Способ определения состояния организма больных с почечным аллотрансплантатом Советский патент 1990 года по МПК G01N33/53 

Изобретение относится к медицине а именно к способам оценки иммунного cia- туса больных с аллогенной почкой для дифференциальной диагностики кризов отторжения и инфекционных осложнений

Целью изобретения является повышение точности способа за счет дифференциации острого криза отторжения и инфекционных осложений у больных с почечным аллотрансплантатом.

Способ осуществляют следующим обра- зом,

Берут4-5мл гепаринизированной крови (гепарина 20 ЕД/мл), взятой из локтевой вены. Кровь разводят средой 199 в соотношении 1:2 и в количестве 3 мл наслаивают мл верографина с удельной плотностью

1,077. Последний готовят, прибавляя 20 мл 76%-ного верографина к 86,6 мл дистиллированной .воды. Пробы центрифугируют в течение 15 мин при 1000 об/мин Лимфо и ты. находящиеся в интерфазе, отбирают трижды отмывают в среде 199 и доводят до концентрации 2х10« кл./мл. К 0,1 мл суспен° зии лимфоцитов добавляют 0,1 мл раствора теофиллина (ЗмМ), приготовленного на подогретой среде 199 ех tempore. Контролем служат пробы, в которые вместо теофиллина добавлена среда 199, Клетки инкубируют 1 ч при .J7 С, затем дважды отмывают средой 1УУ, центрифугируя при 1000 об/мин в течение 5 мин. С осадком лимфоцитов ставят реакцию спонтанного розеткообразования- в рав-ных количествах (0,25 мп) смешивают

еуспензию лимфоцитов и 0,5%-ного раство- Ьа эритроцитов барана, затем производят центрифугирование в течение 5 мин при 1000 об/мин и инкубируют пробы в течение tl ч при . Учет розеткообразующих клеток осуществляют микроскопированием путем подсчета количества розеток на 200 лимфоцитов Розеткой считается лимфоцит, присоединивший 3 и более эритроцитов барана. Лимфоциты, образовавшиеся в присутствии теофиллина. называют теофилли- нустойчивыми. Разницу между общим количеством розеток и теофиллинустоичи- выми клетками составляют теофиллинчувст- вительные лимфоциты.

На основании полученных данных при обследовании 48 больных с почечным трансплантатом разработаны критерии соотношения Т-хелперы: Т-супрессоры (Тх.Тс). позволяющие дифференциально оценивать развитие реакции отторжения и инфекцион ных осложнений. Так, у больных при удовлетворительной функции почечного трансплантата соотношение Тх .Тс равно 1 6 ±0 2 В посттрансплантациончыи период повышение такового до 2.5 и выше ука- , зь1вает на развитие криза отторжения, снижение до 0.5 и ниже - на возникновение инфекционных осложнении.

Показатель, характеризующий соотношение между Т-хелперами и супррссорам - при дифференциальной диагностике реак ции отторжения почечного трансплантата и инфекционных осложнений может служить прогностическим .критерием назначаемой

пТимер1. БОЛЬНОМУ Б-к 21.04.84 г. была осуществлена пересадка трупной почки ЧереГз сут после операции состояние боЬьношухудшилось.Наблюдалосьснижение

СУТОЧНОГО диуреза, повышение температур ЗсС держание креатинина и мочеви- Гы сосТавил о 0.128 ммоль/л и 15.5 ммоль л соответственно. Подозрение на острый коиз отторжения. Соотношение Тх.Тс со сбавляло 21. Больному был назначен курс массивной-иммуносупрессивнойте

(метипред 0.5 г на 1 кг массы тела) в течение Здн Состояние больного улучшилось. Че- реТмес ц после аллотрансплантации тем пература повысилась до 38 С. Уровни коеатинина и мочевины 0.382 ммоль/л и 125 ммоль/л. В указанной ситуации воз- .и кла необходимость в ДиФФеренциально

.

5

10 15 20 25

ривели к удовлетворительному самочувстию больного..

