Способ моделирования внелегочных туберкулезно-аллергических заболеваний Советский патент 1987 года по МПК G09B23/28 

Изобретение относится к медицине, а именно к экспериментальной патологии и терапии.

Цель изобретения - повышение воспроизводимости и стабильности модели. В качестве разрешаклцего фактора используют антиген, приготовленный из убитых автоклавированием микобак- терий туберкулеза, обработанных ультразвуком в течение 5-10 мин при интенсивности 40 - 50 Вт/см , частоте 43 - 45 кГц, амплитуде колебаний 2,5 - 3,5 мкм в непрерывном режиме.Пример 1. Воспроизведение ту-ig гена отмечалось помутнение прозрачберкулезно-аллерги-ческого поражения глаз. Готовят взвесь убитой автоклавированием культуры микобактерий туберку-2Q ющей дозы антигена кролик выведен из

25

35

леза из расчета 1 мг культуры на 1 мл физиологического раствора.10 мл этой взвеси заливают в пробирку диаметром 15 мм,которую помещают в стеклянный стакан емкостью 500 мл, наполненньш холодной водопроводной водой. Проводят озвучивание взвеси убитых микобактерий туберкулеза в течение 5 мин интенсивностью 50 Бт/см, амплитудой колебаний . 3,5 мкм, на частоте 45 кГц в непрерывном режиме. При нагревании водопроводной воды в стакане с пробиркой в процессе озвучивания производят ее замену.Всю процедуру приготовления антигена проводят с соблюдением правил асептики во избежание инфицирования взвеси. Подопытного кролика породы шиншилла серой масти массой 3 кг через 2 мес после сенсибилизации убитыми микобактериями туберкулеза фиксируют к станку в положении на животе. С целью обезболивания вводят 3,0 мл 1%-ного раствора проме- дола. В правый глаз здкапьшают 1%- ньм раствор дикаина с добавлением О,1%-ного раствора адреналина.Рет- робульбарно в область правого глаза вводят 3,0 мл 0,25%-ного раствора но- коваина.Оперируемый глаз обкладывают стерильными салфетками,которые фиксируют за края век. В шприц набирают приготовленный антиген, обработанный , ультразвуком и эмульгированный в физиологическом растворе, в количестве 1 мл. Верхнее веко поднимают ве- коподъемником, глазное яблоко фиксируют пинцетом за верхнюю прямую мышцу. Тонкой иглой, насаженной на

40

45

50

55

опыта. При гистологических исследованиях обнаружены: инфильтрация роговицы клеточными элементами, скопление в ткани радужной оболочки лимфоидных клеток ввиде небольших узелков без выраженных грануляционно-некротичес- ких изменений, скопление в передней камере глаза жидкого экссудата с большим количеством эротроцитов,отек тканей радужной оболочки, разволокне- ние стромы роговицы.

Таким образом, у животного уда- ло сь получить туберкулезно-аллерги- ческое поражение глаза в чистом виде без каких-либо признаков специфического туберкулезного воспаления. П р и м е р 2. Воспроизведение туберкул езно-аллерги- ческого поражения синовиальной оболочки коленного сустава.

Готовят взвесь убитой автоклавированием культуры микобактерий туберкулеза из расчета 1 мг культуры на 1 мл физиологического раствора.10 мл этой взвеси наливают в пробирку диаметром 15 мм, которую помещают в стеклянньм стакан емкостью 500 мл, наполненньш холодной водопроводной водой. Проводят озвучивание взвеси убитых микобактерий туберкулеза в течение, 10 мкнут интенсивностью 40 Вт/См, амплитудой колебаний 2,5 мкм, на чатоте 43 кГц в непрерывном режиме. При нагревании водопроводной воды в стакане с пробиркой в процессе озвучивания производят ее замену. Всю процедуру приготовления

шприц, прокалывают роговую оболочку правого глаза в верхней ее части, у лимба. Медленно без усилий вводят в переднюю камеру глаза антиген в количестве и, 1 мг (.0,1 мл взвеси убитых и обработанных ультразвуком микобактерий туберкулеза). Иглу извлекают,глаз промывают ,4%-ным раствором борной кислоты.

Через 5 дн в тканях правого глаза развился воспалительный процесс с зкссудацией и отеком. Через 3-мес после введения разрушающей дозы антиных сред глаза с полной потерей зрения. Б последующие периоды наблюдалось хроническое течение процесса. Через 6 мес после .введения разреша5

5

.

0

5

0

5

опыта. При гистологических исследованиях обнаружены: инфильтрация роговицы клеточными элементами, скопление в ткани радужной оболочки лимфоидных клеток ввиде небольших узелков без выраженных грануляционно-некротичес- ких изменений, скопление в передней камере глаза жидкого экссудата с большим количеством эротроцитов,отек тканей радужной оболочки, разволокне- ние стромы роговицы.

