с)- пиридин и его гидрохлорид.

2-(2-Метокси-4-метилтиофенил)-1Н- имидазо(4,5-с)пиридин по частям до- . бавляют -в перемешиваемый раствор 30%-ной перекиси водорода в ледяной уксусной кислоте и воде. Светло-коричневый раствор перемешивают при 70°С в течение 3 ч. По данным тонкослойной хроматографии реакция завершена. Реакционную смесь упаривают под вакуумом, для удаления растворителей и остаток очищают хроматографиро- вонием на колонке с выделением вьш1е- указанного свободного основания, т.пл. 225-227 С. Полученное свободное основание суспендируют в метаноле и :через раствор продувают сухой газооб- разный хлористый водород. Твердое соединение .отфильтровывают, сушат и получают указанный гидрохлорид с т.пл. 221-223 С (с разложением).

П р и м е р 6. 2-(3-Метилсульфи- ; нил-4-метоксифенил)- Н-имйдазо(4,5- -с)пиридин.

Соединение, полученное по примеру г), окисляют с использованием перекиси водорода (2 экв) аналогично по примеру Г. Бьш1еуказанное соединение получают в виде белого твердого вещества с т.пл. 227-229 с.

Пример. Гидрохлорид 2-(3 метилсульфинилфенил)-1Н-имидазо(4,5- -с)пиридина.

Соединение, полученного аналогично составу д) , окисляют так же, как по примеру 3, с получением соединени в виде белого твердого.соединения с т.пл. 250-252° С,

Следующие примеры иллюстрируют фармацевтические рецептуры по предлагаемому изобретению, в которых активное соединение может представлять собой любое соединение определенной вьше формулы (О, например, 2-(2-Ме- токси-4-метилсульфинилфенил)-1Н-имидазо ( 4 ,5-с)пиридин. Примере. Рецептура таблеток. Активное соединение (в форме

основания)100 мг

Лактоза100 мг

Натриевая соль гиколята крахмала20 мг ПоливинилпирролиДон . 4 мг Стеарат магний2 мг

226 мг

Смешивают активное соединение с лактозой и натриевой солью гликолята крахмала. Смесь гранулируют раствором поливинилпирролидона в 50%--ном водном спирте.. Сушат гранулят и смешивают со стеаратом магния. Прессуют таблетки, имеющие средний вес 226 мг. П р и м е р 9. Рецептура капсул. Активное соединение (в форме

основания)100 мг

Лактоза100 мг

.Крахмал30 мг

Метилцеллюлоза 4 мг Стеариновая киелота4 мг

238 мг ;

Активное соединение смешивают с лактозой и крахмалом. Гранулируют раствором метилцеллюлозы в воде . Сушат и смешивают со стеариновой кислотой 238 мг. Помещают в плотную желатиновую капсулу.

Пример 10. Инъекция IV (лио- фильно высушенная).

10

i;i

20

25

м м 30

35

40

45

50 55

Ар:тивное соеди- .нение (гидрохлорид) Маннит

Вода для инъекций до А1 ;тивное

50 50

мг мг

2 мл

соединение растворяют в воде для инъекций. Раствор стерилизуют пропусканием через мембранный фильтр, имеющий размер пор 0,2 мк, собирают фильтрат в стерильный стеклянный приемник. Переносят в стерильные стеклянные ампулы емкостью 2 мл в асептических условиях и защищают алюминиевыми уплотнениями. Перед введением состав инъекций разбавляют добавлением удобного объема воды для инъекций или с терильного солевого раствора, если для введения требует- . ся больший объем.

Пример 11. Инъекция IV (ампула для многократной дозы).

Активное соеди- ..нение (гидрохлорид)250 мг Бензиловый

спирт 0,075 мл

Вода для инъкций 5 мл

Бензиловый спирт растворяют в воде для инъекций. Добавляют и растворяют активное соединение. Доводят до нужного объема водой для инъекций. Пропускают через мембранный фильтр с диамбгтром пор 0,2 мк, собирают фильтрат в стерильный стеклянный приемник. Наполняют стерильные стеклянные ампулы. Закрывают ампулы стерильными резиновьии крышками и герметизируют алюминиевыми уплотнениями .

П р и м е р 12. Суппозиторий - Соединение (в форме основания)100 мг Суппозиторная основа (Masse, Ester iniim с) до 2 г Расплавляют суппозиторнуш основу при 40°С. В расплавленное основание вводят активное соединение в форме мелкоизмельченного порошка и перемешивают до гомогенного состояния. Отливают смесь в подходящие формы, по 2 г яа форму, и оставляют стоять. Биологическая активность. Определение инотропной активности in vitro.

