Способ изготовления иммуноэлектродов Советский патент 1986 года по МПК G01N33/53 

ю

00

00 Изобретение относится к иммунологии и может найти применение в медицине и промышленности лекарственных препаратов. Целью изобретения является ускорение процесса изготовления. Способ осуществляют в следующей последовательности. В ячейку, содержащую стандартный хлорсеребряный и вспомогательньш пла тиновый электроды, вносят электролит ную смесь следующего состава: водноэтанольный растворитель, коллагеновая суспензия, глутаровый альдегид, соляная кислота, антиген или антительную сыворотку. Раствор перемешивают и проводят катодное электроосаж дение антигено- или антительно-коллагеновой пленки на поверхности хлор серебряного электрода. Полученный иммуноэлектрод промывают дистиллированной водой и помещают в 0,05 М боратно-фосфатньш буфер, содержащий тритон Х-100 и бычий сывороточный апьбумин (БСА) для блокировки активных центров глутарового альдегида. Иммобилизация антигенов или антител из электролитной смеси методом электроосаждения существенно сокра-. щает время изготовления иммуноэлект,рода. Формирование антигено- или антительно-коллагеновой пленки на токо проводящей поверхности иммуноэлектро да осуществляется за 40-45 с при плотности тока 10-12 мА/см. Наличие коллагеновой пленки затрудняет диффузию различных примесей окислителей и восстановителей непосредственно к токопроводящей поверхности и исключает их влияние на потенциап иммуноэлектрода. К тому же потенциал иммуноэлектрода из хлорсеребряной основы является высоковоспроизводимым. Результатом этого является увеличение селективности изме рений антигенов и антител иммуноэлектродом. Электролитная смесь следующего состава, мас.%: этанол 24,6740 24,8124; коллаген 0,0500-0,1000; глутаровьй альдегид 0,7000-1,2000; соляная кислота 0,0004-0,0040; антиген или антисыворотка 0,1100-0,1300, вода остальное, обеспечивает получение плотных и равномерных по толщине коллагейовых пленок на токопроводящей поверхности электрода, предотвращает осаждение коллагена в объеме что позволяет иммобилизораствора, вывать в коллагеновой пленке антигены и антитела в количестве, на порядок превышающем известный способ. Пример 1. Для изготовления иммуноэлектрода с иммобилизованной L-аспарагиназой в качестве токопроводящей поверхности используют стандартньш хлорсеребряный электрод ((ZJ 0,3 мм, мм), являющийся контактным полуэлементом ионселективных электродов. В ячейку, содержащую хлорсеребряный и вспомогательный платиновый электроды, вносят 0,6 МП электролитной смеси следующего состава, мас.%: этанол 24,8124; коллаген 0,0500; глутаровьй альдегид 0,7000, соляная кислота 0,0004 и L-аспарагиназа из бактерий Е. coli 0,1100; вода остгшьное. Раствор перемешивают и проводят электроосаждение аспарагиназно-коллагеновой пленки на поверхности хлорсеребряного электрода при плотности тока 1012 мА/см в течение 40-45 с. Полученный иммуноэлектрод промывают дистиллированной водой и помещают на 14 мки в 0,05 М боратно-фосфатный буфер рЯ 8,7, содержащий и, 1% раствора тритона X - 100 и 0,6% БСА для блокировки активных центров глутарового альдегида. П р и М е р 2. Для изготовления иммуноэлектрода с иммобилизованными антителами к L-аспарагиназе в качестве токопроводящей поверхности используют стандартный хлорсеребряный электрод (;z(0,3 мм, 1чм) . В ячейку, содерхсащую хлорсеребряньй и вспомо1 ательный платиновый электроды, вносят 0,6 мл электролитной смеси следующего состава, мас.%: этанол 24,674; коллаген 0,100; глутаровый альдегид 1,200; соляная кислота 0,004 и обессоленная кроличья сыворотка против L-аспарагиназы 0,13; вода остальное. Раствор перемешивают и проводят электроосаждение антительно-коллагеновой пленки па поверхности хлорсеребряного электрода при плотности тока 10 - 12 tA/CM в течение 40-45 с. Полученный иммунозлектрод промывают дистиллированной водой и помещают на 14 мин в 0,05 М боратно-фосфатный буфер рН 8,7, содержащий 0,1% раствора тритона Х-100 и 0,6% БСА для блокировки активных центров глутарового альдегида. 3 с помощью изготовленных данным способом иммуноэлектродов и электродов сравнения проводят анализ содержания антигенов или антител в анализируемых жидкостях. Формула изобретения Способ изготовления иммуноэлектро дов, состоящий в иммобилизации антигенов или антител на токопроводящей поверхности, отличающийся тем, что, с целью ускорения процесса изготовления, иммобилизацию проводят 05 4 электроосаждением в электролите состава, мас.%: 24,6740-24,8124 Этанол 0,050-0,100 Коллаген , Глутаровый аль0,700-1,200 дегид 0,0004-0,0040 Соляная кислота Антиген или анти0,1100-0,1300 сыворотка Остальное Вода при плотности тока 10-12 мА/см в течение 40-45 с на токопроводящую поверхность, имеющую хлорсеребряную основу.

Изобретение относится к иммунологии, может быть применено также в изготовлении лекарственных препаратов. Цель изобретения - ускорение процесса изготовления. Для этого в ячейку, содержащую стандартный хлорсеребряный и вспомогательный платиновый электроды вносят электролитную смесь: водно-этанольный растворитель, коллагеновая суспензия, глута.ровый альдегид, соляная кислота, антиген или антительная сыворотка, вода. Раствор перемешивают, проводят катодное электроосаждение антигеноили антительно-коллагеновой пленки на поверхности хлорсеребряного электрода. Полученный иммуноэлектрод промывают дистриллированной водой и помещают в 0,05 М боратно-фосфатный буфер, содержащий бычий сывороточный альбумин для блокировки активных центров глутарового альдегида. Элект(Л С роосаждение коллагеновой пленки на поверхности хлорсеребряного электрода ведут при плотности тока 1012 мА/см в течение 40-45 с.