Таким образом, у животного уда- ло сь получить туберкулезно-аллерги- ческое поражение глаза в чистом виде без каких-либо признаков специфического туберкулезного воспаления. П р и м е р 2. Воспроизведение туберкул езно-аллерги- ческого поражения синовиальной оболочки коленного сустава.

Готовят взвесь убитой автоклавированием культуры микобактерий туберкулеза из расчета 1 мг культуры на 1 мл физиологического раствора.10 мл этой взвеси наливают в пробирку диаметром 15 мм, которую помещают в стеклянньм стакан емкостью 500 мл, наполненньш холодной водопроводной водой. Проводят озвучивание взвеси убитых микобактерий туберкулеза в течение, 10 мкнут интенсивностью 40 Вт/См, амплитудой колебаний 2,5 мкм, на чатоте 43 кГц в непрерывном режиме. При нагревании водопроводной воды в стакане с пробиркой в процессе озвучивания производят ее замену. Всю процедуру приготовления

3133

антигена проводят с соблюдением правил асептики во избежание инфицирования взвеси. Подопытного кролика породы шиншилла серой масти массой 3,5 кг через 2 мес после сенсибилизации фиксируют к I в положении на спине.Выстригают шерсть в области правого коленного сустава. С целью обезболивания операции вводя внутримышечно 3,5 мл 1%-ного раствора промедола.Кожу коленного сустава дважды обрабатывают 1%-ным раствором иодоната. Операционное поле обкладывают стерильными салфетками. В шприц набирают приготовленную заранее взвесь антигена в физиологическом растворе в количестве 1 мл. Иглой, насаженной на шприц, прокалывают кожу, в точке на 5 мм вьше места прикрепления связки надколенника к гребню большеберцовой.кости по средней линии. Связку надколенника прокалывают с таким расчетом,чтобы нанчик иглы находился в толще крыловидной складки синовиальной оболочки, но не проникал в полость сустава. Взвесь антигена в количестве 0,15 мг (0,15 мл взвеси убитых мико- бактерий туберкулеза, обработанных ультразвуком) вводят в ткань синовиальной оболочки. При этом контролируют правильность положения острия иглы. При правильном положении иглы для инъекции требуется приложить некоторое усилие, при неправильном i(проникновение в полость сустава) . содержимое шприца вытекает свободно а при снятии шприца с иглы через нее вьщеляется синовиальная жидкость. ,По окончании введения антигена иглу извлекают резким движением,место инъекции смазывают иодом.

Через 6 дн. после введения разрешающей дозы антигена в толщу синовиальной оболочки появилась болезненность, утолщение сустава в попереч

нике до 28 мм,местное повышение температуры до 37,3 С и гиперемия в

Редактор В.Петраш

Составитель М.Позняк

Техред М.Дидык. , Корректор с.Шекмар

Заказ 3837/47 Тираж 433Подписное

ВНИИПИ Государственного комитетаСССР

по делам изобретений и открытий

113035,Москва, Ж-35,Раушская наб,,д 4/5

Производственно-полиграфическое предприятие, г. Ужгород, ул. Проектная, 4

области коленного сустава. Острые воспалительные изменения в области пораженного сустава стихли через 2 мес и процесс приобрел хроническое течение. До 1 г. после введения разрешающей дозы антигена увеличение размера сустава сохранялось, развились деформирующие изменения и контрактура пораженного сустава до 80°. Через 1 г. после введения разрешаю- , щей дозы антигена кролик выведен из опыта. При гистологических исследованиях определяются признаки хронического аллергического синовита с ,имеющим фибринозно-геморраги- ческий характер, обнаруживаются лим- фоидно-клеточные узелки и участки периваскулярной гистиолимфоцитарной инфильтрации. Обнаружено разрастание фиброзной ткани, а та кже разрушение хрящевой и костной тканей суставных поверхностей с развитием деформирующего артроза.

Таким образом, у кролика было получено туберкулезно-аллергическое поражение синовиальной оболочки коленного сустава в чистом виде без каких-либо признаков специфического туберкулезного воспаления..

Формула изобретения

Способ моделирования внелегочных туберкулезно-аллергических заболеваний путем иммунизации специфическим антигеном из убитой культуры микобактерий туберкулёза, о т л и- ч а ющийся тем,что, с целью повышения воспроизводимости и стабильности модели, животному после иммунизации местно в ткани, обладакяцие повышенной чувствительностью,вводят антиген той же культуры,предварительно обработанной ультразвуком интенсивностью 40-50 Вт/см, амплитудой колебаний 2,5-3,5 мкм, частотой 43-45 кГц в течение 5-10 мин.

Изобретение относится к экспериментальной патологии и терапии. Дпя повышения воспроизводимости и стабильности модели подопытному животному после сенсибилизации убитыми микобак- териямн туберкулеза вводят антиген той же культуры,предварительно обра ботанной ультразвуком интенсивностью 40-50 Вт/см, амплитудой колебаний 2,5-3,5 мкм, частотой 43-45 кГц в течение 5-10 мин. г л