Способ хранения холерных бактериофагов Советский патент 1987 года по МПК C12N7/00 C12N1/04 

1

Изобретение относится к медицинской микробиологии, в.частности к способам хранения умеренных холерных фагов.

Цель изобретения - повьшение жизнеспособности и сохранение биологической активности умеренных фагов.

Пример 1. Берут 1 мл фага 8556 с титром 2,2 10 БОЕ/мл, соединяют с 2 мл защитной среды (соотношение :2). Состав защитной среды, г: сахароза ХЧ 99, желатина 14; хлористый кальций б.З,; дистиллированная вода - остальное (до 1 л). Среду стерилизуют в автоклаве при 110°С в течение 30 мин. Препарат раливают в 5-кубиковые ампулы по 2мл Предварительное замораживание осуществляют путем погружения ампул в спирт, охлажденный до -55° на 3 мин непосредственно перед сушкой. Лио- фильное высушивание осуществляют в вакуум-сушильной установке L7,-9C в течение 26 ч. При этом температуру повышают постепенно в течение 3 от -50° до -10 с и в течение 13 ч - от -10° до +25 С. Досушивают препарат н течение 8-9 ч при +25°С. Первые два часа сублимацию проводят без подогрева. Затем включают подогрев со скоростью 5 град в час. Запаивают ампулы с осушенным стерильным воздухом. В исследуемых образцах через 24 ч после высушивания определяют количество жизнеспособных корпускул фага. Ампулу вскрывают, таблетку растворяют в 2 мл дистиллированной воды. Титр фага после ли филизации 1,7-10, что составляет 77,2% активных фаговых корпускул от исходного жидкого препарата фага (согласно известному способу сохраняется 16% корпускул бактериофага) .

П р и м е р 2. Берут 1 мл фага с титром 2,2-10 БОЕ/мл, соединяют с 2 мл защитной среды, состоящей из г: сахароза 100; желатина 15; хлористый кальций 7,5; дистиллированная вода - остальное. ПрепаРедактор А.Огар

Составитель Г.Смирнова Техред Л.Кравчук

717/28

Тираж 500Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР

по делам изобретений и открытий 113035, Москва, Ж-35,Раушская наб., д. 4/5

Производственно-полиграфическое предприятие, г, Ужгород, ул. Проектная, 4

2965782

рат разливают в. 5-кубиковые ампулы по 2 мл. Предварительное замораживание осу1цествляют путем погружения ампул в спирт, охлажденный до -60°С е на 4 мин, Лиофильное высушивание осу- Р1ествляют в течение 27 ч. Титр фага после лиофилизации 1 ,65 10,

П р и м е р 3, Берут 1 мл фага 8556 с титром 2,2-10 БОЕ/мл, соединяют с 2 мл запщтной среды, состоящей из, г/л: сахароза 101, желатина 16; хлористый кальций 8,5, дистиллированная вода - остальное. Препарат разливают в 5-кубиковые ампулы по 2 мл. Предварительное замораживание осуществляют путем погружения ампул в спирт, охлажденный до -65°, на А минуты. Лиофильное высушивание и определение активности фага осуществляют аналогично примеру 1. Титр фага после лиофилизации 1,710 ,

Формула изобретения

Способ хранения холерных бактериофагов путем кх смешения с защитной средой, содержащей дистиллированную воду, желатину и сахарозу, предварительного замораживания с последующим сублимированием и досугдаванием целевого продукта, отличающийся тем, что, с целью повьш1е- ния жизнеспособности и сохранения биологической активности умеренных фагов, за1читная среда дополнительно содержит хлористый кальций при следующем количественном соотношении компонентов, г/л:

Сахароза99-101

Желатина14-16

Хлористый

кальций6,5-8,5

Дистиллированная вода Остальное бактериофаг смешивают с защитной средой в соотношении 1:2, предварительное замораживание осуществляют в течение 3-4 мин, а высушивание проводят в течение 26-27 ч.

Корректор И.Эрдейи

Изобретение относится к области медицинской микробиологии. Цель изобретения - повьппение жизнеспособности и сохранение биологической активности умеренных фагов. Берут 1мл фага 8556 и соединяют с 2 мл защитной среды. Защитная среда имеет следующий состав: сахароза, желатина, хлористый кальций, дистиллированная вода. Среду стерилизуют в автоклаве. Препарат разливают в ампулы. Предварительное замораживание осуществляют путем погружения ампул . в охлажденный спирт. Производят лио- фштьное высушивание в течение 26- 27 ч. Запаивают ампулы и в исследуемых образцах через 24 ч после высушивания определяк)т количество жизнеспособных корпускул фага. с € (Л ю О) ел 00