Способ определения @ -ацетилглутамина Советский патент 1986 года по МПК G01N31/16 

Изобретение относится к аналити,ческой химии, в частности к способам определения содержания веществ методом потенциометрического титрования, и может использоваться в ана литических и биохимических лабораториях при контроле чистоты N-ацетилглутамина. Цель изобретения - повышение селективности способа. Способ заключается в следующем. /Навеску образца помещают в колбу со шлифом объемом 100 мл, вводят 5-7%-ный раствор гидроокиси калия или натрия, стаканчик плотно закрывают пробкой и помещают в термостат или на терморегулируемую водяную баню. Смесь вьщерживают при 85-80°С в течение 60-70 мин. Затем охлаждаю до комнатной температуры, открывают пробку и 2-3 мл дистиллированной воды споласкивают горлышко колбы и пробку. В полученную смесь вводят 6-8 н. соляную кислоту до установления рН в интервале 1,0-1,5. Затем вводят 20 мл ацетона или диметилсульфоксида и перемешивают. В полученньй раствор погружают стекляннокаломельную электродную пару и проводят потенциометрическое титрование 0,1 н. водным раствором гидроокиси калия или натрия до появления на кривой трех скачков потенциала - первый из них соответствуе оттитрованию избытка соляной кисло ты (V), второй - совместному отти . рованию двух карбоксильных групп N-ацетилглутаминовой кислоты (Vg), sf третий - оттитрованию хлорида ам мония (УЗ). При анализе чистых пре паратов N-ацетилглутамина имеет место равенство V,/2 V . Примеси уксусной кислоты титруются совмест с N-ацетилглутаминовой кислотой и Vj/2 УЗ, содержание N-ацетилглут амина рассчитывают по V , и содерж ние уксусной кислоты по разности ЛУ уксусная кислота. При .наличии примесей хлорида аммония ,/2 содержание N-ацетилглута пЭ рассчитьюают по У2/2, а количес во примеси хлорида аммония находят по разности УЗ - У2/2 . Продолжительность анализа 1,5 ч относительная ошибка ±1%, относител ное стандартное отклонение +1,5%. Пример 1. Навеску(0,07135 г) обрабатывают 5 мл 5%-ного раствора гидроокиси калия, стаканчик плотно закрывают пробкой и помещают в термостат. Смесь вьщерживают при 90®С в течение 70 мин. Затем охлаждают до комнатной температуры, открывают пробку и 2-3 мл воды споласкивают горлышко и пробку. В анализируемый раствор вводят 6 н. соляную кислоту до установления рН 1,0, затем добавляют 20 мл ацетона и потенциометрически титруют 0,1025 н. водным раствором гидроокиси калия до появления трех скачков потенциала на кривой. По кривым определяют, что Уг 7,28 мл, а У 3,68 мл (У2/2 УЗ), и рассчитывают по формулам содержание Н-ацетилглутамина соответственно 99,5 и 98,4%. П ри м е р 2. Навеску (0,08581 г) обрабатывают 5 мл 7%-ного водного раствора гидроокиси- натрия, стаканчик плотно закрывают пробкой и помещают в термостат. Смесь выдерживают при в течение 60 мин. Затем охлаждают до комнатной температуры, открывают пробку и 2-3 мл воды споласкивают горльшко и пробку. В анализируемый раствор вводят 8 н. соляную кислоту до установления рН 1,5, затем добавляют 20 мл диметилсульфоксида и потенциометрически титруют 0,09763 н. раствором гидроокиси натрия до появления трех скачков потенциала. По кри- вым титрования определяют, что Уг 9,38 мл, а У 4,65 (Уг/2 yj) и по формулам рассчитывают содержание N-ацетилглутамина соответственно 99,5 и 100,4%. Пример 3. Навеску (0,0722 г) искусственной смеси - 0,01015 г хлорида аммония (14,1%) и 0,06205 г N-ацетилглутамина (85,9%) обрабатывают 5 мл 6%-ного раствора гидроокиси калия. Колбу плотно закрывают пробкой и помещают в термостат. Смесь вьщерживают при 87°С в течение 65 мин. Затем стаканчик охлаждают до комнатной температуры, открьшают пробку и 2-3 мл воды споласкивают горльш1ко колбы и пробку. В анализируемый раствор вводят 7 н. соляную кислоту до установления рН 1,2, затем добавляют 20 мл диметилсульфоксида и потенциометрически титруют 0,1025 н. раствором гидроокиси кали до появления трех скачков потенциал По кривым титрования определяют. что У 6,36 а V,, 5,06 мл (Vj /2 ) , и рассчитывают по формулам ббдаржание N-ацетилглутамина 85,0% хлорида аммония 14,3%, 3,18 м Пример 4. Навеску (0,08427 искусственной смеси - 0,01115 г уксусной кислоты (13,2) и 0,07312 г N-ацетилглутамина (86,8%) обрабатывают 5 мл 6,5%-ного раствора гидроокиси натрия. Колбу плотно закрывают пробкой и помещают в термостат. Смесь выдерживают при 88°С в течени 60 МИН. Затем охлаждают до комнатной температуры, открывают пробку и споласкивают 2-3 мл воды горльшко колбы и пробку. В анализируемый раствор вводят 6н. соляную кислоту до установления рН 1,3, затем добав ляют 20 мл ацетона и потенциометрически титруют 0,09763 н. раствором гидроокиси натрия до появления трех скачков потенциала. По кривым титрования определяют, что V 9,81 мл, а Vj 3,97 мл ( УЗ и рассчитывают по формулам содержание N-ацетилглутамина 86,6%, уксусной кислоты 13,0%. if р и м е р 5. Навеску (0,0817 г обрабатывают 5 мл 7%-ного раствора гидроокиси калия, колбу плотно закрывают пробкой, помещают в термостат или и вьщерживают при 85°С в течение 60 мин. Затем охлаждают до комнатной температуры, открывают пробку, 2-3 мл воды споласкивают горльппко колбы и пробку. В анализируемый раствор вводят 7 н. соляную кислоту до установления рН 1,5, затем добавпяют 20 мл диметилсульфоксида и потенциометрически титруют 0,1025 н. раствором гидроокиси калия до появления трех скачков потенциала. По кривой титрования определяют, что Vj 8,06 мл, а УЗ 4,50 мл ( ), и рассчитывают по формулам содержание N-ацетилглутамина 95,2%, примесей хлорида аммония 3,2%. 4,03 мл. Примеры реализации способа представлены в таблице. Формула изобретения Способ определения N-ацетилглутамина путем обработки анализируемой пробы при 85-90С раствором щелочи и последующим титрованием полученного раствора гидроокисью калия или натрия, отличающийся тем, что, с целью повышения селективности способа, в качестве раствора щелочи используют 5-7%-ный раствор щелочи, а перед титрованием раствор подкисляют соляной кислотой до рН 1,0-1,5 и вводят в него ацетон диметилсульфоксид.

Изобретение относится к аналитической химии, а именно-к способу определения N-ацетилглутамина. Цель изобретения - повьшение селективности способа. Определение N-aцeтиJiглутамина осуществляют путем обработки 5%-ным раствором гидроокиси калия при 85-90°С. В полученный раствор вводят 6-8 н. раствор соляной кислоты до рН 1,0-1,5 и ацетон или диметилсульфоксид. Проводят потенциометрическое титрование О,1 н. раствором гидроокиси калия. Продоло жительность анализа 1,5 ч, относительная ошибка +1%. 1 табл. (Л