Таким образом, предлагаемый способ позволяет определять развитие криза от- оржения даже при наличии положительной динамики биохимических показателей. Учет соотношения TxiTc может быть критерием эффективности иммуносупрессивнои тера П р и м е р 2. Больному Н-ий была осуществлена пересадка аллогенной почки 12 09 84 г Состояние больного после операции было удовлетворительным. Соотношение Тх .Тс составило 1.2. Через две недели после трансплантации снизился диурез, температура повысилась до 37.8 С. Уровень креати нГа и мочевины 0.343 ммоль/л и 16 8 ммоль/л соответственно. Прослушивались хрипы в легких. Описанная клиниче- екая картина могла быть вызвана либо кризом отторжения, либо инфекционным процессом. Уровень соотношения Тх:Тс в этот период обследования составил 0.3. В дальнейшем обнаружена двусторонняя пневмония, кандидоз рта. Снижение приема иммуносупрессивных препаратов и на значение антибактериальной терапии привело к улучшению состояния больного. Соотношение Тх:Тс перед выпиской из ста иионара составило 1.4.

Таким образом, по уровню соотношения Тх-Тс можно было диагностировать наличие инфекции до подтверждения ее микробиологическими методами исследо- 5 вания Кроме того, показатель соотношения может свидетельствовать об эффективности

проводимой терапии.П ПРНРС

Пример 3. Больной Ос-к перенес пересадку почки 14.10.84 г. После операции

0 состояние больного тяжелое, почка плот- ная температура 38.4°С. Незначительное уменьшение диуреза. Уровень креатинина О 222 ммоль/л. мочевины 14.6 ммоль/л. По дозрение на острый криз отторжения. Соотнес

4Я шение Тх:Тс в этот период обследования вставил О 47. В последующем открылся гнои- ГьГсвищвобластипослеоперационноираньи

Таким образом, предлагаемый способ является высокоинформативным и точнь,м. ЦП поскольку позволяет по результатам соот- ношенияТхТсОцениватьубольногоразвитие

отторжения либо инфекционных яГнений. а также свидетельствует о стабильной функции пересаженной почки. 55 Способ является эффективным, универ- сальным и точным, поскольку позволяет характеризовать напряженность иммунных процессов по отношению к аллотрансплан- тату и инфекционным агентам независимо от динамики клинико-лабораторных показате5 1601581б

лей, может служить отправной точкой тактикитатом путем определения в крови Т-лимфолечения больных и одновременно критериемцитов хелперов и супрессоров, о т л.и ч а юее эффективности, позволяет дифференциаль-щ и и с я тем, что, с целью повышения

но диагностировать кризы отторжения и ин-точности способа за счет дифференциации

фекционные .осложнения у реципиентов с5 острого криза отторжения и инфекционпочечным аллотрансплантатом.ных осложнений, определяют количество

Способ прост в выполнении, не требуетТ-хелперов и Т-супрессоров по их чувствиспециального оборудования, дорогостоя-тельности к теофиллину в реакции розеткощих реактивов, экономически выгоден.образования и при их соотношении, равном

Формулаизобретения10 2,5 и выше, определяют криз отторжения, а

Способ определения состояния орга-при соотношении 0,5 и ниже определяют

низма больных с почечным аллотрансплан-инфекционные осложнения.

Изобретение относится к медицине, а именно к способам оценки иммунного статуса больных с аллогенной почкой для дифференциальной диагностики кризов отторжения и инфекционных осложнений. Целью изобретения является повышение точности диагностики за счет дифференциации реакции отторжения и инфекционных осложнений у больных с почечным аллотрансплантатом. Сущность способа заключается в том, что у больных после аллотрансплантации в периферической крови определяют соотношение между Т-хелперами и Т-супрессорами (Т_х:Т_с) по чувствительности к теофиллину. При соотношении Тх/Тс 2,5 и выше диагностируют криз отторжения, а при соотношении 0,5 и ниже - инфекционные осложнения. Необходимость и важность предлагаемого способа обоснована тем, что с его помощью можно добиться повышения точности диагностических мероприятий, проводимых у реципиентов с почечным аллотрансплантатом. Кроме того, предлагаемый способ может быть использован как отправная точка при выборе терапевтических мероприятий и одновременно служить критерием их эффективности. Приведенные исследования не требуют дорогостоящих реактивов, способ прост в выполнении и объективен.