7

Самцов морских свинок (Halls 275- 350 г),- имеющих свободный доступ к пище и воде, забивают ударом по голове. Сердце быстро удаляют-и промы- вают раствором Кребса-Генеслейта, содержащим -адреносепторный нист каразолол ( М) и при 3 4 °С продувают газовой смесью95% 02+5% 00. Сердце помещают в чашку Петри/ содержащую тот же буфер, поддерживае мый при постоянной температуре (34°С и пропусканием через рассечение. Для каждого, рассечения используют свежий буфер и после использования буфер выбрасывают. Из каждого сердца ис- польз уют один капиллярный мускул правого желудочка, конец сухожилия привязывают к крючку из нержавающей стали, -а нижний конец перевязывают, выводят из стенки желудочка и прикреп- ляют к перспексному зажиму и, таким образом, ткань находится в контакте с платиновым игольчатым электродом. Крючок из нержавеющей стали подвешивают к датчику Grass F т. 0,3 кото- рый записывает изометрическое натяжение. Препарат помещают в емкость для органов (сделанную из пирекса), которая содержит буфер, продуваемый газовой смесью 95% 02: 5% СО и под- держиваемый при температуре 34 С. На препарат накладывают растягивающую нагрузку, равную 500 мг. Стимуляцию осуществляют прямоугольными импульсами продолжительностью 1 не с частотой 1,5 Гц, при напряжении, превышаю щем на 30% пороговое напряжение (1-5)В, с помощью стимулятора SR1. Входы датчика подсоединяют к потен- циометрическому записывающему прибору с помощью шестиканального перехода датчика Grass. Через 90 мин препараты, не способные производить равномерные вне данного периода времени сокращения,- отбрасывались. После достижения как стабильной ба зовой линии, так и сократительного усилия (обычно через 15 мин), проводят добавление испытуемых соединений кумулятивным образом с интервалами 0,5ча единиц в пределах от 10 до 10 М (конечная концентрация в емкости) или до предела растворимости, который всегда выше.

Было установлено, что соединения примеров 2 и 6 обладают положитель- ной инотропной активностью и способны вызывать, по крайней мере 75%-ное увеличение основного сокращающего

.

I24I

. -,0 ) . 2025 ,о

35

40

45

9938

усилия с активностью М. Соединения примеров и 5 аналогичны, но с активностью в интервале IQ - 10 М.

Определение ин виво инотропной. и вазодилаторной (расширяющей сосуды) активности.

I Соединения по примеру I испытыва- ; ют в сравнении с амриноном и Бардаке, У анастезированных гончих собак с вскрытой грудной клеткой внутривенное введение испытуемого соединения приводит к зависящему от дозы положительному инотропному стимулированию (измеряемому по повьшзению скорости изменения давления в левом желудочке сердца - dp/dt) в интервале доз 0,003-3,0 мг/кг. Это сопровождается зависящим от дозы увеличением потока крови в аорте и падением общего кровяного давления.

Дозы соединении, эффективные для достижения увеличения на 50% dp/dt (ЭД.ИНО) и для уменьшения диастоли- ческого кровяного давления на 30% ( ВАЗО),у анестезированных гончих, собак.

Соединение ИНО ВАЗО Пример 1 0,063 мг/кг 0,19 мг/кг Бардаке 1,0 2,11 Амринон 1,0 2,0 - Определение фоефодиэетеразной ин- .гибиторной активности.

Определение фоефодиэетеразной ин- гибиторной активности проводится по методике Томпсона и Эпплмэна.

Н-сАМФ (5 микромолей) инкубируют при 37 С в течение 30 мин с 1000 X еупернатантом 10% (вее/объем) гомо- гената сердца морской свин1ш в. .буфере 50 м/моль 1 рие./НС1, имеющем рН 7+5 м/моль MgClz, как в приеутетвии, так и в отеутетвии еоединения по примеру 1, которое в первом случае растворяют в Трис-буфере е получением конечных концентраций 100 мк/моль, 1 и 10 м/моль, л. Фоефодиэетеразный фермент в грмогенате гидролизует

Н-еАМФ до Н-5 -АМФ, который затем преращается в Н-аденозин-5 -нуклео- тидазой, добавленной в инкубационную смесь. По окончании инкубирования непревращенный Н-еАМФ удаляют добавле- нием в емесь ионнообменной смолы и центрифугированием. Содержание Н в супернатанте измеряют жидкостным сцинтилляционным счетчиком и получают количественную оценку образования аденозина, (т.е. гидр9лиза сАМФ).

Сравнением количеств Н-аденозина, образовавшихся в Присуствии и отсутствии испытуемого соединения, получают величину ФДЭ-ингибирующей активности соединения. При концентрации 100 мк/моль, 1 и 10 м/моль соединение по примеру 1 не обнаруживает ФДЭ-ингибирующей активности.

Сердечно-сосудистое и антиагрегафективная доза соединения а), которая вызывает 50% ингибирования агрегации, равна приблизительно I ,0 мг/к1 при внутривенном введении. 5 - и) in vitro ингибирование агрегации тромбоцитов.

