Питательная среда для выделения и идентификации бактерий РSеUDомоNаS aeRUGINoSa Советский патент 1988 года по МПК C12Q1/04 C12Q1/04 C12R1/385 

4i

00

Изобретение относится к медицин- , ской микробиологии и касается бакте- Iрнологических исследований по выявле- ; нию возбудителей раневых, ожоговых, 1 гнойно-септических и других инфекций I Цель изобретения - повышение селек

тивных свойств среды при одновременном упрощении ее состава.

Пример1.В1л дистиллирован I ной воды вносят 35 г питательного ага 1 ра сухого, содержащего 17,9 г гидро- лизата рыбы, 5,9 г натрия хлорида 11,2 г агар-агара, кипятят до полног растворений компонентов, добавляют I 10 мл 10%-ного раствора oкcaфeнa Шдa j (п-оксифенилсалициламид) в диметил- I сульфоксиде (10%-ный раствор оксафен- амида готовят путем растирания. 2 г таблеток оксафенамида в фарфоровой ступке и растворения его в 18 мл диметилсульфоксида), разливают среду в стерильные чашки Петри. Готовая среда в чашках имеет светло-серый цвет (цвет исходного питательного агара), прозрачна, пригодна к применению в течение 10 сут хранения «при .

Исследуемый материал, например отделяемое раны, засевают петлей или ватным тампоном на поверхность питательной среды, инкубируют посевы в течение 16-24 ч при 35-37 С, после чего учитьшают результаты. Наличие выросших колоний указывает на их при- надлёжность к виду.Pseudomonas aeru- ginosa.

Колонии синегиойной палочки имеют размеры 2-5 мм, плоские, сочные, вязкой консистенции, с перламутровым блеском или зеленоватой окраской, издают характерный запах. Рост других видов микроорганизмов отсутствует.

Пример2.В1л дистиллиро- ванной воды вносят 35,5 г питательного агара сухого, содержащего 18,15 гидролизата, 5,95 г натрия хлорида и 11,4 г агара, кипятят др полного растворения, добавляют 11 мл 10%-ного раствора оксафенамида в диметилсуль- фоксиде (т.е. 1,1 г/л оксафенамида), разливают в .стерильные чашки Петри, подсушивают на воздухе. Исследуемый материал, например Мочу, засевают петлей методом секторных посевов (30- 40 штрихов на сектор А, затем после прожигания петли четыре штриха из сектора А на сектор 1- и далее таким

же образом из сектора I в II, из II в III, Посевы инкубируют при 35-37°С в течение 16-24 ч, после чего учитывают результаты Наличие выросших колоний бактерий указывает на их принадлежность к виду Pseudomonas aeru- ginosa. Концентрацию синегнойных палочек в моче, подсчитывают исходя из числа выросших колоний на различных секторах по таблице данного метода,

ПримерЗ. 3 1 л дистиллированной воды вносят 36 г питательного агара сухого, содержащего 18,4 г гидролизата, 6,0 г натрия хлорида и 11,6 г агара, кипятят до полного растворения, добавляют 12 мл 10%-ного раствора оксафенамида .в диметилсуль- фоксиде (т.е. 1,2 г/л оксафенамида), разливают в стерильные чашки Петри, подсушивают на воздухе. Исследуемый материал, например гной, засевают ватным тампоном на поверхность среды (на 1/4-1/2 часть чашки), вьфащивают посевы при 35-37°С в течение 16-24 ч после чего учитывают результат, Наличие выросших колоний бактерий указывает на их принадлежность к виду Pseudomonas aeruginosa. Колонии сине гнойной палочки имеют такие же признаки, как в примере 1.

Питательная среда обладает высокой чувствительностьюгпри различных вариантах питательной основы и минимальной концентрации оксафенамида

(1,0 г/л) нет подавления роста сине- гнойной папочки или угнетение роста очень незначительно (в 1,5 раза), пр оптимальной концентрации оксафенамида (1,1 г/л) подавление роста сине- гнойной палочки незначительно (в 3 раза), т.е. имеется рост при посевах единичных клеток из разведения 10 , при максимальной концентрации оксафенамида (1,2 г/л) отмечается подавление роста синегнойной палочки в 8,2-10 раз, т.е. имеется рост при посеве десятков клеток.

При использовании известной питательной среды с рамродом наблюдается рост посторонней микрофлоры.

Формула изобретения

Питательная среда для выделения и идентификации бактерий Pseudomonas aeruginosa, содержащая питательную основу, минеральные соли, агар, селективный агент и дистиллированную

1414871

воду, отличающаяся тем,дукщем количественном соотношении

что, с целью повышения селективныхкомпонентов, г/л: свойств среды при одновременном упро- Панкреатический гид- щении ее состава, в качестве пита- ролизат кильки 17,9-18,4 тельной основы она содержит панкреа- Натрия хлорид5,9-6,0

тический гидролизат кильки, в качает- Агар11,2-11,6

не минеральных солей - натрия хлорид, п-Оксифенилсалицил- й в качестве селективного агента - амида в диметил- 10%-ный раствор п-оксифенилсалицш1- IQ сульфоксиде1,.0-1,2

амида в диметилсульфоксиде при еле- Дистиллированная вода 1 л

Изобретение-относится к области медицинской микробиологии. Цель изобретения - повышение- селективных / свойств среды при одновременном упрощении ее состава. Питательная среда представляет собой коммерческий препарат Питательный агар сухой, содержащий, г/л: панкреатический гидро- лизат кильки 17,9-18,4; натрий хлорид 5,9-6,0; агар-агар 11,2-11,6; дистиллированная вода 1 л, и дополнительно пара-оксифенилсалициламид в концентрации 1,0-1,2 г/л, растворенный в 10- 12 мл/л диметилсульфоксида. Питательная среда полностью подавляет рост всех видов бактерий, возможных ассо- циантов синегнойной палочки, и обеспечивает рост бактерий Ps.aeruginosa при посеве единичных или десятков клеток. Использование питательной среды позволяет вьделять (через 16- 24 ч после посева), проводить ускоренную идентификацию (сопряженную с вьщелением) и количественный учет PS. aeruginOsa. (Л с