Способ диагностики злокачественных опухолей человека Советский патент 1988 года по МПК G01N33/49 

со ю О о

(Ж

Изобретение относится к медицине, а именно к онкологии, и может быть использовано для диагностики злокачественных опухолей человека.

Цель - повышение точности диагностики.

Поставленная цель достигается за счет дополнительного определения в мазке крови процентного содержания малых лимфоцитов (диаметр 7,5 мкм и менее). При снижении этого показателя до 15% и ниже проверяют чувст- I витальность лимфоцитов больного к ан I тигенам злокачественных опухолей

I.

I в реакции подавления прилипания лей- Iкоцитов и в случае положительного результата в этой пробе констатируют наличие злокачественной опухоли в организме.

У практически здоровых людей процентное содержание малых лимфоцитов составляет в среднем 25%. Резкое снижение этого показателя отмечается при раках молочной железы, легкого, пищевода, кишечника, матки, яични- JKOB, семенников, злокачественной ме- |Ланоме, злокачественных костных опу- :холях. При этом при различных формах туберкулеза, воспалительнг гх процесса доброкачественных опухолях и кистах снижения малых лимфоцитов в крови не происходит.

Способ осуществляется следующим образом.

В мазке крови, окрашенном по Пап- пенгейму или Романовскому, среди лимфоцитов подсчитывают процентное содержание малых лимфоцитов, которые идентифи дируют по величине клеток и 1ядерно-цитоплазматическому соотноше- йию. лимфоцитами считают клетки диаметром 7,5 мкм и менее с зрелым, иногда пикнотическим ядром, расположенным эксцентрично.К ним относят клетки без цитоплазмы, так называ- емые голые ядра. Диаметр клеток измеряют окуляр-микрометром МОВ-2-15х. Подсчет таких лимфоцитов возможен и без М1 1крометра путем сравнения с .диаметром эритроцитов, который ке превышает 7,5 мкм.

Вторым этапом исследования слуясит Постановка реакщти подавления прилипания лейкоцитов. В качестве антигенов используют водно-солевые экстракты аллогенных опухолей, л шенньгх при хирургическом вмешательстве. Конечная концентрация белка н зкстрак- те составляет 2 мг/мл.

гЦш постановки реакции подавления прилипания лейкоцитов (РИПЛ) берут 1-1,5 мл крови. Лейкоп,иты получают отстаиванием крови с гепарином при , примесь зритро1 щтов удаляют обработкой надосадка О, 5% хлоридом аммония. Лейко1щты однократно отмы- .вают в среде 199 и доводят их концентрацию до Ю клеток/мл. Для постановки реакции смешивают мл суспензии лейкоцитов пациента, О,, мл экстракта опухоли, 0,1 мл АВ-сыворотки и 0,2 14л среды 199. Смесь в пробирках инкубируют в горизонтальном положении 2 ч при З7 с, после чего недосадочную жз.1дкость исследуют в камере Гряева для определения неприлип-ших к поверхности пробирки клеток. Индекс неприлипания

В - А

вычисляют по формуле: х 100,

А где В - число неприлиппшх клеток

в опыте; Л - число неприлипших клеток в контроле. Р1ТПЛ считают положительной при индексе .

Пример 1: Гр-нин

донор

5 О

5

5

крови. Содержа лие малых .чкмфоцитов в крови 26%, РПГШ с йл тигенами из остеогенной и хондросаркомы, карциномы молочной железы и легкого отрицательная. Клршически и рентгенологически констатировано OTcyTCTBtie опухоли ,

Пример 2, Ко Содержание мальк ЛИМФ01ШТОВ 15%, РППЛ с антигеном из остеогенной саркомы - поло- житальная, с антигеном остеобласто- кластомы отрицательная. Клинически, рентгенологически ь: морфологически бьш подтвержден диагноз остеогенной саркомы.

Пример Зо Б-ной Xi Содержание малых лимфоцитов 5%, В РППЛ положительная реакция с актигенаг-ш хонд- росаркомыо Клинически, рентгенологически и морфологически диагностирована хондросаркома,

Пример , П. Содержание малых лимфоцитов 18%, В РПШ1 по- ложительная реакция с антигеном ос- теобластокластомы и отрицательная с антигенам15 остесл енной capKONibi, хонд- росаркомьЕ, рака железы и Jiei - ких. Клинически, рентг ено::огически и морфологически диагностирована доброкачественная ост оГ аптпкллгтпма .

Пример 5. Б-ная М-ва. Малых лимфоцитов 1Д%. В РПШ1 положительная реакция с антигеном рака мол очной железы, отрицательная с антигенами костных опухолей. Клинический диагноз: рак молочной железы.

Пример 6. Б-ная П-ва Л.Г. Поступила с жалобами на боли в левой половине таза, левой паховой области ограничение движений в левом тазобедренном суставе. Страдает с июля 1985, лечилась по поводу деформирующего артрита. Ранее пункционная биопсия опухолевых клеток не выявила, но проведен курс дистанционной гамма терапии (10 X 400 рад), не снявший болей. Иммунологическое обследование в ЦИТО показало содержание малых лимфоцитов 12%, в РППЛ получен отри- цательный результат с антигенами ос- тегенной, хондросаркомы и остеоблас токластомы. При гистологическом анализе открытой биопсии установлен диагноз хондросаркомы. 25.11,86 про- изведена межповздошно-брюшная экзар- тикуляция слева. Окончательный

ноз: хонлрогаркома мезегтхммальная левой половины тача.

Предлагаемым способом бьшо обследовано too клинически здоровых людей, более 100 больных травмой, остеомиелитом, сепсисом, артритами и 242 больных со злокамествен тьп 1 опухолям. Точность диагностики составила при опухолях косттюр системы 100%, а при раках другой лока.т1изащ1и не ниже 95%.

Формула изобретения

Способ диагностики злокачественных опухолей человека путем определения сенсибилизации лимфоцитов крови к опухолевым антигенам, отличающийся тем, что, с целью повышения точности способа, дополнительно в мазке крови определяют процентное содержание малых лимфоцитов (диаметр fa 7,5 мкм) и при его CHj-гжении до 15% и ниже и при наличии сенсибилизации лимфоцитов диагности.руют злокачественную опухоль в организме.

Изобретение относится к медицине, точнее к онкологии, предназначено для диагностики злокачественных опухолей человека. Цель изобретения повышение точности диагностики. Для этого в мазке крови определяют про- .центное содержание малых лимфоцитов диаметром не более 7,5 мкм.У практически здоровых людей этот показатель равен f 25%. При его снижении до 15% и ниже проверяют чувствительность лимфоцитов больного к антигенам злокачественных опухолей в реакции подавления прилипания лейкоцитов. При положительном результате в этой пробе констатируют наличие злокачественной опухоли в организме. Малые лимфоциты идентифицируют по величине клеток и ядерно-цитоплазматическому соотношению при диаметре клетки 7,5 мкм и менее со зрелым, иногда пикноти- ческим ядром, расположенным эксцентрично, а также к ним относят клетки без цитоплазмы, так называемые голые ядра. S (Л с