Способ выделения популяции незрелых макрофагов из мононуклеарных фагоцитов Советский патент 1987 года по МПК G01N33/48 A61B10/00 

Изобретение относится к медицине, а именно к иммунологии и цитологии.

Цель изобретения - выделение чистой фракции незрелых макрофагов и увеличение их выхода.

Пример. 15 мыша.м вводят в брюшную полость 3 мл 0,01 М сбалансированного фос- фатно-солевого буфера рН 7,2-7,4, содержа щего, мас.°/о:

Сывороточный а.льбумин 15,0-20.0

Ионы кальция6.8- 7.7

Фосфатно-солевой буфер

рН 7,2-7,4Остальное

Далее иолучают перитонеальные макрофаги, наносят клетки из перитональной полости на полистироловые чашки, предварительно в течение ночи инкубированные в той же среде.

Клетки со средой инкубируют в течение 40 мин при .

Неприлипшие клетки смывают. Оставшиеся клетки заливают средой 199 с 10%-ной фетальной телячьей сывороткой и повторно инкубируют 30 мин при 37°С.

Адгезия макрофагов определяется по Ig GE.A. розеткообразованию. g GEA розетко образование с макрофагами, адгезирован- ными в среде с ионами Са в фосфатно

солевом буфере 31 м.И, у здоровых М1э1шей {)авно 289±31. Все клетки представлены незрелыми .макрофагами (контроль по активности эстеразы).

Формула изобретения

Способ выделения популяции незрелых макрофагов из мононуклеарных фагоцитов путем нанесения клеток на полистирол, покрытий субстратом белковой природы с по- следуюш,им инкубирование.м. отличающийся тем, что. с целью выделения чистой фракции незрелых макрофагов и увеличения их выхода, в качестве субстрата используют среду, содержащую сывороточный альбумин, ионы кальция и фосфатно-солевой буфер при следующих соотношениях компонентов, мас.°/о:

Сывороточный альбумин 15.0-20.0

Ионы кальция6.8- 7.7

Фосфатно-солевой буфер

рН 7.2-7.4Остальное

пр чем нанесение клеток проводят после предварительной инкубации полистирола в субстрате в течение 12-24 ч, а содержание незрелых макрофагов определяют по количеству адгезированных клеток.

Изобретение относится к цитологии и иммунологии. Цель изобретения - выделение чистой фракции незрелых макрофагов и увеличение их выхода. Животным вводят в брюшную полость сбалансированный фос- фатно-солевой буфер с сывороточным тонеальной полости наносят на полистироловые чашки, предварительно инкубированные в той же среде. Клетки со средой инкубируют. Неприлипшие клетки смывают. Оставшиеся клетки заливают средой 199 с фетальной телячьей сывороткой и ncjBTOpHO инкубируют. Адгезию-.макросЬагов определяют по розеткообразованию. со сд ел 05