Способ определения сенсибилизации лейкоцитов Советский патент 1987 года по МПК G01N33/48 

Изобретение относится к медицине, а именно к иммунодиагностике аллергических состояний

Целью изобретения является повышение чувствительности способа.

Способ осуществляется следующим образом.

0,08 мл крови переносят стерильной пипеткой в две видалевские пробирки, одна из которых служит контролем, а вторая - опытомо В опытную пробирку предварительно помещают 0,02- мл исследуемого аллергена на 3%-ном растворе цитрата натрия, а в контрольную - 0,02 мп 5%-ного раствора цитрата.натрия (стандартные аллергены смешивают с антикоагулянтом - 25%-ным раствором цитрата натрия в соотношении 4:1, нестандартные аллер- гены используются в дозах, соответствующих постановке, тест-показателя повреждения нейтрофилов. Затем про-, бирки с исследуемь1ми образцами крови инкубируют в термостате при 45 - 46 С в течение двух часов, после . чего готовят мазки и окрашивают их по Май-Грюнвальду, Папенгейму или Романовскому-Гимза Учет реакции проводят путем подсчета процентного содерлшния измененных лейкоцитов в опытном (Н,) и контрольном (Н) мазках. Индекс сенсибилизации лейкоцитов определяется по формуле

Н i

Too

Оценка результатов: отрицательные - индекс О - 0,05; положительные - индекс 0,06 0,35 резко положительные индекс более 0,3.

П.р и м е РО Больной Х Диагноз - хронический декомпенсированный тонзиллит, частые ангины в анамнезе о Поступил в клинику ЛОР болезней для проведения тонзиллэктомии, Б день поступления проведено определение сенсибилизации лейкоцитов крови к стрептококковому (КНИИЭМ) и тканевому аллергенамо

Кровь, полученную из пальца больного стандартным методом, переносили стерильной пипеткой в три видалевс- кие пробирки по 0,08 мл, одна из которых служила контролем, две други были опытными В контрольную пробирку предварительно помещали 0,02 мл 5%-ного цитрата натрия, а в опытные

6

0

5

0

исследуемые аллергены ( в первую - 0,02 i-ai стерптококкового аллергена на 5%-ном растворе цитрата натрия, во вторую - 0,02 мл тканевого аллергена на растворе цитрата натрия). Затем пробирки с исследуе1Ф1ми образцами крови инкубировали в термостате при 45°С в течение двух часов, после чего готовили мазки и окрашивали их по Май-Грюнвальду. При подсчете учитывали процентное содержание клеток с гомогенной базофильной цитоплазмой по отношению к лейкоцитам с неизменной цитоплазмой и ядром В пробирке со стрептококковым аллергеном количество измененных лейкоцитов .составило 31%, в пробирке с тканевым аллергеном - 47%, в контрольной пробирке 5%, Индекс сенсиби- лизации лейкоцитов определяли по фор

Н Н

муле 7Qo 1 процентное содержание измененных лейкоцитов в опытном мазке; Н - в контрольном, Индекс сенсибилизации к стрептококковому аллергену составил 0,26, ю тканевому - 0,42,

Таким образом, полученный результат характерен для больных декопен- сированной формой хронического тон-, зиллита. Проведенный патоморфологи- ческий контроль подтвердил клинический диагноз.

Из результатов сравнительной оценки эффективности предлагаемого и известного (прототип) способов, полу- ченных при исследовании 3 групп больных по 20 человек в каждой, сле- 0-Дует, что предлагаемый способ определения сенсибилизации лейкоцитов обладает существенно выраженными диагностическими преимуществами по сравнению с известным, обеспечивая при турбекулезе повышение индекса повреждения лейкоцитов с турбекули- ном в 2,16 раза (0,268+0,0835 ИСЛ по предлагаемому и 0,124±0,0317 по прототипу), при непереносимости стрептомицина - 2,2 раза (0,103f 0,0294 и 0,047±0,0122 соответственно) , при непереносимости новокаина - в 1,35 раза (0,.168±0,0509 и 0,124± 0,0373 соответственно).

Представленные данные показывают, что предлагаемый способ определения сенсибилизации лейкоцитов универсально пригоден для диагностики аллергических процессов, индуктивно связан5

5

0

5

ных с инфекционными, нейнфекционны- ми и аутогенными аллергенами, характеризуется высокой степенью специфичности, выраженной диагностической чувствительностью, позволяет выявлять аллергические состояния не определя- известными методами.

Таким образом, к перимуществам предлагаемого способа определения сенсибилизации лейкоцитов относится: повьшение диагностической чувствительности предлагаемого способа в сравнении с прототипом в 1,2-2,16 раза; упрощение методики оценки результатов реакции и обработки мазков крови, что делает доступным проведение исследования в клинических лабораториях; проведение методики постановки и оценки результатов реакции в соответствии с патогенетически ведущими факторами аллергического

Редактор Т.Парфенова Заказ 6151/48

Составитель В.Литовченко Техред Л.Сердюкова

Тираж 776 ВНИИПИ Государственного комитета СССР

по делам изобретений и открытий 113035, Москва, Ж-35, Раушская наб, д.4/5

Производственно-полиграфическое предприятие, г.Ужгород, ул.Проектная,4

0

воспаления, протекаюп1его в условиях повьшенной температурной реакции, позволяет регистрировать все участвующие в определении аллергического статуса клетки вне зависимости от степени их специфичностио

Формула изобретения

Способ определения сенсибилизации лейкоцитов, включающий инкубацию лейкоцитов крови больных с аллергеном с последующем приготовлением мазков

5 крови и их окрашивание, отличающий с, я тем, что, с целью повышения чувствительности способа, лейкоциты с аллергеном инкубируют при 45-46 С, окраску мазков проводят

0 по Май-Грюнвальду и по наличию клеток с гомогенной базофильной окраской или их цитолиза определяют сенсибилизацию лейкоцитово

Корректор ВоБутяга Подписное

Изобретение относится к иммунологии о Цель изобретения - повьшгение чувствительности способа. Образцы крови с исследуемым аллергеном инкубируют. Затем готовят мазки крови, и окрашивают их Подсчитывают содержание измененных лейкоцитов в опытном и контрольном мазках и определяют индекс сенсибилизации лейкоцитов о Способ позволяет диагностировать аллергические процессы, связанные с инфекционными, неинфекционными и аутогенными аллергенами. Од ел 00