Способ определения 3,4,5-тригидроксибензойной кислоты Советский патент 1988 года по МПК G01N30/94 

4

СО

; Изобретение относится к аналити- чрской химии, в частности к определе- нйо кислот ароматического ряда мето- дрм бумажной хроматографии, и может использоваться для определения 3,4j5 т)игидроксибензойной кислоты в хими- ч|еских и аналитических лабораториях,

Цель изобретения - повышение точ- , чувствительности и селективнос и.

Способ осуществляют следукяцим образом.

Навеску образца, содержащего три- гидроксибензойную кислоту З А З-ТГОБК растворяют в смеси (4;1), отбирают из полученного раствора аликвотную часть и наносят ее на стартовую линию хроматографической бумаги, развивая затем хроматограмму элюентом, пред- ставляющим собой смесь вода - 1 А-ди- сксан, при объемном соотношении ком- гонентов (35-45):1. Подъем фронта глюента превращает пятно В пик высота которого пропорциональна концен- трации 3«4,5-тригидроксибензойной кислоты в пробе. Высота подъема фронта глюента должна быть на 20 мм выше самых высоких пиков, что обеспечивает 3орошее формирование пиков. После

1:одъема жидкой фазы хроматограмму I :одсзппивают на воздухе и пики проявляет 0,02-0,03%-ным раствором бромхлор- оенолового синего. Высоту окрашенного пика измеряют от линии старта до вер- фины пика с помощью циркуля и линейки (i точностью ±0,1 мм. По полученным данным, используя метод наименьших. квадратов, строят калибровочный, гра- (ик в координатах концентрация три гидроксибензойной кислоты 3j4,5(MKr/ /iipo6e) - высота пика (мм) s, по которому и определяют содержание кислоты в анализируемьтх пробах.

Для построения калибровочного графика на хроматографическую бумагу без (тредварительной обработки на старто- рую линию (10 мм от линии погружения) наносят 10 проб стандартных растворов с содержание 3,4,5-тригидроксибензойной кислоты 0,9б° 2j70j 3,60 5,40 и 6,30 мкг/пробе (по 2 пробы каждой концентрации) , Хроматограмму высутаи- вают на воздухе и опускают до линии погружения в кювету с злюентом вода 1,4-диоксан (40:1). После подъема фронта злюента хроматограмму вынимают из кюветы, высушивают на воздухе и окрашивают 0,02-0,03%-ным раствором

Q

0 5

0 5

0

5

0

5

цветореагента. Измеряют высоты пиков и строят калибровочный график,

В табло1 приведены результаты определения 3 5 4 5 5-тригидроксиб ензойной кислоты (3,455-ТГОК) в стандартных растворахе

Пример 1. Для анализа промьпп- ленных образцов готовят раствор с концентрациями 3,4,5-тригидроксибензой- ной кислоты порядка ,0 мг/мл. Для этого навеску в количестве 75,0мг растворяют в 20 мл ацетона в мерной колбе и доводят до 25 мл водой, концентрация анализируемого раствора мг/мл или 4,50 мкг/пробе. На хроматограмму рядом с пробами, предназначенными для построения калибровоч ного графика, капилляром емкостью 0,0015 мл наносят 3-5 проб анализируемого раствора, Хроматограмму высушивают на воздухе и опускают до линии погружения в кювету с вбдно-1,4-ди- i оксановым раствором (40;1), После развития хроматограммы пики проявляют 0,025%-ным раствором бромхлорфено- лового синего. Измеряют высоты пиков, определяют содержание кислоты в образце, пользуясь калибровочным графиком, рассчитанным по методу наименьших квадратов

В табл„2 представлены результаты определения содержания кислоты в ана- - лизируемых объектах.

Прим ер 2, Раствор, содержащий 354,,5-тригир,роксибензойную кислоту в количестве, 3,0 мг/мл или4,50мкг/ пробе, наносят на стартовую линию хроматографической бумаги капилляром емкостью 0,0015 мл (3-5 проб) После развития хроматограммы в смеси вода- 1,4-диоксан (35;i) ее высушивают на воздухе и пики проявляют 0,025%-ны1М раствором реактива. Измеряют высоты пиков и определяют содержание кислоты в образце (4,49 мг/пробе) по калибровочному графикуе