Све}кую кровь набирают в силикони- . зированные (Siloclad; Clay Adams)

пластиковые (sterlin Ltd.) пробирки,

тивное действие, соединения по приме- ю содержащие тринатрийцитрат (3,15%; ру 1 (соединения а) на анастезиро- 0,1 объема на 0,9 объема крови) и ванных резус обезьянах.центрифугируют (ускорение 200g в теРезус обезьяны обоего пола (вес чение 15 мин) при комнатной темпера- тела 7,3-9 кг) успокаивают фенцикли- туре. Обогащённую тромбоцитами плаз- дином, затем анестезируют тиопентоном is му (ОТП) помещают в пластиковые кон- и поддерживают пантабарбитоннатрием. тейнеры и хранят при комнатной темпе- Категеры помещают в левую бедренную ратуре. Ингибирование агре/ации тром- артерию для измерения кровяного дав- боцитов определяют на агрегометре ления и в левую бедренную вену для Борна, инкубируя аликвоты (0,5 мл) введения лекарства. Еще один катетер 20 ОТП в течение 1 мин при 37 С в отсутствии или присутствии соединения И), которое вводят :до прибавления аденозиидифосфата (АДФ). Для каждого соединения строят зависимость 25 ингибирования от дозы и определяют ИДбо (доза, вызывающая 50% ингибировводят в контралатеральную бедренную артерию для отбора образцов крови. Сердечный ритм записывают на ЭКГ (стандартная инструкция П). Катетер в левьпй желудЪчек в водя т через левую сонную артерию для измерения, давления в левом желуДочке. Все сердечно-сосудистые параметры записываются на полиграфе (Grass модель 7). Ректальную

вания), как дозу, требуемую для снижения агрегации на 50% по сравнению с контрольной амплитудой. для

вания), как дозу, требуемую для снижения агрегации на 50% по сравнению с контрольной амплитудой. для

температуру анестезирбванных обезьян -зо соединения а( равна 1 кг/мл (приблизи- поддерживают равной 37-38 С с помощью тельно).

нагреваемого стола с прокладкой.

а Ех vivo ингибирование агрегации тромбоцитов..

Образцы крови (3 мл) набирают в шприцЁ., содержащие тринатрийцитрат (конечная концентрация 0,315 вес/объем), и центрифугируютг 2 с. Обогащен- . ную тромбоцитами плазму,переносят в

агрегометр Борна и инкубируют 1 мин рольной и в этой группе вводят толь(при 37 с),а затем добавляют такое о инертный фармацевтический носиколичестБо АДФ, которое достаточнотель. Наблюдения за поведением проводля достижения агрегации либо нижедят через 5, 20 мин 1,2,3 и 4,5 ч и

максимальной (J ,5-3 мк/моль, л),либочерез 2,4 и 6 дней после введения

почти максимальной (8-12 мк/моль,л). jjлекарства. Результаты этих исследова- Ингибррование агрегации рассчитывают с учетом не менее двух контрольных образцов, взятые до внутривенного

НИИ представлены в таблице. - Таким образом, получен предлагаемый способ получения новых производвведения соединения а). Последствия яых имидазо 4,5-с пиридина, обладаю- введения соединения а) изменялись - щих ценными фармакологическими свой- от эксперимента к эксперименту. Эф ствами.

вания), как дозу, требуемую для снижения агрегации на 50% по сравнению с контрольной амплитудой. для

соединения а( равна 1 кг/мл (приблизи- тельно).

Исследова гшя токсичности.

)3 предварительных испытаниях на токсичность определяют действие сое- динения О. ) на самок Крыс Vistar.

Животных случайным образом разбирают на группы по 5 оЬобей и в казк- дЬй группе проводят одно введение лекарства. Одна группа является контлекарства. Результаты этих исследова-

НИИ представлены в таблице. - Таким образом, получен предлагаемый способ получения новых производяых имидазо 4,5-с пиридина, обладаю- щих ценными фармакологическими свой- ствами.

Доза, мг/кг

Наблюдения за поведением самок крыс

Покраснение кожных покровов, слабая гипотерг ия (1 С)

Пониженная активность, расстройство координации движений, медленное дыхание

Гипотермия (2 С), глубокое

медленное дыхание, расст1ТОйст- во координации движений, покраснение кожных покровов, пониженная активность

140

Пониженная активность, гипотермия (2-3 с), расстройство координации движений

Пониженная активность, расстройство координации движений,. конвульсии

i

Редактор Ю. Середа

Составитель Н. Нарышкова

Техред И.Попович Корректор В, Бутяга

Заказ 3619/60 Тираж 379Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР

по делам изобретений и открытий 113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

.««....«|..«|..«. -,,.Производственно-полиграфическое предприятие, г. Ужгород, ул. Проектная, 4

Смертность при исследованиях

2/5 через 3 ч

4/5 через 2 дня

5/5 через 5-30 мин

Способ получения бициклических соединений общей формулы (ОСН)п 3(0)шСНз где п - о,1 или 2; m - 1 или 2, . или их гидрохлоридов, о т л -и ч а ю- щ и и с я тем, что соответствующее соединение общей формулы /(ОШз)п 1S4H - SCH ., где п имеет указанные значения, или его гидрохлорид, окисляют перекисью водорода или бромом в среде ледяной уксусной кислоты с выделением целевого продукта в свободном виде или в виде гидрохлоридов.