Способ серологической идентификации бактерий Советский патент 1960 года по МПК G01N33/53 

Современные методы серологического анализа бактерий, учитывающие суммарный эффект реакции антиген-антитело на большом числе клеток, не пригодны для регистрации этой реакции на отдельных клетках, что необходимо при изучении см ешанных культур, изменчивости бактерий и для идентификации возбудителей в патологическом материале.

Предлагаемые;, способ позволяет проводить серологический анализ отдельных бактериальных клеток. Сущность изобретения заключается в том, что применяется аноптральная микроскопия бактериальных клеток, обработанных гомологичной антисывороткой и нммергированных в желатиновом геле с показателем светопреломления, равным соответствующему показателю протопласта клетки. Каплю исследуемоГ взвеем (жидкой культуры или смыва бактериальной массы с поверхности плотной питательной среды) наносят на покровное стекло и смешивают с каплей соответствующей антисыворотки. Сразу же после смешивания покровное стекло (каплей книзу) накладывают на предметное стекло, предварительно покрытое тонким слоем (не более 0,2 лш) желатинового геля с соответствующим показателем светопреломления. Приготоьленный препарат исследуют в аноптральном микроскопе. При этом. в случае положительной реакции антиген-антитело, клетки имеют вид оптически пустых тел, окаймленных утолн1енпой и блестяп1,ей клеточной стенкой.

Для приготовления желатинового геля навеска сухой очищенной желатины добавляется к определенному объему слабощелочного 0,1 М раствора NaCl и оставляется на несколько часов до полного набухания желатины. Затем осторожным подогреванием желатину растворяют и просветляют путем кипячения с яичным белком и удаления хлопьев фильтрацией или центрифугированием расплавлен1 ой массы. После

№ 134213- 2

установления нейтральной реакции расплавленную желатину разливают по пробиркам и стерилизуют дробно текучим паром. Показатель светопреломления находится в следуюи1ем соотношении с концентрацией желатины (в %):

Концентрация

желатины (в %)10152025303540

Показатель светопреломления1,350 1,358 1,366 1,374 1.382 1,390 1,397

П род м е т и 3 о б р е те и ;i я

Способ серологической идентификации бактерий в живом состоянии, отличающийся тем, что, с целью регистрации реакции антиген-антитело на изолированных бактериальных клетках, обрабатывают бактерии гомологичной антисывороткой, а затем иммергируют в желатиновом геле с показателем светопреломления, равным соответствующему показателю протопласта клетки, и микроскопируют в аноптральном микроскопе.