П р и м е р 3, 3-5 проб раствора, содержащего 3,0 мг/мл (4,5 мкг/пробе) кислоты, наносят на стартовую линию хроматографи-ческой бумаги посредством капилляра емкостью 0,0015 мл, Хра- матографируют в смеси вода-- 1,4-ди- - океан (45s1), Развитую хроматограмму высушивают-и пики проявляют 0,025%-ным раствором цветореагента. Измеряют вы соту пиков и определяют содержание кислоты в образце -(4954 мкг/пробе) по калибровочному х -рафику

31

Пример АО На стартовую лийию хроматографической бумаги наносят 3-5 проб анализируемого раствора (4,50 мкг/пробе кислоты) рядом с пробами стандартных растворов, Хромато- графируют в смеси вода - 1,4-диоксан (40:1). После развития хроматограммы ее высушивают и пики проявляют 0,03%- ным раствором бромхлорфенолового синего По среднему значению высоты пиков рассчитывают содержание кислот в образце. Содержание ее 4,49мкг/пробе.

ПримерЗ. Наносят 3-5 проб анализируемого раствора рядом с пробами, предназначенными для построения калибровочного графика (концентрация кислоты 4,50 мкг/пробе). Хро- мауографируют в кювете в подвижный фазе вода - 1,4-диоксан (40:1). После развития хроматограммы, ее высушивают и проявляют пики 0,02%-ным раствором бромхлорфенолового синего.

вышеуказанных условиях 22,2 мм и 22,4 мм соответственно, что соответствует содержанию кислоты в стандартном и исследуемом растворах 4, 49 и 4,54 мкг/пробе. Погрешность определения не превьшает 2,7%.

Формула изобретения

Способ определения 3,4,5-тригидро- ксибензойной кислоты путем хромато- графирования анализируемой смеси на бумаге в подвижной фазе, представляющей собой смесь вода - органический растворитель, с последующим детектированием развитой хроматограммы цве- тореагентом, отличающийся тем, что, с целью повьппения точности-.

чувствительности и селективности, нс- пользуют в качестве органического растворителя 1,4-диоксан при объемном соотношении 1,4-диоксан : вода, равном 1:35-45, а в Ka4ectBe цветоре

Изобретение относится к анали- . : тической химии, а именно хроматогра-. фическому определению 3,4,5-тригидро- ксибензойной кислоты в присутствии таннина. Для этого анализируемую пробу растворяют в -ацетоново-водном растворе и полученный раствор капилляром наносят на хроматографическую бумагу FN-3 и опускают в водно-t,4-ди- оксановый рабтвор (45-45):1 для развития хроматограммы. Пики проявляют 0,02-0,ОЗХ-ным раствором бромхлорфе- нолового синего. По высоте образующихся пиков определяют содержание 3,4,5-тригидроксибензойной кислоты в образце. Способ более чувствителен, селективен5 менее длителен и позволяет определять 3,4,5-тригидроксибен- зойную кислоту с меньшей погреяно. стью. 2 табЛо ел

хлорфенола синего.

Т а

блица 1

30

35

По среднему значению высот полученных25 агента 0,02-0,03%-ный раствор бром- пиков определяют содержание кислоты в образце по калибровочному графику. Содержание кислоты 4,52 мкг/пробе.

Прим ер 6. Хроматограмму развивают в смеси вода - 1,4-диоксан (50:1). Пики проявляют 0,025%-ным раствором цветореагента. Вершины пиков кислоты размыты и не имеют четких границо Количественное определение невозможно.

Пример 7. Пики проявляют 0,025%-ным раствором цветореагента. Средняя высота пиков кислоты 21,8 мМо Погрешность определения более 5%.

П р и м е р 8. Раствор, содержащий 3,4,5-тригидроксибензойную кисло- ту и таннин в равных количествах по 75 мг каждого (1:1) готовят, раство- , ряя навеску (150 мг) в 20 мл ацетона, и доводят до 25 мп водой. На стартовую линию наносят 3-5 проб стандартного раствора кислоты (приготовление раствора по примеру 2) (3,0 мг/мл или 4,50 мкг/пробе) и 3-5 проб раствора смеси кислоты и таннина. После развития хроматограммы в смеси вода - 1,4-диоксан (40:1) ее вынимают из кюветы, высушивают на воздухе и проявляют 0,025%-ным раствором бромхлорфенолового синего. Измеряют высоты - пиков и определяют содержание кисло- 55 ты по калибровочному графику. Средние высоты пиков кислоты и таннина при

45

50

хлорфенола синего.

Т а

блица 1

агента 0,02-0,03%-ный раствор бр