Способ получения солей канцеролитических пептидов Советский патент 1960 года по МПК C07K5/65 C07K5/87 A61K38/05 

Группой советских авторов были синтезированы канцеролитические пептиды, содержащие остатки Ы-ацил-п-ди-(2-хлорэтил) амино-DLфенилаланина («Сарк-олизина), и изучено их противоолухолевое действие на животных. Было показано, что полученные препараты имели высокую противоопухолевую активность и Б отличие от п-ди-(2-хлорзтил) амиHO-DL-фенилаланина нетоксичны и проявляют большую избирательность действия по отношению к различным штаммам опухолей.

Однако нерастворимость пептидов и необходимость применять слишком большие дозы затрудняет их применение. Поэтому представляет интерес синтез ряда пептидов, содержащих не ациламино, как это было ранее достигнуто, а свободные аминогруппы.

Однако пептиды со свободной аминогруппой плохо сохраняются и быстро образуют соответствующие дикетопиперазины. Превращение пептидов в хлоргидраты их стабилизирует, но вследствие диссоциации, последние, хотя и медленно, также образуют дикетопиперазины.

Предложен способ получения солей канцеролитических пептидов, содержащих остаток ди-(2-хлорэтил)амино-ОЬ-фенилаланина, заключающийся в том, что, с целью повышения активности пептида, эфиры пептидов, содержащие остаток М-формил-п-дн-(2-хлорэтил)амино-ОЬ-фенилаланина обрабатывают спиртовым раствором хлористого водорода.

С целью получения наиболее стабильных солей пептидов, дихлоргидрат, полученный по вышеописанному способу, обрабатывают ацетатом натрия, а затем метилен-бис-|3-оксинафтойной кислотой.

Соли, образованные пептидами с нелетучей метилен-бис-р-оксинафтойной кислотой, соверщенно стабильны и весьма удобны для применения и хранения.

№ 132229.- 2 Способ получения солей описанных канцеролитических пептидов заключается-а удалении ||)ормильной группы из молекулы пептида, содержащего остаток Ы-формил-п-ди-(2-хлорэтил) амино-ОЬ-фенилаланина кратковременным нагреванием соответствующего пептида в 6Н спиртовом растворе НС1 и последующем выделении пептида со свободной амино-груп пой в виде солей с органическими и минеральными кислотами. f „ 5 (,

Соответствующие реакции протекают по схемам:

(ClCabbj.NCeH CHsCHCONHR - (CIC2H4)2NC6H4CH2CHCONHR-

СаН.ОНI

NHCHOU) NH - 2НС1

CH COONaметилен-бис-)-окси-нафтойная

(C1C2H4)2NC6H4CH2CHCONHRкислота

- -н. (C1C2H4)2NC6H4CH2CHCONHR

(Hi .,:(-Сшо„Х ,

где Б - остатки аминокислот.

Пример 1. Дихлоргидрат этилового эфира п-ди-(2-хлорэтил) амино-ВЬ-фенилаланил-ОЬ-метионина (продукт I).

1,8 г (3,6 ммол) этилового эфира К-формил-п-ди-(2-хлорэтил) амино-ОЬ-фенилаланил-ОЬ-метионина кипятят в течение 1 мин. в 20 мл 6Н спиртового раствора НС. Растворитель отгоняют, оставляя небольщой объем, остаток выливают в эфир, выпавший осадок отфильтровывают и очищают переосаждением из спирта и эфира. Получают продукт в виде неустойчивых краснеющих на воздухе гигроскопических кристаллов с т. пл. 127-130° (с разложением). Выход 30% от теоретического. По данным элементарного анализа.

Найдено %: ,28; ,33; ,46. С2оНззС14НзОз5. Вычислено % ,69; ,14; ,32. Пример 2. Соль этилового эфира п-ди-(2-хлорэтил)-амИНО-ОЬфенилаланил-01.-валина с метилен-бис-р-оксинафтойной кислотой (продукт II).

1,8 г этилового эфира N-фopмил-n-дн-(2-xлopэтИv) амино-ВЬ-фенилаланил-ОЬ-валина кипятят в течение одной минуты с 20 мл 6Н спиртовой НС1. Растворитель удаляют, остаток обрабатывают насыщенным раствором ацетата натрия. Выделившееся основание извлекают эфиром, эфирный экстракт сушат над, сульфатом натрия. Эфир отгоняют, остаток- 1,4 г обрабатывают 0,62 г метилен-бис- -оксинафтойной кислоты в растворе абсолютного тетрагидрофурана. К образовавшемуся прозрачному раствору прибавляют 20 мл абсолютного эфира (до полноты осаждения) и выпавшую соль (продукт И) очищают переосаждением эфиром из спиртового раствора и вновь осаждают эфиром из тетрагидрофурана. Желтый порошок с т. пл- 113-114°. Выход 65% от теоретического. Результаты элементарного анализа. Найдено %: ,55; ,08. СбзН7зС14НбО1г. Вычислено %: ,4; ,2.

NPb