Способ количественного определения углеводородов в биомассе дрожжей,выращенных на углеводородах Советский патент 1988 года по МПК C12N1/26 

со со

о

ел

со

Изобретение относится к микробиологической промышленности, а именно к способу определения углеводородов в биомассе дрожжей, выращенных с ис- , пользованием углеводоров в качестве источника углерода.

Известен способ определения углеводородов в биомассе дрожжей (lUPAC Inform, Bulletin Technol, Report, ю 1974, N 12, p. 20) .

Цель изобретения - повышение достоверности определения.

Способ осуществляют следующим образом.15

Сухую биомассу дрожжей, выращенных на углеводородах, предварительно очи1денную от основного количества углеводородов экстракцией, гидроли- зуют щелочью в течение 3 ч при ки- 20 пении с обратным холодильником. Посе гидролиза углеводороды экстрагируют многоступенчато циклогексаном. Полученные циклогексановые фракции промывают дистиллированной водой и 25 сушат. Остаток растворяют в небольшом количестве бензола или смеси хлороформа и н-гексана (1:1) и хро- матографируют на колонке с окисью алюминия с использованием в качестве элюента указанных растворителей. После хроматографии раствор упаривают до постоянного веса, по которому судят о количестве остаточных углеводородов.

Пример 1. В круглодонной колбе объемом 500 мл при помощи сильного встряхивания смешивают 20 г су- хих кормовых дрожжей, выращенных на нефтяном дистилляте и экстрактивно очищенных, 20 г гидроокиси калия, 20 мл дистиллированной воды и 200 мл этанола, значение рН среды 12. Полученную смесь кипятят 3 ч с обратным холодильником. После гидролиза добавляют 100 мл дистиллированной воды и многоступенчато экстрагируют . 200 мл циклогексана. Циклогексановые фракции промывают дистиллированной водой и сушат сульфатом натрия. Пос- 50 ле отделения сульфата натрия углево30

35

40

45

5

0 5

0

0

5

0

5

дородсодержащий циклогексан сушат в вакууме до остаточного объема 1 мл. Остаток растворяют в неболыиом количестве бензола и хроматографируют в стеклянной колонке длиной 20 см и диаметром 2 см с окисью алюминия первой ступени активности. Элюацию ведут 125 м.п бензола. Прошедший колонку раствор упаривают до постоянного веса в вакууме с помощью очищенного и высушенного газового потока.

Результаты представлены в таблице.

Пример 2. Способ осуществляют согласно примеру 1, но в качестве растворителя при хроматографии используют смесь, состоящую Из равных объемов хлороформа и н-гексана. Содержание углеводородов составляет 2,31 г/кг дрожжей. При анализе аналогичных проб известным методом получают суммарное количество ароматических углеводородов и н-алканов, равное 1,15 г/кг дрожжей.

Таким образом, описанный способ позволяет вьщелять все виды углеводородов и, следователь)1о, более достоверно проводить их определение.

Формула изобретения

Способ количественного определения углеводородов в биомассе дрожжей, выращенных на углеводородах, предусматривающий щелочной гидролиз биомассы, экстракцию углеводородов, очистку полученного экстракта колоночной хроматографией на окиси алюминия с последующим установлением количества углеводородов, о т л и- чающирЧся тем, ITO, с целью повышения достоверности определения, щелочной гидролиз ведут в течение 3 ч при кипении, экстракцию углеводородов осуществляют циклогексаном, в качестве элюента при колоночной хроматографии используют бензол или смесь хлороформа и н-гексана, взятых в соотношении 1:1, а установление количества углеводородов проводят гравиметрическим методом.

Изобретение относится к микробиологической промьшшенности, а именно к способу определения количества углеводородов в биомассе дрожжей, выращенных на нефтяных дистиллятах. Цель изобретения - повьппение достоверности определения. Сухую биомассу дрожжей гидрализуют в течение 3 ч щелочью при кипении с обратным холодильником, смесь промывают водой, углеводороды экстрагируют циклогекса- ном, циклогексановый экстракт упаривают, остаток растворяют в бензоле или смеси равных объемов хлороформа и н-гексана и проводят колоночную хроматографию на окиси алюминия с использованием ,в качестве элюента тех же растворителей. Элюат после колонки упаривают и высушивают до постоянной массы, которая характеризует количество углеводородов в пробе биомассы. 1 табл. i СЛ