1
Изобретение относится к медицине а именно к методам морфрфункциональ ного анализа клеток крови, и может быть использовано в гематологии для изучения структуры и функциональног состояния эритроцитов.
Цель изобретения - повышение контрастности клеток и удлинение времени свечения красителя путем оптимального сочетания фиксатора и красителя.
П р и м е.р. Дпя флуорохромирова ния эритроциты свежевзятой цельной крови белых беспородных крыс трижды отмывают физиологическим раствором и фиксируют во взвешенном состоянии в растворе параформглютаровый альдегид на 0,1 М фосфатном буфере при рН 7,2-7,3 в течение 2 ч при 4 С в соотношении эритроциты:фиксирующая смесь 1:1 (объем-объем). Затем эритроциты трижды отмывают от фиксатора цитратпр-фосфатным буфером с рН 6,8 7,2р центрифугируя взвесь при 2000 об/мин в течение 15 мин. Из отмытых эритроцитов готовят мазки и окрашивают их раствором акридинового оранжевого, приготовленным на ци ратно-фосфатном буфере рН 6,8-7,2 в разведении 1:10000 в течение 10- 15 мин при 18-24 С.
Окрашенный мазок двукратно промывают в течение 1 мин в том же буфере, покрывают покровным стеклом и
Редактор А.Козориз
Составитель Л.Соловьев Техред Н.Глущенко
Заказ 1421/40 Тираж 777Подписное
ВНИИПИ Государственного комитета СССР
по делам изобретений и открытий 113035, Москва, т-35, Раушская наб,, д. 4/5
Производственно-полиграфическое предприятие, г.Ужгород, ул.Проектная, 4
5
0
5
0
микроскопируют при длине волны 436 нм.
Преимуществом предложенного способа является возможность выявления безъядерных эритроцитов методом люминесцентной микроскопии, получение контрастных длительно и стабильно флуоресцирующих б езъядерных эритроцитов, а также возможность проведения одновременных исследований окрашенных данным способом эритроцитов методами люминесцентной, фазово-конт- растной и электронной микроскопии.
Формула изобретения
Способ окраски эритроцитов для люминесцентной микроскопии путем приготовления мазков, фиксации и окраски в красителе, отличающийся тем, чт;о, с целью повьш1е- ния контрастности клеток и удлинения времени свечения красителя, фиксацию проводят цельной кровью до приготовления мазков, при этом для фиксации используют растворы параформ- глютарового альдегида на 0,1 М фосфатном буфере при рН 7,2-7,3, а в качестве красителя используют 1:10000 растворы акридинового оранжевого на цитратно-фосфатном буфере при рН 6,8- 7,2, при этом окраску проводят в течение 10-15 мин.
Корректор А.Зимокосов
| название | год | авторы | номер документа |
|---|---|---|---|
| Способ диагностики пищевой аллергии | 1989 |
|
SU1704089A1 |
| Способ подготовки эритроцитов для использования в флуоресцентной микроскопии | 2017 |
|
RU2657823C1 |
| СПОСОБ ОДНОВРЕМЕННОГО ОПРЕДЕЛЕНИЯ КЛЕТОК С РЕЦЕПТОРАМИ К БИОЛОГИЧЕСКИ АКТИВНЫМ ВЕЩЕСТВАМ И ИХ ПОПУЛЯЦИОННОЙ ПРИНАДЛЕЖНОСТИ | 1994 |
|
RU2081418C1 |
| СПОСОБ ПРОГНОЗИРОВАНИЯ ТЕЧЕНИЯ ОСТРЫХ КИШЕЧНЫХ ИНФЕКЦИЙ У ДЕТЕЙ | 2004 |
|
RU2275634C2 |
| СПОСОБ ОЦЕНКИ ФАГОЦИТАРНОЙ АКТИВНОСТИ МОНОЦИТОВ КРОВИ ЧЕЛОВЕКА | 1994 |
|
RU2089899C1 |
| СПОСОБ ДИАГНОСТИКИ МИАСТЕНИИ | 1996 |
|
RU2098827C1 |
| Способ определения лизосомальной активности лейкоцитов на мазках | 1988 |
|
SU1682864A1 |
| СПОСОБ ОТБОРА ТРОМБОЦИТОВ ЧЕЛОВЕКА, ПРИГОДНЫХ ДЛЯ КРИОКОНСЕРВИРОВАНИЯ | 2015 |
|
RU2623073C1 |
| СПОСОБ ДИАГНОСТИКИ ПАТОЛОГИИ КЛЕТОЧНОГО ИММУНИТЕТА ПРИ ХРОНИЧЕСКИХ ВИРУСНЫХ ИНФЕКЦИЯХ | 2000 |
|
RU2187813C2 |
| Способ получения иммобилизированного простагландина,обладающего антиагрегационной активностью | 1981 |
|
SU982695A1 |
Для повышения контрастности клеток и удлинения времени свечения красителя эритроциты свежевзятой цельной крови отмывают физиологическим раствором, фиксируют во взвешенном состоянии в растворе параформ- глютарового альдегида на 0,1 И фосфатном буфере рН 7,2-7,3 в течение 2 ч при °С в соотношении эритроциты: фиксирующая смесь 1:1. Эритроциты отмывают цитратно-фосфатным буфером с рН 6,8-7,2 и центрифугируют при 2000 об/мин 15 мин. Затем готовят мазки и окрашивают раствором акридинового оранжевого на цитратно-фосфат- ном буфере рН 6,8-7,2 в разведении 1:10000 в течение 10-15 мин при 18- 24 С. о СП СЛ СП 00
