1
Изобретение относится к медицинской биохимии, а именно к определе- .нию белка в растворе, и может быть использовано для исследования биологических жидкостей.
Цель изобретения - упрощение и повьпиение точности способа за счет учета вклада экстинкции непрореагировавшего биуретового реактива.
Способ состоит в следующем. К биуретовому раствору добавляют определенное количество пробы, хорошо смешивают. Через 30 мин пробы фото™ метрируют по отношению к воде при 545 нм. Показатели подставляют в формулу
12543862
не волны 545 нм. Спектрофотометр
устанавливают- на нулевую экстинкцию по дистиллированной воде. При фото- метрировании опытной пробы получают экстинкцию, равную 0,2325 ед. оптической плотности. Подставляя все значения в формулу (2), получают:
Р п отос; 5+0,05 , ..,.„ 0,05 ,0 Р 0,2325 ,1438-
0,05
15
«0,3232,
или Р 65 г/л белка в плазме крови
При изменении соотношения объемов пробы и биуретового реактива (0,05 и 3,0 мл) получают экстинкцию опытной пробы 0,3330. Подставляя все значения в формулу расчета кон- 20 центрации белка (2), получают:
, ----41438 F -М
IAI -Н-,0 V + W
--1
.Ll
(1)
где Р - концентрация белка, г%;
V - объем биуретового реактива , мл ;
- объем пробы, мл; f - экстинкция пробы,- - экстинкция биуретового
реактива.
При использовании стандартного биуретового реактива с М 0,078
формула вид:
1) принимает следующий
у +UJ
ы
4,14581л)
О 3232. (2)
Способ определения белка применим ко всем растворам и биологическим жидкостям, где отсутствует побочное поглощение света в диапазоне 545 нм (например, гемоглобином): лимфе, ликвору, плазме крови, растворам с добавленньм белком промьшшенного изготовления.
Пример. Берут 0,05 мл плазмы крови, смешивают с 5,0 мл биуретового реактива и через 30 мин фотомет- рируют на спектрофотометре при длиРедактор М.Циткина
Составитель Н.Гуляева Техред И.Попович
Заказ 4714/48
Тираж 778Подписное
ВНИИПИ Государственногр комитета СССР по делам изобретений и открытий 113035, Москва, Ж-35, Раушская наб. , д. 4/5
Производственно-полиграфическое предприятие, г. Ужгород, ул. Проектная, 4
Р п отос; 5+0,05 , ..,.„ 0,05 ,0 Р 0,2325 ,1438-
0,05
«0,3232,
15
или Р 65 г/л белка в плазме крови.
При изменении соотношения объемов пробы и биуретового реактива (0,05 и 3,0 мл) получают экстинкцию опытной пробы 0,3330. Подставляя все значения в формулу расчета кон- 20 центрации белка (2), получают:
Р 0,3339 ;У/ .4,1438-.
0,3232,
или Р 65 г/л белка в плазме крови.
Таким образом, использование различных соотношений пробы и биуретового реактива дает при определении концентрации белка одно и то же значение.
Формула изобретени-я
Способ определения белка в растворе путем добавления биуретового реактива и спектрофотометрирования, отличающийся тем, что, с целью упрощения и повышения точности способа, в качестве контрольной пробы используют дистиллированную воду, определяют удельную экстинкцию белка, связанного с реакти- вом, и расчет содержания белка в опытной пробе проводят с учетом
биуретового реактива, не связавшегося с белком.
Корректор Т.Колб
название | год | авторы | номер документа |
---|---|---|---|
Способ определения белка в плазме крови | 1984 |
|
SU1454079A1 |
Способ определения кровопотери из желудочно-кишечного тракта при хронических заболеваниях органов пищеварения | 1986 |
|
SU1397835A1 |
СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ОКИСЛИТЕЛЬНОЙ МОДИФИКАЦИИ ФИБРИНОГЕНА ПЛАЗМЫ КРОВИ ПО СОДЕРЖАНИЮ КАРБОНИЛЬНЫХ ГРУПП В ФИБРИНОВОМ СГУСТКЕ | 2014 |
|
RU2595806C2 |
Способ определения молочной кислоты в биологических жидкостях | 1985 |
|
SU1335880A1 |
Способ определения аденозинтрифосфорной кислоты в крови | 1978 |
|
SU905787A1 |
Способ определения проницаемости капилляров конечности для белка | 1985 |
|
SU1512615A1 |
Способ оценки характера экзогенных воздействий на сперматогенез у экспериментальных животных | 2018 |
|
RU2691734C1 |
ПРИМЕНЕНИЕ 6-ГИДРОКСИ-2,2,4-ТРИМЕТИЛ-1,2-ДИГИДРОХИНОЛИНА В КАЧЕСТВЕ ГЕПАТОПРОТЕКТОРА | 2017 |
|
RU2677883C1 |
Способ определения белка в листьях растений | 1987 |
|
SU1508996A1 |
Способ определения активности глутатионпероксидазы в эритроцитах | 1984 |
|
SU1282003A1 |
Изобретение относится к биохимии. Цель изобретения - упрощение и повышение точности способа. К биуретовому раствору добавляют определенное количество пробы, хорошо смешивают. Через 30 мин пробы фото- метрируют по отношению к дистиллированной воде при 545 нм. Определяют удельную зкстинкцию белка, связанного с реактивом. Расчет содержания белка в опытной пробе проводят с . учетом биуретового реактива, не связавшегося с белком. to сд 4; со 00 О)
Инструкция ВНМЦ по лабораторному делу | |||
Утв | |||
Походная разборная печь для варки пищи и печения хлеба | 1920 |
|
SU11A1 |
Авторы
Даты
1986-08-30—Публикация
1983-12-12—Подача