Способ определения дифференцирующихся клеток на препарате Советский патент 1987 года по МПК G01N1/28 

1 1

Изобретение относится к медицине, а именно, к гистологии.

Цель изобретения - уменьшение травматичности способа путем обработ ки клетки трилоном Б с последующим воздействием сьгоороткой крови и определения потенции к дифференциройке по степени адсорбции соединений кальция из сыворотки крови ядрами клеток

Пример. Ткань опухоли у боль кого К. подвергают исследованию с целью диагностики заболевания. Для этого берут ткань во время оперативного вмешательства, фиксируют в 12%-ном формалине в течение 24 ч, удаляют остатки формалина с их поверхности многократным погрзтеением в дистиллированную в оду. Затем погружают в 1 .%-ный раствор трилона Б на 24-48 ч при рН 7,2-7,4, после этого повторно промьгоают дистиллированной водой. Затем ткани обрабатывают в спиртах восходящей концентрации, %: 70, 80, 90, 96, 100, причем в каждом из спиртовых растворов выдерживают По 2 ч. После этого ткань погружают в хлороформ с выдержкой 30 мин, а затем обрабатьгоают смесь хлороформа и парафина в соотношении 1:1 в течение 30 мин и заключают в расплавленный .парафин при 56-60°С с послед-ующим охлаждением до . Изготовляют гистологические срезы, которые укрепляют на предметных стеклах, депарафини- ру(от в ксилоле и спирте по общепринятым методам. На срезы наливают сыворотку, после этого предметные стекла со срезами помещают в чашки Петри, содержащие на дне фильтровальную бумагу, смоченн-ую дистиллированной водой. Гистологические срезы инкубируют с сывороткой в течение 22-24 ч при 37 С, после этого их промывают

Составитель Л. Соловьев Редактор А. Козориз Техред Н.Глущенко Корректор А. Зимпкосов

147.1/40

Тираж 777Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР

по делам изобретений к открытий 113035, Москва, Ж-35, Раушская наб. ,, д. 4/5

.Производственно-полиграфическое предприятие, г. Ужгород, ул. Проектная, 4

fO

15

20

П55562

дистиллированной водой и погружают в раствор азотно-кислого серебра (5%-ный раствор) на ярком свету на 1,5 - 2 ч до почернения. Затем срезы 5 вновь промывают дистиллированной водой, обрабатывают спиртом, ксилолом, заключают в канадский бальзам и просматривают в световом микроскопе. Результаты оценива1§т по отложению гра- нул серебра, которые избирательно откладываются в местах локализации кальция в ядрах клеток. Клетки, содержащие ядра с интенсивными отложениями гранул серебра, обладают высокими потенция1 ш к дифференцировке. Для объективной оценки подсчитывают количество клеток, содержащих гранулы серебра на 100 однотипных клеток. Исследование позволило установить, что потенции клеток опухолевой ткани весьма снижены, только 1,5% клеток S опухолевой обладают потенцией ,к дифференцировке, при этом установлен диагноз злокачественной опухо- ли - саркомы.

Формула изобретения

Способ определения дифференцирую- 30 щихся клеток на препарате путем фиксации ткани, приготовления срезов и исследования клеток, отличаю- щ и и с я тем, что, с целью уменьшения травматичности способа, ткань пе- 35 Ред фиксацией обрабатывают 12%-ным раствором трилона при рН 7,2-7,4 в течение 24-48 ч, далее срезы инкубируют с сывороткой крови при 37 С в течение 22-24 ч после чего срезы по- 40 мещают в 3%-ный раствор азотно-кислого серебра, а дифференцирующиеся клетки определяют по содержанию гранул серебра в клетках.

Изобретение относится к медицине, точнее к гистологии. Цель изобретения - уменьшение травматичности способа путем помещения гистологических срезов в 5%-ный раствор азотнокислого серебра, обработки клеток трилоном В с последующей реакцией с сывороткой крови и определением потенции к дифференцировке клеток по степени адсорбции соединений кальция из сыворотки крови ядрами клеток. Дифференцирующиеся клетки определяют по содержанию гранул серебра в клетках. 00 о СЛ ел СЛ 35