Питательная среда для культивирования кампилобактерий Советский патент 1988 года по МПК C12N1/20 

(Л

с

Изобретение относится к медицинской микробиологии и может быть использовано при работе с кампилобакте I риями. ,

Цель изобретения - удешевление среды при сохранении ее ростовых I свойств.

П р и м е р 1. В 1 л дистиллированной воды растворяют, г: триптичес- д кий гидролизат кормовых дрожжей 30,0 натрия пируват 0,2; натрия мета- бисульфит 0,2, железо сернокислое закисное 0,2; натрия глютамат 1,3, натрий хлористый 4,0, агар 12,0, 15 натрий углекислый О,15 до рН 7,2, что соответствует минимальной концентрации ингредиентов. Кипятят 2- 3 мин, отфильтровьгоают через ватный фильтр, стерилизуют при 1 атм 20 (121°С) в течение 20 мин.

П р и м е р 2. Отличается от примера 1 тем, что в 1 л дистиллированной воды растворяют,г: триптический гидролизат кормовых дрожжей 32,5, 25 натрия пируват 0,25, железо сернокислое закисное 0,25, метабисульфит натрия 0,25, глютамат натрия 1,5, натрий хлористый 0,5, агар 12,5, натрий углекислый 0,2 до рН 7,4, 30 что соответствует оптимальной .концентрации ингредиентов.

П р и м е р 3. Отличается от примеров 1 и 2 тем, что в 1 л дис- тиллированной воды растворяют, г: триптический гидролизат кормовых дрожжей 15,01,, пируват натрия 0,3, метабисульфит натрия 0,3 железо сернокислое закисное 0,3, натрия

глютамат 1,7, натрий хлористый 6,0, 40 агар 13,0, натрий углекислый 0,25 до рН 7,6,.что соответствует максимальной концентрации ингредиентов,

Питательную среду можно получить в сухом виде.45

11ример4.В шаровую мельницу загружают, г: ферментативный гидролизат кормовых дрожжей 534,04, натрия пируват 6,67, натрия метабисульфит 6,67, железо сернокислое закисное 6,67, натрия глютамат 40,05, натрия хлорид 133,54, агар порошковидный 267,07, натрий углекислый 5,34. Перемешивают в течение 40 мин Навеска среды 37,45 г/л соответству- ет оптимальной концентрации ингредиентов.

После стерилкза1щи среду остужают до 45-50°С, добавляют 5% стериальной дефибринированной крови, разливают в чашки Петри по 20-25 мл.. После застьшания среду подсушивают в термостате в течение 30-40 мин. Возможно использование среды без добавления крови.

Пример 5. Для определения чувствительности и скорости роста проводят посев каждого штамма по 0,1 мл взвеси культур из разведения испытуемую и контрольные среды.

Посевы инкубируют в микроаэрофиль ных условиях при 42°С. Результаты учитывают через 48 ч (табл. l),средние данные 10 опытов .

Показатель эффективности сред определяют путем посева культру на скошенную без столбика поверхность среды, разлитой по 5 мл в стерильные пробирки.

Косяки засевают по 0,1 мл взвеси суточных культур кампилобактерий содержащей 50 млн м.кл. Посевы инкубируют в микроаэрофильных условиях при температуре в течение 48 ч.

Показатели эффективности среды приведены в табл.2. )

Определение стабильности биологических свойств кампилобактерий проводят путем посева 0,1 мл взвеси культур каждого штамма из разведения 10 и последующего инкубирования в микроаэрофильных условиях при 42 С, Учет результатов проводят через 48 ч

Колонии кампилобактерий на среде культивирования - влажные блестящие полупрозрачные кремового цвета круглые или с неровнь1ми краями. Диаметр колоний 1,5-2,0 мм.

В мазках, окрашенных по Граму, кампилобактерий просматриваются как грамотрицательные палочки, изогнутые в виде спиралей, занятых, а при мик- роскопии в темном поле подвижные.

Кампилобактерий продуцируют окси- дазу, каталазу, растуг при 42 и не растут при не ферментируют Зпглеводы растут в среде, содержащей 1% глицина. Camp jejuni вызывает гидролиз гиппурата.

Таким образом, предлагаемая среда обеспечивает ростовые потребности высокотребовательных к условиям культивирования кампилобактерчй, при этом среда более экономичная и не

трубет для изготовления использования пищевых продуктов.

Формула изобретения

Питательная среда для культивирования кампилобактерий, содержащая питательную основу, стимулятор роста натрия пируват, натрия метабисуль- фит, железо сернокислое закисное, . натрий хлористый, агар и воду, отличающаяся тем, что, с целью удешевления среды при сохранении ее ростовых свойств, она дополнительно содержит натрий углекислый, в качестве питательной основы она

содержит триптический гидролизат кормовых дрожжей, в качестве стимулятора роста - натрия глютамат при сле- дующем соотношении компонентов,г/л:

Триптический гидролизат

кормовых дрожжей30,0-35,0

Натрия глютамат1,3-1,7

Натрия пируват0,2-0,3

Натрия метабисульфит0,2-0,3 Железо сернокислое

закисное0,2-0,3

Натрий хлористый4,0-6,0

Натрий углекислый0,15-0,25

Агар12,0-13,0

Вода1л

Таблица 1

Изобретение относится к области медицинской микробиологии, в частности приготовлению питательных сред для культивирования кампилобак- терий. Цель изобретения - удешевление среды при сохранении ее ростовых свойств. Для приготовления среды смешивают в 1 л воды триптический гидро- лизат кормовых дрожжей,натрия пиру- ват,натрия метабисульфит, железо нокислое закисное,натрия глутамат, натрий хлористый, агар, натрий углекислый,рН среды 7,2. Стерилизуют nptf 1 атм.Среда обеспечивает хороший рост кампилобактерий с сохранением биологических свойств. 2 табл. с

Тйлячмая, кремового «т. 1.5-2,0

10

,-«

48

Типичная,кремового цвета, 1,0-1,5

10

,-t

48

23